Burada sunulan protokol beyin hasarı bir kemirgen modeli oluşturmak için bir teknik gösterir. Burada açıklanan yöntem lazer ışınlama kullanır ve motor korteks hedefler.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Farelerin Motor Korteksinde LazerE Bağlı Beyin Hasarı
* These authors contributed equally
Bu makalede
Düzeltme bildirimi
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Özet
Özet
Deneysel kemirgen modellerinde inme indükleme için yaygın bir teknik geçici içerir (genellikle MCAO-t olarak gösterilir) veya kalıcı (MCAO-p olarak belirlenmiş) orta serebral arter tıkanıklığı (MCA) bir kateter kullanarak. Ancak bu genel kabul görmüş tekniğin bazı sınırlamaları vardır ve böylece geniş kullanımını sınırlandırmıştır. Bu yöntemle inme indüksiyonu genellikle iskemik alanın lokalizasyonu nda ve boyutunda yüksek değişkenlik, periyodik kanama oluşumları ve yüksek ölüm oranları ile karakterizedir. Ayrıca, geçici veya kalıcı prosedürlerden herhangi birinin başarıyla tamamlanması uzmanlık gerektirir ve genellikle yaklaşık 30 dakika sürer. Bu protokolde, kemirgen modellerinde beyin hasarının indüklemesi ve incelenmesi için alternatif bir yöntem olarak hizmet edebilen bir lazer ışınlama tekniği sunulmuştur.
Kontrol ve MCAO gruplarında sıçanlar ile karşılaştırıldığında, lazer indüksiyon ile beyin hasarı vücut ısısı, infarkt hacmi, beyin ödemi, intrakraniyal kanama ve mortalite azaltılmış değişkenlik gösterdi. Ayrıca, lazer kaynaklı bir yaralanma kullanımı, hem motor korteks inanın hem de striatal dokuların tahrip edildiği MCAO deneylerinin aksine sadece motor kortekste beyin dokularında hasara yol açtı.
Bu araştırmadan elde edilen bulgular lazer ışınlama motor kortekste beyin hasarı indükleyen alternatif ve etkili bir teknik olarak hizmet olabileceğini düşündürmektedir. Yöntem ayrıca yordamı tamamlamak için süreyi kısaltır ve uzman işleyicileri gerektirmez.
Giriş
Küresel olarak, inme ölüm ikinci önde gelen nedeni ve sakatlık üçüncü önde gelen nedeni1. İnme de ağır sakatlık yol açar, genellikle tıbbi personel ve akrabalarıekstra bakım gerektiren. Bu nedenle, bozukluk ile ilişkili komplikasyonları anlamak ve daha olumlu sonuçlar için potansiyelini artırmak için bir ihtiyaç vardır.
Hayvan modellerinin kullanımı hastalıkları anlamak için ilk adımdır. En iyi araştırma sonuçlarını sağlamak için, tipik bir model basit bir teknik, karşılanabilirlik, yüksek tekrarlanabilirlik ve minimum değişkenlik içerecektir. İskemik inme modellerinde belirleyiciler beyin ödemi hacmi, infarkt boyutu....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Aşağıdaki prosedür Avrupa Topluluğu'nun Deneysel Hayvanların Kullanımı Yönergeleri'ne göre yürütülmüştür. Deneyler, Negev'deki Ben-Gurion Üniversitesi Hayvan Bakım Komitesi tarafından da onaylandı.
1. Hayvan seçimi ve hazırlanması
- Bu işlem için hiçbir overt patoloji ile 300 ila 350 g ağırlığında 65 erkek Sprague-Dawley sıçan seçin. Küçük boyutu MCAO prosedürü için teknik zorluklar teşkil.
- Kafes başına 3 sıçan atayın ve en az 3 gün uyum sağlar.
2. MCAO prosedürü
- MCAO için 25 sıçan seçin ve prosedür11ile ilişkili -20 mortaliteye izin verin.
- McAO'....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Kontrol veya deney gruplarında ölüm veya SAH kaydı bulunmamaktadır(Tablo 1). MCAO grubunda hem mortalite hem de SAH oranı idi.
Her iki grubun sıçanlarında göreceli vücut ısısı değişiklikleri de benzerdi, her iki grubun değişkenlik farkı rağmen(Tablo 1).
Hem lazer (16 ± 1.1) hem de MCAO (20 ± 1.5) modellerinde, sham-operated kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha kötü NSS vardı (1 ± 0.3; Tablo 1; p<0.01).
.......Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Lazer grubunda ölüm veya SAH olmadığı göz önüne alındığında, lazer tekniğinin minimal invaziv olduğunu varsaymak yanlış olmaz. Ölüm ve SAH birincil nedeni intrakranial basınç (ICP) bir yükseklik yol açan kan damarlarının hasarı, orijinal MCAO teknikleri gösterildiği gibi10. Lazer grubunda ölüm ve SAH yokluğu lazerlerin özel etkileri nedeniyle muhtemeldir: onlar kan damarları üzerinde doğrudan etkisi yoktur ve sızıntı durumunda pıhtılaşma neden olabilir. Düşük enfarkt hacmi ve beyin ödemi de ölüm r.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.
Teşekkürler
Soroka Üniversitesi Tıp Merkezi Anesteziyoloji Bölümü'ne ve Negev Ben-Gurion Üniversitesi laboratuvar personeline bu deneyin performansına yardımcı olan yardımcılarından dolayı teşekkür ederiz.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 2,3,5-Trifeniltetrazolyum klorür | SIGMA - ALDRICH | 298-96-4 | |
| %50 trikloroasetik asit | SIGMA - ALDRICH | 76-03-9 | |
| Beyin ve Doku Matrisleri | SIGMA - ALDRICH | 15013 | |
| Kanül Venflon 22 G | KD-FIX | 1.83604E+11 | |
| Santrifüj Sigma 2-16P | SIGMA - ALDRICH | Sigma 2-16P | |
| Kompakt Analitik Teraziler | SIGMA - ALDRICH | HR-AZ/HR-A | |
| Dijital Tartı Terazisi | SIGMA - ALDRICH | Rs 4.000 | |
| Diseksiyon makası | SIGMA - ALDRICH | Z265969 | |
| Eppendorf pipet | SIGMA - ALDRICH | Z683884 | |
| Eppendorf Tüpü | SIGMA - ALDRICH | EP0030119460 | |
| Etanol %96 | ROMİK | Yanıcı Sıvı | |
| Evans Mavi %2 | SIGMA - ALDRICH | 314-13-6 | |
| Floresan dedektörü | Tecan, Mä nnedorf İsviçre | modeli Infinite 200 PRO çok modlu okuyucu | |
| Termometreli ısıtıcı | Isıtma pedi-1 | Model: HEATINGPAD-1/2 | |
| İnfüzyon Manşeti | ABN | IC-500 | |
| Isofluran, USP %100 | Piramamal Critical Care, Inc | NDC 66794-017 | |
| Multiset | TEVA MEDICAL | 998702 | |
| Olympus BX 40 mikroskop | Olympus | ||
| Optik tarayıcı | Canon | Cano Scan 4200F | |
| Petri tabakları | SIGMA - ALDRICH | P5606 | |
| Neşter bıçakları 11 | SIGMA - ALDRICH | S2771 | |
| Sharplan 3000 Nd:YAG (neodimyum katkılı itriyum alüminyum granat) lazer makinesi | Lazer Endüstrileri Ltd | ||
| Stereotaksik kafa tutucu | KOPF | 900LS | |
| Steril Şırınga 2 ml | Braun | 4606027V | |
| Şırınga İğnesi 27 G | Braun | 305620 |
Kaynaklar
- World Health Organization. Global health estimates: deaths by cause, age, sex and country, 2000-2012. World Health Organization. 9, Geneva. (2014).
- Meadows, K. L. Experimental models of focal and multifocal cerebral ischemia: a review....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Düzeltme
Formal Correction: Erratum: Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats
Posted by JoVE Editors on 2/07/2022. Citeable Link.
An erratum was issued for: Laser-Induced Brain Injury in the Motor Cortex of Rats. The Authors section was updated.
One of the author names was updated from:
Dmitri Frank
to
Dmitry Frank
