Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Akut Chorioamnionitis'in Yenidoğan Bağırsak Gelişimi Üzerindeki Etkilerini İncelemek için Anne İltihaba Fetal MaruzIyetin Bir Murine Modeli

3.3K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/61464

⸱

24 Haziran 2020

 ,  ,  ,  ,  , 
1Division of Neonatology, Stead Family Department of Pediatrics, University of Iowa, 2Division of Maternal Fetal Medicine, Department of Obstetrics & Gynecology, University of Iowa, 3Division of Neonatology, Department of Pediatrics, Vanderbilt University, 4Department of Microbiology & Immunology, University of Iowa

Bu makalede

Özet

FEMI'nin yavruların bağırsak sisteminin gelişimi üzerindeki etkilerini incelemek için canlı organizmaların komplikasyonları olmadan anne iltihabına (FEMI) fetal maruziyeti simüle etmek için bir chorioamnionitis modeli geliştirdik. Bu, chorioamnionitis'i takiben bağırsak hasarı gelişimi için mekanistik nedenlerin incelenmesine izin verir.

Özet

Chorioamnionitis, preterm doğumun yaygın bir çökelticisidir ve nekrotizan enterokolit (NEC) de dahil olmak üzere prematürite morbiditelerinin çoğu ile ilişkilidir. Ancak, bu iki koşul arasında mekanistik bir bağlantı henüz keşfedilmemiştir. Lipopolisakkarit (LPS) kaynaklı fetal inflamasyon ve anne iltihabı (FEMI) içeren bir koryoamniyozit modelini benimsedik. Bu FEMI modeli, birçok klinik chorioamnionitis vakasında da bulunan steril bir maternal, plasental ve fetal enflamatuar kaskadı indükler. Canlı bakterileri kullanan ve koliyoamniyotitle sonuçlanan artan bir enfeksiyonun patofizyolojisini daha doğru bir şekilde taklit eden modeller mevcut olsa da, bu yöntemler olgunlaşmamış bağırsak sisteminin ve ilişkili gelişen mikrobiyomun gelişimi üzerinde dolaylı etkilere neden olabilir. Bu protokolü kullanarak, LPS kaynaklı FEMI'nin gebelik kaybı ve erken doğumda doza bağlı bir artışın yanı sıra yavrularda normal bağırsak gelişiminin bozulmasına neden olduğunu gösterdik. Ayrıca, FEMI'nin yavrularda bağırsak yaralanmasını ve serum sitokinleri önemli ölçüde artırdığını, aynı zamanda her ikisi de bağırsak iltihabına karşı doğuştan gelen ilk bağışıklık hattını sağlayan kadeh ve Paneth hücrelerini azaltdığını gösterdik. LPS kaynaklı FEMI'nin benzer bir modeli, chorioamnionitis ile merkezi sinir sisteminin sonraki anormallikleri arasındaki ilişkiyi modellemek için kullanılmış olsa da, bu protokol, chorioamnionitis ve NEC arasında potansiyel bir bağlantı olarak koryoamniyozit ve daha sonra bağırsak gelişimindeki pertürbasyonlar arasında mekanistik bir bağlantı kurmaya çalışan ilk protokoldür.

Giriş

Koryonik zarlar memeli hamileliğinde ayrılmaz bir rol oynar. Birden fazla işleve hizmet eden korozyon ve amnion içerirler. Fetüsü çevreler ve korurlar, anne ve fetal bölmeler arasında parakrin sinyali kolaylaştırırlar1ve koryonik membranlar içinde parturition1'inbaşlatılmasında rol alabilen yerel geri bildirim döngüleri oluştururlar. Zarların mevcut anlaşılması, amniyonun yapısal bariyer fonksiyonu sağladığını ve koronun öncelikle gelişmekte olan fetüsü anne bağışıklık sisteminden korumak için immünolojik bir tampon sağladığını gösterir2. Bu zarların iltihabı chorioamnionitis olarak bilinir. Tarihsel olarak, klinik koryoamniyozit tanısı anne ateşinin varlığı artı bir veya daha fazla fetal veya maternal klinik bulgu3,4 .4.'densonra konur. Bununla birlikte, bu tanım klinik olarak yararlı olsa da, hassasiyet eksikliği chorioamnionitis araştırmasını zorlaştırdı. 2015 yılında, tanıyı açıklığa kavuşturmak amacıyla, Eunice Kennedy Shriver Ulusal Çocuk Sağlığı ve İnsan Gelişimi Enstitüsü tarafından yapılan bir uzman paneli çalıştayı, koryoamniyonuti rahim içi inflamasyon veya enfeksiyon veya her ikisi (üçlü I)3olarak tanımladı. Bu açıklama önemlidir, çünkü mikrobiyal indüklenen enfeksiyon uterus / amniyotik iltihabın önemli bir nedeni olmakla birlikte, steril rahim / amniyotik inflamasyondan daha az görülür5,6,7. Genel olarak, chorioamnionitis, dönem teslimatlarının% 2\u20124'ünde ve 25 \u201230% preterm teslimatlarında görüldüğü gibi önemli bir halk sağlığı sorunu olmaya devam etmektedir8,9.

Koliyoamniyonut fetüs ve yenidoğan üzerinde önemli etkilere sahip olabilir. Literatürde chorioamnionitis'in prematürite morbiditelerinin çoğunun artan riski ile ilişkili olduğu iyi belgelenmiştir, bronkopulmoner displazi10, serebral beyaz madde yaralanması11, intraventriküler kanama12, prematürite retinopatisi13ve hem şüpheli hem de doğrulanmış erken başlangıçlı yenidoğan sepsis14,15. Olgunlaşmamış bağırsak sisteminin yaralanma ve onarım mekanizmalarıyla ilgilendiğimiz için, chorioamnionitis'in daha sonra nekrotizan enterokolit (NEC) gelişimi ile de ilişkili olduğunu belirtmek önemlidir15,16. NEC, preterm bebeklerin iltihaplanmaya ve sonraki bağırsak nekrozuna disregüle edilmiş konakçı yanıtı ile sonuçlanan yıkıcı bir gastrointestinal hastalığıdır17. Her yıl, NEC Amerika Birleşik Devletleri'nde 4000'den fazla bebeği etkiler ve bu bebeklerin üçte birine kadarı hastalıktan ölür18. NEC patogenez muhtemelen bağırsak olgunlaşmamışlığı, olgunlaşmamış bağışıklık sisteminin düzensizliği, bağırsak iltihabı ve bakteriyel translokasyon19'un bir kombinasyonunu içerir . Daha da önemlisi, NEC'in başlangıcı genellikle doğumdan haftalar sonra ve koryoamniyozite potansiyel maruziyet meydana gelir, bu da chorioamnionitis ile NEC'in sonraki gelişimi arasındaki mekanistik bağlantıyı belirsiz hale getirir20. Chorioamnionitis'in NEC patofizyolojisine katkıda bulunabileceği potansiyel bir mekanizma, maternal bağışıklık sisteminin yukarı doğrullaştırılması ve daha sonra normal fetal gelişimsel kalıpları bozabilecek güçlü bir fetal inflamatuar yanıt üretmesidir21,22,23.

Korneaların ve koyunların birden fazla memeli modeli kemirgenlerde ve koyunlarda bulunur24,25,26,27,28,29,30,31,32. Bununla birlikte, koliamnionit kaynaklı fetal inflamasyondan (FEMI) sonra ilk yenidoğan döneminin ötesinde bağırsak sisteminin gelişimi ile ilgili çok az veri bulunmaktadır. FEMI ile olgunlaşmamış bağırsak sisteminin yaralanmasının daha sonra gelişmesi arasındaki ilişkiyi araştırmak için lipopolisakkarit (LPS) kaynaklı FEMI modelini uyarladık. Lipopolisakkaritler gram negatif bakteriler üzerindeki hücre dışı yüzeyin önemli bir bileşenidir ve insanlar da dahil olmak üzere birden fazla ökaryotik türün doğuştan gelen bağışıklık sisteminin güçlü bir uyarıcısıdır33. Maternal LPS enjeksiyonu, canlı bakterilerin şaşırtıcı etkileri olmadan steril bir enflamatuar kaskad ile sonuçlanır ve preterm doğum34indüksiyonu için iyi kurulmuş bir modeldir Akut chorioamnionitis ve cenin enflamatuar yanıt sendromu (FIRS) modeli, koryoamniyonit24,35. Ayrıca bir koyun modeli 36 ve bir murine model37 , 38 ,39,40hem serebral beyaz hem de gri madde yaralanmasına neden olduğu gösterilmiştir. Bununla birlikte, bildiğimiz kadarıyla, bu chorioamnionitis ve FEMI modelini gastrointestinal sistemin gelişimi üzerindeki etkilerini araştırmak ve ayrıca chorioamnionitis ile daha sonra NEC41,42gelişimi arasındaki olası bir mekanistik bağlantıyı araştırmak için ilk kullananlarız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan prosedürleri Iowa Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (Protokol #8041401) tarafından onaylandı. Tüm hayvanlar, Iowa Üniversitesi'nde Laboratuvar Hayvan Bakımı Değerlendirme ve Akreditasyon Derneği (AALAC) onaylı bir vivariumda barındırıldı. Tüm fareler vahşi tip Suş C57Bl / 6J'ydi.

1. Hamile farelerde FEMI'nin kurulması

  1. LPS hazırlığı
    1. Escherichia coli O55:B5'ten türetilen LPS kullanın (stok konsantrasyonu 2 mg/mL).
    2. LPS stok konsantrasyonunu 1:100 steril salin ile seyreltin ve 20 μg/mL çalışma konsantrasyonu elde edin.
  2. Maternal LPS enjeksiyonu
    1. Gebelik günü e15'te hamile barajları enjekte edin. Bu zaman noktası, murine gebelik yoluyla yaklaşık% 75'tir ve bu modeli, chorioamnionitis'e bağlı erken doğumların çoğunluğunun gerçekleştiği insan gebeliklerinin erken üçüncü üç aylık dönemine gelişimsel olarak benzer hale getirir.
    2. Uygun LPS dosing belirlemek için enjeksiyondan hemen önce hamile fareleri tartın.
    3. Aşağıdaki formülü kullanarak çalışma konsantrasyonunun dozunu hesaplayın: toplam 100 μg / kg LPS dozu için 5 μL x gram vücut ağırlığı (gbw). Hayvanları kontrol için, enjeksiyon için eşdeğer bir normal salin hacmi kullanın.
    4. Vortex LPS çözeltisi, her enjeksiyondan önce 15 saniye boyunca üç kez yüksekte.
    5. LPS hacmini 1 mL şırınna çekin.
    6. Hamile fareyi scruffing tekniği ile zapt edin. Dorsal reumbency pozisyonunda tutun ve enjeksiyonu gerçekleştirin.
      1. 30\u201240° açıyla karnın sağ alt çeyreğini (mesane ve karın damarlarını önlemek için) üzerine 30 ölçer 8 mm iğne eğimi yerleştirin. İğnenin yaklaşık 1/4 ila 1/2 uzunluğunu yerleştirin.
      2. Enjekte etmeden önce negatif basınç sağlamak için şırınna pistonu geri çekin. Negatif basınç varsa enjeksiyona devam edin.
      3. Enjeksiyondan sonra, fareleri yaklaşık 30 dakika izleyin ve daha sonra hamileliğin geri kalanı için kafeslere geri dönün.

2. Yavruların teslimi ve bakımı ve bağırsak hasadı

  1. E20'de vajinal doğum yoluyla normal olarak yavrular teslim edin.
    NOT: Bu model Şekil 1'de görülebilen ve aşağıdaki sonuçlarda tartışılan beklenen bir doza bağımlı fetal kayıp oranına sahiptir.
  2. Yavruların annelerle kalmasına ve reklam libitum beslemeleri almasına izin verin.
  3. Hasat gününde, tipik olarak doğum sonrası 14 (P14), Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi protokollerine uygun olarak servikal çıkık yoluyla yavrulara ötenazi.
  4. Makas ve forseps kullanarak, karnın orta çizgisine, deri ve peritondan, karnın tüm uzunluğu boyunca dikey bir kesi yapın. İnce bağırsağı mideden makasla sökmeğe çıkarın ve asalarla mezteri çıkarın.
  5. İnce bağırsağın distal 1/3'ü (insan ileumunun kesit temsilcisi), proksimal ince bağırsağı, cecum'ı ve kolonu atarak izole edin ve saklayın.
  6. İleum kısmını makas kullanarak ikiye bölün.
  7. Proksimal yarısını daha sonra RNA nicelemesi için bir RNA stabilizasyon çözeltisine yerleştirin.
  8. Distal yarısını slayt hazırlığı için% 10 nötr tamponlu formalin içine yerleştirin.

3. Bağırsak yaralanması puanlaması

  1. Bölüm parafin gömülü doku 5 μm kalınlığında dilimler halinde ve cam slaytlar üzerine monte.

    NOT: Örnekleri parafin gömme, bölümleme ve slaytlara montaj için bir histoloji çekirdeğine gönderiyoruz.
  2. Slaytları standart prosedürlere göre ayrıştırın.
  3. Standart prosedürlere göre hematoksilin ve eozin ile leke bölümleri.
  4. Daha önce açıklandığı gibi bağırsak yaralanması için 3 puan ölçeğinde puan bölümleri42,43.
    1. Hafif mikroskopi kullanarak, villus bütünlüğünü ve bodrum zarından ayırmayı değerlendiren 3 puanlık bir ölçekte iki ayrı kör araştırmacı tarafından genelleştirilmiş bağırsak yaralanmasını değerlendirin43 (Ek Şekil 1). Bağırsak hasarı en iyi 20x büyütme ve sayısal diyafram 0.50'de değerlendirilir.
    2. Normal mukozayı tanımlamak için 0 puanı atayın.
    3. Subepithelial Gruenhagen'in uzayının gelişimini, vakuolizasyon veya villi'nin lamina propria veya uçları ile sınırlı olan subepithelial kaldırmayı kapsayan hafif yaralanmayı tanımlayan 1 puan atayın.
    4. Villi, villi distorsiyon veya mukozal ülserasyon ve lamina proprianın parçalanmasından daha büyük epitel kaldırma ve vakuolizasyon ile belirtilen ciddi yaralanmayı tanımlamak için 2 puan atayın.

4. Paneth ve kadeh hücrelerinin nicelleştirilmesi

  1. Deparaffinizasyonun ardından, aşağıdaki adımlara göre daha önce açıklandığı gibi hem kadeh hem de Paneth hücrelerini belirtmek için Alcian Blue/Periodic Acid Schiff lekesi ile Adım2.8'den doku bölümlerinin leke slaytları.
    NOT: Alcian Blue/Periodic Acid Schiff lekesi Paneth veya goblet hücrelerine özgü olmasa da, deneyimlerimize göre, kör deneyimli araştırmacılar hücresel hedefli antikorlara kıyasla bu lekeyi kullanarak eşdeğer hücresel nicelemelere sahiptir, önemli ölçüde daha az arka plan lekesi46.
  2. Deparaffinize, leke ve susuz slaytlar aşağıdaki gibi.
    1. İki kez 10 dakika boyunca ksilen olarak bastırın.
      DİkKAT: Duman kaputunda ksilen kullanılmalıdır.
    2. %100 EtOH ile durulayın.
    3. 3 dakika boyunca % 100 EtOH'da, daha sonra 3 dakika boyunca% 90 EtOH'da, ardından 3 dakika boyunca% 70 EtOH'da ve son olarak 3 dakika boyunca% 50 EtOH'da slaytları batırın.
    4. Akan musluk suyunun altında 5 dakika yıkayın.
      DİkKAT: Doku örneğinin kaybını önlemek için bölümü akan sudan uzağa doğru yönlendirin.
    5. Alcian mavi leke solüsyonlarını standart bir kahve filtresi ile filtreleyin.
    6. Alcian mavi lekesinde 15 dakika leke slaytları ve ardından 2 dakika boyunca akan musluk suyu altında yıkayın.
    7. 200 mL çift damıtılmış suda 1 mg periyodik asit seyreltin. Bu çözeltide 5 dakika boyunca slaytları batırın. Daha sonra akan musluk suyunun altında 1 dakika yıkayın.
    8. Schiff'in reaktifiyle 10 dakika lekele. Akan musluk suyunun altında 5 dakika yıkayın.
    9. Slaytları hematoksilin ile 1 dakika lekeleyin ve ardından 2 dakika boyunca akan musluk suyunun altında yıkayın.
    10. Onları asit alkolüne batırın (1 mL hidroklorik asit 99 mL%70 EtOH karıştırılır) 1 dakika boyunca.
    11. Scott'ın musluk suyuna (musluk suyunda% 0.1 NaHCO3 konsantrasyonu) 1 dakika batırın ve ardından 1 dakika boyunca akan musluk suyunun altında yıkayın.
    12. Slaytları susuz kalsın.
      1. Her slaydı %70 EtOH'da 10 kez daldırın, sonra %90 EtOH'da 10 kez ve %100 EtOH'da 10 kez daldırın.
      2. 10 dakika boyunca % 100 EtOH'da batır, ardından her biri 3 dakika boyunca taze ksilende iki kez batır.
    13. Numunenin üzerine bir damla montaj ortamı yerleştirin ve üzerine bir kapak parçası yerleştirin.
  3. Kadeh hücre sayımı
    1. Hafif mikroskopi kullanarak kadeh hücrelerini sayın (Tamamlayıcı Şekil 2). Bağırsak dokusunun her bir parçası için, kadeh hücrelerinin sayısını ve 500 epitel hücresini sayın ve 100 epitel hücresi başına bir oran olarak goblet hücre oranını ifade edin. Kadeh hücreleri en iyi 20x büyütme ve sayısal diyafram 0.5'te sayılır.
  4. Paneth hücre sayımı
    1. Işık mikroskopisi kullanarak Paneth hücrelerini sayın (Tamamlayıcı Şekil 2). Bağırsak dokusunun her parçası için, bağırsak mahzeni başına Paneth hücrelerinin bir oranı olarak ifade edin. Her bağırsak dokusu parçası başına 100 bağırsak mahzeni sayın. Paneth hücreleri en iyi 20x-60x büyütme ve sayısal diyafram 0.50-1.30 olarak sayılır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Embriyonik 15. günde FEMI'ye maruz kalmak, doza bağlı gebelik kaybına ve doz bağımlı preterm işgücü oranına yol açar (Şekil 1)42. Deneyler için, fetüsleri önemli bir inflamatuar hakarete maruz tutarken gebelik kaybını ve prematüritesini (hem prematürite hem de intrauterin fetal ölüm arasında% 50 kayıp) en aza indirmek için 100 μg / kg LPS dozunu kullanmayı seçtik.

Bu yaklaşımı kullanarak, FEMI'nin yavruların sonraki yaralanması üzerindeki e...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Chorioamnionitis terimin% 2\u20124'ünü ve 25\u201230% preterm teslimatlarının%8,9'unuetkiler. Bununla birlikte, koryoamniyonulün etkisi, fetüs ve yenidoğan 10 , 11 , 12 , 13,14,15,16üzerinde önemli etkileri olduğu gösterildiği için doğumu uzun süre uzatabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma kısmen Ulusal Sağlık Enstitüleri (DK097335 & T32AI007260) ve Iowa Stead Üniversitesi Aile Pediatri Bölümü aracılığıyla desteklendi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
% 10 nötr tamponlu formalinSigmaHT501128
Alcian mavi lekesiYeni gelen tedarik1003A
C57Bl6 / J farelerJackson Laboratuvarları664
EtanolDecon laboratuvarları2701
HClSigmaH1758
Hematoksilen lekesiLeica381562
LPSSigmaL2880
NaHCO3SigmaS6014
Nikon Eclipse Ni-U MikroskobuNikon2CE-MQVJ-1
Periyodik AsitACROSH5106CAS # 10450-59-9
RNAlaterThermofisherAm7021
Schiff'in reaktifiSigmaS5133
Secor Imager 2400Meso Scale Discovery (MSD)
V-Plex DeneyiMeso Scale Discovery (MSD)
XyleneSigma534056

Kaynaklar

  1. Myatt, L., Sun, K. Role of fetal membranes in signaling of fetal maturation and parturition. International Journal of Developmental Biology. 54 (2-3), 545-553 (2010).
  2. Verbruggen, S. W., Oyen, M. L., Phillips, A. T., Nowlan, N. C. Function and failure of the fetal membrane: Modelling the mechanics of the chorion and amnion. PLoS One. 12 (3), 0171588(2017).
  3. Higgins, R. D., et al. Evaluation and Management of Women and Newborns With a Maternal Diagnosis of Chorioamnionitis: Summary of a Workshop. Obstetrics & Gynecology. 127 (3), 426-436 (2016).
  4. Peng, C. C., Chang, J. H., Lin, H. Y., Cheng, P. J., Su, B. H. Intrauterine inflammation, infection, or both (Triple I): A new concept for chorioamnionitis. Pediatrics and Neonatology. 59 (3), 231-237 (2018).
  5. Romero, R., et al. Prevalence and clinical significance of sterile intra-amniotic inflammation in patients with preterm labor and intact membranes. American Journal of Reproductive Immunology. 72 (5), 458-474 (2014).
  6. Romero, R., et al. Sterile intra-amniotic inflammation in asymptomatic patients with a sonographic short cervix: prevalence and clinical significance. Journal of Maternal-Fetal and Neonatal. , 1-17 (2014).
  7. Romero, R., et al. Sterile and microbial-associated intra-amniotic inflammation in preterm prelabor rupture of membranes. Journal of Maternal-Fetal and Neonatal Medicine. 28 (12), 1394-1409 (2015).
  8. Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. Epidemiology and causes of preterm birth. Lancet. 371 (9606), 75-84 (2008).
  9. Erdemir, G., et al. Histological chorioamnionitis: effects on premature delivery and neonatal prognosis. Pediatrics and Neonatology. 54 (4), 267-274 (2013).
  10. Metcalfe, A., Lisonkova, S., Sabr, Y., Stritzke, A., Joseph, K. S. Neonatal respiratory morbidity following exposure to chorioamnionitis. BMC Pediatrics. 17 (1), 128(2017).
  11. Anblagan, D., et al. Association between preterm brain injury and exposure to chorioamnionitis during fetal life. Scientific Reports. 6, 37932(2016).
  12. Villamor-Martinez, E., et al. Corrigendum: Chorioamnionitis Is a Risk Factor for Intraventricular Hemorrhage in Preterm Infants: A Systematic Review and Meta-Analysis. Frontiers in Physiology. 10, 102(2019).
  13. Villamor-Martinez, E., et al. Chorioamnionitis as a risk factor for retinopathy of prematurity: An updated systematic review and meta-analysis. PLoS One. 13 (10), 0205838(2018).
  14. Randis, T. M., et al. Incidence of early-onset sepsis in infants born to women with clinical chorioamnionitis. Journal of Perinatal Medicine. 46 (8), 926-933 (2018).
  15. Rodrigo, F. G. M., Henriquez F, G. G., Aloy, F. J., Perez, G. A. A. Outcomes of very-low-birth-weight infants exposed to maternal clinical chorioamnionitis: a multicentre study. Neonatology. 106 (3), 229-234 (2014).
  16. Been, J. V., Lievense, S., Zimmermann, L. J., Kramer, B. W., Wolfs, T. G. Chorioamnionitis as a risk factor for necrotizing enterocolitis: a systematic review and meta-analysis. Journal of Pediatrics. 162 (2), 236-242 (2013).
  17. Tanner, S. M., et al. Pathogenesis of necrotizing enterocolitis: modeling the innate immune response. American Journal of Pathology. 185 (1), 4-16 (2015).
  18. Fitzgibbons, S. C., et al. Mortality of necrotizing enterocolitis expressed by birth weight categories. Journal of Pediatric Surgery. 44 (6), 1075-1076 (2009).
  19. Vongbhavit, K., Underwood, M. A. Prevention of Necrotizing Enterocolitis Through Manipulation of the Intestinal Microbiota of the Premature Infant. Clinical Therapeutics. 38 (4), 716-732 (2016).
  20. Yee, W. H., et al. Incidence and timing of presentation of necrotizing enterocolitis in preterm infants. Pediatrics. 129 (2), 298-304 (2012).
  21. Gantert, M., et al. Chorioamnionitis: a multiorgan disease of the fetus. Journal of Perinatology. 30, 21-30 (2010).
  22. Hudalla, H., et al. LPS-induced maternal inflammation promotes fetal leukocyte recruitment and prenatal organ infiltration in mice. Pediatric Research. 84 (5), 757-764 (2018).
  23. Yamada, N., et al. Histological severity of fetal inflammation is useful in predicting neonatal outcome. Placenta. 36 (12), 1490-1493 (2015).
  24. Wolfe, K. B., et al. Modulation of lipopolysaccharide-induced chorioamnionitis in fetal sheep by maternal betamethasone. Reproductive Sciences. 20 (12), 1447-1454 (2013).
  25. Normann, E., et al. A novel mouse model of Ureaplasma-induced perinatal inflammation: effects on lung and brain injury. Pediatric Research. 65 (4), 430-436 (2009).
  26. Burd, I., Brown, A., Gonzalez, J. M., Chai, J., Elovitz, M. A. A mouse model of term chorioamnionitis: unraveling causes of adverse neurological outcomes. Reproductive Sciences. 18 (9), 900-907 (2011).
  27. Dell'Ovo, V., et al. An animal model for chorioamnionitis at term. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 213 (3), 387(2015).
  28. Randis, T. M., et al. Group B Streptococcus beta-hemolysin/cytolysin breaches maternal-fetal barriers to cause preterm birth and intrauterine fetal demise in vivo. Journal of Infectious Diseases. 210 (2), 265-273 (2014).
  29. Breen, K., et al. TLR-4-dependent and -independent mechanisms of fetal brain injury in the setting of preterm birth. Reproductive Sciences. 19 (8), 839-850 (2012).
  30. Burd, I., Balakrishnan, B., Kannan, S. Models of fetal brain injury, intrauterine inflammation, and preterm birth. American Journal of Reproductive Immunology. 67 (4), 287-294 (2012).
  31. Agrawal, V., et al. Role of Notch signaling during lipopolysaccharide-induced preterm labor. Journal of Leukocyte Biology. 100 (2), 261-274 (2016).
  32. Filipovich, Y., Klein, J., Zhou, Y., Hirsch, E. Maternal and fetal roles in bacterially induced preterm labor in the mouse. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 214 (3), 381-389 (2016).
  33. Alexander, C., Rietschel, E. T. Bacterial lipopolysaccharides and innate immunity. Journal of Endotoxin Research. 7 (3), 167-202 (2001).
  34. McCarthy, R., et al. Mouse models of preterm birth: suggested assessment and reporting guidelines. Biology of Reproduction. 99 (5), 922-937 (2018).
  35. Rueda, C. M., et al. Lipopolysaccharide-Induced Chorioamnionitis Promotes IL-1-Dependent Inflammatory FOXP3+ CD4+ T Cells in the Fetal Rhesus Macaque. Journal of Immunology. 196 (9), 3706-3715 (2016).
  36. Gavilanes, A. W., et al. Chorioamnionitis induced by intraamniotic lipopolysaccharide resulted in an interval-dependent increase in central nervous system injury in the fetal sheep. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 200 (4), 431-438 (2009).
  37. Boksa, P. Effects of prenatal infection on brain development and behavior: a review of findings from animal models. Brain, Behavior, and Immunity. 24 (6), 881-897 (2010).
  38. Knuesel, I., et al. Maternal immune activation and abnormal brain development across CNS disorders. Nature Reviews Neurology. 10 (11), 643-660 (2014).
  39. Garay, P. A., Hsiao, E. Y., Patterson, P. H., McAllister, A. K. Maternal immune activation causes age- and region-specific changes in brain cytokines in offspring throughout development. Brain, Behavior, and Immunity. 31, 54-68 (2013).
  40. Smith, S. E., Li, J., Garbett, K., Mirnics, K., Patterson, P. H. Maternal immune activation alters fetal brain development through interleukin-6. Journal of Neuroscience. 27 (40), 10695-10702 (2007).
  41. Elgin, T. G., et al. Fetal exposure to maternal inflammation interrupts murine intestinal development and increases susceptibility to neonatal intestinal injury. Disease Models & Mechanisms. 12 (10), (2019).
  42. Fricke, E. M., et al. Lipopolysaccharide-induced maternal inflammation induces direct placental injury without alteration in placental blood flow and induces a secondary fetal intestinal injury that persists into adulthood. American Journal of Reproductive Immunology. 79 (5), 12816(2018).
  43. Wynn, J. L., et al. Targeting IL-17A attenuates neonatal sepsis mortality induced by IL-18. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (19), 2627-2635 (2016).
  44. Brown, K. S., et al. Tumor necrosis factor induces developmental stage-dependent structural changes in the immature small intestine. Mediators of Inflammation. 2014, 852378(2014).
  45. McElroy, S. J., et al. The ErbB4 ligand neuregulin-4 protects against experimental necrotizing enterocolitis. American Journal of Pathology. 184 (10), 2768-2778 (2014).
  46. McElroy, S. J., et al. Tumor necrosis factor receptor 1-dependent depletion of mucus in immature small intestine: a potential role in neonatal necrotizing enterocolitis. American Journal of Physiology - Gastrointestinal and Liver Physiology. 301 (4), 656(2011).
  47. Stanford, A. H., et al. A direct comparison of mouse and human intestinal development using epithelial gene expression patterns. Pediatric Research. , (2019).
  48. McElroy, S. J., Weitkamp, J. H. Innate Immunity in the Small Intestine of the Preterm Infant. NeoReviews. 12 (9), 517-526 (2011).
  49. McElroy, S. J., Underwood, M. A., Sherman, M. P. Paneth cells and necrotizing enterocolitis: a novel hypothesis for disease pathogenesis. Neonatology. 103 (1), 10-20 (2013).
  50. Park, B. S., Lee, J. O. Recognition of lipopolysaccharide pattern by TLR4 complexes. Experimental & Molecular Medicine. 45, 66(2013).
  51. Lester, S. N., Li, K. Toll-like receptors in antiviral innate immunity. Journal of Molecular Biology. 426 (6), 1246-1264 (2014).
  52. Pott, J., et al. Age-dependent TLR3 expression of the intestinal epithelium contributes to rotavirus susceptibility. PLOS Pathogens. 8 (5), 1002670(2012).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Fetal Maruziyet Maternal nflamasyonKoryoamniyinit ModeliLPS Enjeksiyon ProtokolBa rsak Hasar De erlendirmesiGoblet H cre KantifikasyonuPaneth H cresi AnaliziSerum Sitokin l mNekrotizan Enterokolit Ara t rmasFare Gebelik KaybPreterm Do um Modeli
Akut Chorioamnionitis'in Yenidoğan Bağırsak Gelişimi Üzerindeki Etkilerini İncelemek için Anne İltihaba Fetal MaruzIyetin Bir Murine Modeli
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.