Sıçanlarda Motor Tic Ekspresyonunun Akut ve Kronik Deneysel Modellerinin Oluşturulması

Özet

Özgürce davranan sıçanlarda akut ve kronik deneysel tik ekspresyon modelleri üretmek için protokoller sunuyoruz. Modeller striatal kanül implantasyonu ve sonraki GABA_A antagonist uygulamasına dayanmaktadır. Akut model geçici enjeksiyonlar kullanırken, kronik model deri altı implante edilmiş bir mini-ozmotik pompa aracılığıyla uzun süreli infüzyonlar kullanır.

Özet

Motor tikler Tourette sendromunun ve diğer tik bozukluklarının temel belirtileri olan ani, hızlı, tekrarlayan hareketlerdir. Tik kuşağının patofizyolojisi bazal gangliyonun anormal inhibisyonu ile ilişkilidir, özellikle birincil giriş yapısı olan striatum. Hem kemirgenlerin hem de insan olmayan primatların hayvan modellerinde, gaba_A antagonistlerinin, bikükülin ve pikrotoksin gibi yerel uygulamaları, striatumun motor kısımlarına yerel disinhibisyona neden olur ve motor tiklerin ifade edilir.

Burada sıçanlarda akut ve kronik motor tik modelleri sunuyoruz. Akut modelde, dorsal striatuma yerleştirilen bir kanül yoluyla biküküllin mikroenjections, bir saate kadar kısa süreler süren tiklerin ekspresyonunu ortaya çıkarır. Kronik model, tik ekspresyonunun birkaç gün hatta hafta dönemlerine uzatılmasını sağlayan, bir alt kese altı mini ozmotik pompa aracılığıyla biküküllin sürekli infüzyonunu kullanan bir alternatiftir.

Modeller, kortiko-bazal gangliyon yolu boyunca tik kuşağının davranışsal ve sinirsel mekanizmalarının incelenmesini sağlar. Modeller, enjeksiyon kolaylarına ek olarak ek kayıt ve stimülasyon cihazlarının implantasyonunu destekler, böylece elektrik ve optik stimülasyon ve elektrofizyolojik kayıtlar gibi çok çeşitli kullanımlara izin verir. Her yöntemin farklı avantajları ve eksiklikleri vardır: akut model, hareketin kinematik özelliklerinin ve buna karşılık gelen elektrofizyolojik değişikliklerin tik ekspresyonu öncesi, sırasında ve sonrasında karşılaştırılması ve kısa süreli modülatörlerin tic ekspresyonu üzerindeki etkilerinin karşılaştırılmasına olanak tanır. Bu akut modelin kurulması kolaydır; ancak, kısa bir süre ile sınırlıdır. Kronik model, daha karmaşık olmakla birlikte, uzun süreler boyunca tik dinamiği ve davranışsal etkilerin tik ekspresyolu üzerinde incelenmesini mümkün kılar. Bu nedenle, ampirik sorgu türü, bu iki tamamlayıcı tic ifade modeli arasındaki seçimi yönlendirir.

Giriş

Tikler Tourette sendromunun (TS) ve diğer tik bozukluklarının belirleyici belirtisidir. Tikler ani, hızlı, tekrarlayan hareketler (motor tikler) veya vokalizasyonlar (vokal tikleri)¹olarak tanımlanır. Tic ifadesi genellikle zamansal (frekans)² ve uzamsal (yoğunluk, vücut konumu)³ özelliğinde birden çok zaman ölçeğinde (saat, gün, ay ve yıl) dalgalanır. Bu değişiklikler, çevresel özellikler 4^,5 , davranış durumları^6,7ve gönüllü ve geçici bastırma⁸gibi farklı faktörlerden etkilenir.<....

Protokol

Tüm prosedürler Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmış ve denetlenmiş ve Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri Rehberi ve Araştırmada Laboratuvar Hayvanlarının Kullanımı ve Bakımı için Bar-Ilan Üniversitesi Yönergeleri'ne bağlı kalınmıştır. Bu protokol, Sağlık Bakanlığı Laboratuvar Hayvanlarında Deneyler Ulusal Komitesi tarafından onaylandı.

NOT: Bu protokolde 3-10 aylık, 280-350 g yaş arası dişi Long-Evans sıçanları (akut ve kronik modeller) ve dişi Sprague Dawley sıçanları (akut model) kullanılmaktadır. Bu modellerin diğer suşlarda, ağırlıklarda veya yaşlarda uygulanması far....

Sonuçlar

Sıçanlarda tik indüksiyonu için akut ve kronik modellerin üretilmesine yönelik protokoller yukarıda sunulmuştur. Protokoller ameliyat ve deneyler için tam hazırlığı kapsar (Akut model içinŞekil 1, kronik model için Şekil 2). Biküküllin striatumun motor bölgelerine uygulanması, devam eden motor tiklerin ifade edilir. Tikler uygulamanın kontralteral tarafında görünür ve kısa ve tekrarlayan kas kasılmaları ile karakterize edilir. Striatumun ön kısımlarına bikükülin.......

Tartışma

Bu yazıda, özgürce davranan bir sıçanda tik indüksiyonu için akut ve kronik modellerin protokollerini ayrıntılı olarak detaylandırdık. Bu protokoller, tüm bileşenlerin hazırlanmasını, ameliyatı ve özel araştırma ihtiyaçlarını karşılamak için özelleştirmeye uyarlanabilecek deneysel süreci açıklar. Bu modellerin altında kalan birincil ilke, tic bozuklukların patofizyolojisinde kilit rol oynadığı bilinen striatumun motor bölgelerine biküküllin doğrudan lokal uygulamasıdır^10,

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
Ankraj vidaları	Mikro Bağlantı Elemanları	SMPPS0002	#0 x 1/8 - Pan Başlı Sac Metal Vidalar
Bicuculline methiodide	Sigma Aldrich	14343
Siyanoakrilat (CA) hızlandırıcı	Zap	PT29
Siyanoakrilat (CA) yapıştırıcı	BSI	IC-2000	Bu yapıştırıcının diğerlerinden daha güçlü olduğu bulundu
çimentosu	Coltene	H00322	Hijyenik Perma Onarım Malzemesi Reline Reçine Kendinden Kürlenen
Tutkal jel	Loctite		Ultra Jel Kontrol
Hemostat	WPI	501242	Yaklaşık 14 cm boyutundaki herhangi bir kanama durdurucu yeterli olacaktır
Hipo-tüp, ekstra ince duvarlı 25G	Bileşen tedarik şirketi	HTX-25X
Hipo-tüp, normal duvar 22G	Bileşen tedarik şirketi	HTX-22R
Hipo-tüp, normal duvar 30G	Bileşen tedarik şirketi	HTX-30R
İnfüzyon pompası makinesi	Yeni Çağ Pompa Sistemleri	NE-1000
Mini-ozmotik pompa	ALZET	2001	1.0 ve mikro; Saatte l, 7 gün
PE uyumlu yapıştırıcı	CEYS		Özel zor plastikler (PE için uygun)
PE-10 Kateter Boru	ALZET	PE-10	ID = 0.28mm, OD = 0.61mm
Hassas cam mikroşırınga, 10 & mikro; l	Hamilton	80065	1701 RNR 10 ve mikro; l syr (22s/51/3)
Doku yapıştırıcısı	3M	1469Sb	Vetbond
Boru adaptörü	CMA	3409500
Tygon mikro delikli boru, 0.02 inç ID * 0.06 OD	Bileşen tedarik şirketi	TND80-020
Tel 0.005 inç	Bileşen tedarik şirketi	GWX-0050
Tel 0.013 inç	Bileşen tedarik şirketi	GWX-0130