Method Article

Bir Murine Kuyruk Lenfödem Modeli

DOI:

10.3791/61848

⸱

February 10th, 2021

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Surgery, Indiana Center for Regenerative Medicine and Engineering, Indiana University School of Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Lenfödem, lenfatik disfonksiyondan kaynaklanan ekstremite şişmesidir. Lenfödemin kronik bir murine kuyruk modelini ve kuyruğa genetik kargo teslimatı için doku nanotransfeksiyon teknolojisinin (TNT) yeni kullanımını anlatıyoruz.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Lenfödem, lenfatik disfonksiyondan kaynaklanan ekstremite şişmesidir. Etkilenen uzuv sıvı, yağ ve fibrozis birikimi nedeniyle büyür. Bu hastalığın tedavisi yoktur. Lenfödem çalışması için kuyruğun tabanına yakın bir odak tam kalınlıkta cilt eksizyonu kullanan ve kuyruk şişmesine neden olan bir fare kuyruk modeli kullanılmıştır. Bununla birlikte, bu model vasküler oluşur ve sonuç olarak kuyruk nekrozu ve erken kuyruk şişmesi çözünürlüğü ile klinik çevrilebilirliğini sınırlayabilir. Kronik murin kuyruk lenfödem modeli, 15 hafta boyunca sürekli lenfödemi ve kuyruğa güvenilir bir perfüzyonu indükler. Geleneksel murine kuyruk lenfödem modelinin geliştirmeleri arasında 1) cerrahi bir mikroskop kullanılarak hassas tam kalınlıkta eksizyon ve lenfatik kupür, 2) yüksek çözünürlüklü lazer benek kullanılarak ameliyat sonrası arteriyel ve venöz perfüzyonun onaylanması ve 3) kızılötesi lazer limphangiografisi yakın indocyanine yeşili kullanılarak fonksiyonel değerlendirme. Ayrıca genetik kargonun fare kuyruğu vaskülatına yeni viral olmayan, transkütan, odaksal teslimatı için doku nanotransfeksiyon teknolojisini (TNT) kullanıyoruz.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Lenfödem, lenfatik disfonksiyondan kaynaklanan ekstremite şişmesidir. Etkilenen uzuv sıvı, yağ ve fibrozis birikimi nedeniyle büyür1. Lenfödem dünya çapında 250 milyon kişiyi etkiler2,3,4. Meme kanseri, melanom, jinekolojik/ürolojik tümörler veya sarkomlar gibi katı maligniteler için tedavi gören hastaların %20-40'ında lenfödemgeliştiğitahmin edilmektedir 2,4,5. Lenfödem morbidite tekrarlayan enfeksiyonlar, ağrı ve deformite içerir6. Bu....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Protokol, kurumun hayvan araştırma etik komitesinin yönergelerine uyar. Tüm hayvan deneyleri Indiana Üniversitesi Tıp Fakültesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Hayvanlar, yiyecek ve su reklam libitum ile 12 saatlik açık-karanlık bir döngü altında barındırıldı.

1. Fare Kuyruğu Lenfatiklerinin Cerrahi Bozulması

  1. Eşit cinsiyet dağılımında sekiz haftalık C57BL/6 fare kullanın.
  2. İşlem sırasında %100 oksijende %3-4 izofluran ve ardından %1-3 oranında bakım sedasyonu olan bir indüksiyon odasına genel anestezi altında bir fare yerleştirin.
  3. Ağrı kontrolü için 0,5 mg/kg sürekli salınım (SR)....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sürekli lenfödem için fare kuyruk modeli tekniği Şekil 1'de gösterilmiştir. Şekil, fare kuyruk modelinin ilgili anatomisini sergiler. Şekil 2 lenfödem indüksiyonu sonrası fare kuyruğunda ilerleyici şişlik ve sürekli dirençli lenfödem göstermektedir. Kesilen koni denklemi tarafından hesaplanan fare kuyruk hacmi, 4. haftada zirveler ve 6. haftaya platolar ve ardından 15. haftaya kadar sürdürülen kademeli iyileşme. Kuyruk hacmi, mod.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Lenfödem primer (konjenital) veya sekonder (iyatrojenik lenfatik) yaralanma olarak kategorize edilir38,39. sekonder lenfödem olguların %99'unu oluşturur39. sekonder lenfödem en sık lenfadenektomi veya radyasyon ile enfeksiyon (filariasis) veya onkolojik sonrası tedaviden kaynaklanır4,39. Lenfadektomi ve radyasyonla tedavi edilen hayvanların% 70'i lenfödem elde etmediği için çeviris.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların rakip çıkar çatışmaları yoktur.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Amerikan Plastik Cerrahlar Birliği Akademik Bursu ve Savunma Bakanlığı W81XWH2110135 tarafından AHH'ye sağlanan hibe finansmanı   ile desteklendi. Estetik Cerrahi Eğitim ve Araştırma Vakfı'nın MS. NIH U01DK119099, R01NS042617 ve R01DK125835'e CKS'ye hibesi.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Tegaderm Film1626W
Cerrahi MikroskopLeica, Wetzlar, AlmanyaMSV266
Yapışık Pansuman (Tegaderm)3M, St. Paul, Minn.1626W
Lazer benek (Pericam PSI Sistemi)Perimed AB, Stockholm, İsveç)PSIZ
Yakın kızılötesi lazer (LUNA)Stryker (Eski adıyla Novadaq Technologies, Toronto, Kanada)LU3000
C57BL / 6 fareJackson Laboratories000664
Micro-Adson Forseps - 1x2 TeethFine Science Tools (USA) Inc.11019-12
V-HookGüzel Bilim Araçları (ABD) Inc.18052-12
Neşter SS NO15Fischer Scientific29556
Tek Kullanımlık İğne 30GX1Fischer Scientific305128
Ameliyat MakasıFischer Scientific12-460-796
Cerrahi veya Kuyumcu Forsepsleri, Sklar 4-1 / 2Fischer Scientific50-118-4255
Yaylı Makas - Düz/Keskin-Keskin/ 8mm KesmeKenarı İnce Bilim Araçları (ABD) Inc.15024-10
CardiogreenSigmaI2633-25MG
IsosulfanBlue (Lenfazorin)  50 mg / 5mlMylan67457-220-05

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kataru, R. P., et al. Fibrosis and secondary lymphedema: chicken or egg. Translation Research. 209, 68-76 (2019).
  2. Brayton, K. M., et al. Lymphedema prevalence and treatment benefits in cancer: impact of a therapeutic inte....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Murine Tail LymphedemaLymphatic ClippingLaser Speckle ImagingIndocyanine Green LymphangiographyTissue NanotransfectionFull Thickness ExcisionTail Volume MeasurementHigh Resolution Laser SpeckleNear Infrared LymphangiographyGenetic Cargo Delivery

Related Articles