Bu makalenin amacı, farelerde serebral arterlerde kan akışının in vivo görüntülenmesini sağlayan sonografi tabanlı bir yöntem sunmaktır. Subaraknoid kanamanın (SAH) murine modellerinde vazospazm ile ilişkili kan akışı hızlarındaki değişiklikleri belirlemek için uygulamasını gösteriyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Bir tür hemorajik inme olan subaraknoid kanamadan sonraki haftalarda ortaya çıkan serebral vazospazm, gecikmiş serebral iskemiye katkıda bulunur. SAH'ın murine modellerinin kullanılarak yapılan deneysel çalışmalarda karşılaşılan bir sorun, farelerde serebral vazospazm in vivo izleme yöntemlerinin eksik olmasıdır. Burada fareler üzerinde transkraniyal Dubleks sonografi muayeneleri yapmak için yüksek frekanslı ultrason uygulamasını gösteriyoruz. Yöntem kullanılarak, iç karotis arterler (ICA) tanımlanabilir. intrakraniyal ICA'lardaki kan akışı hızları SAH indüksiyonu sonrasında önemli ölçüde hızlanırken, ekstrakraniyal ICA'lardaki kan akışı hızları düşük kalarak serebral vazospazmı gösterdi. Sonuç olarak, burada gösterilen yöntem, bir murine SAH modelinde serebral vazospazm fonksiyonel, noninvaziv in vivo izlenmesine izin verir.
Giriş
Spontan subaraknoid kanama (SAH), çoğunlukla intrakraniyal anevrizma1'inyırtılmasından kaynaklanan hemorajik inme şeklidir. Nörolojik sonuç esas olarak iki faktörden etkilenir: kanamanın ve buna bağlı geçici küresel serebral iskeminin etkilerinden kaynaklanan erken beyin hasarı (EBI) ve kanamayı takip eden haftalarda ortaya çıkan gecikmiş serebral iskemi (DCI),2,3. DCI'nın SAH hastalarının %30'una kadar etkilediğibildirilmiştir 2. DCI'nın patofizyolojisi anjiyografik serebral vazospazm, mikrovazospaz ve mikrotemozun neden olduğu rahatsız bir mikrositülasyon, kort....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan deneyleri sorumlu hayvan bakım komitesi (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) tarafından onaylandı ve Alman Hayvan Refahı Yasası (TierSchG) uyarınca gerçekleştirildi. Hayvanların bakımı ve kullanımı için geçerli tüm uluslararası, ulusal ve kurumsal yönergelere uyuldu. Bu çalışmada 11-12 haftalık kadın C57BL/6N farelerde vücut ağırlığı 19-21 g arasında olan intrakraniyal ve ekstrakraniyal arterlerin kan akış hızlarının ölçümlerini yaptık. Fareler, başka bir yerde ayrıntılı olarak açıklanan SAH indüksiyonu veya sham ameliyatına maruz kaldı10,12,13.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
3'unda endovasküler filament perforasyon modeli kullanılarak SAH indüklenen 6 farede, 3'ü sham ameliyatı elde edilirken, intrakraniyal iç karotis arterin (ICA) ve ekstrakraniyal ICA'nın kan akış hızları ameliyattan bir gün önce, ameliyattan 1, 3 ve 7 gün sonra belirlendi. Ölçümler, vücut ısısı 37 °C19'datutulurken izofluran ile anestezi altında yapılan başka bir çalışmanın ekokardiyografi incelemelerinin bir parçası olarak gerçekleştirildi.
Ameliyattan önce, ekstra ve i.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bilgimiz dahilinde, bu çalışma, yüksek frekanslı transkraniyal renk kodlu Dubleks ultrason ile SAH'ın bir murine modelinde serebral vazospazm izlenmesi için bir protokol sunan ilk çalışmadır. Bu yöntemin farelerde SAH indüksiyonu sonrası intrakraniyal kan akışı hızlarında bir artışı ölçebileceğini gösteriyoruz. İnsan tıbbında bu fenomen iyi bilinmektedir3,15. Çeşitli klinik çalışmalar, büyük intrakraniyal arterlerin yüksek kan akışı hızlarının ve intrakraniyal ka.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar rakip çıkarlar beyan etmemektedir.
Teşekkürler
Yazarlar, videodaki illüstrasyonların hazırlanması için Stefan Kindel'e teşekkür etmek istiyor. PW, MM ve SHK, Almanya Federal Eğitim ve Araştırma Bakanlığı (BMBF 01EO1503) tarafından desteklendi. Çalışma, Alman Araştırma Vakfı'nın (DFG INST 371/47-1 FUGG) Büyük Enstrümantasyon Hibesi ile desteklendi. MM, Else Kröner-Fresenius-Stiftung (2020_EKEA.144) tarafından hibe ile desteklendi.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Balea epilasyon kremi | Balea; Almanya | ASIN B0759XM39V | epilasyon kremi |
| C57BL/6N fareler | Janvier; Saint-Berthevin Cedex, Fransa | n.a.mice | |
| Corneregel | Bausch & Lomb; Rochester, NY, ABD | REF | göz merhemi, kayganlaştırıcı |
| pamuklu çubuklar | Hecht Assistent; Sondenheim vor der Rö hn, Almanya | REF 44302010 | pamuklu çubuklar |
| Ecco-XS tıraş bıçağı | Tondeo; Soligen, Almanya | DE 28693396 | ustura |
| Elektrot kremi | GE; Boston, MA, ABD | REF | 21708318 iletken macun |
| Isıtma plakası | Medax; Kiel, Almanya | 2005-205-01 | |
| Isoflurane | Abvie; Wiesbaden, Almanya | n.a.uçucu | anestezik |
| Leukofix | BSN medikal; Hamburg, Almanya | REF 02137-00 | bant |
| Mekanik kol + mikromanipülatör | VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA | P/N 11277 | |
| Mikrobac dokuları | Paul Hartmann AG; Hamburg, Almanya | REF 981387 | antimikrobiyal dokular |
| MZ400, 38 MHz doğrusal dizi dönüştürücü | VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA | REF 51068-30 | ultrason dönüştürücü |
| Sonosid | ASID Bonz GmbH; Herrenberg, Almanya | REF 782010 | ultrasonografi jeli |
| Isıtma plakalı ve EKG kayıt | VisualSonics ile ultrason platformu; FujiFilm, Toronto, CA | P/N 11179 | |
| UniVet-Porta | Groppler; Oberperasberg, Almanya | S/N BKGM0437 | izofluran buharlaştırıcı |
| Vevo3100 | VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA | REF 51073-45 | ultrasonografi cihazı |
| VevoLab yazılımı | VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA | n.a. | değerlendirme yazılımı |
Kaynaklar
- Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. Spontaneous subarachnoid haemorrhage. Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).
- Macdonald, R. L. Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage. Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).
- Francoeur, C. L., Mayer, S. A....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
