Deneysel inme araştırmalarında orta serebral arter tıkanma (MCAo) farklı modelleri kullanılmaktadır. Burada, serebrovasküler trombüsin spontan pıhtı lizisi veya tedavisi nedeniyle çıkarıldığı insan inmesini taklit etmeyi amaçlayan dış karotis arter (ECA) yoluyla geçici MCAo'nun deneysel bir inme modeli tanımlanmıştır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı
Bu makalede
Özet
Özet
İnme, gelişmiş ülkelerde üçüncü en sık mortalite nedeni ve edinilmiş erişkin sakatlığının önde gelen nedenidir. Bugüne kadar terapötik seçenekler inmeden sonraki ilk saatlerde inme hastalarının küçük bir oranı ile sınırlıdır. Özellikle terapötik zaman penceresini uzatmak için yeni terapötik stratejiler kapsamlı bir şekilde araştırılmaktadır. Bu güncel araştırmalar, inme sonrası inme sonrası inflamasyon, anjiogenez, nöronal plastisite ve rejenerasyon gibi önemli patofizyolojik yolların incelenmesini içerir. Son on yılda, bağımsız araştırma grupları arasında deneysel sonuçların ve bilimsel bulguların zayıf tekrarlanabilirliği konusunda artan bir endişe vardır. "Çoğaltma krizi" olarak adlandırılan krizin üstesinden gelmek için, tüm prosedürler için ayrıntılı standartlaştırılmış modellere acilen ihtiyaç vardır. "ImmunoStroke" araştırma konsorsiyumu (https://immunostroke.de/) içinde bir çaba olarak, geçici orta serebral arter tıkanıklığının (MCAo) standartlaştırılmış bir fare modeli önerildi. Bu model, filamentin çıkarılmasından sonra kan akışının tamamen restorasyonuna izin verir, insan felçlerinin büyük bir kısmında meydana gelen terapötik veya spontan pıhtı lizizini simüle eder. Bu "filament" inme modelinin cerrahi prosedürü ve fonksiyonel analizi için araçlar eşlik eden videoda gösterilmiştir.
Giriş
İnme, dünya çapında en sık görülen ölüm ve sakatlık nedenlerinden biridir. Esas olarak iskemik ve hemorajik olmak üzere iki farklı inme şekli olmasına rağmen, tüm inme vakalarının% 80-85'i iskemik1' dir. Şu anda, iskemik inme hastaları için sadece iki tedavi mevcuttur: rekombinant doku plazminojen aktivatörü (rtPA) veya mekanik trombektomi ile farmakolojik tedavi. Ancak terapötik zaman penceresinin dar ve çoklu dışlama kriterleri nedeniyle bu özel tedavi seçeneklerinden sadece belirli sayıda hasta yararlanabiliyor. Son yirmi yılda preklinik ve çevirisel inme araştırmaları nöroprotektif yaklaşımların incelenmesine odaklanmıştır. Bununla birlikte....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu videoda bildirilen deneyler, deney hayvanlarının kullanımına ilişkin ulusal yönergeleri izleyerek yapıldı ve protokoller Alman hükümet komiteleri (Regierung von Oberbayern, Münih, Almanya) tarafından onaylandı. On haftalık erkek C57Bl/6J fareler kullanıldı ve kontrollü sıcaklık (22 ± 2 °C) altında, 12 saat açık-karanlık döngü süresi ve peletlenmiş yiyecek ve su reklam libitum erişimi ile yerleştirildi.
1. Malzeme ve aletlerin hazırlanması
- 37 °C'de anestezi sırasında çalışma bölgesinin sıcaklığını ve fare gövdesi sıcaklığını korumak için ısı battaniyesini bağlayın.
- Otoklav makası ve forseps, % 70 etanol çözelt....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Burada açıklanan model, MCA'nın kökenini geçici olarak engellemek için ECA aracılığıyla silikon kaplı bir filamentin tanıtılmasından oluşan yaygın olarak kullanılan "filament" inme modelinin bir modifikasyonudur (Şekil 1). Filament çıkarıldıktan sonra, sadece ECA'daki kan akışı kalıcı olarak durdurulur ve CCA ve ICA'nın tamamen yeniden dengelenmesine izin verir. Bu, insan hastalarında başarılı farmakolojik tromboliz veya mekanik trombektomi sonrası gözlenen duruma benzer şekilde beynin yeter.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Mevcut protokol, standartlaştırılmış geçici bir MCAo modeli oluşturmak için bir Alman çok merkezli araştırma konsorsiyumunun ("ImmunoStroke") konsensüs anlaşmasına dayanan deneysel bir inme modelini tanımlamaktadır. MCA'nın kökenine ECA üzerinden silikon kaplı bir filament getirilerek kurulan geçici MCAo modeli, sınırlandırılmış bir tıkanıklık döneminden sonra arteriyel reperfüzyon elde etmek için en yaygın kullanılan inme modellerinden biridir. Bu nedenle, bu yordam çeviriyle ilgili bir kontur modeli olarak kabul edileb.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak rakip çıkarları yoktur.
Teşekkürler
ImmunoStroke Konsorsiyumu'nun (FOR 2879, For immune cells to stroke recovery) tüm işbirliği ortaklarımıza öneriler ve tartışmalar için teşekkür ederiz. Bu çalışma Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, Alman Araştırma Vakfı), Münih Sistem Nörolojisi Kümesi (EXC 2145 SyNergy - ID 390857198) çerçevesinde ve LI-2534/6-1, LI-2534/7-1 ve LL-112/1-1 hibeleri kapsamında Almanya'nın Mükemmellik Stratejisi kapsamındadır.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 45 derece rampa | H & S Kunststofftechnik | yüksekliği: 18 cm | |
| 5/0 tehdit | Pearsalls | 10C103000 | |
| 5 mL Şırınga | Braun | ||
| Asetik Asit | Sigma Life Science | 695092 | |
| İzofluran için anestezi sistemi | Dräger | ||
| Bepanthen pomat | Bayer | ||
| C57Bl/6J fareler | Charles Nehir | 000664 | |
| Kelepçesi | FST | 12500-12 | |
| Klips | FST | 18055-04 | |
| Klips tutucu | FST | 18057-14 | |
| Kotonlar | NOBA Verbondmitel Danz | 974116 | |
| Kresil menekşe | Sigma Yaşam Bilimleri | C5042-10G | |
| Kriyostat | Termo Bilimsel CryoStarNX70 | ||
| Etanol %70 | CLN Chemikalien Laborbedorf | 521005 | |
| Etanol %96 | CLN Chemikalien Laborbedorf | 522078 | |
| Etanol %99 | CLN Chemikalien Laborbedorf | ETO-5000-99-1 | |
| Filamentler | Doccol | 602112PK5Re | |
| İnce 45 açılı forseps | FST | 11251-35 | |
| İnce forseps | FST | 11252-23 | |
| İnce Makas | FST | 14094-11 | |
| Tutkal | Orechseln | BSI-112 | |
| Sertleştirici Tutkal | Drechseln & Mehr | BSI-151 | |
| Isıtma battaniyesi | FHC DC Sıcaklık Kontrol Cihazı | ||
| Isofluran | Abbot | B506 | |
| Isopentan | Fluka | 59070 | |
| Ketamin | Inresa Arzneimittel GmbH | ||
| Lazer Doppler | Perimed | PF 5010 LDPM, Periflux Sistemi 5000 | |
| Lazer Doppler probu | Perimed | 91-00123 | |
| Fosfat Tamponlu Tuzlu Su pH: 7.4 | Apotheke Innestadt Uni Munchen | P32799 | |
| Kurtarma odası | Mediheat | ||
| Roti-Histokit montaj ortamı | Roth | 6638.1 | |
| Tuzlu su çözeltisi | Braun | 131321 | |
| Neşter | Tüyü | 02.001.30.011 | |
| Silikon kaplı filamentler | Doccol | 602112PK5Re | |
| Stereomikroskop | Leica | M80 | |
| Superfrost Plus Slaytlar | Thermo Scientific | J1800AMNZ | |
| Vannas Yaylı Makas | FST | 15000-00 | |
| Xylacine | Albrecht |
Kaynaklar
- Donnan, G. A., Fisher, M., Macleod, M., Davis, S. M. Stroke. Lancet. 371 (9624), 1612-1623 (2008).
- O'Collins, V. E., et al. 1,026 experimental treatments in acute stroke. Annals of Neurology. 59 (3), 467-477 (2006).
- Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
