Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Vajinal Lavaj Kullanarak Kemirgen Östrus Döngüsünün İzlenmesi: Normal Bir Döngü Olarak Böyle Bir Şey Yok

9K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/62884

⸱

30 Ağustos 2021

 ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Bu çalışma, dişi sıçanları içeren deneysel tasarımlarda göz önünde bulundurulması gereken önemli faktörleri detaylandırmaktadır. Daha geniş anlamda, bu veriler damgalamayı azaltmaya ve daha kapsayıcı teşhis ve müdahale araçlarının geliştirilmesine yardımcı olmaya hizmet eder.

Özet

Mevcut metodoloji, dişi Sprague Dawley (SD) ergen sıçanlarının östrus döngüsünü izlemek için tekrarlanabilir, standartlaştırılmış ve uygun maliyetli bir yaklaşım ortaya koymaktadır. Bu çalışma, hormonal siklusların karmaşıklığını ve güvenilir ve geçerli bir izleme tekniği oluşturmak için gereken geniş anlayış spektrumunu göstermektedir. Temel deneysel tasarım ve prosedürel unsurların derinlemesine incelenmesi yoluyla, döngünün bu tanımı ve temel ilkeleri, gelecekteki çoğaltma için yanlış anlamaları daha iyi anlamak ve yapıbozuma uğratmak için bir çerçeve sağlar.

Vajinal lavaj kullanan numune toplama sürecinin bir taslağı ile birlikte, prosedür, dört aşamalı proöstrus, östrus, metestrus ve diestrus modeline veri kategorizasyon mekanizmasını açıklar. Bu aşamalar, vajinal sıvı durumunun, mevcut hücre tiplerinin, hücre düzenlemesinin ve toplama sırasındaki hücre miktarının 4 kategorize edici belirleyicisini kullanan yeni bir önerilen yaklaşımla karakterize edilir. Her aşamanın varyasyonları, olumlu ve olumsuz örnekler, döngüsellik ve asiklik arasındaki ayrım ve toplanan kategorizasyon bileşenlerinin grafik tasvirleri, verilerin etkili yorumlayıcı ve örgütsel uygulamalarının yanında sunulmaktadır. Genel olarak, bu araçlar ölçülebilir veri aralıklarının ilk kez yayınlanmasına izin vererek çoğaltma üzerine kategorizasyon faktörlerinin standartlaştırılmasına yol açar.

Giriş

Yeni katkılar
Kemirgen östrus döngüsü, sağlığın temel bir göstergesi olarak tanımlanmıştır. Bununla birlikte, araştırmacıların bilinçsiz önyargıları ve kadın bedeni ile ilgili yanlış yorumlar, bilim camiasını engellemektedir. "Estrous" kelimesinin etimolojisi, aşağılık ve olumsuzluk duygusunu ima eder. Euripides bu terimi "çılgınlık" ya da deliliği, Homeros paniği ve Platon da irrasyonel bir dürtüyü tanımlamak için kullanmıştır. Bu çalışma, bu ilkel perspektiflerin mevcut bilimsel topluluğu nasıl etkilediğini vurgulamakta ve bu endişeleri, daha kapsamlı bir yaklaşım için kapsamı genişletilmiş, daha önce çalışılan yöntemlerin güncellenmiş bir kombin....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu protokolde özetlenen tüm kullanım ve prosedür yöntemleri, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) hayvan bakımı ve kullanımı kılavuzlarıyla uyumludur ve Pepperdine Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) ve UCLA Şansölyesi Hayvan Araştırma Komitesi (ARC) tarafından onaylanmıştır.

1. Hayvan bakımı ve kullanımı

  1. Güç analizine göre sayılarla dişi sıçanlar ve Whitten etkisini veya daha tutarlı döngüyü teşvik etmek için erkek sıçanlar elde edin46. Bilinen veri tabanlarında çalışmanın amacına göre suşu belirleme47.
    NOT: Mevcut veriler, işbirlikçi bir çalışmanın parça....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Mevcut veriler, erkek SD sıçanlarının varlığında kadın ergen SD Uluslararası Genetik Standardizasyon Programı'nın (IGS) verilerini yansıtmaktadır. Bu hayvanlar, işbirlikçi bir çalışmanın parçası olarak hem Pepperdine Üniversitesi hem de UCLA laboratuvarlarında bulundu. Şekil 5, 4 döngü aşamasının çoklu varyasyonlarını sunmaktadır. Şekil 5A1, çeşitli hücre tiplerinin mevcut olduğu bir diestrus örneği olarak tanımlandı. Bu örnek, daha fazla sayıda.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Önemli adımlar ve dikkat edilmesi gereken önemli noktalar
Sağlanan protokoldeki bazı kritik adımlar, özellikle vajinal hücrelerin toplanmasında vurgu gerektirir. Vajinal sıvı ekstraksiyonu sırasında, şırınga yerleştirmenin uygun açısını ve derinliğini sağlamak, tatmin edici sonuçlar vermenin ve sonuçta hayvana tahriş, yaralanma veya servikal stimülasyonu önlemenin anahtarıdır. Serviksin uyarılması, 12-14 günlük lökosit içeren vajinalsmear 11 ile gösterilen bir psödogebelik indü.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, Kaliforniya Üniversitesi Los Angeles Beyin Hasarı Araştırma Merkezi (BIRC) arasında NIH tarafından finanse edilen bir işbirliği ile gerçekleştirildi.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
AmScope 40X-1000X LED Öğrenci Mikroskobu + 5MP USB KameraAmScopeParça Numarası: M150C-E5 EAN: 0608729747796 Model Numarası: M150C-E5https://www.amazon.com/AmScope-40X-1000X-Student-Microscope-Camera/dp/B00O9GNOTA/ref=sr_1_15?crid=2W9CHTG8YSOTV&
anahtar kelimeler=USB+KAMERA+İÇİN+mikroskop& Amp;
qid=1572477663& Amp; S=Endüstriyel
& Amp; sprefix=USB+kamera+for+micr%2Cindustrial%2C177& Amp; sr=1-15
BD PrecisionGlide İğne Paketi, 20G x 1, Kısa KonikFischer Scientific14-815-526https://www.fishersci.com/shop/products/bd-precisionglide-single-use-needles-short-bevel-regular-wall-4/14815526#?keyword=BD%20PrecisionGlide%20Needle%20Pack,%2020G%20x%201
Yatağı O Cob 1/8NEWCO93009https://andersonslabbedding.com/cob-products/bed-ocobs-8b/
Corning ve ticaret; Düz Mikroskop Slaytları Düz su beyazı camFischer Scientific12-553-7Ahttps://www.fishersci.com/shop/products/corning-plain-microscope-slides-microscope-slides-75-x-25mm/125537a
Corning & trade; Dikdörtgen Kapaklı GözlüklerFischer Scientific12-553-464
https://www.fishersci.com/shop/products/corning-square-rectangular-cover-glasses-rectangle-no-1-thickness-0-13-0-17mm-size-24-x-50mm/12553464#?keyword=true Kimberly-Clark Professional & trade; Kimtech Bilim ve Ticaret; Kimmendil ve ticaret; Hassas Görev Silecekleri, 1 KatlıFischer Scientific06-666https://www.fishersci.com/shop/products/kimberly-clark-kimtech-science-kimwipes-delicate-task-wipers-7/p-211240?crossRef=kimwipes
Labdiet Kemirgen Laboratuvarı Yemeği 50lb, 15001 NEWCO Özel ve LabDiet5012 https://www.labdiet.com/products/standarddiets/rodents/index.html
Lineer LED Ampul, UL Tip A, T8, Orta Bi-Pin (G13), 4.000 K Renk Sıcaklığı, Lümen 2550 lmGrainger36UX10https://www.grainger.com/product/36UX10?gclid=CjwKCAjw_
LL2BRAkEiwAv2Y3SW1WdNdkf7
zdIxoT9R6n2DGnrToJHjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRoCi4
cQAvD_BwE& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696
!p!! g!! led18et8%2F4%2F840& ef_id=
CjwKCAjw_LL2BRAkEiwAv2Y3SW
1WdNdkf7zdIxoT9R6n2DGnrToJ
Hjv-pwCTca4ahQyExrrtWvbgwRo
Ci4cQAvD_BwE:G:s& s_kwcid=AL!2966!3!335676016696!p!! g!! led18et8%2F4%2F840& cm_mmc=
PPC:+Google+PPC
Sodyum Klorür Enjeksiyon Torbaları, %0.9Canlı Aksiyon GüvenliğiABB079830939https://www.liveactionsafety.com/injection-iv-solution-9-sodium-chloride-1000ml-bags/
Şırınga Steril 1ml  Luer Kayma Uçlu - BH Sarf Malzemeleri ile 100 ŞırıngaBH MalzemeleriASIN: B07BQDRDC2 UPC: 638632928821https://www.amazon.com/1ml-Syringe-Sterile-Luer-Slip/dp/B07BQDRDC2/ref=sr_1_1_sspa?crid=13S8EGEUK90G7&
Anahtar Kelimeler=1ml+Steril+Şırınga& Amp; qid=
1572478649& Amp; S=Endüstriyel
& Amp; sprefix=1+ml+steri%2Cindustrial%2C187& Amp; sr=1-1-spons& Amp; psc = 1 & Amp; spLa=
ZW5jcnlwdGVkUXVhbGlmaWVy
PUEyRlo4NFdZWkJLWkxGJm
VuY3J5cHRlZElkPUEwMDEzODQ
yMjNWNzdWM0hTNzVBRCZlbmNy
eXB0ZWRBZElkPUEwNDI3NzAzM< br/> 0E5SzVKMkxaQVc2JndpZGdldE5h
bWU9c3BfYXRmJmFjdGlvbj1jbGlja
1JlZGlyZWN0JmRvTm90TG9nQ2
xpY2s9dHJ1ZQ==
Tel kapaklar ve zeminler Fare Hamile Tel Bar KapağıFare Kafesi ile kullanılır (10" X 19" x 8" Y )Genel boyutAllentownLV40326013https://www.labx.com/item/wire-lids-and-floors-mouse-maternity-wire-bar-lidused/LV40326013#description
Ultra Hafif Mendil ve Plastik 17' x 24' Tek Kullanımlık Alt BezMedline EAN: 0480196288558
  Küresel Ticaret Kimlik Numarası: 40080196288558
https://www.amazon.com/Medline-Industries-MSC281224C-Lightweight-Disposable/dp/B00A2G67YU/ref=sr_1_4?keywords=medline+industries+surgical+pads&qid=1572475853&
sr=8-4

Kaynaklar

  1. Schneider, M. Adolescence as a vulnerable period to alter rodent behavior. Cell and Tissue Research. 354 (1), 99-106 (2013).
  2. Camacho-Arroyo, I., Montor, J. M. Beyond reproductive effects of sex steroids. MiniReviews in Medicinal Chemistry. 12 (11), 10....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Sprague Dawley SıçanlarıDöngü Evresi KategorizasyonuHücre Tipi TanımlamaVajinal Sıvı AnaliziHormonal Döngü DeğerlendirmesiÜreme Döngüsü EvrelemesiErgen Dişi SıçanlarStandartlaştırılmış Döngü Protokolü