Yöntem makalesi

Farelerde Cisterna Magna ile Kaudal Beyin Sapı ve Üst Servikal Omuriliğin Mikroenjekte Edilmesine Stereotaksik Cerrahi Yaklaşım

11.8K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/63344

⸱

21 Ocak 2022

 ,  ,  , 
1Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School

Bu makalede

Özet

Farelerde beyin bölgelerini hedeflemek için stereotaksik cerrahi genellikle kafatası kemiklerinden erişimi içerir ve kafatası yer işaretleri tarafından yönlendirilir. Burada, beyin sapı yer işaretlerinin doğrudan görselleştirilmesine dayanan sarnıç magna aracılığıyla kaudal beyin sapı ve üst servikal omuriliği hedeflemek için alternatif bir stereotaksik yaklaşımı özetlemekteyiz.

Özet

Farelerde beyin bölgelerini hedeflemek için stereotaksik cerrahi genellikle kafatası yer işaretleri tarafından yönlendirilir. Erişim daha sonra kafatasından delinmiş çapak delikleri aracılığıyla elde edilir. Bu standart yaklaşım, belirli anatomik zorluklar nedeniyle kaudal beyin sapı ve üst servikal kordondaki hedefler için zorlayıcı olabilir, çünkü bu bölgeler kafatası yer işaretlerinden uzaktır ve belirsizliğe yol açar. Burada, kaudal beyin sapı ve üst servikal kordondaki ayrı ilgi bölgelerini hedeflemek için kullanılan cisterna magna aracılığıyla alternatif bir stereotaksik yaklaşımı özetlemekteyiz. Sarnıç magna, oksipital kemikten atlasa (yani ikinci vertebral kemiğe) kadar uzanır, beyin omurilik sıvısı ile doldurulur ve dura mater ile kaplanır. Bu yaklaşım, anatomik engeller nedeniyle ulaşılması zor olan seçilmiş merkezi sinir sistemi (CNS) yapılarına yeniden üretilebilir bir erişim yolu sağlar. Ayrıca, beyin sapı işaretlerinin hedef bölgelere yakın bir yerde doğrudan görselleştirilmesine izin vererek, kaudal beyin sapı ve üst servikal kordondaki sınırlı ilgi alanlarına küçük enjeksiyon hacimleri verirken doğruluğu arttırır. Son olarak, bu yaklaşım, motor ve sensorimotor çalışmalar için önemli olabilecek beyincikten kaçınmak için bir fırsat sağlar.

Giriş

Farelerde beyin bölgelerini hedeflemek için standart stereotaksik cerrahi1 genellikle kafatasının bir dizi kulak çubuğu ve bir ağız çubuğu kullanılarak sabitlenmesini içerir. Koordinatlar daha sonra referans atlasları 2,3 ve kafatası yer işaretlerine, yani bregma (frontal ve parietal kemiklerin dikişlerinin bir araya geldiği nokta) veya lambda (parietal ve oksipital kemiklerin dikişlerinin bir araya geldiği nokta; Şekil 1A,B). Tahmini hedefin üzerindeki kafatasına bir çapak deliğinden sonra, mikroenjeksiyonların verilmesi veya kanüller veya optik fiberlerle enstrümantasyon için hedef bölgeye ulaşılabilir. Bu dikişlerin anatomisindeki farklılıklar ve bregma veya lambda 4,5'in lokalizasyonundaki hatalar nedeniyle, sıfır noktalarının beyne göre konumu hayvandan hayvana değişir. Bu değişkenlikten kaynaklanan hedeflemedeki küçük hatalar, büyük veya yakın hedefler için bir sorun olmasa da, etkileri, anteroposterior veya dorsoventral düzlemlerdeki sıfır noktalarından uzak olan ve / veya yaş, gerginlik ve / veya cinsiyet nedeniyle değişen büyüklükteki hayvanları incelerken daha küçük ilgi alanları için daha büyüktür. Medulla oblongata ve üst servikal kordon için benzersiz olan birkaç ek zorluk vardır. İlk olarak, anteroposterior koordinatlardaki küçük değişiklikler, beyinciğin konumu ve şekli nedeniyle duraya göre dorsoventral koordinatlardaki önemli değişikliklerle ilişkilidir (Şekil 1Bi)2,6,7. İkincisi, üst servikal kordon kafatası2 içinde yer almaz. Üçüncüsü, oksipital kemiğin eğimli pozisyonu ve boyun kaslarının üst tabakası2, beyin sapı ve omurilik arasındaki geçişin yakınında bulunan yapılar için standart stereotaksik yaklaşımı daha da zorlaştırmaktadır (Şekil 1Bi). Son olarak, kaudal beyin sapı ve servikal kordona ilgi duyan birçok hedef küçük2'dir ve hassas ve tekrarlanabilir enjeksiyonlar gerektirir 8,9.

Sarnıç magna aracılığıyla alternatif bir yaklaşım bu sorunları aşar. Sarnıç magna, oksipital kemikten atlasa kadar uzanan geniş bir alandır (Şekil 1A, yani ikinci omur kemiği)10. Beyin omurilik sıvısı ile doldurulur ve dura mater10 ile kaplanır. Oksipital kemik ve atlas arasındaki bu boşluk, kafayı anteroflekleştirdiğinde açılır. Longus capitis kasının üstteki eşleştirilmiş karınları arasında gezinerek ve kaudal beyin sapının dorsal yüzeyini açığa çıkararak erişilebilir. İlgilenilen bölgeler daha sonra sırt yüzeyinin yakınında bulunuyorlarsa, bu bölgelerin işaretlerine dayanarak hedeflenebilir; veya obeksi kullanarak, merkezi kanalın IV ventriküle açıldığı nokta, koordinatların daha derin yapılara ulaşması için sıfır noktası olarak. Bu yaklaşım, ventral solunum grubunu, medüller medial retiküler oluşumu, soliter sistemin çekirdeğini, alan postremasını veya hipoglossal çekirdeği hedeflemek için sıçan11, kedi 12, fare 8,9 ve insan dışı primat 13 dahil olmak üzere çeşitli türlerde başarıyla kullanılmıştır. Bununla birlikte, bu yaklaşım, anatomi bilgisi, özel bir araç seti ve standart stereotaksik yaklaşıma kıyasla daha gelişmiş cerrahi beceriler gerektirdiği için yaygın olarak kullanılmamaktadır.

Burada, sarnıç magna yoluyla beyin sapına ve üst servikal kordona ulaşmak, yer işaretlerini görselleştirmek, sıfır noktasını ayarlamak (Şekil 2) ve mikroenjeksiyonların stereotaksik olarak verilmesi için hedef koordinatları tahmin etmek ve optimize etmek için adım adım cerrahi bir yaklaşımı açıklıyoruz (Şekil 3). Daha sonra bu yaklaşımla ilgili avantaj ve dezavantajları tartışacağız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Yazar, protokolün Beth Israel Deaconess Tıp Merkezi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi'nin yönergelerini izlediğini beyan eder.

1. Cerrahi aletlerin ve stereotaksik çerçevenin hazırlanması

NOT: Ameliyat aseptik koşullar altında yapılır. Sterilite steril uç tekniği kullanılarak korunur.

  1. Stereotaksik kolu, stereotaksik çerçeveye enjekte edilebilir bir seçenek (adeno ilişkili virüs (AAV) veya geleneksel izleyici) ile doldurulmuş bir mikropipet veya şırınga ile takın ve fare adaptörünü hazırlayın (Şekil 2A).
  2. Otoklavlanmış cerrahi aletler hazırlayın (Malzeme tablosu) ve steril bir yüzeye yerleştirin.

2. Anestezi indüksiyonu ve fare hazırlığı

  1. O2'yi 0,5 L/dak'da açın ve izofluran buharlaştırıcıyı 4,0'a ayarlayarakO2 akışının indüksiyon kutusuna olduğundan emin olun.
    DİKKAT: İzofluran indüksiyon kutusunun bir davlumbaza yerleştirildiğinden ve izofluran'ın cerrahi bölgeden uzaklaştırıldığından emin olun.
  2. Fareyi (10 haftalık erkek C57BL/6J) indüksiyon odasına yerleştirin.
  3. Solunum yavaşladığında, indüksiyon odasını açın ve fareyi hafifçe kaldırın. Saçları baştan omuzlara çıkarmak için makas kullanın.

3. Farenin stereotaksik çerçevede konumlandırılması

  1. Fareyi stereotaksik çerçeveye hareket ettirin ve burnu esnek bir burun konisine yerleştirin. Bu aşamada,O2 akışının artık burun konisine yönlendirildiğinden emin olun.
  2. Fareyi yalnızca kulak çubuklarını kullanarak stereotaksik çerçeveye yerleştirin.
    NOT: Kulak çubuklarının düz ve başın düz olduğundan emin olun.
  3. Anteroflex, burnu manuel olarak yönlendirerek farenin başını 90° açıyla bükün. Bu konumu korumak için, fare adaptörünün kulak çubuğu sütunları arasına, sütunlara paralel olarak plastik bir bariyer yerleştirin. Kafatasının düz kısmı, geleneksel stereotaksik cerrahideki düz kafatası yaklaşımına benzer şekilde referans görevi görür.
    NOT: Kafayı aşırı esnetmeyin (yani frontal kafatası kemiğinin düzlemi ile masanın yüzeyinin düzlemi arasındaki 90°'lik bir açının ötesinde), çünkü bu, üst solunum yolundan hava akışını engeller. Hava akımı engellenirse, fareyi yeniden konumlandırın, gövdenin gövdenin altında desteklendiğinden ve plastik bir kartın ön kafatası kemiğinin düzlemi ile Şekil 2A, C'de belirtildiği gibi tablonun yüzeyinin düzlemi arasında 90 ° 'ye ayarlandığından emin olun.
  4. Isıtma yastığını farenin altına yerleştirin ve ardından boynun ve vücudun geri kalanının aynı seviyede (yani yaklaşık 180 ° veya masaya paralel olarak) konumlandırıldığından emin olun. Yaylı makası tutan alet kutusu, gövdeyi bu konuma kaldırmak için kullanılabilir.
    NOT: Bu adım, kaudal beyin sapı ve üst servikal kordon, kafatası tarafından yerinde tutulan CNS'nin daha fazla rostral kısmının aksine, pozisyona bağlı olarak hareket ettiğinden önemlidir.
  5. 4 mg / kg'lık tek bir doz Meloksikam yavaş salınımlı (SR) deri altından (SC) 2 μL / g vücut ağırlığı hacminde enjekte edin ve gözlere kayganlaştırıcı yerleştirin.
  6. Cerrahi kesi bölgesini önce %70 alkol hazırlama pediyle, sonra betadin hazırlama pediyle ve sonra tekrar alkol hazırlama pediyle temizleyin ve kurumaya bırakın.
  7. Vücudun altına bir örtü yerleştirin.
  8. Ellerinizi dezenfekte edin ve steril eldivenler giyin.
  9. Cerrahi bölgeye bir örtü yerleştirin.

4. Sarnıç magnasına erişmek için ameliyat

  1. Ayak parmaklarını sıkıştırarak veya kornea refleksini kontrol ederek farenin uygun şekilde uyuşturulduğundan emin olun.
  2. İzofluranı bakım seviyelerine indirin (2.0).
  3. Oksipital kemiğin kenarından omuzlara doğru 10 numaralı cerrahi bıçakla tek bir yumuşak hareketle 1-1.2 cm'lik bir kesi yapın.
  4. Trapezius kasının orta hat raphesinde bir kesi yapın. Bu, eşleştirilmiş longus kapitis kaslarını açığa çıkarır.
    NOT: Farelerde, trapezius kası çok ince, neredeyse şeffaf bir kastır. Orta hatta kaldığınızdan emin olun ve gereksiz kanamaya neden olacağından altta yatan kasları kesmeyin.
  5. Her iki retraktör kancasını da eşleştirilmiş longus kapitis kasları arasına yerleştirin, biri sola, diğeri sağa yönlendirilmiştir. Hemostatların ağırlığı, hemostatların pozisyonunun yeniden ayarlanmasıyla değiştirilebilen retraktör kancalarına gerginlik sağlar.
  6. Cerrahi alanı daha iyi görselleştirmek için cerrahi mikroskopu yerine yerleştirin.
  7. Eşleştirilmiş longus kapitis kasının sol ve sağ karnını, orta hattın kolayca görülebildiği oksiputtan başlayarak ayırmak için künt laminektomi forsepslerini kullanın. Künt forsepsleri orta çizgideki oksiput kemiği boyunca sarnıç dura mater ile buluştuğu yere kadar yönlendirin ve ardından dura mater boyunca atlasa doğru devam edin.
    NOT: Eşleştirilmiş longus kapitis kaslarını kesmeye gerek yoktur, çünkü hiçbir şey onları orta hatta bir arada tutmaz; bunu yapmak gereksiz kanamaya neden olur.
  8. Retraktörleri yeniden konumlandırın ve hemostatları yeniden konumlandırarak gerginliği ayarlayın, sarnıç magna görünümünü açın.
  9. Beyin sapı ve beyinciğin iyi bir görüntüleme penceresini elde etmek için orta hatta kasları daha da ayırmak için künt laminektomi forsepslerini kullanın.
  10. Beyincik ve beyin sapı duranın altında görünene kadar 4.7-4.9 arasındaki adımları gerektiği gibi tekrarlayın.
  11. Künt laminektomi forseps kullanarak, forsepsleri orta hattan lateral yönde hareket ettirerek, beyin sapının net bir görünümü olana kadar ve hedef için gerektiği gibi daha fazla yanal alan oluşturmak için küçük bağ dokusu iplikçiklerinin durasını temizleyin.

5. Sarnıç zarının açılması

  1. Oksipital kemikten atlasa kadar uzanan durayı yakalamak için açılı Dumont forsepslerini (#4/45) kullanın. Dura'yı oksipital kemiğin yakınında tutun ve durada küçük bir açıklık (~ 0,5 ila 1,5 mm) yapmak için yay makasını kullanın.
    NOT: Bu rostral konumda, beyin sapı ile üstteki dura arasındaki boşluk en geniştir ve duranın güvenli bir şekilde manipüle edilmesi için yeterli alan sağlar.
  2. Durayı kaldırmak ve durayı daha da açmak için yaylı makası kullanın. Pencerenin boyutu hedefe bağlıdır.
    NOT: Birden fazla uzunlamasına enjeksiyon veya bilateral enjeksiyon yaparken daha büyük bir pencereye ihtiyaç duyulacaktır; tek taraflı veya orta hat enjeksiyonları yapılırken küçük bir pencere yeterli olacaktır.
  3. Dura açıldıktan sonra, fazla beyin omurilik sıvısını steril bir ipucu ucu ile boşaltın.

6. Yer işaretlerinin ve sıfır noktasının tanımlanması

  1. Beyin sapının sırt yüzeyini, açık dura boyunca ayrıntılı işaretlerle görüntüleyin. Merkezi kanalın IV ventriküle açıldığı nokta olan obeks, standart ön-arka ve mediolateral sıfır noktasıdır.

7. Hedef koordinatları

NOT: Çeşitli hedefler için, metodolojiler arasındaki geçişi kolaylaştırmak için sıfır noktası bregma'ya göre anterior posterior (AP) ve mediolateral (ML) koordinatları ve sıfır noktası obex'e göre AP ve ML koordinatları ile cisterna magna koordinatları içeren standart koordinatların bir listesini ekledik (Tablo 1). Dorsoventral (DV) koordinatlar, AP ve ML giriş noktasındaki beyin veya beyincik yüzeyine (standart yaklaşım) veya beyin sapı veya üst servikal kordonun yüzeyine (sarnıç magna yaklaşımı) göredir. Ameliyat öncesi planlama yapılmalıdır.

  1. Hedefi belirlemek için üç koordinat kümesini kullanın: AP, ML ve DV. Baş pozisyonu nedeniyle, beyin sapı yapılarının göreceli oryantasyonu konuma göre değişir.
    1. Hedef mesafe >0,4 mm için kaudalden obekse (Şekil 1B, yeşil) aşağıdakileri gerçekleştirin.
      1. AP: Obex ve hedef arasındaki AP mesafesini tahmin etmek için herhangi bir standart stereotaksik referans atlası (örneğin, Paxinos ve Franklin atlas2) veya enine düzlemde kesilmiş doku serilerini kullanın.
      2. ML: Obex ve hedef arasındaki ML mesafesini tahmin etmek için enine düzlemde kesilmiş herhangi bir standart stereotaksik referans atlası veya doku serisini kullanın.
      3. DV: AP ve ML hedef noktasındaki beyin veya beyincik yüzeyine göre koordinatları tahmin edin. İstenilen AP ve ML koordinatlarındaki beyin sapı yüzeyi ile hedef arasındaki mesafeyi tahmin etmek için enine düzlemde kesilmiş herhangi bir standart stereotaksik referans atlası veya doku serisini kullanın.
    2. Hedef mesafe için <0,4 mm kaudalden obekse (Şekil 1B, turuncu) aşağıdakileri gerçekleştirin.
      1. AP: Beyin sapının anterofleksiyonunu hesaba katmak için koordinatları ayarlayın. Ventral ve rostral koordinatlar için, AP beyin sapı giriş noktası, standart düzlemdeki hedef AP koordinatına göre daha kaudal olacaktır.
      2. ML: Hedef koordinatları standart bir stereotaksik referans atlasından veya enine düzlemde kesilmiş doku serilerinden türetin. Koordinatlar, hedef AP düzeyinde görselleştirilmiş orta hatta göre olacaktır.
      3. DV: AP ve ML hedef noktasındaki beyin sapının yüzeyine göre koordinatları tahmin edin. DV'yi beyin sapının anterofleksiyonunu hesaba katacak şekilde ayarlayın. Ventral ve rostral koordinatlar için, DV koordinatları standart düzlemde beyin sapının dorsal yüzeyinden olan mesafeden daha büyük olacaktır.

8. Hedefin enjeksiyonu

  1. Stereotaksik kolu kullanarak pipeti veya şırıngayı hedefe indirin ve standart stereotaksik yaklaşımlarda olduğu gibi çözelti enjekte edin. 3-50 nL arasındaki hacimleri kullanırken iğne izinden kaçınmak için enjeksiyondan sonra 1-5 dakika yerinde bırakın. Ardından, stereotaksik kolu kullanarak pipeti veya şırıngayı kaldırın.
  2. 8.1. adımı yineleyin. birden fazla hedef için.

9. Cerrahi alanın kapatılması

  1. Kancaları cerrahi alandan dikkatlice çıkarın. Eşleştirilmiş longus kapitis kasları, sarnıç magnasını tamamen kaplayan nötr bir pozisyona geri dönecektir. Trapezius kasını ve orta hatta dura mater'i kapatmayın, çünkü dikişleri tutmak için çok kırılgandırlar.
  2. Cildi üç naylon veya polipropilen sütürle kapatın (5-0 veya 6-0).

10. Ameliyat sonrası bakım

  1. İzofluranı kapatın ve fareyi stereotaksik çerçeveden çıkarın. Fareyi bir ısıtma yastığı üzerinde temiz bir kafese yerleştirin ve uyanana ve hareket edene kadar gözlemleyin.
  2. Ameliyat sonrası 1-3. günlerde sağlık durumunu, ağırlığı ve dikişleri izleyin. Dikişleri daha önce alınmamışsa 10. günde çıkarın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Sarnıç magna yaklaşımı, standart stereotaksik yaklaşımlarla ulaşılması zor olan veya tutarsız hedeflemeye eğilimli olan kaudal beyin sapı ve üst servikal kord yapılarını hedeflemeyi mümkün kılar. Sarnıç magnasına ulaşma ameliyatı, cildin insizyonlarını, ince bir trapezius kası tabakasını ve dura materin açılmasını gerektirir ve bu nedenle fareler tarafından iyi tolere edilir. Standart stereotaksik yaklaşımlarda olduğu gibi birden fazla çapak deliğinin delinmesini gerektirmediğinden, birden fazla (uzunlamasına da...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Standart stereotaksik cerrahi, CNS1'deki hedef bölgelerin koordinatlarını hesaplamak için genellikle kafatası işaretlerine dayanır. Hedef bölgelere daha sonra kafatası1'den delinen çapak delikleri aracılığıyla erişilir. Bu yöntem, kaudal beyin sapı için ideal değildir, çünkü hedef bölgeler anteroposterior ve dorsoventral düzlemlerdeki kafatası işaretlerinden uzakta bulunur2 ve kafatası ve üstteki kasların anatomisi6'ya

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma R01 NS079623, P01 HL149630 ve P01 HL095491 tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Alkol pediMed-Vet InternationalSKU: cerrahialan enfeksiyonunun önlenmesi için MDS090735Z cilt hazırlığı
Açılı forseps, Dumont #5/45FST11251-35sadece dura
Betadine pediniMed-Vet InternationalSKU:PVP-PADcerrahi alan enfeksiyonunun önlenmesi için cilt hazırlığı
Kolera toksin alt birimi-b, Alexa Fluor 488/594 eşlenikThermo Fisher Scientific488: C34775, 594: C22842Floresan izleyici
ClippersWahlModel MC3, 28915-10cerrahi alanda kürk tıraş etmek için
Köşe kelepçeli elektrot tutucuKopf1770cam pipeti tutmak için
Akış ölçerGilmont aletlerimodel # 65 MMdüzlemde
fareye izofluran ve oksijen akışını düzenlemek içinFloresan mikro küreler, polistirenThermo Fisher ScientificF13080Floresan izleyici
Isıtma yastığıÇalma53800Mtermoregülasyon
Portu bağlantı kitli indüksiyon odasıMidmark Inc93805107 92800131 ilk anestezi sağlayan
İnsülin ŞırıngasıExelint International26028salin ve analjezik uygulamak için
IsofluraneMed-Vet InternationalSKU:RXISO-250uçucu anestezik
İzofluran Matris VIP 3000 buharlaştırıcıMidmark Inc91305430inhalan anestezik uygulama için aparat
Laminektomi forseps, Dumont #2FST11223-20sadece dura
Medical havasını temizlemek için, basınçlıLindeUN 1002stimülatör ile kullanılır & Hassas çözelti enjeksiyonu için hava sağlamak için PicoPump
Meloxicam SRZoo Pharm LLCLot # MSR2-211201analjezik
Microhematocrit borosilikat cam önceden kalibre edilmiş kılcal tüpGlobe Scientific Inc51628malzemenin belirlenen koordinatlara transfeksiyonu için
Fare adaptörüÇalma0051625  Fare cerrahisi için sıçan stereotaksik çerçevenin uyarlanması
İğne tutucu, Öğrenci Halsted- Sivrisinek HemostatlarıDikiş atmak içinFST91308-12
Oksijen regülatörüYaşam Destek ÜrünleriS/N 909328, lot 092109oksijen tankından oksijen seviyelerini düzenler
Oksijen tankı, sıkıştırılmışLindeUSP UN 1072izofluran ile birlikte sağlanır anastezi
Plastik kartdeğil uygulanabiliruygulanamazherhangi bir sert plastik kart, stereotaktik çerçeveye uyacak şekilde kesilmiş (örn. kimlik kartı)
Pnömatik PicoPump (veya benzeri)Dünya Hassas Aletler (WPI)SYS-PV820Hassas çözelti enjeksiyonu için
Salin, sterilMountainside Tıbbi EkipmanH04888-10ameliyat sırasında kaybedilen vücut sıvılarını yerine koymak için
Neşter sapı, #3FST10003-12 neşter tutun
Makas, WagnerFST14070-12polipropilen sütür kesmek için
Yaylı makas, Vannas 2.5mm beraberindeki kutu ileFST15002-08makas sadece dura'yı açmak için, vücudu yükseltmek için kutu
Koordinatlara
Stereotaktik 'U' çerçeve düzeneği ve hücre içi taban plakasıKopf1730-B, 1711ameliyat çerçevesi
Steril pamuk uçlu aplikatörlerPuritan25-806 10WCcerrahi alandan kan emici
Steril fenestre olmayan örtülerSteril cerrahi alan içinHenry Schein9004686
Steril oftalmik merhemPuralubeP1490oküler yağlayıcı
Stimülatör & Hassasçözelti enjeksiyonu için kontrollü ön hava sağlamak içinÇimi Tıbbi AletlerS44
Cerrahi Bıçak #10Med-Vet InternationalCilt insizyonu için10SS
Cerrahi forseps, Cildi tutmak için ekstra ince GraefeFST11153-10
Cerrahi eldivenlerMed-Vet Internationalaseptik cerrahi
için MSG2280ZCerrahi alanın5X-40X büyütmesi içinLeicaModel M320/ F12
kapatmak içinSütür 5-0 polipropilenOasisMV-8661
Tegaderm3M3M ID 70200749250steril bariyer sağlar
Üniversal Kelepçe ve stand direğiKopf1725stereotaktik U çerçeveye ve hücre içi taban plakasına bağlı
Yara kancası hartman kanama durdurucularFST18200-09, 13003-10kasları ayırmak ve cerrahi pencere sağlamak için
almak için cerrahi oda , göre konumu ayarlamak için elektrot tutucuya bağlı stereotaktik mikromanipülatör Kopf 1760-61Boru SKU: cerrahi mikroskop Cildi

Kaynaklar

  1. JoVE. Rodent Stereotaxic Surgery. JoVE Science Education Database. , Neuroscience (2021).
  2. Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , Academic Press. (2001).
  3. Lein, E. S., et al. Genome-wide atlas of gene expression in the adult mouse brain. Nature. 445 (7124), 168-176 (2007).
  4. Rangarajan, J. R., et al. Image-based in vivo assessment of targeting accuracy of stereotactic brain surgery in experimental rodent models. Scientific Reports. 6 (1), 38058(2016).
  5. Blasiak, T., Czubak, W., Ignaciak, A., Lewandowski, M. H. A new approach to detection of the bregma point on the rat skull. Journal of Neuroscience Methods. 185 (2), 199-203 (2010).
  6. Popesko, P., Rajtova, V., Horak, J. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals, Volume 2: Rat, Mouse and Golden Hamster. 2, Wolfe Publishing Ltd. (1992).
  7. Allen Mouse Brain Atlas. Allen Institute for Brain Science. , Available from: https://mouse.brain-map.org/experiment/thumbnails/100042147?image_type=atlas (2004).
  8. Vanderhorst, V. G. J. M. Nucleus retroambiguus-spinal pathway in the mouse: Localization, gender differences, and effects of estrogen treatment. The Journal of Comparative Neurology. 488 (2), 180-200 (2005).
  9. Yokota, S., Kaur, S., VanderHorst, V. G., Saper, C. B., Chamberlin, N. L. Respiratory-related outputs of glutamatergic, hypercapnia-responsive parabrachial neurons in mice. Journal of Comparative Neurology. 523 (6), 907-920 (2015).
  10. Anselmi, C., et al. Ultrasonographic anatomy of the atlanto-occipital region and ultrasound-guided cerebrospinal fluid collection in rabbits (Oryctolagus cuniculus). Veterinary Radiology & Ultrasound. 59 (2), 188-197 (2018).
  11. Herbert, H., Moga, M. M., Saper, C. B. Connections of the parabrachial nucleus with the nucleus of the solitary tract and the medullary reticular formation in the rat. The Journal of Comparative Neurology. 293 (4), 540-580 (1990).
  12. Vanderhorst, V. G., Holstege, G. Caudal medullary pathways to lumbosacral motoneuronal cell groups in the cat: evidence for direct projections possibly representing the final common pathway for lordosis. The Journal of Comparative Neurology. 359 (3), 457-475 (1995).
  13. Vanderhorst, V. G., Terasawa, E., Ralston, H. J., Holstege, G. Monosynaptic projections from the nucleus retroambiguus to motoneurons supplying the abdominal wall, axial, hindlimb, and pelvic floor muscles in the female rhesus monkey. The Journal of Comparative Neurology. 424 (2), 233-250 (2000).
  14. Wall, N. R., Wickersham, I. R., Cetin, A., De La Parra, M., Callaway, E. M. Monosynaptic circuit tracing in vivo through Cre-dependent targeting and complementation of modified rabies virus. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (50), 21848-21853 (2010).
  15. Krashes, M. J., et al. Rapid, reversible activation of AgRP neurons drives feeding behavior in mice. The Journal of Clinical Investigation. 121 (4), 1424-1428 (2011).
  16. Ganchrow, D., et al. Nucleus of the solitary tract in the C57BL/6J mouse: Subnuclear parcellation, chorda tympani nerve projections, and brainstem connections. The Journal of Comparative Neurology. 522 (7), 1565-1596 (2014).
  17. Ung, K., Arenkiel, B. R. Fiber-optic implantation for chronic optogenetic stimulation of brain tissue. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (68), e50004(2012).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Stereotaksik CerrahiCisterna Magna Yakla mst Servikal KordMikroenjeksiyon Tekni iBeyin Sap aretleriDura MaterFare N rocerrahisiHipoglossal NukleusVentromedial Medulla

İlgili makaleler