Bu makalede, geleneksel tekniklerle gözlenen önemli teknik sorunlardan kaçınmak için periton diyalizi kateterinin murin modeline implante edilmesine yönelik bir prosedürün modifikasyonları açıklanmaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bu makalede, geleneksel tekniklerle gözlenen önemli teknik sorunlardan kaçınmak için periton diyalizi kateterinin murin modeline implante edilmesine yönelik bir prosedürün modifikasyonları açıklanmaktadır.
Murin modelleri, periton diyalizinin (PD) periton iltihabı ve fibroz gibi çeşitli yönlerini araştırmak için kullanılır. Bu olaylar, insanlarda periton zarı yetmezliğine neden olmakta ve bu da son dönem böbrek hastalığı (ESKD) olan hastaların yönetiminde derin klinik etkileri nedeniyle yoğun bir araştırma alanı olmaya devam etmektedir. PD'nin klinik önemine ve ilgili komplikasyonlarına rağmen, mevcut deneysel murin modelleri, modellerin performansını tehlikeye atan temel teknik zorluklardan muzdariptir. Bunlar PD kateter göçünü ve bükülmesini içerir ve genellikle daha erken kateter çıkarılmasını garanti eder. Bu sınırlamalar aynı zamanda bir çalışmayı tamamlamak için daha fazla sayıda hayvana duyulan ihtiyacı da artırmaktadır. Bu dezavantajları ele alan bu çalışma, bir murin modelinde yaygın olarak gözlenen PD kateter komplikasyonlarını önlemek için teknik iyileştirmeler ve cerrahi nüanslar sunmaktadır. Ayrıca, bu modifiye model, lipopolisakkarit enjeksiyonları kullanılarak periton iltihabı ve fibrozu indükleyerek doğrulanır. Temel olarak, bu makale deneysel bir PD modeli oluşturmak için geliştirilmiş bir yöntemi açıklamaktadır.
Son dönem böbrek hastalığı yükü
Kronik böbrek hastalığı (KBH) dünya çapında bir sağlık sorunudur1. Mevcut tahminler, dünya çapında 850 milyondan fazla insanın böbrek hastalığına sahip olduğunu göstermektedir. Böbrek hastalığının prevalansı, diyabetli insan sayısını (422 milyon) neredeyse iki katına çıkarmaktadır ve dünya çapında kanser (42 milyon) veya HIV / AIDS (36,7 milyon) hastalarının prevalansının 20 katından fazladır2. Yaklaşık yedi Amerikalıdan birinde KBH vardır ve 1000 Amerikalıdan ikisinde böbrek nakli veya diyaliz desteği gerektiren ESKD vardır3. ESKD'nin dünya çapında artan yükü göz önüne alındığında, diyaliz teknolojisinin optimize edilmesi çok önemlidir3.
Periton diyalizi
PD, Amerika Birleşik Devletleri'nde ESKD tedavisinde önemli ölçüde az kullanılan bir yöntemdir. Amerika Birleşik Devletleri Renal Veri Sistemi'ne (USRDS) göre, yaygın PD hastalarının yüzdesi 2020 yılında sadece% 11 idi 4,5. PD, merkez içi hemodiyalize (HD) göre, daha iyi bir yaşam kalitesi, daha az klinik ziyaret ve Medicare harcamalarında azalma dahil olmak üzere çeşitli avantajlar sağlar 6,7. Ek olarak, PD ev tabanlı bir tedavidir ve sıklıkla hemodiyaliz kateterleriyle ilişkili olan bakteriyemi ve endokardit gibi ciddi enfeksiyon riskinin çok daha düşük olmasıyla ilişkilidir. Ayrıca, acil başlangıç protokolü ile PD hızlı bir şekilde başlatılabilir, bu da yerleşik vasküler kateterlerle diyaliz başlatma ihtiyacını azaltır8. PD, pediatrik ESKD popülasyonunda tercih edilen diyaliz yöntemi olarak kabul edilir9.
Periton diyalizi ile indüklenen periton yetmezliği
PD, periton içine PD sıvısının (diyalizat) sokulmasını gerektirir, bu da zamanla periton zarının iltihaplanmasına ve yeniden şekillenmesine neden olur. Periton iltihabı fibrozu tetikler ve zamanla membranın ultrafiltrasyon yeteneklerinin potansiyel kaybıyla sonuçlanır. Periton zarının korunması PD'de önemli bir zorluktur ve daha fazla araştırma, uygulayıcılar için en iyi klinik uygulamaların mevcut olmasını sağlamak için kritik öneme sahiptir. Periton enfeksiyonu ve inflamasyonun, solute, su taşıma kinetik ve membran yetmezliğinin patofizyolojik mekanizmalarının daha iyi anlaşılmasına yardımcı olmak için iyi kurulmuş murin modelleri vardır; Yine de, kateter ile ilgili teknik sorunlar genellikle bu modelleri10 ile sınırlar.
Periton zarı değişikliklerinin analizi
ESKD hastalarında, diyalizat geleneksel olarak periton boşluğuna derin ve yüzeysel bir manşet ile bir Tenkhoff kateteri yoluyla verilir. Hastalar potansiyel olarak kateter göçü, infüzyon ağrısı ve diyalizat 11,12,13'ün zayıf drenajı gibi kateterle ilişkili komplikasyonlar yaşayabilirler. Bu komplikasyonları en aza indirmek için sarmal veya düz insanlar için iki ana periton kateteri türü tanıtılmıştır12. PD kateter sağkalımını uzatmak için konvansiyonel iki kelepçeli kateterlere ekstra bir manşet de dahil olmak üzere çeşitli modifikasyonlar eklenmiştir11. Yerleştirme tekniği, kaynakların mevcudiyeti ve uzmanlık düzeyi de dahil olmak üzere sağkalım sonrası eklenecek kateter göçünü önleyerek çeşitli faktörlere göre değişir14.
Buna karşılık, periton diyalizinin murin modelleri, insan periton kateterlerine kıyasla teknikler ve amaç açısından temel farklılıklara sahiptir. Örneğin, murin modellerindeki periton kateterleri öncelikle membran değişikliklerini incelemek için kullanılır ve çift yönlü drenaj fonksiyonları için daha az amaçlanmıştır. Mevcut teknik, hayvanların taşınması nedeniyle potansiyel port yerinden çıkması ve kateter göçünden muzdariptir. Geleneksel murin modellerinde, erişim portları cilde sabitlenmemiştir. Bu yön, uyanık hayvanlarda yerinden çıkabilecek ve kateter göçüne neden olabilecek dengesiz bir erişim limanı yarattı. Periton membranı araştırmalarında murin modellerinin önemi göz önüne alındığında, güvenilir modeller üretmek için etkili cerrahi tekniklerin oluşturulması zorunludur. Bu nedenle, PD kateter yerleştirmenin geleneksel modelini optimize etmek için yola çıktık. Kateterin kendisinin periton zarında histopatolojik değişikliklere neden olduğunu ve bu nedenle hayvan çalışmalarında PD solüsyonlarının etkisine ilişkin herhangi bir sonucun PD kateteri bağlamında yabancı cisim olarak yorumlanması gerektiğini belirtmek önemlidir15,16,17.
Periton zarı histopatolojisi
PD yetmezliği esas olarak fibroz ve aşırı anjiyogenez ile ilişkilidir ve ozmolar konsantrasyon gradyanının kaybına neden olur. Ek olarak, periton zarı filtrasyon kapasitesi peritonitten etkilenebilir. Ek olarak, enfeksiyöz peritonit, periton diyalizinden hemodiyalize diyaliz diyalizine diyaliz modalitesinde değişiklik için iyi bilinen bir nedendir. 18.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışma için, sekiz dişi C57BL / 6J fare, 8-12 haftalık ve ortalama 20 g ağırlığında kullanılmıştır. Fareler standart koşullar altında barındırıldı ve chow ve su ad libitum ile beslendi. Bu çalışma Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC), Boston Üniversitesi Tıp Merkezi (AN-1549) onayı ile gerçekleştirilmiştir. Burada açıklanan prosedürler steril koşullar altında gerçekleştirilmiştir.
1. Fareyi bir İzofluran odasında anestezi altına alın ve analjeziği deri altından enjekte edin
2. Cilt hazırlığı
3. Kateter uzunluğunu ölçün ve karın içindeki yerleştirme noktasını ve hazırlanan cildin üzerindeki tüp sistemini işaretleyin
4. Peritoneal kateter rezervuar bölümünü özelleştirin
5. Damlatma portunu yerleştirin
6. Kateter ucu yerleştirme yeri insizyonunu yaptırın
7. Kateterin işleyişini onaylayın
8. Cilt kesilerini kapatın
9. Kateter ucunu karın boşluğunun içine sabitleyin
10. Hayvanları postoperatif ve günlük olarak izlemek, postoperatif analjezi ve sıvıları uygulamak ve günlük postoperatif kayıtları en az 7 gün boyunca ve tamamen iyileşene kadar saklayın.
11. Sıvı enjeksiyonları
12. Peritonu toplamadan önce fareleri anestezi altına alın ve periton sıvısını toplayın
13. Peritoneal biyopsi
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
İmplante edilen tüm kateterler çalışmanın sonuna kadar işlevseldi ve kateter yerinden çıkması veya bükülmesi implante edilen kateterlerin hiçbirini komplike hale getirmedi. Mevcut, modifiye edilmiş teknik, LPS kullanılarak peritonite bağlı bir modelle daha da doğrulandı. Kontrol fareleri günlük normal salin enjeksiyonlarından 200 μL alırken, deneysel farelere kateter implantasyonundan sonraki toplam 7 gün boyunca protokol adımı 11'de tartışıldığı gibi 200 μL LPS enjekte edildi.
Peritoneal memb...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
PD'nin üç murin modeli tanımlanmıştır. Bu, periton yüzeyinin kör bir şekilde delinmesini, açık-kalıcı bir sistemi ve kapalı bir sistemiiçerir 10. Peritoneal yüzeyin kör delinmesi, intraperitoneal enjeksiyonlara benzer şekilde doğrudan periton erişimini içerir, ancak diyalizatın drenajına izin vermez. Kör bir prosedür olan bu yöntem, abdominal viseral organlara zarar verebilir. Açık-kalıcı sistem modeli, diyaliz kateterini ve damlatma portunu vücudun dışında tutar. Bununla birlikte, farelerde bu te...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.
Bu çalışma NIH 1R01HL132325 ve R21 DK119740-01 (VCC) ve AHA Kardiyo-onkoloji SFRN CAT-HD Center hibe 857078 (VCC ve SL) tarafından desteklenmiştir.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| % 10 heparin | Kanada Inc., Boucherville, QC, Kanada) | Farmasötik ürün | |
| Buprenorfin 0.3 mg/mL | PAR İlaç | NDC 42023-179-05 | |
| C57BL/6J fareler | Jackson Lab | IMSR_JAX:000664 | |
| CD31 | Abcam | Ab9498 | |
| Kelepçe | Güzel Bilim Araçları | 13002-10 | |
| Forseps | Güzel Bilim Araçları | 11002-12 | |
| Dumont #5SF Forseps | Güzel Bilim Araçları | 11252-00 | |
| Dumont Damar Kanülasyon Forseps | Güzel Bilim Araçları | 11282-11 | |
| İnce Makas - Büyük Halkalar | Güzel Bilim Araçları | 14040-10 | |
| Fisherbrand Hayvan Kulak Yumruğu | Fisher Scientific | 13-812-201 | |
| Hill Hemostat | Güzel Bilim Araçları | 13111-12 | |
| Huber nokta | iğnesi Erişim Teknolojiler | PG25-500 | Enjeksiyonlar için iğne |
| İzofluran, USP | Covetrus | NDC 11695-6777-2 | |
| E.coli | SIGMA | L4391 | |
| Mikroskop | Nikon Eclipse Ters Mikroskop | TE2000 | |
| Dakika Fare Bağlantı Noktası 4 Fransız, tutma boncukları ve çapraz delikleri ile | Erişim Teknolojiler | MMP-4S-061108A | |
| Posi-Grip Huber nokta iğneleri 25 G x 1/2&akut; &akut; | Erişim Teknolojiler | PG25-500 | |
| Makas | Güzel Bilim Araçları | 14079-10 | |
| Vicryl Sütür | AD-Cerrahi | #L-G330R24 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
An erratum was issued for: A Retrograde Implantation Approach for Peritoneal Dialysis Catheter Placement in Mice. The Authors section was updated from:
Saran Lotfollahzadeh1
Mengwei Zhang1
Marc Arthur Napoleon1
Wenqing Yin1
Josephine Orrick1
Nagla Elzind1
Austin Morrissey1
Isaac E. Sellinger1
Lauren D. Stern1
Mostafa Belghasem2
Jean M. Francis1
Vipul C. Chitalia1,3,4
1Renal Section, Department of Medicine, Boston University School of Medicine
2Department of Biomedical Science, Kaiser Permanente Bernard J. Tyson School of Medicine
3Veterans Affairs Boston Healthcare System
4Institute of Medical Engineering and Sciences, Massachusetts Institute of Technology
to:
Saran Lotfollahzadeh1
Mengwei Zhang1
Marc Arthur Napoleon1
Wenqing Yin1
Josephine Orrick1
Nagla Elzind1
Austin Morrissey1
Isaac E. Sellinger1
Lauren D. Stern1
Mostafa Belghasem2
Jean M. Francis1
Vipul C. Chitalia1,3,4
1Renal Section, Department of Medicine, Boston University Aram V. Chobanian & Edward Avedisian School of Medicine
2Department of Biomedical Science, Kaiser Permanente Bernard J. Tyson School of Medicine
3Veterans Affairs Boston Healthcare System
4Institute of Medical Engineering and Sciences, Massachusetts Institute of Technology