Yöntem makalesi

Görüntü Elde Yoluyla Cilt Kanserlerinin Noninvaziv Tanısı için Reflektans Konfokal Mikroskopinin Optik Koherens Tomografi ile Birleştirilmesi

DOI:

10.3791/63789

⸱

18 Ağustos 2022

 ,  , 
1Dermatology Service, Department of Medicine, Memorial Sloan Kettering Cancer Center

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, reflektans konfokal mikroskopi (RCM) ve kombine RCM ve optik koherens tomografinin (OCT) yeni, invaziv olmayan görüntüleme cihazlarını kullanarak kaliteli görüntüler elde etmek için protokolleri açıklıyoruz. Ayrıca, klinisyenlere klinik uygulamaları hakkında bilgi veriyoruz, böylece hasta bakımını iyileştirmek için teknikleri düzenli klinik iş akışlarına entegre edebiliyorlar.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cilt kanseri dünya çapında en sık görülen kanserlerden biridir. Tanı görsel muayene ve dermoskopi ile ardından histopatolojik doğrulama için biyopsiye dayanır. Dermoskopinin duyarlılığı yüksek olmakla birlikte, düşük özgüllük biyopsilerin %70-80'inin histopatolojide benign lezyonlar (dermoskopide yanlış pozitifler) olarak teşhis edilmesine neden olmaktadır.

Reflektans konfokal mikroskopi (RCM) ve optik koherens tomografi (OCT) görüntüleme cilt kanserlerinin tanısını noninvaziv olarak yönlendirebilir. RCM, en-face katmanlarındaki hücresel morfolojiyi görselleştirir. Melanom ve pigmente keratinositik deri kanserlerinin tanısal özgüllüğünü dermoskopi ile iki katına çıkarmış ve benign lezyonların biyopsi sayısını yarıya indirmiştir. RCM, ABD'de fatura kodlarını satın aldı ve şimdi kliniklere entegre ediliyor.

Bununla birlikte, görüntülemenin sığ derinliği (~ 200 μm), pigmente olmayan cilt lezyonları için zayıf kontrast ve en-face katmanlarında görüntüleme gibi sınırlamalar, pigmente olmayan bazal hücreli karsinomun (BCC'ler) tespiti için nispeten daha düşük özgüllüğe neden olur - bazal hücre tabakası ile bitişik yüzeysel BCC'ler ve daha derin infiltratif BCC'ler. Buna karşılık, OCT hücresel çözünürlükten yoksundur, ancak dokuyu dikey düzlemlerde ~ 1 mm derinliğe kadar görüntüler, bu da BCC'lerin hem yüzeysel hem de daha derin alt tiplerinin tespit edilmesini sağlar. Bu nedenle, her iki teknik de esasen tamamlayıcıdır.

"Çok modlu", kombine RCM-OCT cihazı, cilt lezyonlarını aynı anda hem en-face hem de dikey modlarda görüntüler. BCC'lerin tanı ve tedavisinde yararlıdır (yüzeysel BCC'ler için cerrahi olmayan tedavi ve daha derin lezyonlar için cerrahi tedavi). Özgüllükte belirgin bir iyileşme, küçük, pigmente olmayan BCC'leri tek başına RCM üzerinden tespit etmek için elde edilir. RCM ve RCM-OCT cihazları, cilt kanserlerinin tanı ve yönetiminde büyük bir paradigma değişikliği getirmektedir; Bununla birlikte, kullanımları şu anda akademik üçüncü basamak bakım merkezleri ve bazı özel kliniklerle sınırlıdır. Bu makale, klinisyenleri bu cihazlar ve uygulamaları hakkında bilgilendirmekte ve rutin klinik iş akışına translasyonel engelleri ele almaktadır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Geleneksel olarak, cilt kanseri teşhisi, lezyonun görsel muayenesine ve ardından dermatoskop adı verilen büyüteç bir lens kullanılarak şüpheli lezyonlara daha yakından bakmaya dayanır. Bir dermatoskop, cilt kanserlerinin teşhisi için görsel muayeneye göre duyarlılığı ve özgüllüğü artıran yüzey altı bilgileri sağlar 1,2. Bununla birlikte, dermoskopi hücresel detaylardan yoksundur ve sıklıkla histopatolojik doğrulama için biyopsiye yol açar. Dermoskopi3'ün düşük ve değişken (%67-%97) özgüllüğü, patolojide benign lezyonlar gösteren yanlış pozitifler ve biyopsilerle sonuçlanır. Biyopsi sadece kanamave ağrıya neden olan invaziv bir prosedür değildir4 aynı zamanda yara izi nedeniyle yüz gibi kozmetik olarak hassas bölgelerde de oldukça istenmeyen bir durumdur.

Mevcut sınırlamaların üstesinden gelerek hasta bakımını iyileştirmek için, birçok noninvaziv, in vivo görüntüleme cihazı araştırılmaktadır 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 . RCM ve OCT cihazları başta cilt kanserleri olmak üzere cilt lezyonlarının tanısında kullanılan iki ana optik noninvaziv cihazdır. RCM, ABD'de Mevcut Prosedürel Terminoloji (CPT) faturalandırma kodlarını satın almıştır ve akademik üçüncü basamak bakım merkezlerinde ve bazı özel kliniklerde giderek daha fazla kullanılmaktadır 7,8,19. RCM, lezyonları histolojik (hücresel) çözünürlüğe yakın görüntüler. Bununla birlikte, görüntüler en-face düzlemindedir (bir seferde bir cilt tabakasının görselleştirilmesi) ve görüntüleme derinliği ~ 200 μm ile sınırlıdır, sadece yüzeysel (papiller) dermise ulaşmak için yeterlidir. RCM görüntüleme, ciltteki çeşitli yapılardan gelen yansıma kontrastına dayanır. Melanin en yüksek kontrastı verir, pigmentli lezyonları parlak ve teşhis edilmesi daha kolay hale getirir. Bu nedenle, dermoskopi ile kombine edilen RCM, melanom 20 de dahil olmak üzere pigmente lezyonların dermoskopisi üzerinde tanıyı (%90 duyarlılık ve% 82 özgüllük) önemli ölçüde iyileştirmiştir. Bununla birlikte, pembe lezyonlarda, özellikle BCC'lerde melanin kontrastının olmaması nedeniyle, RCM daha düşük özgüllüğe sahiptir (%37.5-%75.5)21. Yaygın olarak kullanılan bir başka noninvaziv cihaz olan konvansiyonel OCT cihazı, cilt içinde 1 mm derinliğe kadar olan lezyonları görüntüler ve dikey bir düzlemde (histopatolojiye benzer) görselleştirir9. Bununla birlikte, OCT hücresel çözünürlükten yoksundur. OKT öncelikle keratinositik lezyonların, özellikle BCC'lerin teşhisinde kullanılır, ancak yine de daha düşük özgüllüğe sahiptir9.

Böylece, bu cihazların mevcut sınırlamalarının üstesinden gelmek için, çok modlu bir RCM-OCT cihazı inşa edilmiştir22. Bu cihaz, RCM ve OCT'yi tek bir el tipi görüntüleme probu içinde birleştirerek, birlikte kayıtlı en-face RCM görüntülerinin ve lezyonun dikey OCT görüntülerinin aynı anda alınmasını sağlar. OCT, lezyonların mimari detaylarını sağlar ve cilt içinde daha derin (~ 1 mm derinliğe kadar) görüntü verebilir. Ayrıca, el tipi RCM cihazına (~0,75 mm x 0,75 mm) kıyasla ~2 mm22 daha geniş bir görüş alanına (FOV) sahiptir. RCM görüntüleri, OCT'de tanımlanan lezyonun hücresel ayrıntılarını sağlamak için kullanılır. Bu prototip henüz ticarileştirilmemiştir ve 23,24,25 kliniklerinde araştırma cihazı olarak kullanılmaktadır.

Cilt kanserlerinin tanı ve yönetimini iyileştirmedeki başarılarına rağmen (literatür tarafından desteklendiği gibi), bu cihazlar kliniklerde henüz yaygın olarak kullanılmamaktadır. Bu, esas olarak bu görüntüleri okuyabilen uzmanların azlığından kaynaklanmaktadır, ancak aynı zamanda başucunda (klinik bir zaman dilimi içinde) tanısal kalitede görüntüler elde edebilen eğitimli teknisyenlerin eksikliğinden kaynaklanmaktadır8. Bu yazıda amaç, bu cihazların kliniklerde farkındalığını ve nihayetinde benimsenmesini kolaylaştırmaktır. Bu amaca ulaşmak için, dermatologları, dermatopatologları ve Mohs cerrahlarını RCM ve RCM-OCT cihazlarıyla elde edilen normal cilt ve cilt kanserlerinin görüntüleri ile tanıştırıyoruz. Ayrıca cilt kanserlerinin teşhisi için her cihazın faydasını da detaylandıracağız. En önemlisi, bu makalenin odak noktası, klinik kullanım için kaliteli görüntüler sağlayacak olan bu cihazları kullanarak görüntü elde etmek için adım adım rehberlik sağlamaktır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Aşağıda açıklanan tüm protokoller, kurumsal insan araştırmaları etik komitesinin yönergelerini takip etmektedir.

1. RCM cihazı ve görüntüleme protokolü

NOT: Piyasada satılan iki in vivo RCM cihazı vardır: geniş problu RCM (WP-RCM) ve el tipi RCM (HH-RCM). WP-RCM, dijital dermatoskop ile entegre olarak gelir. Bu iki cihaz ayrı ayrı veya birleşik bir ünite olarak mevcuttur. Aşağıda, WP-RCM ve HH-RCM cihazlarının en yeni neslini (Nesil 4) klinik endikasyonlarıyla birlikte kullanan görüntü toplama protokolleri bulunmaktadır.

  1. Lezyon seçimi ve klinik endikasyonları
    1. Aşağıdaki lezyon türlerini arayın: dermoskopik olarak belirsiz pembe (BCC, skuamöz hücreli karsinom [SCC], aktinik keratoz [AK], diğer iyi huylu lezyonlar) veya pigmentli lezyon (nevüs ve melanom, pigmentli keratinositik lezyonlar); klinik veya dermoskopi muayenesinde yakın zamanda değişmiş bir nevüs; inflamatuar paternleri belirlemek için inflamatuar lezyonlar.
    2. Lezyonun derecesini belirlemek için lentigo maligna (LM) marjları için haritalama yapın ve ekstrameme Paget hastalığı (EMPD) ve LM gibi subklinik uzantılı hastalıklar için biyopsi bölgelerinin haritalandırılması ve seçilmesi.
    3. Topikal ilaçlar (imiquimod), radyasyon, fotodinamik tedavi ve lazer ablasyon gibi cerrahi olmayan tedavilerin noninvaziv monitörizasyonunu gerçekleştirin.
  2. Cihaz seçimi için, cildin nispeten düz yüzeylerinde (gövde ve ekstremiteler) bulunan lezyonlar için WP-RCM cihazını ve kavisli yüzeylerdeki (burun, kulak memeleri, göz kapakları ve genital bölgeler) lezyonlar için HH-RCM cihazını kullanın.
    NOT: Görüntüleme cihazının seçimi esas olarak lezyonun lokalizasyonuna bağlı olacaktır.
  3. Görüntüleme için, hastayı tamamen yaslanmış bir sandalyeye veya destek için yastıklı veya kolçaklı düz bir muayene masasına yerleştirin ve düz bir görüntüleme yüzeyi elde edin.
    NOT: Eski nesil (Nesil 3) WP-RCM cihazları lezyon başına ~ 30 dakika sürdü. Tek bir lezyonun görüntülenmesi, şu anda kliniklerde kullanılmakta olan yeni nesil (Nesil 4) WP-RCM cihazı ile ~ 15 dakika sürebilir. İyileştirilmiş edinme süresine rağmen, hastayı konforlu bir şekilde konumlandırmak, minimum hareket artefaktları sağlayacak ve üstün kaliteli görüntülerin elde edilmesine yardımcı olacaktır. Aşağıdaki adımlar hastanın doğru konumlandırılmasına yardımcı olabilir:
  4. Görüntülemeye hazırlanmak için, lezyonu ve çevresindeki cildi herhangi bir kir, losyon veya makyajı ortadan kaldırmak için alkollü bir mendille temizleyin. Doku mikroyapılarının görselleştirilmesini engelleyebilecek hava kabarcıklarını önlemek için doku penceresini takmadan önce tüylü cilt yüzeylerini tıraş edin.
    NOT: Ağır kozmetik ürünleri veya güneş kremlerini çıkarmak için, alkolle temizlemeden önce bölgeyi nazik bir sabun ve suyla temizleyin.
  5. WP-RCM cihazını kullanarak görüntü yakalama (Şekil 1, Şekil 2, Ek Şekil S1, Ek Şekil S2ve Ek Şekil S3)
    NOT: WP-RCM cihazları yığınları, mozaiği, canlı tek kareli videoları ve tek kareli görüntüleri yakalayabilir.
    1. Lezyona tek kullanımlık plastik bir pencere kapağı takmak için (Şekil 1), en iyi görüntüleri elde etmek için probu lezyona dik olarak konumlandırın. Ek örneği için Şekil 1A-F'ye bakın. Plastik pencerenin ortasına bir damla mineral yağ ekleyin ve dikkatlice pencere genişliğine yayın (Şekil 1A). Kağıt desteğini plastik pencerenin yapışkan tarafından çıkarın. Kırışıklığı önlemek için cildi hafifçe gerin ve pencereyi takın.
      NOT: Güvenli ve yüksek viskoziteye sahip gıda sınıfı mineral yağ kullanın. Lezyonun ortalandığından ve bütünüyle kaplandığından emin olun. 8 mm x 8 mm'den büyük lezyonlar için, dermoskopiye dayalı olarak ilgilenilen görüntü alanları veya lezyonun tamamını kapsayacak şekilde ayrı görüntüleme seansları uygulayın.
    2. Dermoskopi görüntülerinin elde edilmesi (Şekil 1C,D)
      NOT: Dermoskopi görüntüsü, lezyon içinde gezinmek için bir rehber görevi görmesi için elde edilir. Dermoskopi görüntüsü ile konfokal görüntü arasında mükemmel kayıt sağlamak için aşağıdaki adımlar kullanılmalıdır.
      1. WP-RCM probunu plastik pencere kapağının üzerine getirin ve prob için en iyi yerleştirme açısını yaklaşık olarak tahmin edin (Şekil 1C). Probun yan tarafında bulunan küçük, beyaz oku bulun (Şekil 1C) ve dermoskopi kamerasının yan tarafındaki okla hizalayın (Şekil 1C).
      2. Dermoskopi kamerasını plastik pencere kapağına yerleştirin (Şekil 1D). Bir görüntü elde etmek için fotoğraf makinesindeki tetiğe basın. Dermatoskopu çıkarın. Görüntüleme seansına başlamadan önce, dermatoskop görüntüsünün tüm lezyon yüzeyini kapladığından emin olun.
    3. RCM probunu plastik tek kullanımlık kapağa takmak için (Şekil 1E, F), tek kullanımlık plastik pencere kapağının içine bezelye büyüklüğünde bir miktar ultrason jeli yerleştirin (Şekil 1E). Keskin bir tıklama duyulana kadar probu kapağın içine yerleştirin (Şekil 1F).
      NOT: En iyi görüntüler için, probu plastik pencereye dik olarak (90° açıyla) yerleştirin. Daha düz bir yüzey elde etmek, hareket artefaktlarını azaltmak, hava kabarcıklarını dışarı atmak (Şekil 3 ve Şekil 4) ve cilde güvenli bir şekilde yapışmasını sağlamak için muayene koltuğunun yüksekliği yükseltilebilir.
    4. RCM görüntülerini alma (Şekil 2, Ek Şekil S1 ve Ek Şekil S2)
      1. RCM görüntü alımına rehberlik etmek için dermoskopi görüntüsünü (adım 5.2.) kullanın (Ek Şekil S1). Lezyonun merkezini seçin ve cildin en üstteki (en parlak) tabakasını tanımlayın - stratum korneumun anükleat tabakası (Ek Şekil S1).
      2. Bu düzeyde görüntüleme derinliğini sıfıra ayarlayın (Ek Şekil S1).
        NOT: Bu derinlik, lezyon içindeki sonraki katmanların gerçek z-derinliğini belirlemek için bir referans noktası görevi görür.
      3. Yığın simgesine basarak lezyonun merkezinde bir yığın elde edin (Şekil 2 ve Ek Şekil S1). Açılır menüden anatomik bir bölge seçin: yüz veya vücut. 4,5 μm adım boyutunu ve 250 μm derinliğini ayarlayın.
        NOT: Yığınlara stratum korneumdan başlayın ve dermiste görünür en derin tabakalarda bitirin. Ek Şekil S1 , bir yığının nasıl elde edileceğine dair bir örnek gösterirken, Şekil 2 bir yığın örneği verir.
      4. Bir mozaik edinin: İlk mozaiği dermal-epidermal kavşakta (DEJ) alın (Ek Şekil S2). Elde edilen yığındaki DEJ tabakasını tanımlayın ve ardından fareyi kullanarak lezyonun tamamını kaplayacak 8 mm x 8 mm'lik bir kare seçin. İşlemi tamamlamak için mozaik simgesine basın (Ek Şekil S2). Çeşitli derinliklerde en az 5 mozaik elde edin: stratum corneum, stratum spinosum, suprabazal tabaka, DEJ ve yüzeysel papiller dermis.
      5. Sonraki mozaiklerin edinilmesine rehberlik etmek için DEJ mozaiğini açın. DEJ mozaiği üzerindeki herhangi bir yapıya tıklayarak canlı görüntü görüntülemede o alanı açın. Dermiste mozaikler elde etmek için aşağı kaydırın ve ardından epidermiste mozaik almak için yukarı (DEJ'den) kaydırın.
      6. Edinilen mozaikleri, ilgilenilen bölgeyi belirlemek ve yığınları almak için başucunda bulunan uzman RCM okuyucusu tarafından değerlendirin. Yatak başında bir uzmanın yokluğunda, 5 yığın yakalayın: her kadranda bir tane ve dermoskopide homojen bir desen ile lezyonun merkezinde bir tane (adım 1.5.2.). Heterojen lezyonlar için, tüm dermoskopi özelliklerini kapsayacak ek yığınlar edinin.
        NOT: Bir "yığın" (Şekil 2), epidermisin en üst tabakasından yüzeysel dermise (~ 200 μm) kadar derinlikte elde edilen yüksek çözünürlüklü, tek kareli, küçük görüş alanı (FOV) görüntülerinin (0,5 mm x 0,5 mm) sıralı bir koleksiyonudur. Bir "mozaik" (Ek Şekil S2), 500 μm x 500 μm görüntülerin tek tek "X-Y" (yatay en yüz düzlemi) içinde bir araya getirilmesiyle elde edilen görüntülerin büyük bir FOV'udur.
    5. Görüntüleme oturumunu tamamlama
      1. Done Imaging'e (Görüntüleme Tamamlandı) tıklayın.
      2. Mikroskobu plastik pencereden ayırın. Plastik pencereyi hastanın cildini hafifçe gergin tutarak çıkarın ve atın. Ciltteki yağı alkollü çubukla silin.
      3. Mikroskop lensini çevreleyen koruyucu koniyi ayırın. Ultrason jelini çıkarmak için objektif lensin ucunu alkollü bir çubukla temizleyin. Objektif lensi bir kağıt havluyla kurulayın. Plastik koniyi mikroskop probuna tekrar takın.
        NOT: Görüntüler okunabilir ve eğitimli bir doktor tarafından başucunda bir rapor oluşturulabilir ve imzalanabilir. Uzman bir okuyucunun yokluğunda, görüntüleri bulut üzerinden aktararak veya canlı bir telekonfokal oturum26 aracılığıyla uzaktaki bir uzmana danışılabilir.
    6. Konfokal Tanısal Değerlendirme raporu oluşturma (Ek Şekil S3)
      1. Yeni Değerlendirme'ye tıklayın. Açılır menüdeki önceden seçilmiş seçeneklerden tanıyı girin.
      2. Başka bir görüntüleme oturumu gerekiyorsa, yetersiz ve yeniden yakalanması gereken görüntüleri seçin. Açıklayıcı bir tanılama gerekiyorsa, diğer'i seçin ve formun sonundaki serbest metin kutusunda açıklayın. Faturalandırma 7 için CPT kodunu girin (Ek Şekil S3A). Rapor kontrol listesinden görüntüleme sırasında görülen ilgili özellikleri seçin (Ek Şekil S3B). Kontrol listesinden ilgili yönetimi seçin.
        NOT: HH-RCM görüntüleme için fatura kodu geçerli değildir.
      3. Son'a tıklayın ve İmzalayın. Raporu PDF olarak oluşturun ve yazdırın. Raporu bir doktor tarafından imzalatın ve faturalandırma için hastanın çizelgesine ekleyin.
  6. HH-RCM cihazını kullanarak görüntü yakalama (Şekil 5)
    NOT: HH-RCM cihazları yığınları, canlı tek kareli videoları ve tek kareli görüntüleri yakalayabilir.
    1. Doktor tarafından tespit edilen lezyonu bir kağıt halka ile çevreleyin. Bölüm 3'te ayrıntılı olarak açıklanan adımları kullanın. hastayı konumlandırmak ve lezyon bölgesini temizlemek için.
      NOT: Lezyonun sınırını tanımlamak ve lezyon içinde görüntüleme yapıldığından emin olmak için lezyon boyutuna göre kağıt halkanın boyutunu (5-15 mm) seçin. Bir kağıt halka yoksa, lezyonu tanımlamak için kağıt bant kullanın.
    2. Mikroskop merceğini kaplayan plastik kapağı çıkarın. HH-RCM'nin objektif lensine bezelye büyüklüğünde bir miktar ultrason jeli uygulayın ve plastik kapakla örtün (Ek Şekil S3A). Plastik kapağın cilde dokunacak yanına cömert bir damla mineral yağ ekleyin.
      NOT: Gerekirse çok kuru ciltler için yağ miktarını artırın.
    3. Probu ciltteki lezyon bölgesine sert bir basınçla bastırın. Lezyon içindeki çeşitli derinliklerde yukarı ve aşağı hareket etmek için HH-RCM cihazındaki z-derinlik kontrollerini kullanın (Ek Şekil S3B). İlgilendiğiniz bölgelerde birden fazla tek kare görüntü ve yığın elde edin. Adım 1.5.4.3'te açıklandığı gibi yığınları alın.
    4. WP-RCM cihazının takılamadığı büyük lezyonlar için, HH-RCM probunu tüm lezyon yüzeyi üzerinde hareket ettirerek çeşitli katmanlarda sürekli videolar çekin. Bunu yapmak için video yakalama sembolüne tıklayın. Gerekirse, kan hücrelerinin damarlar içindeki hareketini kaydedin.
      NOT: Bu videolar daha sonra mozaiklere benzer büyük FOV görüntüleri sağlamak için yazılım kullanılarak dikilebilir.
    5. Görüntüleme oturumu tamamlandıktan sonra Done Imaging (Bitti Görüntüleme ) düğmesine basın. Yağı çıkarmak için lezyonu alkollü çubukla temizleyin. Ultrason jelini probun objektif merceğinden, alkollü bir mendille temizleyerek ve plastik kapağı tekrar takarak çıkarın.
      NOT: Bir teknisyen tarafından çalıştırılabilen WP-RCM cihazının aksine, HH-RCM, lezyon içinde gezinmek ve doğru bir tanıya ulaşmak için görüntüleri gerçek zamanlı olarak yorumlayabilen bir RCM okuyucu tarafından çalıştırılmalıdır.

2. Kombine RCM-OCT cihazı ve görüntüleme protokolü

NOT: RCM-OCT aygıtının yalnızca bir prototipi vardır. Bu cihaz el tipi bir proba sahiptir ve HH-RCM cihazına benzer şekilde tüm vücut yüzeylerinde kullanılabilir. RCM yığınlarını (RCM cihazına benzer) ve OCT rasterlerini (sıralı, kesitsel görüntülerin bir videosu22) edinir. Hem RCM hem de OCT görüntüleri gri tonlamalıdır. RCM görüntüleri ~200 μm x 200 μm FOV'a sahipken, OCT görüntüsü 2 mm (genişlikte) x 1 mm (derinlikte) FOV'a sahiptir. Aşağıda, RCM-OCT cihazını kullanan görüntü toplama protokolü, klinik endikasyonlarıyla birlikte verilmiştir. Şekil 6'da RCM-OCT cihazının bir görüntüsü, Şekil 7'de ise RCM-OCT cihazının yazılım sistemi gösterilmektedir.

  1. Lezyon seçimi
    1. BCC'yi ekarte etmek için dermoskopik olarak belirsiz pembe veya pigmentli lezyon arayın.
    2. Yönetim için BCC'nin derinliğini değerlendirin ve tedavi sonrası kalıntı BCC'yi değerlendirin.
  2. Hastanın görüntüleme için konumlandırılması: Tek bir lezyonun görüntülenmesi RCM-OCT cihazı ile 20 dakika kadar sürebilir. Cihaz aynı zamanda HH-RCM cihazına benzer bir el tipi probdur ve bu nedenle lezyon üzerinde serbestçe hareket ettirilebilir. Hasta konumlandırma ile ilgili ayrıntılar için, bölüm 1.4'e bakın. üstünde.
  3. Görüntüleme için bölgenin hazırlanması: Bu probu kullanırken, lezyonun sınırının aşırı kıl ve topikal safsızlıklardan arındırılmış olduğundan ve açıkça tanımlandığından emin olun. Adım 1.4.1'e bakın. daha fazla ayrıntı için yukarıda.
  4. RCM-OCT cihazını kullanarak görüntü yakalama (Şekil 6 ve Şekil 7)
    1. Probu HH-RCM için kullanılana benzer şekilde hazırlayın (adım 1.6.1-1.6.2.)
    2. Çizgi görüntüleme modunda ve raster modunda görüntüler alın.
      1. Görüntüleme ayarlarına tıklayın (Şekil 7A). RCM görüntüsü (hücresel çözünürlük) elde etmek için çizgi görüntüleme modunu seçin (Şekil 7B). Adım boyutunu 5 μm ve adım sayısını 40 olarak ayarlayın (Şekil 7A).
      2. Grab'a tıklayın. 1.5.4.3 adımını izleyerek yığınları alın. Tamamlandığında, Dondur düğmesine tıklayın.
      3. Görüntüleme ayarlarına tıklayın. Lezyon mimarisi için korelasyonlu bir OCT videosu elde etmek üzere raster modunu seçin (Şekil 7B). Teknisyen sekmesine geçin (Şekil 7C). Tamamlandığında, Tut düğmesine tıklayın (Şekil 7A) ve hemen kaydet düğmesine basın.
      4. Doktorun ilgi alanına göre birden fazla yığın ve video edinin.
      5. Lezyonu ve makineyi adım 1.6.5'te açıklandığı gibi temizleyin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Reflektans konfokal mikroskopi (RCM)
RCM'de görüntü yorumlama:
RCM görüntüleri, histopatoloji slaytlarının değerlendirilmesini taklit edecek şekilde yorumlanır. Mozaikler öncelikle genel mimari detayı elde etmek ve tarama büyütme (2x) ile ilgili histoloji bölümlerinin değerlendirilmesine benzer şekilde endişe alanlarını belirlemek için değerlendirilir. Bunu, slaytları yüksek büyütmede (20x) değerlendirmeye benzer şekilde, hücresel ayrıntıların değerlendirilmesi için mozaiğin yakınl...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu yazıda, in vivo RCM ve RCM-OCT cihazlarını kullanarak görüntü toplama protokollerini açıkladık. Şu anda, piyasada satılan iki RCM cihazı vardır: Geniş problu veya kola monte RCM (WP-RCM) cihazı ve el tipi RCM (HH-RCM) cihazı. Bu cihazların klinik ortamlarda ne zaman kullanılacağını anlamak çok önemlidir. Kanser tipi ve lokalizasyonu, cihazın seçimini belirleyen başlıca faktörlerdir.

WP-RCM cihazı, gövde ve ekstremiteler gibi düz ve hafifçe dalgalanan vücut yüzeylerindeki lezyonlar ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ucalene Harris'in rakip bir finansal çıkarı yok. Dr. Jain, Enspectra Health Inc.'de bir danışmandır. Dr. Milind Rajadhyaksha, VivaScope konfokal mikroskobu üreten ve satan şirket olan Caliber ID'nin (eski adıyla Lucid Inc.) eski bir çalışanı ve hisse senedine sahiptir. VivaScope, Harvard Tıp Fakültesi, Massachusetts Genel Hastanesi'ndeyken Dr. Rajadhyaksha tarafından geliştirilen orijinal bir laboratuvar prototipinin ticari versiyonudur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kwami Ketosugbo ve Emily Cowen'e görüntüleme için gönüllü oldukları için özel bir teşekkür ederiz. Bu araştırma, Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi'ne yapılan Ulusal Kanser Enstitüsü / Ulusal Sağlık Enstitüleri (P30-CA008748) tarafından sağlanan bir hibe ile finanse edilmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Crystal Plus 500FG mineral yağSTE Oil Company, Inc.in vivo görüntüleme sırasında çeşitli cihazlarımızla birlikte kullanılan gıda sınıfı, yüksek viskoziteli mineral yağdır.
RCM-OCTFizik Bilimleri A.Ş.-Bir " çok modlu" kombine RCM-OCT cihazı, hem yatay hem de dikey modda cilt lezyonlarını aynı anda görüntüler.
Vivascope 1500Kalibre İç Çap-Campture in vivo cihazlarına cilde takılan geniş problu bir RCM (WP-RCM) cihazı.
Vivascope 3000Kalibre İç Çap-in vivo görüntüleri yakalamak için cilt boyunca hareket ettirilen elde tutulan bir RCM (HH-RCM) cihazı.

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Argenziano, G., et al. Accuracy in melanoma detection: A 10-year multicenter survey. Journal of the American Academy of Dermatology. 67 (1), 54-59 (2012).
  2. Vestergaard, M. E., Macaskill, P., Holt, P. E., Menzies, S. W. Dermoscopy compared with naked eye examination for the diagnosis of primary melanoma: A meta-analysis of studies performed in a clinical setting. British Journal of Dermatology. 159 (3), 669-676 (2008).
  3. Reiter, O., et al. The diagnostic accuracy of dermoscopy for basal cell carcinoma: A systematic review and meta-analysis. Journal of the American Academy of Dermatology. 80 (5), 1380-1388 (2019).
  4. Abhishek, K., Khunger, N. Complications of skin biopsy. Journal of Cutaneous and Aesthetic Surgery. 8 (4), 239-241 (2015).
  5. Navarrete-Dechent, C., Fischer, C., Tkaczyk, E., Jain, M. Chapter 5: Principles of non-invasive diagnostic techniques in dermatology. Moschella and Hurley's Dermatology. Rao, B. K. 1, Jaypee Brothers Medical Publishers. New Delhi, India. (2019).
  6. Wassef, C., Rao, B. K. Uses of non-invasive imaging in the diagnosis of skin cancer: An overview of the currently available modalities. International Journal of Dermatology. 52 (12), 1481-1489 (2013).
  7. Rajadhyaksha, M., Marghoob, A., Rossi, A., Halpern, A. C., Nehal, K. S. Reflectance confocal microscopy of skin in vivo: From bench to bedside. Lasers in Surgery and Medicine. 49 (1), 7-19 (2017).
  8. Jain, M., Pulijal, S. V., Rajadhyaksha, M., Halpern, A. C., Gonzalez, S. Evaluation of bedside diagnostic accuracy, learning curve, and challenges for a novice reflectance confocal microscopy reader for skin cancer detection in vivo. JAMA Dermatology. 154 (8), 962-965 (2018).
  9. Sattler, E., Kästle, R., Welzel, J. Optical coherence tomography in dermatology. Journal of Biomedical Optics. 18 (6), 061224(2013).
  10. Wang, Y. -J., Huang, Y. -K., Wang, J. -Y., Wu, Y. -H. In vivo characterization of large cell acanthoma by cellular resolution optical coherent tomography. Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 26, 199-202 (2019).
  11. Balu, M., et al. Distinguishing between benign and malignant melanocytic nevi by in vivo multiphoton microscopy. Cancer Research. 74 (10), 2688-2697 (2014).
  12. Balu, M., et al. In vivo multiphoton microscopy of basal cell carcinoma. JAMA Dermatology. 151 (10), 1068-1074 (2015).
  13. Lentsch, G., et al. Non-invasive optical biopsy by multiphoton microscopy identifies the live morphology of common melanocytic nevi. Pigment Cell and Melanoma Research. 33 (6), 869-877 (2020).
  14. Dimitrow, E., et al. Sensitivity and specificity of multiphoton laser tomography for in vivo and ex vivo diagnosis of malignant melanoma. Journal of Investigative Dermatology. 129 (7), 1752-1758 (2009).
  15. Ruini, C., et al. Line-field optical coherence tomography: In vivo diagnosis of basal cell carcinoma subtypes compared with histopathology. Clinical and Experimental Dermatology. 46 (8), 1471-1481 (2021).
  16. Suppa, M., et al. Line-field confocal optical coherence tomography of basal cell carcinoma: A descriptive study. Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. 35 (5), 1099-1110 (2021).
  17. Wang, Y. J., Wang, J. Y., Wu, Y. H. Application of cellular resolution full-field optical coherence tomography in vivo for the diagnosis of skin tumours and inflammatory skin diseases: A pilot study. Dermatology. 238 (1), 121-131 (2022).
  18. Jain, M., et al. Rapid evaluation of fresh ex vivo kidney tissue with full-field optical coherence tomography. Journal of Pathology Informatics. 6, 53(2015).
  19. Mehta, P. P., et al. Patterns of use of reflectance confocal microscopy at a tertiary referral dermatology clinic. Journal of the American Academy of Dermatology. , (2021).
  20. Dinnes, J., et al. Reflectance confocal microscopy for diagnosing cutaneous melanoma in adults. Cochrane Database of Systematic Reviews. 12 (12), (2018).
  21. Dinnes, J., et al. Reflectance confocal microscopy for diagnosing keratinocyte skin cancers in adults. Cochrane Database of Systematic Reviews. 12 (12), (2018).
  22. Iftimia, N., et al. Handheld optical coherence tomography-reflectance confocal microscopy probe for detection of basal cell carcinoma and delineation of margins. Journal of Biomedical Optics. 22 (7), 76006(2017).
  23. Monnier, J., et al. Combined reflectance confocal microscopy and optical coherence tomography to improve the diagnosis of equivocal lesions for basal cell carcinoma. Journal of the American Academy of Dermatology. 86 (4), 934-936 (2021).
  24. Navarrete-Dechent, C., et al. Management of complex head-and-neck basal cell carcinomas using a combined reflectance confocal microscopy/optical coherence tomography: a descriptive study. Archives of Dermatological Research. 313 (3), 193-200 (2021).
  25. Sahu, A., et al. Evaluation of a combined reflectance confocal microscopy-optical coherence tomography device for detection and depth assessment of basal cell carcinoma. JAMA Dermatology. 154 (10), 1175-1183 (2018).
  26. Rubinstein, G., Garfinkel, J., Jain, M. Live, remote control of an in vivo reflectance confocal microscope for diagnosis of basal cell carcinoma at the bedside of a patient 2500 miles away: A novel tele-reflectance confocal microscope approach. Journal of the American Academy of Dermatology. 81 (2), 41-42 (2019).
  27. Scope, A., et al. In vivo reflectance confocal microscopy imaging of melanocytic skin lesions: Consensus terminology glossary and illustrative images. Journal of the American Academy of Dermatology. 57 (4), 644-658 (2007).
  28. Calzavara-Pinton, P., Longo, C., Venturini, M., Sala, R., Pellacani, G. Reflectance confocal microscopy for in vivo skin imaging. Photochemistry and Photobiology. 84 (6), 1421-1430 (2008).
  29. Rajadhyaksha, M., Grossman, M., Esterowitz, D., Webb, R. H., Anderson, R. R. In vivo confocal scanning laser microscopy of human skin: Melanin provides strong contrast. Journal of Investigative Dermatology. 104 (6), 946-952 (1995).
  30. Gonzalez, S., Gonzalez, E., White, W. M., Rajadhyaksha, M., Anderson, R. R. Allergic contact dermatitis: Correlation of in vivo confocal imaging to routine histology. Journal of the American Academy of Dermatology. 40 (5), 708-713 (1999).
  31. Sahu, A., et al. Combined PARP1-targeted nuclear contrast and reflectance contrast enhances confocal microscopic detection of basal cell carcinoma. Journal of Nuclear Medicine. 63 (6), 912-918 (2021).
  32. González, S., Sackstein, R., Anderson, R. R., Rajadhyaksha, M. Real-time evidence of in vivo leukocyte trafficking in human skin by reflectance confocal microscopy. Journal of Investigative Dermatology. 117 (2), 384-386 (2001).
  33. Navarrete-Dechent, C., et al. Reflectance confocal microscopy terminology glossary for nonmelanocytic skin lesions: A systematic review. Journal of the American Academy of Dermatology. 80 (5), 1414-1427 (2019).
  34. Navarrete-Dechent, C., et al. Reflectance confocal microscopy terminology glossary for melanocytic skin lesions: A systematic review. Journal of the American Academy of Dermatology. 84 (1), 102-119 (2021).
  35. Sattler, E., Kastle, R., Welzel, J. Optical coherence tomography in dermatology. Journal of Biomedical Optics. 18 (6), 061224(2013).
  36. Park, E. S. Skin-layer analysis using optical coherence tomography. Medical Lasers. 3 (1), 1-4 (2014).
  37. Marra, D. E., Torres, A., Schanbacher, C. F., Gonzalez, S. Detection of residual basal cell carcinoma by in vivo confocal microscopy. Dermatologic Surgery. 31 (5), 538-541 (2005).
  38. Alarcon, I., et al. In vivo reflectance confocal microscopy to monitor the response of lentigo maligna to imiquimod. Journal of the American Academy of Dermatology. 71 (1), 49-55 (2014).
  39. Guitera, P., et al. Surveillance for treatment failure of lentigo maligna with dermoscopy and in vivo confocal microscopy: new descriptors. British Journal of Dermatology. 170 (6), 1305-1312 (2014).
  40. Menge, T. D., Hibler, B. P., Cordova, M. A., Nehal, K. S., Rossi, A. M. Concordance of handheld reflectance confocal microscopy (RCM) with histopathology in the diagnosis of lentigo maligna (LM): A prospective study. Journal of the American Academy of Dermatology. 74 (6), 1114-1120 (2016).
  41. Chen, C. S., Elias, M., Busam, K., Rajadhyaksha, M., Marghoob, A. A. Multimodal in vivo optical imaging, including confocal microscopy, facilitates presurgical margin mapping for clinically complex lentigo maligna melanoma. British Journal of Dermatology. 153 (5), 1031-1036 (2005).
  42. Yelamos, O., et al. Handheld reflectance confocal microscopy for the detection of recurrent extramammary Paget disease. JAMA Dermatology. 153 (7), 689-693 (2017).
  43. Ardigo, M., Longo, C., Gonzalez, S. Multicentre study on inflammatory skin diseases from The International Confocal Working Group: Specific confocal microscopy features and an algorithmic method of diagnosis. British Journal of Dermatology. 175 (2), 364-374 (2016).
  44. Moscarella, E., Argenziano, G., Lallas, A., Pellacani, G., Longo, C. Confocal microscopy: A new era in understanding the pathophysiologic background of inflammatory skin diseases. Experimental Dermatology. 23 (5), 320-321 (2014).
  45. Bertrand, C., Corcuff, P. In vivo spatio-temporal visualization of the human skin by real-time confocal microscopy. Scanning. 16 (3), 150-154 (1994).
  46. Saknite, I., et al. Features of cutaneous acute graft-versus-host disease by reflectance confocal microscopy. British Journal of Dermatology. 181 (4), 829-831 (2019).
  47. Aleissa, S., et al. Presurgical evaluation of basal cell carcinoma using combined reflectance confocal microscopy-optical coherence tomography: A prospective study. Journal of the American Academy of Dermatology. 82 (4), 962-968 (2020).
  48. Bang, A. S., et al. Noninvasive, in vivo, characterization of cutaneous metastases using a novel multimodal RCM-OCT imaging device: A case-series. Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology. , (2022).
  49. Dickensheets, D. L., Kreitinger, S., Peterson, G., Heger, M., Rajadhyaksha, M. Wide-field imaging combined with confocal microscopy using a miniature f/5 camera integrated within a high NA objective lens. Optics Letters. 42 (7), 1241-1244 (2017).
  50. Kose, K., et al. Automated video-mosaicking approach for confocal microscopic imaging in vivo: an approach to address challenges in imaging living tissue and extend field of view. Scientific Reports. 7 (1), 10759(2017).
  51. Zhao, J., et al. Deep learning-based denoising in high-speed portable reflectance confocal microscopy. Lasers in Surgery and Medicine. 53 (6), 880-891 (2021).
  52. Curiel-Lewandrowski, C., Stratton, D. B., Gong, C., Kang, D. Preliminary imaging of skin lesions with near-infrared, portable, confocal microscopy. Journal of the American Academy of Dermatology. 85 (6), 1624-1625 (2021).
  53. Freeman, E. E., et al. Feasibility and implementation of portable confocal microscopy for point-of-care diagnosis of cutaneous lesions in a low-resource setting. Journal of the American Academy of Dermatology. 84 (2), 499-502 (2021).
  54. Peterson, G., et al. Feasibility of a video-mosaicking approach to extend the field-of-view for reflectance confocal microscopy in the oral cavity in vivo. Lasers in Surgery and Medicine. 51 (5), 439-451 (2019).
  55. Kurugol, S., et al. Automated delineation of dermal-epidermal junction in reflectance confocal microscopy image stacks of human skin. Journal of Investigative Dermatology. 135 (3), 710-717 (2015).
  56. Kose, K., et al. Utilizing machine learning for image quality assessment for reflectance confocal microscopy. Journal of Investigative Dermatology. 140 (6), 1214-1222 (2020).
  57. Campanella, G., et al. Deep learning for basal cell carcinoma detection for reflectance confocal microscopy. Journal of Investigative Dermatology. 142 (1), 97-103 (2022).
  58. Wodzinski, M., Skalski, A., Witkowski, A., Pellacani, G., Ludzik, J. Convolutional neural network approach to classify skin lesions using reflectance confocal microscopy. 41st Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society EMBC 2019. , Berlin, Germany. (2019).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Reflectance Confocal MicroscopyOptical Coherence TomographySkin Cancer DiagnosisNoninvasive ImagingImage AcquisitionBasal Cell CarcinomaConfocal MosaicsDermoscopy ImagingHistopathological ResolutionMelanoma Detection

İlgili makaleler