Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kemirgen Kalplerde Viral Transgen Ekspresyonu ve Kardiyak Aritmi Riskinin Değerlendirilmesi

2K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/64073

⸱

27 Temmuz 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1University of Ottawa Heart Institute, 2Department of Cellular and Molecular Medicine, University of Ottawa, 3Department of Biochemistry, Microbiology and Immunology, University of Ottawa

Bu makalede

Özet

Bu protokol, ekokardiyografi rehberliğinde virüsün doğrudan intramiyokard enjeksiyonu ile sıçan ve fare kalplerinde transgen ekspresyonu yöntemlerini açıklamaktadır. İzole, Langendorff perfüze edilmiş kalplerin programlanmış elektriksel stimülasyonu ile kalplerin ventriküler aritmilere duyarlılığının değerlendirilmesi için yöntemler de burada açıklanmaktadır.

Özet

Kalp hastalığı tüm dünyada önde gelen morbidite ve mortalite nedenidir. Transgenik suşların kullanım kolaylığı ve bolluğu nedeniyle, kemirgenler kardiyovasküler araştırmalar için gerekli modeller haline gelmiştir. Bununla birlikte, kalp hastalığı hastalarında sıklıkla mortaliteye neden olan spontan ölümcül kardiyak aritmiler, kalp hastalığının kemirgen modellerinde nadirdir. Bu öncelikle insan ve kemirgenler arasındaki kardiyak elektriksel özelliklerdeki tür farklılıklarından kaynaklanmaktadır ve kemirgenleri kullanan kardiyak aritmilerin incelenmesine meydan okumaktadır. Bu protokol, rekombinant virüsün (adenovirüs ve adeno ilişkili virüs) ekokardiyografi eşliğinde intramüsküler enjeksiyonlarını kullanarak fare ve sıçan ventriküler miyokardında etkili transgen ekspresyonunu sağlamak için bir yaklaşımı açıklamaktadır. Bu çalışma aynı zamanda, hem adrenerjik hem de programlanmış elektriksel stimülasyonlarla izole edilmiş, Langendorff perfüze fare ve sıçan kalplerini kullanarak aritmilere kardiyak duyarlılığın güvenilir bir şekilde değerlendirilmesini sağlayacak bir yöntemi özetlemektedir. Bu teknikler, miyokard enfarktüsü gibi yaralanmalardan sonra olumsuz kardiyak yeniden yapılanma ile ilişkili kalp ritmi bozukluklarını incelemek için kritik öneme sahiptir.

Giriş

Kardiyovasküler hastalık, dünya çapında önde gelen ölüm nedenidir ve sadece 2017 yılında 18 milyon insanın hayatına mal olmuştur1. Kemirgenler, özellikle fareler ve sıçanlar, kullanım kolaylığı ve çeşitli transgenik aşırı ekspresyon veya nakavt çizgilerinin mevcudiyeti nedeniyle kardiyovasküler araştırmalarda en yaygın kullanılan model haline gelmiştir. Kemirgen modelleri, hastalık mekanizmalarını anlamak ve miyokard enfarktüsü2, hipertansiyon3, kalp yetmezliği4 ve ateroskleroz5'te potansiyel yeni terapötik hedefleri belirlemek için temel olmuştur. Bununla birlikte, kardiyak aritmiler çalışmalarında kemirgenlerin kullanımı, insan veya büyük hayvan modellerine kıyasla küçük kalp boyutları ve daha hızlı kalp atış hızları ile sınırlıdır. Bu nedenle, miyokard enfarktüsü sonrası farelerde veya sıçanlarda spontan ölümcül aritmiler nadirdir2. Araştırmacılar, aritmi yükünde veya pro-aritmik eğilimlerde anlamlı değişiklikler göstermeden, fibroz veya gen ekspresyonu gibi pro-aritmik bir substratı yansıtabilecek dolaylı ikincil değişikliklere odaklanmak zorunda kalmaktadır. Bu sınırlamanın üstesinden gelmek için, fare ve sıçan kalplerinin genetik modifikasyon 6,7 veya miyokard enfarktüsü2 sonrası ventriküler taşiaritmilere duyarlılığının güvenilir bir şekilde değerlendirilmesini sağlayan bir yöntem mevcut protokolde tanımlanmıştır. Bu yöntem, izole edilmiş, Langendorff perfüzeedilmiş 8 fare ve sıçan kalplerinde ventriküler taşiaritmileri indüklemek için adrenerjik reseptör stimülasyonunu programlanmış elektriksel stimülasyonla birleştirir.

Kemirgen miyokard dokusunda viral gen transferi için standart yaklaşımlar genellikle kalbin torakotomi 9,10,11 ile maruz kalmasını içerir, bu da invaziv bir prosedürdür ve işlemden sonra hayvanların gecikmiş iyileşmesi ile ilişkilidir. Bu makalede, transgenlerin aşırı ekspresyonu için ultrason görüntüleme rehberliğinde doğrudan intramiyokard virüs enjeksiyonu yöntemi açıklanmaktadır. Bu daha az invaziv prosedür, torakotomi ile karşılaştırıldığında, viral enjeksiyondan sonra daha hızlı hayvan iyileşmesine ve daha az doku hasarına izin verir, hayvandaki ameliyat sonrası ağrı ve iltihabı azaltır ve böylece transgenik genlerin kalp fonksiyonu üzerindeki etkilerinin daha iyi değerlendirilmesini sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Açıklanan tüm yöntem ve prosedürler, Ottawa Üniversitesi'ndeki hayvan araştırmaları etik inceleme kurulu ve Ottawa Üniversitesi Kalp Enstitüsü'ndeki biyogüvenlik inceleme komitesi tarafından onaylanmıştır. Geliştirilen güvenlik protokolleri, rekombinant adenovirüs veya adeno ilişkili virüs (AAV) ile ilgili tüm prosedürlerin seviye II biyogüvenlik kabininde gerçekleştirildiğini içerir. Virüsle temas eden tüm maddeler deneyden sonra iyice dekontamine edildi. Bu çalışmada Ctnnb1flox/flox ve αMHC-MerCreMer fareleri (8-12 haftalık, her iki cinsiyetten) ve Sprague-Dawley sıçanları (200-250g, erkek) kullanılmıştır. Hayvanlar ticari kaynaklardan elde edilmiştir (bkz. Hayvanlarla ilgili tüm prosedürler, kurumsal düzenleyici komiteler tarafından eğitilmiş ve onaylanmış personel tarafından gerçekleştirilmiştir. Tüm işlemler sırasında uygun kişisel koruyucu ekipmanlar kullanıldı.

1. Kemirgen ventrikül dokularında viral transgen ekspresyonu

NOT: Hedef geni ve ilgili kontrol virüsünü ifade eden Ad-GFP (1 x 10 10 PFU/mL titre) veya AAV9-GFP (1 x 10 13 GC/mL titre) gibi rekombinant adenovirüs veya AAV (bkz.

  1. Virüs enjeksiyonu gününde, virüsü buz üzerinde çözün. Hedef geni ve kontrol virüsünü eksprese eden virüsü 30 G 1/2 iğne ile iki ayrı şırıngaya (hacim = 50 μL) aspire edin ve kullanıma kadar buz üzerinde tutun.
    NOT: Şırınga ve iğnedeki kabarcıklar dikkatlice çıkarılmalıdır.
  2. Sıçanlara veya farelere buprenorfin uygulayın (sıçanlar için 0.05 mg / kg, fareler için 0.1 mg / kg, deri altı), 1 saat sonra% 3 izofluran kullanarak anesteziyi indükleyin ve sonraki prosedür için% 2'de (0.5-1.0 L / dak akış hızında% 100 oksijende) izofluranı koruyun.
  3. Hayvanın vücudunu (örneğin kuyruğu) bir çift forseps ile hafifçe sıkıştırın ve hayvan sıkışmaya herhangi bir vücut hareketiyle cevap vermezse, uygun anestezi onaylanır.
  4. Elektrikli ısıtma yastığı kullanarak vücut ısısını 37 ° C'de tutun. Göğüs bölgesindeki saçları saç kesme makinesi kullanarak tıraş edin.
    NOT: Potansiyel düzensiz ısı dağılımı nedeniyle elektrikli ısıtma yastığı kullanırken dikkatli olunmalıdır.
  5. Korneanın kurumasını önlemek için her iki göze de oftalmik merhem uygulayın.
  6. Hayvanı sırtüstü pozisyonda tutun ve kısa eksen oryantasyonunda hayvanın kalbinin ultrasonla görüntülenmesi için klinik öncesi bir görüntüleme sistemi kullanın (bkz.
    NOT: Aşağıdaki adımlar, steril bir ortam sağlayan seviye II biyogüvenlik kabininde gerçekleştirilir. Güvenli iğne kullanımı olanlar da dahil olmak üzere standart güvenlik prosedürleri uygulanır.
  7. Hayvanın sol alt göğüs bölgesini, dairesel bir hareketle üç kez iyot bazlı veya klorheksidin bazlı bir ovma ve alkolün alternatif turlarıyla sterilize edin.
  8. Ultrason görüntüleme rehberliği altında, virüsü içeren şırınganın 30 G 1/2 iğnesini adım 1.1'de hazırlandığı gibi yerleştirin. Vücudun sol alt göğüs tarafından hayvanın göğsüne girer.
  9. İğne ucunu sol ventrikül ön serbest duvarına yaklaştırın ve yavaşça 10-15 μL virüs enjekte edin. İğnenin ucuna yakın gelişmiş parlaklık ile ultrason görüntülerinde başarılı enjeksiyonu doğrulayın.
    NOT: Her bölgeye enjekte edilen virüs miktarı, miyokard dokularına fiziksel zarar gelmesini önlemek için 15 μL'den fazla değildir.
  10. İğneyi kalpten çekin ve aynı miktarda virüsün ikinci ve üçüncü enjeksiyonu için sol ventrikülün diğer bölgelerine yerleştirin.
    NOT: Toplam enjeksiyon bölgesi sayısı deney tasarımı ile belirlenir. Fokal transgen ekspresyonu gerekiyorsa, sadece bir enjeksiyon gereklidir; Daha fazla difüzif transgen ekspresyonu gerekiyorsa, genellikle çoklu enjeksiyon bölgelerine (üç ila beş) ihtiyaç duyulur.
  11. Enjeksiyonların tamamlanmasından sonra, hayvanı kafesine geri getirin.
  12. Sternal yatışlığı korumak ve konut odasına geri döndürmek için yeterli bilinci yeniden kazanana kadar hayvanı dikkatlice izleyin.
  13. Buprenorfin HCl'yi (0.1 mg / kg, fareler için günde iki kez, 0.05 mg / kg, sıçanlar için günde iki kez, deri altı) sonraki 2 gün boyunca hayvana uygulayın. Hayvanları vivaryuma geri döndürün ve olağandışı ağrı veya sıkıntı belirtileri için günlük olarak izleyin ve bulunursa, Kurumsal hayvan bakım komitesi protokollerine göre hayvanları tedavi edin.

2. Kardiyak aritmi duyarlılığının değerlendirilmesi

NOT: Adenovirüs enjeksiyonundan 4-6 gün sonra ve AAV enjeksiyonundan 1-2 hafta sonra, 2.1.-2.2 adımlarını izleyerek hayvan kalplerinin kardiyak aritmilere duyarlılığını değerlendirin.

  1. Sıçan veya fare kalbinin Langendorff perfüzyonunu gerçekleştirin.
    1. 1 L suya aşağıdakileri ekleyerek tirot çözeltisi hazırlayın: NaCl, 7.9 g (son = 135 mM); KCl, 0,37 g (5,0 mM); CaCl2, 0,27 g (1,8 mM); MgCl 2, 0,24 g (1,2 mM); HEPES, 2,38 g (10 mM); ve glikoz, 1.8 g (10 mM). NaOH ile pH'ı 7,40'a ayarlayın ( bkz.
    2. Çözeltiyi 0,2 μm'lik bir filtre ve 2.1.6.-2.2.8 adımları sırasında sürekli olarak %100 O2 kabarcığı ile filtreleyin.
    3. Heparini sıçan veya fareye uygulayın (500 U / kg, intraperitoneal enjeksiyon) ve 10 dakika sonra hayvanı% 3 izofluran ile uyuşturun. Vücutta hafif bir tutam ile yeterli anestezi sağlayın.
    4. Sol torakotomi için orta klaviküler çizgide 1-1.5 cm'lik dikey bir kesi yapmak ve kalbi açığa çıkarmak için bir neşter kullanın.
    5. Aort kemeri seviyesinde bir çift makasla keserek kalbi toplayın ve hemen kalbi buz gibi soğuk Tyrode çözeltisine koyun.
      NOT: Kalp toplanması sırasında kalbe zarar vermemek için dikkatli olunmalıdır.
    6. Kalbin aortunu, sabit akış hızı modunda modifiye edilmiş bir Langendorff perfüzyon sistemine (bakınız Malzeme Tablosu) bağlı künt bir iğne (sıçanlar için 18 G; fareler için 23 G) ile kanüle edin. Perfüzyon basıncını 70-80 mmHg'de tutmak için akış hızını ayarlayın.
      NOT: Perfüzyon iğnesindeki kabarcıklar aort kanülasyonundan önce çıkarılmalıdır. Diseksiyon mikroskobu kullanmak kanülasyonu kolaylaştırır.
    7. Kanüllenmiş kalbi, sol ventrikül yukarı bakacak şekilde silikon elastomer kaplı 9, 10 cm'lik plastik bir kaba yerleştirin ve kalbi 9,12'yi 37 ° C'de O2 kabarcıklı Tirode çözeltisi ile perfüze edin.
    8. Perfüzyonun başlangıcında, ilk iki ila üç kalp atışı sırasında kalpten kanın yıkanmasını ve kalp renginin kırmızıdan solukluğa değiştiğini gözlemleyerek doğru aort kanülasyonunu doğrulayın.
    9. Küçük bir hayvan EKG sisteminin elektrotlarını (bakınız Malzeme Tablosu) kabın içindeki silikon elastomer kaplamaya yerleştirerek kalbin etrafına yerleştirin (Şekil 1). Uyumlu bir yazılım kullanarak EKG'yi kaydedin.
  2. Ventriküler taşiaritmileri indüklemek için adrenerjik reseptör stimülasyonu ve programlanmış elektriksel stimülasyon gerçekleştirin.
    1. Başarılı aort kanülasyonundan sonra, kalp hazırlığını stabilize etmek için kalbi 20 dakika boyunca Tyrode çözeltisi ile perfüze etmeye devam edin.
    2. Adım 2.2.3.-2.2.8'de kalp perfüzyonu için kullanılan Tyrode çözeltisine 1 μM izoproterenol ekleyin ( Malzeme Tablosuna bakınız).
    3. 10 dakikalık izoproterenol perfüzyonundan sonra, bir elektrik stimülatörüne bağlı iki platin elektrot ile tepedeki kalbi uyarın (bkz.
    4. 10 ardışık uyaranı (S1, 5 V, 100 ms aralıkları) içeren stimülasyon prosedürü (Şekil 2) ile başlayın ve bunu 80 ms'lik bir başlangıç aralığına sahip ekstra bir uyaran (S2) izler. Kalp atışı artık yakalanamayana kadar S2 aralığını her seferinde tekrar tekrar 2 ms azaltın (yani, kalbin etkili refrakter periyoduna, ERP'ye ulaşmak)13.
    5. İndüklenmiş ventriküler taşiaritmileri (ventriküler taşikardi ve fibrilasyon dahil) EKG ile izleyin.
    6. Yukarıdaki prosedür tarafından herhangi bir aritmi indüklenmezse, ERP'ye ulaşılana kadar S2'den sonra aynı başlangıç (80 ms) ve azalma (2 ms) aralıklarla başka bir ekstra uyaran (S3) ekleyin.
    7. Ventriküler taşiaritmiler hala indüklenmiyorsa, ERP'ye ulaşılana kadar S3'ten sonra aynı başlangıç ve azalma aralıklarıyla bir ekstra uyaran (S4) daha ekleyin.
    8. Ventriküler taşiaritmiler hala indüklenmiyorsa (kontrol sağlıklı kalplerde beklendiği gibi), elektriksel stimülasyon protokolünü durdurun ve kalbin indüklenemez olduğunu düşünün.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Burada açıklanan protokolü izleyerek perfüze edildiğinde (Şekil 1), izole edilmiş bir sıçan veya fare kalbi en az 4 saat boyunca ritmik ve kararlı bir şekilde atar. Deneysel tasarım daha uzun bir kalp perfüzyonu süresi gerektiriyorsa, uzun süreli perfüzyondan sonra miyokard ödemi oluşumunu azaltmak için perfüzyon çözeltisine albümin eklemek yararlıdır14. İzoproterenolün perfüzyon çözeltisine dahil edilmesi, miyokard enfarktüsü ve kalp yetmezliği gibi birçok aritmojeni...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Langendorff perfüzyonlu, izole kalp preparatının başarısı için birkaç adım kritik öneme sahiptir. İlk olarak, kalp toplanması sırasında kalbe herhangi bir zarar gelmesini önlemek önemlidir (örneğin, makasla kazara sıkma veya kesme nedeniyle). İkincisi, toplanan kalbi mümkün olan en kısa sürede soğuk Tyrode çözeltisine koymak çok önemlidir, çünkü bu kalp atışını durduracak ve kalbin oksijen tüketimini azaltacaktır. Üçüncüsü, aort içine iğne yerleştirilmesi çok derin olmamalıdır – ideal olarak, iğnenin ucu aort kapak seviy...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların rekabet eden finansal çıkarları yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, Kanada Sağlık Araştırmaları Enstitüleri (CIHR) Proje Hibeleri (PJT-148918 ve PJT-180533, WL'ye), CIHR Erken Kariyer Araştırmacı Ödülü (AR8-162705, WL'ye), Kanada Kalp ve İnme Vakfı (HSFC) McDonald Bursu ve Yeni Araştırmacı Ödülü (S-17-LI-0866, WL'ye), Öğrenci Bursları (JW ve YX'e) ve Ottawa Üniversitesi Kardiyak Bağış Fonlarından Doktora Sonrası Bursu (AL'ye) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar Richard Seymour'a teknik desteği için teşekkür eder. Şekil 2 , onaylanmış lisanslara sahip Biorender.com oluşturulmuştur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
30 G 1/2 PrecisionGlide İğneBecton Dickinson (BD)305106
adeno-ilişkili virüs (AAV9-GFP)Vector Biolabs7007
adenovirus (Ad-GFP)Vector Biolabs1060
adenovirus (Ad-Wnt3a)Vector BiolabsADV-276318
Biyogüvenlik kabini (Seviye II)Microzone CorporationN/AModel #: BK-2-4
BuprenorfinVeterjezikDIN 02342510
KalsiyumKlorür Sigma-Aldrich102378
D-GlikozFisher KimyasalD16-1
Saç kesme makinesiWAHL Clipper Corporation78001
Hamilton şırıngaSigma-Aldrich20701705 LT, hacim 50 & mu; L
Isıtma yastığıYaşam MarkasıE12107
HeparinFresenius KabiDIN 02264315
HEPESSigma-AldrichH4034
IsofluraneFresenius Kabi Ltd.M60303
İzoproterenol hidroklorürSigma-Aldrich1351005
LabChart 8 yazılımıADInstruments Inc.EKG kaydı içinSürüm 8.1.5
Magnezyum klorür hekzahidratSigma-AldrichM2393
Fareler (Ctnnb1flox/flox)Jackson Labs4152
Fareler (α MHC-MerCreMer)Jackson Labs5650
MikroskopLeicaS9iLangendorff sistemi
MS400 dönüştürücüiçin, VisualSonic, Inc.N / A Oftalmik
merhemSystaneDIN 02444062
Potasyum Klorür (KCl)Sigma-AldrichP9541
Langendorff sistemi içinbasınç ölçerNETECHDigiMano 1000
Langendorff sistemi içinPompaCole-ParmerUZ-77924-65
Sıçan (Sprague-Dawley, erkek)Charles River400
Neşter bıçaklarıGüzel Bilim Araçları10010-00
Neşter sapıGüzel Bilim Araçları10007-12
Silikon elastomerDown Inc.Langendorff sistemi içinSylgard 184
Küçük hayvan EKG sistemiADInstruments Inc.N/APowerlab 8/35 ve Hayvan Biyo Amp
Sodyum KlorürSigma-AldrichS7653
Sodyum HidroksitSigma-Aldrich567530
StimülatörIonOptixMyoPacer EP
VEVO3100 Klinik Öncesi Görüntüleme SistemiVisualSonic Inc.Yok
,

Kaynaklar

  1. Virani, S. S., et al. Heart disease and stroke statistics-2020 update: A report from the American Heart Association. Circulation. 141 (9), 139(2020).
  2. Wang, J., et al. Cardiomyocyte-specific deletion of β-catenin protects mouse hearts from ventricular arrhythmias after myocardial infarction. Scientific Reports. 11 (1), 17722(2021).
  3. Wang, T., et al. Effect of exercise training on the FNDC5/BDNF pathway in spontaneously hypertensive rats. Physiological Reports. 7 (24), 14323(2019).
  4. Lin, H. B., et al. Innate immune Nod1/RIP2 signaling is essential for cardiac hypertrophy but requires mitochondrial antiviral signaling protein for signal transductions and energy balance. Circulation. 142 (23), 2240-2258 (2020).
  5. Karunakaran, D., et al. RIPK1 expression associates with inflammation in early atherosclerosis in humans and can be therapeutically silenced to reduce NF-κB activation and atherogenesis in mice. Circulation. 143 (2), 163-177 (2021).
  6. Gharibeh, L., et al. GATA6 is a regulator of sinus node development and heart rhythm. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 118 (1), 2007322118(2021).
  7. Lu, A., et al. Direct and indirect suppression of Scn5a gene expression mediates cardiac Na+ channel inhibition by Wnt signalling. Canadian Journal of Cardiology. 36 (4), 564-576 (2020).
  8. Liang, W., et al. Role of phosphoinositide 3-kinase {alpha}, protein kinase C, and L-type Ca2+ channels in mediating the complex actions of angiotensin II on mouse cardiac contractility. Hypertension. 56 (3), 422-429 (2010).
  9. Kapoor, N., Liang, W., Marban, E., Cho, H. C. Direct conversion of quiescent cardiomyocytes to pacemaker cells by expression of Tbx18. Nature Biotechnology. 31 (1), 54-62 (2013).
  10. Kim, N. K., Wolfson, D., Fernandez, N., Shin, M., Cho, H. C. A rat model of complete atrioventricular block recapitulates clinical indices of bradycardia and provides a platform to test disease-modifying therapies. Scientific Reports. 9 (1), 6930(2019).
  11. Cingolani, E., et al. Gene therapy to inhibit the calcium channel beta subunit: Physiological consequences and pathophysiological effects in models of cardiac hypertrophy. Circulation Research. 101 (2), 166-175 (2007).
  12. Ionta, V., et al. SHOX2 overexpression favors differentiation of embryonic stem cells into cardiac pacemaker cells, improving biological pacing ability. Stem Cell Reports. 4 (1), 129-142 (2015).
  13. Guss, S. B., Kastor, J. A., Josephson, M. E., Schare, D. L. Human ventricular refractoriness. Effects of cycle length, pacing site and atropine. Circulation. 53 (3), 450-455 (1976).
  14. Segel, L. D., Ensunsa, J. L. Albumin improves stability and longevity of perfluorochemical-perfused hearts. The American Journal of Physiology. 254, 1105-1112 (1988).
  15. Hong, P., et al. NLRP3 inflammasome as a potential treatment in ischemic stroke concomitant with diabetes. Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 121(2019).
  16. Lin, H. B., et al. Macrophage-NLRP3 inflammasome activation exacerbates cardiac dysfunction after ischemic stroke in a mouse model of diabetes. Neuroscience Bulletin. 36 (9), 1035-1045 (2020).
  17. Lin, H. B., et al. Cerebral-cardiac syndrome and diabetes: Cardiac damage after ischemic stroke in diabetic state. Frontiers in Immunology. 12, 737170(2021).
  18. Brack, K. E., Narang, R., Winter, J., Ng, G. A. The mechanical uncoupler blebbistatin is associated with significant electrophysiological effects in the isolated rabbit heart. Experimental Physiology. 98 (5), 1009-1027 (2013).
  19. Allison, S., et al. Electroconductive nanoengineered biomimetic hybrid fibers for cardiac tissue engineering. Journal of Materials Chemistry. B. 5 (13), 2402-2406 (2017).
  20. Hamel, V., et al. De novo human cardiac myocytes for medical research: Promises and challenges. Stem Cells International. 2017, 4528941(2017).
  21. Liang, W., Lu, A., Davis, D. R. Induced pluripotent stem cell-based treatment of acquired heart block: The battle for tomorrow has begun. Circulation. Arrhythmia and Electrophysiology. 10 (5), 005331(2017).
  22. McLaughlin, S., et al. Injectable human recombinant collagen matrices limit adverse remodeling and improve cardiac function after myocardial infarction. Nature Communications. 10 (1), 4866(2019).
  23. Villanueva, M., et al. Glyoxalase 1 prevents chronic hyperglycemia induced heart-explant derived cell dysfunction. Theranostics. 9 (19), 5720-5730 (2019).
  24. Kanda, P., et al. Deterministic paracrine repair of injured myocardium using microfluidic-based cocooning of heart explant-derived cells. Biomaterials. 247, 120010(2020).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Kemirgen Kalp ModelleriVentriküler MiyokardEkokardiyografi Rehberliğinde EnjeksiyonLangendorff PerfüzyonuProgramlı Elektriksel StimülasyonAdrenerjik StimülasyonVentriküler TakiaritmiTek Hücreli Elektrofizyoloji
Kemirgen Kalplerde Viral Transgen Ekspresyonu ve Kardiyak Aritmi Riskinin Değerlendirilmesi
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.