RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Research Article
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Erratum Notice
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Mevcut protokol domuz trakealarının gerilme stresi-gevşeme ve başarısızlık özelliklerini belirlemektedir. Bu tür yöntemlerden elde edilen sonuçlar, trakeanın viskoelastik ve başarısızlık eşiklerinin anlaşılmasını iyileştirmeye ve pulmoner sistemin hesaplamalı modellerinin yeteneklerini geliştirmeye yardımcı olabilir.
Trakeanın biyomekanik özellikleri hava akışını doğrudan etkiler ve solunum sisteminin biyolojik fonksiyonuna katkıda bulunur. Bu özellikleri anlamak, bu dokudaki yaralanma mekanizmasını anlamak için kritik öneme sahiptir. Bu protokol, domuz trakeasının 300 s için% 0 veya% 10 gerinime önceden gerilmiş stres gevşeme davranışını incelemek için deneysel bir yaklaşımı açıklar, ardından arızaya kadar mekanik çekme yüklemesi yapılır. Bu çalışma, deneysel tasarım, veri toplama, analizler ve domuz trakea biyomekanik testinden elde edilen ön sonuçların ayrıntılarını sunmaktadır. Bu protokolde sağlanan ayrıntılı adımları ve veri analizi MATLAB kodunu kullanarak, gelecekteki çalışmalar trakea dokusunun fizyolojik, patolojik ve travmatik durumlar sırasında biyomekanik tepkilerini anlamak için kritik olan zamana bağlı viskoelastik davranışını araştırabilir. Ayrıca, trakeanın biyomekanik davranışının derinlemesine incelenmesi, ameliyatlar sırasında yaygın olarak kullanılan endotrakeal implantlar gibi ilgili tıbbi cihazların tasarımının iyileştirilmesinde kritik öneme sahip olacaktır.
Akciğer hastalığındaki kritik rolüne rağmen, en büyük hava yolu yapısı olan trakea, viskoelastik özelliklerini detaylandıran sınırlıçalışmalara sahiptir 1. Trakeanın zamana bağlı, viskoelastik davranışının derinlemesine anlaşılması, pulmoner mekanik araştırmaları için kritik öneme sahiptir, çünkü hava yoluna özgü malzeme özelliklerinin anlaşılması, Amerika Birleşik Devletleri'nde üçüncü önde gelen ölüm nedeni olan akciğer hastalıkları için yaralanma önleme, teşhis ve klinik müdahale biliminin ilerlemesine yardımcı olabilir 2,3,4.
Mevcut doku karakterizasyon çalışmaları trakeanın sertlik özelliklerini bildirmiştir 5,6,7,8. Zamana bağlı mekanik yanıtlar, patoloji 9,10 tarafından da değiştirilen doku yeniden şekillenmesindeki önemine rağmen minimal düzeyde araştırılmıştır. Dahası, zamana bağlı yanıt verilerinin eksikliği, şu anda genel kurucu yasaları kullanmaya başvuran pulmoner mekanik hesaplama modellerinin öngörücü yeteneklerini de sınırlar. Trakeanın biyofiziksel çalışmalarını bilgilendirmek için gerekli materyal özelliklerini sağlayabilecek stres-gevşeme çalışmaları yaparak bu boşluğu gidermeye ihtiyaç vardır. Bu çalışma, domuz trakeasının stres-gevşeme davranışını araştırmak için test yöntemleri, veri toplama ve veri analizlerinin ayrıntılarını sunmaktadır.
Açıklanan tüm yöntemler, Drexel Üniversitesi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Tüm kadavra hayvanları, ABD'nin Pensilvanya eyaletinde bulunan Amerika Birleşik Devletleri Tarım Bakanlığı (USDA) onaylı bir çiftlikten satın alınmıştır. Bu çalışma için erkek Yorkshire domuzundan (3 haftalık) bir kadavra kullanılmıştır.
1. Doku hasadı
2. Biyomekanik test
3. Veri toplama
4. Veri analizi
, burada σ gerilimi (mega Pascals [MPa]), F çevresel veya eksenel yükü (Newtons [N]) temsil eder ve A0 başlangıç kesit alanını temsil eder (milimetre karesi [mm2]).
, burada Rel% gevşeme yüzdesini temsil eder, σ(0+) ilk tepe gerilimini (veya ilk tepe yükünü) temsil eder ve σ (300), 300 s'nin üzerindeki gevşemeden sonra kaydedilen stres (veya yük) seviyesini temsil eder.
ve G(0) = 1. Viskoelastik gerilme-gevşeme tepkilerini karşılaştırmak için, G (t), doğrusal olmayan en küçük kareler regresyonu kullanılarak aşağıdaki gibi eğri olarak takılır:
, burada t, stres gevşeme tutma sırasındaki zamandır, g, gevşeme katsayısıdır, τ1 ve τ2 ve sırasıyla dokunun kısa (ilk) ve uzun vadeli (denge) davranışını tanımlayan gevşeme sürelerini (saniye cinsinden) gösterir.
, burada σ nominal gerilimi (MPa), F çevresel veya eksenel yükü (N) temsil eder ve A 0 başlangıç kesit alanını (mm2) temsil eder;
burada
sonuçta ortaya çıkan gerinim, Δ L yer değiştirmeyi veL 0 numunenin başlangıç uzunluğunu temsil eder. Stres gevşeme bekletmesini takiben arıza çekme testine tabi tutulan numuneler için L0, dokunun önceden gerilmiş uzunluğunu temsil eder. Örneğin, örnek 3 (başlangıç uzunluğu 8 mm) 'a kadar önceden gerilmişti ve bu nedenle L0,19 sonuç gerinim değerlerini hesaplamak için 8,8 mm olarak kabul edildi.
, burada E, elastikiyet modülünü temsil eder, x ve y yük yer değiştirme eğrisinde seçilen koordinatları temsil eder, A 0, kesit alanını temsil eder, L0, mekanik arızanın başlangıcındaki numunenin uzunluğunu temsil eder ve Δσ ve Δ
, sırasıyla arıza yanıtının doğrusal bölgesi üzerindeki gerilim ve gerinimdeki değişimi temsil eder.Şekil 1, kelepçeleme bölgesinin yakınındaki başarısız dokuyu ve kelepçe içindeki dokunun varlığını göstererek, çekme testi sırasında kayma olmadığını doğrulamaktadır. Şekil 2, test edilen numuneler arasında çekme testi sırasında gözlemlenen üst veya alt sıkıştırma bölgeleri veya dokunun uzunluğu boyunca dahil olmak üzere çeşitli arıza yerlerini göstermektedir. Veri analizi sonuçları Şekil 3-4 ve Tablo 1-2'de özetlenmiştir. Trakeal örnekler için eksenel veya çevresel gerilme öncesi% 10'a kadar gerilmeyi takiben stres gevşeme yanıtları Şekil 3'te gösterilmiştir. İlk pik yük ve gerilme, 300 s tutma üzerindeki stresteki yüzde azalma ve 2 dönemlik Prony serisi gevşeme fonksiyonundaki zaman sabitleri, t1 ve t2, bu gevşeme eğrilerinden hesaplanmıştır. Bu viskoelastik parametreler Tablo 1'de yer almaktadır. Eksenel veya çevresel yükler altında arıza testine tabi tutulan trakeal numunenin gerilme-gerinim tepkileri, herhangi bir ön gerilme veya ön gerilme sonrasında Şekil 4'te gösterilmiştir. Bu eğrilerden, arıza gerilimi ve buna karşılık gelen arıza gerinimi ile elastikiyet modülü belirlenmiş ve Tablo 2'de listelenmiştir.
Ön testler, trakea dokusunun stres-gevşeme yanıtlarını başarıyla karakterize etti. Bu ilk deneylerde,% 10'luk gerilme öncesi stres-gevşeme tepkisi, ilk tepe geriliminin eksenel yükleme yönlerinde daha yüksek olduğunu bildirirken, stresteki yüzde azalma, eksenel yükleme yönüne kıyasla çevresel yükleme yönünde daha yüksekti (Tablo 1). Gevşeme süreleri (dokunun kısa [başlangıç] ve uzun vadeli [denge] davranışını tanımlayan τ1 ve τ2 ), aynı 'luk pre-streç grubu için çevresel yükleme yönüne kıyasla eksenel yükleme yönünde de daha yüksekti. Arıza verileri karşılaştırıldığında, arıza gerilimi ve E değerleri hem %0 hem de ön gerilme gruplarında çevresel yükleme yönlerinde daha yüksekken, eksenel yükleme yönlerinde bildirilen arıza gerinimi daha yüksekti (Tablo 2). Bu ön bulgular, trakea dokusundaki stres-gevşeme ve başarısızlık yanıtlarını, hem eksenel hem de çevresel olarak gerilme yükleme koşullarında stres-gevşeme tepkilerini daha iyi anlamak için daha fazla karakterize etmek için ek deneyler gerektirmektedir. Bu protokolde özetlenen adımlar bu hedefe ulaşılmasına yardımcı olabilir.

Şekil 1: Doku toplama ve mekanik test detayları. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2: Hata siteleri. Sarı oklarla gösterilen örnek hata siteleri. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 3: gerinime kadar gerilmiş trakea örneklerinin 300 sn bekletilmesi üzerine stres gevşeme tepkisi. (A) Eksenel veya (B) çevresel yükleme (yükleme koşulu başına n = 1). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 4: Ön gerilme veya ön gerilme (yükleme koşulu başına n = 1) sonrasında eksenel veya çevresel yükleme altında trakea numunelerinin arıza testi için gerilme-gerinim tepkileri.
| Örnek | Esneme öncesi gerinim | Yükleme Yönü | İlk Pik Yük (N) | Başlangıç Tepe Gerilimi (MPa) | % Streste Azalma | τ1 (s) | τ2 (s) | Düzeltilmiş R2 (%) |
| 3 | 10% | Eksenel | 0.56 | 0.089 | 33.93 | 11.59 | 152.44 | 98.79 |
| 4 | Çevresel | 0.26 | 0.057 | 42.31 | 1.58 | 14.86 | 99.08 |
Tablo 1: 300 sn'lik stres gevşemesine maruz kalmak için 'luk bir gerilme öncesi gerilmeye maruz kalan trakea örnekleri için ölçülen ve hesaplanan stres gevşeme parametre değerleri.
| Örnek | Esneme öncesi gerinim | Yükleme Yönü | Arıza Stresi (MPa) | Arıza Gerinimi | Elastikiyet Modülü (MPa) |
| 3 | 10% | Eksenel | 0.89 | 0.38 | 2.9 |
| 4 | Çevresel | 1.78 | 0.51 | 3.74 | |
| 5 | %0 (Yalnızca Hata) | Eksenel | 1.02 | 0.86 | 2.3 |
| 6 | Çevresel | 2.15 | 0.57 | 6.3 |
Tablo 2: Çeşitli deney grupları altında trakea örneklerinin başarısızlık yanıtları.
Ek Kodlama Dosyası 1: Trakea'nın stres-gevşeme davranışını incelemek için özel kodlar. Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.
Mevcut protokol domuz trakealarının gerilme stresi-gevşeme ve başarısızlık özelliklerini belirlemektedir. Bu tür yöntemlerden elde edilen sonuçlar, trakeanın viskoelastik ve başarısızlık eşiklerinin anlaşılmasını iyileştirmeye ve pulmoner sistemin hesaplamalı modellerinin yeteneklerini geliştirmeye yardımcı olabilir.
Bu yayında bildirilen araştırmalar, Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin Eunice Kennedy Shriver Ulusal Çocuk Sağlığı ve İnsani Gelişme Enstitüsü tarafından R15HD093024 Ödül Numarası ve Ulusal Bilim Vakfı KARİYER Ödülü Numarası 1752513 altında desteklenmiştir.
| Tek kullanımlık güvenlik neşterleri | Fine Science Tools Inc | 10000-10 | |
| eXpert 7600 | ADMET Inc. | Yok | Norwood, MA |
| Forseps | Güzel Bilim Araçları A.Ş | .11006-12 ve 11027-12 veya 11506-12 | |
| Ölçer Güvenli | ADMET A.Ş. | N / A | Ücretsiz İndir |
| Görüntü J | NIH | N / A | Açık Kaynak |
| Programlama Yazılımı - MATLAB | Mathworks | N/A | sürüm 2018A |
| Makas | Fine Science Tools Inc | 14094-11 veya 14060-09 | |
| Steril fosfat tampon çözeltisi | Millipore, Thomas Bilimsel | MFCD00131855 |