Yöntem makalesi

Tam Kalınlıkta Kutanöz Termal Yanık ve Enfeksiyonu İncelemek için Sıçan Yanık Modeli

DOI:

10.3791/64345

⸱

23 Ağustos 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1UNC Eshelman School of Pharmacy, University of North Carolina at Chapel Hill, 2Department of Biochemistry & Pharmacology, School of Biomedical Sciences, Faculty of Medicine, Dentistry and Health Sciences, The University of Melbourne, 3Department of Microbiology & Immunology, University of North Carolina School of Medicine, 4Department of Surgery, University of North Carolina at Chapel Hill, 5Curriculum in Toxicology and Environmental Medicine, University of North Carolina at Chapel Hill, 6Department of Microbiology, Monash Biomedicine Discovery Institute, Monash University

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yanık hasarı ve enfeksiyonunun klinik senaryosunu taklit eden bir model, yanık araştırmalarını ilerletmek için gereklidir. Mevcut protokol, insanlardakiyle karşılaştırılabilir basit ve tekrarlanabilir bir sıçan yanığı enfeksiyon modeli göstermektedir. Bu, yeni topikal antibiyotik tedavileri geliştirmek için yanık ve yanık sonrası enfeksiyonların incelenmesini kolaylaştırır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yanık indüksiyon metodolojileri sıçan modellerinde tutarsız bir şekilde tanımlanmıştır. Klinik senaryoyu temsil eden tek tip bir yanık yara modeli, tekrarlanabilir yanık araştırması yapmak için gereklidir. Mevcut protokol, sıçanlarda ~% 20 toplam vücut yüzey alanı (TBSA) tam kalınlıkta yanıklar oluşturmak için basit ve tekrarlanabilir bir yöntem tanımlamaktadır. Burada, yanık yaralanmasını indüklemek için sıçan derisi yüzeyine bir su banyosunda 97 ° C'de ısıtılan22.89 cm2 (5.4 cm çapında) bakır çubuk uygulanmıştır. Yüksek ısı iletkenliğine sahip bir bakır çubuk, tam kalınlıkta bir yanık oluşturmak için ısıyı cilt dokusunda daha derine dağıtabildi. Histoloji analizi, dermisin ve deri altı dokusunun tam kalınlık derecesine pıhtılaştırıcı hasar veren zayıflatılmış epidermisi gösterir. Ek olarak, bu model immün disregülasyon ve bakteriyel enfeksiyonlar gibi yanık yaralanmasını takiben hastanede yatan yanık hastalarında gözlenen klinik durumları temsil etmektedir. Model, hem Gram-pozitif hem de Gram-negatif bakteriler tarafından sistemik bakteriyel enfeksiyonu özetleyebilir. Sonuç olarak, bu yazıda, yanık yarası ve enfeksiyonlar için yeni topikal antibiyotik ilaçların geliştirilmesinde önemli yarar sağlayan, immün disregülasyon ve bakteriyel enfeksiyonlar da dahil olmak üzere klinik durumları taklit eden, öğrenmesi kolay ve sağlam bir sıçan yanığı modeli sunulmaktadır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yanık yaralanmaları travmanın en yıkıcı biçimleri arasındadır ve ölüm oranları özel yanık merkezlerinde bile %12'ye ulaşmaktadır 1,2,3. Son zamanlarda yayınlanan raporlara göre, Amerika Birleşik Devletleri'nde yılda ~ 486.000 yanık hastası tıbbi bakıma ihtiyaç duyuyor ve yaklaşık 3.500 ölüm 1,2,3,4,5,6. Yanık yaralanması, hastaların bağışıklık sistemi için büyük bir zorluk oluşturur ve iyileşmesi yavaş olan önemli bir açık yara oluşturur ve onları nozokomiyal, fırsatçı bakterilerle kutanöz, pulmoner ve sistemik kolonizasyona duyarlı hale getirir. Bakteriyel enfeksiyon ile birlikte immün disregülasyon yanık hastalarında artmış morbidite ve mortalite ile ilişkilidir7.

Bir hayvan yanığı ve enfeksiyon modeli, deri hasarı ve yanık travması ile ilişkili immün baskılanmayı takiben bakteriyel enfeksiyonların patogenezini incelemek için gereklidir. Bu tür modeller, yanık hastalarında bakteriyel enfeksiyonların tedavisi için yeni yöntemlerin tasarlanmasını ve değerlendirilmesini sağlar. Sıçanlar ve insanlar, daha önce belgelenen benzer cilt fizyolojik ve patolojik özelliklerini paylaşırlar8. Ek olarak, sıçanların boyutu daha küçüktür, bu da onları daha büyük hayvan modellerinden daha kolay, daha uygun fiyatlı ve tedarik edilmesi ve bakımı daha kolay hale getirir.

Bu özellikler, sıçanları yanıkları ve enfeksiyonları incelemek için ideal bir model hayvan yapar9. Ne yazık ki, yanık indüksiyonu tekniği tutarsızdır ve genellikle minimal olarak tanımlanmıştır 10,11,12,13,14. Mevcut protokol, klinik senaryoyu simüle eden ve bağışıklık baskılanmasını ve bakteriyel enfeksiyonu değerlendirmek için kullanılabilecek bir sıçan modelinde tutarlı bir tam kalınlıkta yanık hasarı oluşturmak için basit, uygun maliyetli ve tekrarlanabilir bir prosedür geliştirmek üzere tasarlanmıştır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm prosedürler, Kuzey Carolina Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylandı ve belirlenen yönergelere uygun olarak yürütüldü. Deneyler için 7-9 haftalık erkek ve dişi Sprague Dawley sıçanları (250-300 g) kullanıldı. Tüm hayvanlar, yiyecek ve su ad libitumuna serbest erişim ile 12 saat: 12 saat açık-karanlık döngüsünde barındırıldı. Çalışmaya başlamadan önce her zaman kurumsal veterinerinizle birlikte analjezik bir plan hakkında çalışın.

1. Sıçanları yanık yaralanması için hazırlama

  1. Hayvanları yanıktan 24 saat önce yanık yaralanmasına hazırlayın.
  2. Sıçanı, solunum yavaşlayana kadar bir indüksiyon odasında% 100 oksijende% 5 izofluran ile 5 dakika (akış hızı: 2 L / dak) anestezi yapın.
  3. Sıçan derinlemesine uyuşturulduktan sonra (tüm uzuvlarda ayak parmağı sıkışmasına yanıt vermez), sıçanı yüzüstü pozisyonda bir ısıtma yastığına doğru hareket ettirin ve izofluranı bir burun konisinden bakım için oksijende% 1.5'e düşürün.
  4. Anesteziden sonra ve işlem sırasında korneanın kurumasını önlemek için, pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak her iki gözün kornealarına göz kayganlaştırıcısı uygulayın.
  5. Sıçanın sırt bölgesini elektrikli bir makas makinesi kullanarak tıraş edin ( Malzeme Tablosuna bakınız) ve omuz bıçaklarından kuyruğun tabanına kadar büyük bir dikdörtgen halinde mümkün olduğunca fazla kılı çıkarın (Şekil 2A).
  6. Gevşek tüyleri silmek için tıraş edilen bölgeyi tuzlu suya batırılmış bir mendille temizleyin. Pamuk uçlu bir aplikatör kullanarak tıraş edilen bölgeye epilasyon losyonu uygulayın ve ~ 3 dakika bekletin.
    NOT: Referans alınan epilasyon losyonunun 3 dakikadan fazla uygulanması ciltte kırmızı döküntülere neden olacaktır.
  7. Losyonu çıkarmak ve cilt tahrişini önlemek için bölgeyi iki kez ıslak gazlı bez süngerle silin.
  8. İzofluranı kapatın, burun konisini çıkarın ve sıçanı kurtarma kafesine yerleştirin.
    NOT: Kurtarma kafesine bir ısıtma yastığı yerleştirin.
  9. Ertesi günün yanık prosedürü için kurtarılan hayvanı temiz bir muhafaza kafesine aktarın (sıçanın anesteziden iyileşmesi ~ 10-15 dakika sürebilir).

2. Sıçanlarda yanık yaralanmasına neden olmak

  1. Yanma gününde, su banyosu sıcaklığını 97 ° C'ye ayarlayın ve dört bakır çubuğun tümünü yerleştirin (her biri 420 g; Şekil 1) Çubukların düzgün bir şekilde ısınmasına izin vermek için yanma deneyinden 1 saat önce su banyosunda.
    NOT: Çubuklar suya batırılmalıdır. Deneyden önce bir termometre kullanarak dijital sıcaklık göstergesinin doğruluğunu kontrol edin.
  2. Bölüm 1'de belirtildiği gibi sıçanı anestezi altına alın.
  3. Sıçan tüm uzuvlarda ayak parmağı sıkışmasına yanıt vermediğinde, bakım için oksijende% 1.5 izofluran ile eğilimli bir konumda bir ısıtma yastığına yerleştirin (Şekil 2A).
  4. Ağrı yönetimi için intraperitoneal (i.p.) yoldan morfin ( 20 mg / kg vücut ağırlığı) enjekte edin6.
  5. Su banyosundaki suyun sıcaklığını kontrol edin. Zamanlayıcıyı ayarlayın ve ısıya dayanıklı eldivenleri giyin.
  6. Su banyosundan ısıtılmış bir bakır çubuğu çıkarın ve yanığı indüklemek için sıçanın dorsum bölgesine 7 s dokunun.
    NOT: Isı kaybını en aza indirmek için su banyosu ile hayvan arasında minimum bir mesafe (10-15 cm) tutun ve yanığı indüklerken çubuklara baskı uygulamayın (yani, temas yerçekimi ile korunmalıdır).
  7. Yanık bölgesi başına bir çubuk kullanarak, yaklaşık% 20 TBSA tam temaslı yanık üretmek için birbiri ardına dört yanık uygulayın (Şekil 2B).
  8. Yanıktan sonra, laktasyonlu Ringer çözeltisinin (0.1 mL / g vücut ağırlığı) i.p. enjeksiyonu ile hayvanı yeniden canlandırın.
    NOT: Sıçanları canlandırmak için vücut ısısı ayarlı laktasyonlu bir zil çözeltisi kullanın.
  9. İzofluranı kapatın, burun konisini çıkarın ve sıçanı iyileşme için ısı paspasının üzerine yerleştirin.

3. Bakteriyel inokulum ve enfeksiyonun hazırlanması

  1. Pseudomonas aeruginosa PAO1 ve Staphylococcus aureu'nunATCC25923'ün dondurulmuş örneğini, yanık deneyinden 2 gün önce Muller Hinton Agar (MHA) plakalarına çizin.
  2. Ertesi gün, plakadan tek bir yetişkin bakteri kolonisi seçin ve bir aşılama döngüsü kullanarak, plakadan hafifçe kazıyın. Daha sonra, 10 mL Muller Hinton Suyu (MHB) ve kültürü bir inkübatör çalkalayıcıda 37 ° C'de gece boyunca aşılamak için kültür tüpüne yerleştirin.
  3. Yanık ve enfeksiyon gününde, kültürü 5 dakika boyunca 4.000 × g'de santrifüj yapın. Pelet normal salin (% 0.9 NaCl çözeltisi) ile yıkayın.
  4. Bakteriyel peleti tuzlu suda yeniden askıya alın ve 0.1 OD 600nm'ye kadar seyreltin (600 nm'de optik yoğunluk). Bu bakteriyel süspansiyonun 200 μL'sini alarak ve istenen 2 × 107 CFU / mL'lik bakteriyel inokulumu elde etmek için 800 μL salin ile karıştırarak bakteriyel inokülumu seyreltin.
  5. Önceki adımda hazırlanan 50 μL P. aeruginosa veya S. aureu'nun inokülumunu(enfeksiyon dozu 1 × 106 CFU) yanıktan 15 dakika sonra anestezi altına alın, yanık yarasına mümkün olduğunca yakın bir şekilde deri altından 29 G'lık bir iğne kullanarak enjekte edin.
  6. Yanık yarasını enfekte ettikten sonra, sıçanı iyileşme için ısıtma yastığına yerleştirin. Hayvan iyileştikten sonra (~ 15-20 dakika), temiz bir kafeste saklayın.
    NOT: Yanık yaralanmasından sonra, kafes başına bir sıçan barındırın. Kolay çiğneme için su ıslak yiyecek peletleri kullanın ve kolay erişim için kafes zeminine yerleştirin.
  7. Ağrı yönetimi için kafesteki su şişelerini morfin çivili suyla (0.4 mg / mL) doldurun.
    NOT: Oral Morfin, insan yanığı hastalarındaki klinik durumu yansıtır. Bu çalışma, birçok kez veteriner personeline danıştıktan sonra bu deneyleri insan yanığı hastalarıyla karşılaştırılabilir tutmak için oral morfin kullanmıştır. Deney boyunca içme ve kilo günlükleri tutuldu. Tüm prosedürler sırasında aynı içme sistemini kullanın. Buprenorfin gibi diğer analjezikler, kurumsal hayvan bakım kılavuzlarına göre deri altından / intraperitoneal olarak uygulanabilir.
  8. İzleme kontrol listesini doldurun ve deney boyunca hayvanları sıkıntı veya hastalık açısından yakından izleyin.

4. Yanık yaralanmasının değerlendirilmesi

  1. Yanık yaralanmasından hemen sonra deri yanığı yaralanmasını morfolojik olarak renk ve marj açısından değerlendirin.
  2. Yanık yarasının yapısını ve epitel boşluğunu görselleştirmek için yanmış cildi hematoksilin ve eozin (H&E) ile lekeleyin15 (numune işleme için bkz. adım 5.6).

5. Sıçan örneklerinin sonradan işlenmesi ve bakteri sayımı

  1. Sıçanı aşırı dozda anestezi ile yanma sonrası 24, 48 ve 72 saatte ötenazileştirin.
  2. Kardiyak ponksiyon yoluyla sıçanlardan kan örnekleri alın ve bunları mini bir toplama tüpünde toplayın.
    1. Yanık indüksiyonunun konakçı bağışıklık sistemi üzerindeki etkisini belirlemek için kan örneklerinden tam kan sayımlarını analiz edin.
  3. Ötanazi sırasında cilt, deri altı dokusu, kas, akciğer ve dalak toplayın.
    NOT: H&E boyama için cildin bir kısmını (~1 cm × 1 cm; ~200-300 mg ağırlığında) ve bakteriyel numaralandırma için başka bir kısmını saklayın.
  4. Dokuları 10 mL'lik bir toplama tüpünde toplayın ve bakteri sayımı için buz üzerinde normal saline yerleştirin.
  5. Doku ağırlığını normal salin ile normalleştirin ve bir doku homojenizatörü kullanarak numuneleri homojenleştirin (bkz.
    1. Doku homojenatlarını normal salinle seri olarak seyreltin.
    2. P. aeruginosa ile enfekte sıçanlardan toplanan örnekler için setrimidli agar plakaları üzerindeki her doku örneğinin seyreltilmemiş homojenatının plakası ve her doku örneğinin tüm seyreltimlerinin plakaları 100 μL'dir.
      NOT: S. aureus ile enfekte olmuş sıçanlardan toplanan numuneleri kaplamak için mannitol agar plakaları kullanın.
    3. Plakaları 37 ° C'de bir inkübatörde 16-18 saat boyunca inkübe edin.
    4. Ertesi gün, plakalardaki bakteri kolonilerini sayın, CFU / mL sayısını elde etmek için seyreltme oranıyla çarpın ve CFU / g dokusunu hesaplamak için dokunun ağırlığı ile normalleştirin.
    5. Farklı organlardaki bakteri sayımlarını farklı örnekleme zaman noktalarında çizmek için veri analiz yazılımı kullanın.
  6. Yara yapısını ve epitel boşluğunu görselleştirmek için yanmış cildin H&E boyamasını gerçekleştirin.
    1. Makas ve dişli forseps kullanarak, yanık bölgesinden 1 cm x 1 cm'lik bir cilt yamasını kesin ve oda sıcaklığında 48 saat boyunca bir fiksatif (% 10 nötr tamponlu formalin, NBF) içine daldırın.
      NOT: Tüm dokuların fiksatif içine tamamen daldırıldığından emin olmak için kabı döndürün, fiksatif hacmi doku hacminin 30 katıdır.
    2. Cilt dokusunu oda sıcaklığında 72 saat boyunca% 70 (v / v) etanol ile dehidre edin.
    3. Bölümleri kesmek ve H&E 15 ile lekelemek için kurumuş numuneleri parafin bloklardaişleyin.
    4. 40x objektif kullanarak lekeli slaytları bir slayt tarayıcıda dijital olarak görüntüleyin ( Malzeme Tablosuna bakın).
    5. Taranan görüntüyü yazılım kullanarak analiz edin (analiz için görüntünün işlenmesi için Ek Dosya 1'e bakın; Malzeme Tablosu'na bakın).
    6. Epidermis, dermis, deri altı dokusu ve iskelet kasının durumunu değerlendirmek için lekeli cilt bölümünün tüm alanlarını inceleyin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada sunulan protokol oldukça tekrarlanabilir ve sıçanlarda üçüncü derece, tam kalınlıkta yanık hasarı ile sonuçlanmıştır. Yanık indüksiyonundan sonra yanık yarası mumsu beyaz görünür (Şekil 2B). Yanık yaralanmasının rengi, 72 saatlik yanma sonrası boyunca beyazdan kahverengiye değişmiştir (Şekil 2B-E).

Histolojik analiz, tam kalınlıkta bir yanığı doğruladı (derinlik > 24 saat yanma sonrası 2.61 ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yanık yaralanmasının patofizyolojisini incelemek için çeşitli yanık modelleri sunulmuştur 8,12,16,17. Bu çalışmada, hastalarda enfekte bir yanık travmasını simüle etmek için tam kalınlıkta bir yanığı indüklemek için basit ve tekrarlanabilir bir protokol geliştirmek için bir sıçan modeli kullandık. İnsan koşullarını taklit etmek için hayvan modeli olarak sıçanın seçimi, maliyet dengesine, kullan...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, hayvanların sağlanması ve bakımı için Kuzey Carolina Üniversitesi Karşılaştırmalı Tıp Bölümü'ne teşekkür eder. Lauren Ralph ve Mia Evangelista'ya Patoloji Hizmetleri Çekirdeği'nde, doku kesitleme ve görüntüleme de dahil olmak üzere Histopatoloji / Dijital Patoloji ile ilgili uzman teknik yardım için teşekkür ederiz. Bu araştırma, Savunma Bakanlığı'ndan bir araştırma hibesi ile desteklenmiştir (Ödül numarası W81XWH-20-1-0500, GR ve TV).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1 mL şırıngaBD, ABD309597Analjezik
1.7 mL MicrotubeOlympus, ABD24-282Morfin taşımak için kullanılır
%10 NBFVWR, ABD16004-115Lekelenme için cilt parçasını sabitlemek için kullanılır
30 mL şırıngaBD, ABD302832Laktat zil çözeltisini enjekte etmek için kullanılır
%70 etil alkolFischer Bilimsel, ABDBP28184
Aperio AT2 Dijital Patoloji  ImageScope yazılımı ile Slayt TarayıcıAperio, Technologies Inc., Vista, CA, ABDn / aH & Tarama E slaytlar ve analiz
Cetrimide agar plakalarıBD, ABD285420Pseudomonas aeruginosa büyümesi için seçici ortam
plakaları Bakır çubuklarn/an/aYanık yaralanmasını indüklemek için kullanılır
Pamuk uçlu aplikatörlerOMEGA Cerrahi malzeme, ABD4225-IMCGöz merhemi uygulamak için kullanılır
Elektrikli tıraş makinesiOster, ABDAltın A5Sırt tarafındaki tüyleri gidermek için kullanılır
Göz kayganlaştırıcıDechra, UKn/aUzun süreli rahatlık sağlamak ve göz kuruluğunu önlemek için göz ıslatma maddesi
Tüy dolgulu alt pedlerMedline, ABDMSC281225Yanık prosedüründe kullanılır
ForcepFST11027-12Cilt parçasını tutmak için kullanılır
Gazlı bez süngerlerOasis, ABDPK412Uygulanan nair kremini sırt tarafından temizlemek için kullanılır 
Isıya dayanıklı eldivenlern/an/aIsıtılmış bakır çubukları tutmak için kullanılır
Hematoloji AnalizIDEXX laboratuvarları, ABDProCyte Dx
İndüksiyon odasıKent Scientific, ABDvetFlo-0730Hayvanları uyuşturmak için kullanılır
İnsülin şırıngasıBD, ABD329461
IsofluranPivetal, ABDNDC46066-755-04Bilinç kaybına neden olmak için sıçanları uyuşturmak için kullanılır
İzofluran buharlaştırıcın/an/a
Laktasyonlu zil çözeltisiicumedical, ABDNDC0990-7953-09Sıçanları canlandırmak için kullanılır
L şeklinde yayıcıFischer Scientific, ABD14-665-230
Mannitol AgarBD, ABD211407Staphylococcus aureus growth
Minicollect tüpleri (K2EDTA)greiner bio-one, ABD450480Kan toplamak için kullanılır
MorfinMallinckrodt, İngiltereNDC0406-8003-30Bu analjezi, yanık yaralanması ağrısının hissedilememesini indüklemek için kullanıldı
Muller Hinton BrothBD, ABD275730
Muller Hinton II AgarBD, ABD211438
Nair epilasyon losyonuNair, ABDn/aSırt tarafında kalan tüyleri çıkarmak için kullanılır
İğne 23 GBD, ABDLaktat zil çözeltisini enjekte etmek için kullanılır
Normal salinn/an/a
SpektrofotometreThermoScientific, ABDGenesys 30
Sprague-Dawley sıçanları, erkek ve dişiCharles River Labsyanıkindüksiyonu için 7-9 haftalık
Cerrahi MakasFST14501-14İstenilen deri parçasını kesmek için kullanılır
Doku toplama tüpleriGlobe Scientific220101236
Doku HomojenizatörüKinematica, Inc, ABDPOLYTRON PT2100Doku örneklerini homojenize etmek için kullanılır
Su banyosuFischer Scientific, ABDn/aYanık yaralanmasını indüklemek için kullanılır
Ağırlıklı ısıtma yastığıComfytemp, ABDyokSıçanın vücudunu sıcak tutmak için işlem sırasında kullanılır
enjekte etmek için kullanılır Cihazı 305193

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Peck, M., Molnar, J., Swart, D. A global plan for burn prevention and care. Bulletin of the World Health Organization. 87, 802-803 (2009).
  2. American Burn Association. Burn incidence and treatment in the United States: 2011 fact sheet. Chicago: American Burn Association. , (2011).
  3. Miller, S. F., et al. National burn repository 2007 report: a synopsis of the 2007 call for data. Journal of Burn Care & Research. 29 (6), 862-870 (2008).
  4. Kruger, E., Kowal, S., Bilir, S. P., Han, E., Foster, K. Relationship between patient characteristics and number of procedures as well as length of stay for patients surviving severe burn injuries: analysis of the American Burn Association National Burn Repository. Journal of Burn Care & Research. 41 (5), 1037-1044 (2020).
  5. American Burn Association. Burn incidence and treatment in the United States: 2016. Burn Incidence Fact Sheet. Chicago: American Burn Association. , (2016).
  6. Willis, M. L., et al. Plasma extracellular vesicles released after severe burn injury modulate macrophage phenotype and function. Journal of Leukocyte Biology. 111 (1), 33-49 (2022).
  7. Kartchner, L. B., et al. One-hit wonder: late after burn injury, granulocytes can clear one bacterial infection but cannot control a subsequent infection. Burns. 45 (3), 627-640 (2019).
  8. Abdullahi, A., Amini-Nik, S., Jeschke, M. Animal models in burn research. Cellular and Molecular Life Sciences. 71 (17), 3241-3255 (2014).
  9. Cai, E. Z., et al. Creation of consistent burn wounds: a rat model. Archives of Plastic Surgery. 41 (4), 317(2014).
  10. Pessolato, A. G. T., dos Santos Martins, D., Ambrósio, C. E., Mançanares, C. A. F., de Carvalho, A. F. Propolis and amnion reepithelialise second-degree burns in rats. Burns. 37 (7), 1192-1201 (2011).
  11. Gurung, S., Škalko-Basnet, N. Wound healing properties of Carica papaya latex: in vivo evaluation in mice burn model. Journal of Ethnopharmacology. 121 (2), 338-341 (2009).
  12. Eloy, R., Cornillac, A. Wound healing of burns in rats treated with a new amino acid copolymer membrane. Burns. 18 (5), 405-411 (1992).
  13. Upadhyay, N., et al. Safety and healing efficacy of Sea buckthorn (Hippophae rhamnoides L.) seed oil on burn wounds in rats. Food and Chemical Toxicology. 47 (6), 1146-1153 (2009).
  14. El-Kased, R. F., Amer, R. I., Attia, D., Elmazar, M. M. Honey-based hydrogel: In vitro and comparative In vivo evaluation for burn wound healing. Scientific Reports. 7 (1), 1-11 (2017).
  15. Fan, G. -Y., et al. Severe burn injury in a swine model for clinical dressing assessment. Journal of Visualized Experiments. (141), e57942(2018).
  16. Davenport, L., Dobson, G., Letson, H. A new model for standardising and treating thermal injury in the rat. MethodsX. 6, 2021-2027 (2019).
  17. Kaufman, T., Lusthaus, S., Sagher, U., Wexler, M. Deep partial skin thickness burns: a reproducible animal model to study burn wound healing. Burns. 16 (1), 13-16 (1990).
  18. Casal, D., et al. Blood supply to the integument of the abdomen of the rat: a surgical perspective. Plastic and Reconstructive Surgery Global Open. 5 (9), (2017).
  19. Casal, D., et al. A model of free tissue transfer: the rat epigastric free flap. Journal of Visualized Experiments. (119), e55281(2017).
  20. Naldaiz-Gastesi, N., Bahri, O. A., Lopez de Munain, A., McCullagh, K. J., Izeta, A. The panniculus carnosus muscle: an evolutionary enigma at the intersection of distinct research fields. Journal of Anatomy. 233 (3), 275-288 (2018).
  21. Weber, B., et al. Modeling trauma in rats: similarities to humans and potential pitfalls to consider. Journal of Translational Medicine. 17 (1), 1-19 (2019).
  22. Nguyen, J. Q. M., et al. Spatial frequency domain imaging of burn wounds in a preclinical model of graded burn severity. Journal of Biomedical Optics. 18 (6), 066010(2013).
  23. Sobral, C., Gragnani, A., Morgan, J., Ferreira, L. Inhibition of proliferation of Pseudomonas aeruginosa by KGF in an experimental burn model using human cultured keratinocytes. Burns. 33 (5), 613-620 (2007).
  24. Olivera, F., Bevilacqua, L., Anaruma, C., Boldrini Sde, C., Liberti, E. Morphological changes in distant muscle fibers following thermal injury i n Wistar rats. Acta Cirurgica Brasileira. 25, 525-528 (2010).
  25. Davies, J. W. Physiological Responses to Burning Injury. , Academic Press. (1982).
  26. Neely, C. J., et al. Flagellin treatment prevents increased susceptibility to systemic bacterial infection after injury by inhibiting anti-inflammatory IL-10+ IL-12-neutrophil polarization. PloS One. 9 (1), e85623(2014).
  27. Dunn, J. L., et al. Direct detection of blood nitric oxide reveals a burn-dependent decrease of nitric oxide in response to Pseudomonas aeruginosa infection. Burns. 42 (7), 1522-1527 (2016).
  28. Gouma, E., et al. A simple procedure for estimation of total body surface area and determination of a new value of Meeh's constant in rats. Laboratory Animals. 46 (1), 40-45 (2012).
  29. Dawson, N. The surface-area/body-weight relationship in mice. Australian Journal of Biological Sciences. 20 (3), 687-690 (1967).
  30. Moins-Teisserenc, H., et al. Severe altered immune status after burn injury is associated with bacterial infection and septic shock. Frontiers in Immunology. 12, 529(2021).
  31. Robins, E. V. Immunosuppression of the burned patient. Critical Care Nursing Clinics. 1 (4), 767-774 (1989).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Tam Kat Yan kYan k Yaras EnfeksiyonuYan k Olu turma Y ntemiBakteriyel EnfeksiyonYara yile mesiPseudomonas AeruginosaStaphylococcus AureusTopikal Antibiyotik TestiHistoloji Analizi

İlgili makaleler