Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Mekanik Havalandırmalı Domuz Yavrularında Glomerüler Filtrasyon Hızının Transdermal Ölçümü

3.8K görüntülenme

DOI:

10.3791/64413

13 Eylül 2022

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Glomerüler filtrasyon hızı (GFR), böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için ideal bir belirteçtir. Bununla birlikte, seri kan ve idrar analizi ile inülin enjeksiyonu kullanan standart ölçüm yöntemi pratik değildir. Bu makalede, domuz yavrularında GFR'yi transdermal olarak ölçmek için pratik bir yöntem açıklanmaktadır.

Özet

Glomerüler filtrasyon hızının (GFR) transdermal ölçümü, bilinçli hayvanlarda böbrek fonksiyonlarını değerlendirmek için kullanılmıştır. Bu teknik, akut böbrek hasarı ve kronik böbrek hastalığını incelemek için kemirgenlerde iyi kurulmuştur. Bununla birlikte, transdermal sistemi kullanan GFR ölçümü, insanlara benzer bir böbrek sistemine sahip bir tür olan domuzlarda doğrulanmamıştır. Bu nedenle, anestezi uygulanan ve mekanik olarak ventilasyona tabi tutulan yenidoğan domuzlarında sepsisin transdermal GFR üzerine etkisini araştırdık. Polimikrobiyal sepsis, çekal ligasyon ve ponksiyon (CLP) ile indüklendi. Minyatür bir floresan sensöründen oluşan transdermal GFR ölçüm sistemi, intravenöz olarak enjekte edilen bir GFR izleyici olan floresein-izotiyosiyanat (FITC) konjuge sinistrinin temizlenmesini belirlemek için domuzun traşlı derisine bağlandı. Sonuçlarımız, CLP sonrası 12 saat sonrasında, GFR'de bir azalma ile serum kreatinininin arttığını göstermektedir. Bu çalışma, ilk kez, mekanik olarak ventilasyona tabi tutulan yenidoğan domuzlarında böbrek fonksiyonunun belirlenmesinde transdermal GFR yaklaşımının yararlılığını göstermektedir.

Giriş

Böbrek fonksiyonunun pratik ve kantitatif bir değerlendirmesi, böbreklerin klirens prensibi1'e dayanarak kanı ne kadar iyi filtrelediğini söyleyen glomerüler filtrasyon hızı (GFR) ölçümüdür. GFR'yi ölçmenin daha önceki bir yöntemi, inülin veya sinistrin gibi eksojen bileşiklerin intravenöz enjeksiyonunu gerektirir ve klirenslerini tespit etmek için plazma / idrar seviyelerinin seri ölçümlerini yapar 2,3. Bu yöntem hantaldır, plazma ve idrar örneklerinin seri toplanmasını gerektirir4. Bir alternatif, kreatinin gibi endojen metabolik son ürünlerin ölçümüdür. Bununl....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Prosedürler, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için ulusal standartlara göre yazılmıştır ve Tennessee Üniversitesi Sağlık Bilimleri Merkezi (UTHSC) Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.

NOT: Deney grubundaki domuz yavruları çekal ligasyonuna ve delinmeye maruz kalırken, sahte grup sadece çekal ligasyonu veya delinmesi olmadan karın açılmasına maruz kalır. Her iki gruptaki domuz yavruları, deney grubunda sepsis ve akut böbrek hasarının (AKI) ortaya çıkması için yeterli zaman tanımak amacıyla işlem sonrası 12 saat boyunca anestezi altında tutulur. Transdermal GFR ölçümü işlem sonrası 8 saat....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bu bölümde, yenidoğan domuzlarda transdermal GFR kullanımından elde edilen temsili verileri ilk kez sunuyoruz. Daha önce böbrek fonksiyonlarını azalttığı gösterilen bir çekal ligasyon ve ponksiyon modeli kullandık28. Buna göre, CLP domuzlarımızda, GFR'de AKI'ya karşılık gelen akut bir düşüş olması gerektiğini ve bunun transdermal GFR cihazında artan boşluk süresi (t1/2) olarak tespit edilmesi ve böylece domuzlarda kullanımının doğrulanması gerektiğini varsaydık. Yedi erkek domuz yavrusu.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu yazıda, minyatür transdermal GFR monitörleri ve mekanik olarak havalandırılan, anestezi uygulanmış yenidoğan domuz modelinde FITC-sinistrin kullanılarak domuzlarda böbrek fonksiyonunu belirlemenin pratik adımları açıklanmaktadır. Önceki makaleler11,12,14 kemirgenlerinde deneysel transdermal GFR protokolleri oluşturmuştur, ancak domuzlarda protokol yoktur.

Son zamanlarda, inatçı hastalıkları çözmek .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Hiç kimse.

Teşekkürler

Bu çalışma, Dr. Adebiyi'ye verilen Ulusal Sağlık Enstitüleri R01 DK120595 ve R01 DK127625 hibeleri ile desteklenmiştir. Bu makalenin içeriği yalnızca yazarların sorumluluğundadır ve Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir. MediBeacon GmbH Saha Direktörü Dr. Daniel Schock-Kusch'a tavsiyeleri için teşekkür ederiz.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Alfa - KloralozSigma-AldrichC0128-25GBakım anestezisi için kullanılır
Siyah örgülü ipek ve 3-0Cerrahi UzmanlıklarSP117Kan damarı çekişi ve ligasyonu için ipek kravat
Santrifüj makinesi AccuSpin 8CFischer Scientific75-008-821Tam kan örneğinden plazma çıkarmak için kullanılır
Endotrakeal Tüp 3.0 kelepçesizProgressive Medical International1109021995Trakeostomi yoluyla yerleştirilir
FITC-Sinistrin 1.0 gMediBeacon Inc.FTCF S001Oda sıcaklığında saklayın ve ışıktan koruyun
GEM Premier 3000 Kan gazıanalizörü Enstrümantasyon Laboratuvarı5700Yatak başı kan gazı analizi için
Isıtma Yastığı orta boy 20 inç x 29Adroit Medical SystemsV029'daIsı işlem pompasına bağlanır
HTP-Isı Terapi PompasıAdroit Medical SystemsHTPSıcaklığı gerektiği gibi ayarlamanıza olanak tanır.
IDEXX Catalyst OneIDEXX Laboratuvarları89-92525-00Plazma kreatinin analizi
İnvaziv kan basıncı kateteri 3.5FrMillarSPR-524
Akış regülatörlü femoral arter IV uygulama setineTrue CareTCRTCBINF033GIV sıvı torbasını ven kateterine bağlamak için kullanılır
KetaminCovetrus68317Anestezi indüksiyonu için kullanılır
MediBeacon analiz yazılımı sürüm 3.0MediBeacon Inc.N / ASinistrin klerensi, yarı ömür ve eğri elde etmek için verileri analiz etmek için kullanılan yazılım programı
Millex-GV Şırınga Filtre Ünitesi 0.22 & mikro; mMillipore SigmaSLGVR33RSKloroz enjeksiyonu için şırınga filtresi
Yenidoğan/Bebek VentilatörüSechrist Millennium20409Endotrakeal tüp yoluyla ventilasyon sağlamak için hava beslemesine bağlı
Fenobarbital Sodyum + Fenitoin Sodyum (Euthasol)Covetrus72934Ötenazi için kullanılır
Ringer Laktat 500 mL torbaBaxter2B2323QBakım sıvısı infüzyonu
Steril EldivenlerHenry Schein104-5920Ameliyat sırasında operatör tarafından kullanılır
Steril ÖnlükHalyard Health95021Ameliyat sırasında operatör tarafından kullanılır
Steril HavluMedline42131704Ameliyat sırasında steril alanı korumak için örtü olarak kullanılır
Sütür 3-0 ipek ters kesme iğnesiEthiconNC1842168Karın duvarı katmanlarını dikmek için kullanılır
Transdermal Mini GFR MonitörüMediBeacon Inc.TDM004Pil ve USB konektörü pakete dahildir
Transdermal monitör yapışkan yamaMediBeacon Inc.PTC-SM001GFR probu için çift taraflı yapışkan yama
Göbek Bandı 1/8 inç x 20 ydsFisher ScientificNC9303017Endotrakeal tüpü sabitlemek için
Venöz Kateter boyutu PE / 5Femoral ven kanülasyonu içinmikro tıbbi boruBB31695
XylazineCovetrus61035Anestezi indüksiyonu için kullanılır
yerleştirilir

Kaynaklar

  1. Pasala, S., Carmody, J. B. How to use... serum creatinine, cystatin C and GFR. Archives of Disease in Childhood Education and Practice Edition. 102 (1), 37-43 (2017).
  2. Smith, H. W. The Kidney: Structure and Function in Health and Disease. , Oxford Universit....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Transdermal GFRAkut Böbrek HasarıKronik Böbrek HastalığıFITC-Sinistrin KlirensiSekal Ligasyon PunksiyonuRenal Fonksiyon DeğerlendirmesiSepsis ModeliFloresan Sensör