Bu protokol, superior servikal ganglionu tanımlayarak ve rezeke ederek adrenerjik innervasyonun ablasyonunun bir fare modelini tanımlamaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir Murin Modelinde Superior Servikal Ganglionektomi için Cerrahi Teknik
Bu makalede
Özet
Özet
Artan kanıtlar, sempatik sinir sisteminin kanserin ilerlemesinde önemli bir rol oynadığını göstermektedir. Adrenerjik innervasyon tükürük bezi sekresyonunu, sirkadiyen ritmi, makula dejenerasyonunu, bağışıklık fonksiyonunu ve kalp fizyolojisini düzenler. Murin cerrahi sempatektomi, tekrarlanan farmakolojik müdahale ve ilişkili yan etkilere ihtiyaç duyulmadan tam, tek taraflı adrenerjik ablasyona izin vererek adrenerjik innervasyonun etkilerini incelemek için bir yöntemdir. Bununla birlikte, farelerde cerrahi sempatektomi, superior servikal ganglionun küçük boyutu nedeniyle teknik olarak zordur. Bu çalışma, sempatik sinir sistemini ablate etmek için superior servikal ganglionu güvenilir bir şekilde tanımlamak ve rezeke etmek için bir cerrahi tekniği tanımlamaktadır. Ganglionun başarılı bir şekilde tanımlanması ve çıkarılması, floresan sempatik gangliyonların transgenik bir fare kullanılarak görüntülenmesi, rezeksiyon sonrası Horner sendromunun tanımlanması, rezeke edilen gangliyonlarda adrenerjik belirteçlerin boyanması ve sempatektomiyi takiben hedef organlarda azalmış adrenerjik immünofloresansın gözlemlenmesiyle doğrulanır. Bu model, sempatik sinir sistemi tarafından düzenlenen diğer fizyolojik süreçlerin yanı sıra kanser ilerlemesinin gelecekteki çalışmalarını mümkün kılar.
Giriş
Çok sayıda çalışma, tümör mikroçevresindeki sinirlerin tümör ilerlemesini desteklemede aktif bir rol oynadığını bildirmiştir. Adrenerjik sempatik sinirlerin ablasyonunun prostat ve mide kanserinde in vivo 1,2,3'te tümör gelişimini ve yayılımını bozduğu gösterilirken, adrenerjik reseptörlerin farmakolojik blokajı baş ve boyun kanserinde tümör büyümesini inhibe eder4. Sempatik nöral tutulum pankreas, servikal ve bazal hücreli karsinom progresyonunda da tanımlanmıştır 5,6,7
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Burada açıklanan hayvan prosedürleri, Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır. Burada sekiz haftalık erkek ve dişi NSG fareleri kullanıldı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bkz. Aletler sterilize edilir, cerrahi çalışma yüzeyi dezenfekte edilir, hayvanın cilt yüzeyi dezenfekte edilir ve cerrah işlem boyunca steril eldiven giyer.
1. Farelerin hazırlanması ve ameliyat öncesi kurulum
- Ameliyattan önceki gün, fareyi bir indüksiyon odasında% 2 izofluran ile uyuşturun (3.75 inç genişlik x 9 derinlik x 3.75 yüksekli....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Bu protokol, bir fare modelinde SCG'nin cerrahi olarak çıkarılmasını açıklar. Şekil 2 , CCA, anterior juguler ven ve SCG dahil olmak üzere anatomik işaretleri göstermektedir. Diseksiyonda (Şekil 2A), sağ anterior juguler ven trakeanın lateral sınırı boyunca uzanırken görülebilir. Anterior juguler venden daha derinde yer aldığından, sol CCA ve bunun internal karotis arter (İKA) ve eksternal karotis artere (ECA) bifurkasyonu venin lateralinde sadece belli belirsiz.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu protokol, SCG girişinin cerrahi tek taraflı ablasyonu için bir fare modelini açıklar. Bu teknik, çeşitli ortamlarda adrenerjik innervasyonun etkilerini incelemeye izin verir. Ek olarak, rezeke edilen sempatik ganglion, in vitro deneyler için 3D matrigel kültüründe de büyütülebilir30.
SCGx ile ilgili çalışmalar çoğunlukla sıçanlarda gerçekleştirilmiştir, çünkü daha büyük anatomileri daha kolay anatomik görselleştirme ve diseksiyona izin verir. Farelerde SCGx .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Teşekkürler
Q. W., NIH T32CA009685 tarafından desteklendi. R. J. W., NIH R01CA219534 tarafından desteklendi. Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi Çekirdek Tesisleri, NIH P30CA008748 tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Anti-Tirozin Hidroksilaz Antikoru | EMD Millipore | AB152 | |
| Yapay Gözyaşı Yağlayıcı Oftalmik Merhem | Akorn | 59399-162-35 | |
| Curity 2 x 2 İnç Gazlı Bez Sünger 8 Katlı, Steril | Covidien | 1806 | |
| Derf İğne Tutucu | Thomas Scientific | 1177K00 | |
| Diseksiyon Mikroskobu | |||
| Dumont #5/45 Forseps | Güzel Bilim Araçları | 11251-35 | |
| Dumont #7b Forseps | Güzel Bilim Araçları | 11270-20 | |
| ETHILON Naylon Sütür | Ethicon | 698H | |
| İnce Makas - ToughCut | Fine Science Tools | 14058-09 | |
| Hipoalerjenik Cerrahi Bant | 3M Blenderm | 70200419342 | |
| İndüksiyon Hazne, 2 Litre | VetEquip | 941444 | |
| Isofluran | Baxter | 1001936060 | |
| Nair | Kilisesi & Dwight Co., Inc | 40002957 | kimyasal epilasyon ajanı |
| NORADRENALIN ARAŞTIRMASI ELISA | Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics) | BA E-5200 | |
| NSG Mouse | Jackson Laboratory | JAX:005557 | |
| Povidon-İyot Swabstick | PDI | S41350 | |
| Webcol Alkol Hazırlıkları | Covidien | 5110 |
Kaynaklar
- Magnon, C., et al. Autonomic nerve development contributes to prostate cancer progression. Science. 341 (6142), 1236361(2013).
- Zhao, C. M., et al. Denervation suppresses gastric tumorigenesis. Science Translational Medicine. 6 (250), 115(2014....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
