Bir tıklama serisine ABR dalga formu tepkileri üzerindeki rutinleri, 75 dB'den başlayıp 5 dB'lik artışlarla 5 dB'ye düşürerek test ettik. Bu veriler daha önce açıklandığı gibi elde edilmiştir19. Ayrıca aracı ton pip verileri üzerinde test ettik ve benzer sonuçlar elde ettik. Çoğu ABR sisteminden gelen ABR verileri, .txt (ASCII) dosyaları olarak dışa aktarılabilir. ABR ASCII dosyalarını bir bilgisayara yükledik ve protokolde açıklandığı gibi RStudio'da açtık. FindPeaks.R rutinini toplu halde çalıştırdıktan sonra, otomatik etiketlemeli örnek dalga formları (Şekil 1) ve sonuçları içeren bir .csv dosyası elde ettik. Sonuçlar, alakasız zirveleri kaldırmak için gözden geçirildi. Otomatik etiketlemeyi doğrulamak için, yukarıda açıklanan tıklama serisiyle elde edilen her dalga formundaki ilk beş tepe noktasını ve oluğu manuel olarak etiketlemek için ABR programı özelliğini de kullandık. Bu görevi yerine getiren deneyci, ABR verilerini kaydetme ve analiz etme konusunda 2 yıllık deneyime sahipti. Şekil 2 , otomatik FindPeaks.R verileri kırmızı ve manuel olarak elde edilen veriler siyah ile bu karşılaştırmayı göstermektedir. Her izleme, tek bir fareden gelen verileri temsil eder. Bir standart sapmaya sahip her iki yöntemin ortalaması da görüntülenir. FindPeaks.R tarafından elde edilen sonuçlar, manuel olarak elde edilen sonuçlarla güçlü bir şekilde ilişkilidir (bakınız Ek Şekil S4).

Resim 1: Genç bir F1 faresi için 75 dB'lik bir tıklama uyaranına temsili dalga formu tepkisi. Milisaniye cinsinden gecikme x ekseninde çizilir ve mikrovolt cinsinden genlik y ekseninde çizilir. Zirveler otomatik olarak FindPeaks.R ile tanımlanır ve kırmızı renkle etiketlenirken, oluklar mavi renkle etiketlenir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Şekil 2: Manuel olarak tanımlanan piklerden elde edilen verilerin FindPeaks.R analizi tarafından sağlanan verilerle karşılaştırılması. (A,C,E,G,I) Mikrovoltlardaki genlikler ve milisaniyelerdeki (B,D,F,H,J) gecikmeler, 12 fareye sunulan tıklama uyaranları için elde edilen dalga formlarında I-V pikleri için 5 dB ile 75 dB (x ekseni, tüm grafikler) arasındaki ses seviyeleri için çizilmiştir. El ile elde edilen değerler (siyah), FindPeaks.R (kırmızı) ile analiz edilen veri kümeleriyle karşılaştırılır. Ortalamalar ağır çizgiler olarak çizilir ve gölgeli bölge bir standart sapmayı temsil eder. Kruskal-Wallis sıralama toplamı testi ile değerlendirildiğinde yöntemler arasında fark görülmemiştir (A, fark = 0.0547977 ± 0.0010028, max = 0.96, p = 0.9216; B, fark = −0.0001734 ± 0.0001214, maksimum = 0.04, p = 0.8289; C, fark = −0212209 ± 0,0006806, maksimum = 0,92, p = 0,9687; D, fark = −0,0011047 ± 0,0001556, maksimum = 0,06, p = 0,771; E, fark = −0323077 ± 0,0006169, maksimum = 0,66, p = 0,899; F, fark = −0,0072189 ± 0,0001460, maksimum = 0,04, p = 0,8644; G, fark = 0,201754 ± 0,0007407, maksimum = 0,64, p = 0,9312; H, fark = −0,0007018 ± 0,0001717, maksimum = 0,09, p = 0,8013; I, fark = 0,0347561 ± 0,0007343, maksimum = 1,05, p = 0,8856; J, fark = −0.0078049 ± 0.0002762, max = 0.16, p = 0.886) ve sonuçlar yüksek oranda korelasyonluydu (ki-kare değerleri: A, 0.009696; B, 0,046684; C, 0,0015395; D, 0,084742; E, 0,016102; F, 0,029153; G, 0,0074604; H, 0,063322; I, 0.020699; J, 0.020544; ortalama SEM ± olarak sunulan farklılıklar; max = mutlak maksimum fark). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Ek Şekil S1: FindPeaks.R. ile Analiz (A) Çalışma dizinini seçme (bkz. protokol adım 3.2); (B) programın yüklenmesi (bkz. protokol adım 3.3). Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Ek Şekil S2: Dalga formlarının analizi için komut dosyası çıktısı ve komutları. (A) tek tek dosyalar ve (B) toplu işleme için komutlar. (C) Etiketli tepe noktaları ve oluklarla dalga formlarını gösteren çıktı PDF dosyası. Bkz. protokol adımı 3.4. Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Ek Şekil S3: Analizin doğrulanması. (A) Dalga formu verilerinin yüklenmesi (bkz. protokol adım 4.1). (B) Uygulamayı Çalıştır düğmesinin konumu. Örnek veri dosyası da belirtilmiştir. (C) Dalga biçimli parlak pencere. Bu durumda, ses seviyesi üst pencereye girildiği gibi 75 dB'dir. İstenilen bir tepe noktasına ve aşağıdaki oluğa tıklandığında, genlik ve gecikme süresi verileri tabloya kaydedilir (protokol adımı 4.6). Tepe 3 verileri gösterilir. Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.
Ek Şekil S4: Manuel olarak tanımlanan piklerden elde edilen bireysel verilerin FindPeaks.R analizi tarafından sağlanan verilerle karşılaştırılması. (A,C,E,G,I) Milisaniyelerdeki mikrovolt genlikleri ve (B,D,F,H,J) gecikmeleri, 12 fareye sunulan tıklama uyaranları için elde edilen dalga formlarında I-V zirveleri için 5 dB ile 75 dB (x ekseni, tüm grafikler) arasındaki ses seviyeleri için çizilir. Her hayvan, efsanede gösterildiği gibi benzersiz bir renkle etiketlenmiştir. FindPeaks.R ile elde edilen veriler düz renklerle etiketlenirken, manuel olarak elde edilen veriler aynı renklerin daha az doygun versiyonlarıyla etiketlenir. Her iki veri kümesi de bu şekilde çizilmiş olsa da, aynı olduklarında, yalnızca bir satır belirgindir. Bu Dosyayı indirmek için lütfen tıklayınız.