Method Article

Alzheimer'da İp Gömülü Akupunktur Tedavisinin Çalışma Prosedürü ve Önlemleri

DOI:

10.3791/65895

⸱

May 10th, 2024

 ,  ,  ,  ,  , 
1College of Acupuncture and Orthopedics, Hubei University of Chinese Medicine, 2Hubei Shizhen Laboratory, 3Hubei International Science and Technology Cooperation Base of Preventive Treatment by Acupuncture and Moxibustion, 4Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Alzheimer hastalığı benzeri sıçanlarda iplik gömülü akupunktur tedavisi için bir protokol sunmaktadır.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İplik gömme tedavisi (TEAT), bir akupunktur noktasına biyolojik olarak parçalanabilen bir sütür yerleştirerek hastalıkları önleyen ve yöneten, uzun süreli stimülasyon sağlayan bir tedavidir. TEAT, düzenli akupunkturun verdiği rahatsızlığı önleyen ve sürekli terapötik etkiler sağlayan basit bir yaklaşımdır. Bu makale, TEAT'ın Alzheimer hastalığı benzeri semptomları olan sıçanların öğrenme ve hafıza yetenekleri üzerindeki potansiyel etkisini tartışmaktadır. Sıçanlarda kimyasal olarak indüklenen nöronal dejenerasyon ve bilişsel bozukluklar, Alzheimer hastalığında gözlenen gerçek patolojik değişiklikleri tamamen yansıtmadığından. Sonuç olarak, araştırma grubumuz bu belirtileri Alzheimer hastalığı benzeri semptomlar olarak belirlemiştir. Akupunktur noktalarının seçimini, ameliyat sürecini ve baş ve alt sırt için gerekli önlemleri ana hatlarıyla belirtmek için bir protokol oluşturulmuştur. Deney üç grup üzerinde gerçekleştirildi: her biri 6 sıçan içeren bir kontrol grubu, bir model grubu ve bir TEAT grubu. Alzheimer hastalığı benzeri semptomları indüklemek için, sıçanlara 7 hafta (49 gün) boyunca intraperitoneal olarak D-galaktoz enjekte edildi. TEAT grubundaki sıçanlara akupunktur noktası katgüt gömme tedavisi uygulandı. Müdahale süresinin ardından, sıçanların öğrenmesini ve hafızasını değerlendirmek için bir Morris Su Labirenti (MWM) gerçekleştirildi. Daha sonra sıçanlar sakrifiye edildi ve beyin dokuları incelendi. Alzheimer hastalığının semptomlarını sergileyen sıçanların patolojisi üzerindeki TEAT'ın etkilerini anlamak için histolojik bir inceleme yapıldı. Bu çalışma, TEAT'ın Alzheimer hastalığı benzeri semptomları olan sıçanlarda öğrenmeyi ve hafızayı iyileştirebileceğini ve bu nörodejeneratif durum için potansiyel olarak umut verici yeni bir tedavi yaklaşımına işaret ettiğini düşündürmektedir.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İplik gömmeli akupunktur (TEA), katgüt veya emilebilir sütürlerin özel bir iğne kullanılarak akupunktur noktalarına yerleştirilmesini içerir. Bu teknik, dikişler emilene ve bozulana kadar uzun süreli bir etkiye sahiptir. Akupunktur noktalarına bir hafta veya daha uzun süre sürekli ve sürekli stimülasyon sağlar1, günlük tekrarlayan prosedürlere gerek kalmadan karşılaştırılabilir bir sonuç elde eder2. Bu, tıbbi tedavi arayan hasta sayısını azaltır, böylece tıbbi kaynakları bir dereceye kadar korur. Son yıllarda TEAT, Çin'de dahiliye, dış tıp, dermatoloji, yüz özellikleri, jinekoloji ve pediatri dahil olmak üzere çeşitli tıbbi alanlarda giderek daha fazla kullanılmaktadır3. Çalışmalar, epilepsi4 ve fasiyal sinir felci5 gibi bazı kronik ve karmaşık hastalıklar için uzun vadeli ve güvenilir etkiler üretmede etkili olduğunu göstermiştir. Minimal travma ve basit operasyon avantajlarına sahiptir6. Ek olarak, TEAT'ın tedavi maliyetlerinin elektroakupunkturdan (EA) daha düşük olduğu bildirilmiştir7. Bu nedenle, TEAT klinik ve bilimsel araştırmalarda giderek daha değerli hale gelmektedir.

Alzheimer hastalığı (AD), zamanla ilerleyen nörodejeneratif bir durumdur. Patofizyolojik süreci, klinik semptomların ortaya çıkmasından yaklaşık 20 yıl önce birikmeye başlar, ancak mekanizması hala tam olarak anlaşılamamıştır8. AH için etkili ilaçların sınırlı mevcudiyeti göz önüne alındığında, araştırmalar giderek daha fazla hastalığın prodromal ve preklinik aşamalarına odaklanmaktadır9. Önleme, MS 9,10'un gelişimini ve ilerlemesini ele almak için çok önemli bir stratejidir. Son yıllarda, geleneksel Çin tıbbı (TCM) önemli ilerleme kaydetmiştir ve AD11,12'yi önlemek ve tedavi etmek için yeni olanaklar sunması beklenmektedir. Akupunkturun bir alt tipi olan TEAT, geniş tedavi yelpazesi, minimal travma, basit operasyon, düşük tedavi sıklığı ve uzun süreli etkinliği nedeniyle diğer tedavilere göre tercih edilmektedir6. Gelişmekte olan literatür, TEAT'ın obezite 13,14, diyabet15, uykusuzluk16, postmenopozal osteoporoz17 ve depresyon 18 olan bireylere fayda sağlayabileceğini ve bunların tümünün AH için risk faktörleri olduğunu göstermektedir. Aynı zamanda mitofaji2'yi düzenleyerek yaşlanan sıçanlarda yaşlanmayı iyileştirir, uzamsal öğrenmeyi ve hafıza bozukluğunu iyileştirir, hipokampusun patolojik hasarını hafifletir ve vasküler demans (VD) sıçanlarında iltihaplanma yanıtını inhibe eder19. TEAT'ın AD sırasında patolojik süreçler üzerinde de etkili olup olmadığını anlamak çekici görünüyordu.

Mevcut araştırma, gömme yöntemi, gömme aracı, iplik ve gömme aralığı süresi dahil olmak üzere TEAT operasyonunun birçok kritik unsurunda tekdüzelik ve standardizasyondan yoksundur. Bu standardizasyon eksikliği, tedavinin etkisinin değerlendirilmesini ve ilgili mekanizmaların araştırılmasını etkilemekte ve dış tanıtım ve iletişimi kısıtlamaktadır. Önceki araştırmalar20,21, D-galaktozun (D-gal) intraperitoneal uygulamasının, nöronal dejenerasyon ve bilişsel bozukluklar dahil olmak üzere sıçanlarda Alzheimer hastalığı benzeri patolojik değişikliklere neden olabileceğini göstermiştir. Ayrıca, Baihui (GV20) ve Shenshu'daki (BL23) elektroakupunkturun bilişsel gerilemeyi etkili bir şekilde iyileştirdiği, nöroinflamasyonu hafiflettiği ve nöronal hasarı azalttığı gösterilmiştir. Bu çalışmada Alzheimer hastalığı benzeri model sıçanlar örnek alınarak, akupunktur noktalarının seçimi ve bu model altında TEAT'ın operasyon süreci ve önlemleri tanıtılmıştır. Gelecekteki çalışmalar için bir referans sağlamak amacıyla deneysel araştırmalarda TEAT'ın kritik operasyonel unsurlarını tartışır.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm deneyler, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri Rehberi'ne uygun olarak gerçekleştirildi ve Hubei İl Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi Laboratuvar Hayvanları Yönetimi ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı. Test için 220-250 g ağırlığında toplam 18 adet 3 aylık dişi Sprague-Dawley (SD) sıçan kullanıldı. Tüm sıçanlar, 23 ± 1 ° C'de ve% 40 -% 50 nemde 12 saatlik bir aydınlık / karanlık döngüsünde, yiyecek ve suya ücretsiz erişim ile tutuldu. Sıçanların laboratuvar koşullarına alışmalarına izin verilen bir haftalık bir iklimlendirme döneminin ardından deneyler başlatıldı.

1. Model geliştirme

  1. Deney tasarımı Şekil 1'de gösterilmiştir. 220-250 g ağırlığındaki 18 adet Sprague-Dawley 3 aylık dişi sıçanı rastgele kontrol, model ve meme başı gruplarına bölün. Her grup 6 sıçandan oluşur.
  2. Model grubuna ve TEAT grubuna günlük olarak D-galaktoz (D-gal; 120 mg / kg / gün) enjekte edilirken, kontrol grubu alt ventral bölgede 7 hafta (49 gün) boyunca salin enjeksiyonları (120 mg / kg / gün) alır22. Enjeksiyon her gün sabah 8:00 ile 9:00 arasında uygulanmalıdır.
  3. Fareleri her haftanın 7. günü sabah 9:00 ile 10:00 arasında tartın. Deney 49 gün sürdü. İplikleri her 14 günde bir 14., 28. ve 42. günlerde gömün. Her iş parçacığı yerleştirme saatini 9:00-12:00 arasında sabitleyin.
  4. Sıçanlarda Alzheimer hastalığına bağlı patolojik belirtileri indüklemek için 7 hafta boyunca D-galaktozun intraperitoneal uygulamasına devam edin22.

2. TEAT için Hazırlık

  1. Oftalmik makas, tepsi ve cımbız gibi cerrahi aletleri sterilize edin ve dezenfekte edin. Ameliyathane ortamındaki yüzeyleri detaylı bir şekilde temizleyin ve dezenfekte edin.
  2. Yüzeye düz bir şekilde küçük bir hayvan ısıtma yastığı sererek ve ardından steril bir havluyla örterek cerrahi platformu hazırlayın. Ardından, temizlenmiş ve dezenfekte edilmiş işletim kartını, pürüzlü tarafı yukarı bakacak şekilde düzgün bir şekilde üstüne yerleştirin. Ardından ısıtma yastığını açın ve sıcaklığı 32 °C'ye ayarlayın.
  3. İşlem için 0,6 mm çapında 6 numaralı tek kullanımlık iplik gömme iğnesi ve 2 cm uzunluğunda 5-0 emilebilir cerrahi sütür (kollajen sütür) seçin. 2 cm 5-0 emilebilir cerrahi ipliği oftalmik makas kullanarak 0,5 cm ve 0,2 cm'lik parçalar halinde kesin. Kesilen ipliği% 0,9 tuzlu suya batırın ve bir kenara koyun.
  4. Ellerinizi 20 saniye boyunca sabun ve suyla yıkayın ve ardından kurulayın. Daha sonra steril eldiven giyin.
  5. Sıçanları alt ventral bölgede bir IP kloral hidrat (300 mg / kg) enjeksiyonu ile uyuşturun, hayvanlar cerrahi bir düzlemde yanıt vermediğinde, ayak parmağı tutam testinden yanıt alınmamasına bağlı olarak anestezinin doğrulanmasını sağlayın ve stabil bir fizyolojik durumu koruyun. Ek olarak, sıçanlar anestezi altındayken kornea kuruluğunu ve olası hasarı önlemek için, gözlere bol miktarda veteriner merhemi sürün ve işlem boyunca yağlı kalmalarını sağlayın.
    NOT: Piercingi deneyimlemeleri acı verici olduğu için farenin uyuşturulması önerilir.

3. Baihui için iplik gömme işlemi (GV 20)

  1. Sıçanlarda parietal kemiğin sağ orta noktasındaki akupunktur noktası Baihui'yi (GV 20) bulun (Şekil 2A). Sıçanları, kulak apeks çizgilerini bağlamak için insanlarda kullanılan yönteme yaklaşmak için kulakları öne doğru çekerek kafayı tamamen açığa çıkaracak şekilde konumlandırın. Kafatasının merkezi uzunlamasına sırtını palpe ederek ve konumu kabaca orta noktasında tam olarak belirleyerek Baihui (GV 20) noktasını tanımlayın. Bu akupunktur noktasını, sagital sütür ile parietal kemiğin kesişimi ile aynı hizada, düz bir şekilde yatırıldığında kulakların kafa ile temas edeceği seviyede daha da onaylayın. Baihui'yi (GV 20) işaretlemek için bir işaretleyici kullanın.
  2. Bir düzeltici (genellikle elektrikli bir erkek sakal düzelticisi) kullanarak farenin akupunktur noktasının etrafındaki baş bölgesini tıraş edin.
  3. Ameliyattan önce, merkezden başlayarak dışa doğru hareket ederek dairesel hareketlerle% 0,5'lik bir iyot solüsyonu uygulayarak akupunktur noktalarını ve çevresindeki cildi dezenfekte edin. Ardından, üçlü bir dezenfeksiyon işlemi gerçekleştirin: iyodofor 3x kullanın, ardından uygun dekontaminasyonu sağlamak ve alanı aseptik tekniğe hazırlamak için her birine bir alkol uygulaması yapın.
  4. Tuzlu suya batırılmış 0,2 cm'lik emilebilir cerrahi dikişi sıkıştırmak için forseps kullanın ve iğne tüpünün ön ucuna yerleştirin. Ardından, iğne çekirdeğine bağlayın.
  5. Baihui'nin (GV 20) etrafındaki alanı bir elinizle başparmak ve işaret parmağınızla sıkıştırırken, diğer elinizle iğneyi tutun.
  6. Cildi sıkıştırırken iğneyi cilt yüzeyine 15°'lik bir açıyla, Baihui (GV 0.1) noktasının 0.1 cm altına yatay ve hızlı bir şekilde sokun (Şekil 3A).
  7. İğne ucu Baihui (GV 20) noktasının 0,1 cm üzerine ulaştıktan sonra, 0,2 cm'lik emilebilir cerrahi ipliği akupunktur noktasının deri altı dokusuna tam olarak implante etmek için iğne tüpünü geri çekerken iğne çekirdeğini itin (Şekil 3B).
  8. İğneyi yavaşça çıkarın, hiçbir dikişin açığa çıkmadığından emin olun. Kanamayı önlemek için iğne deliğine steril kuru pamukla 10 saniye boyunca bastırın. Çizgiyi akupunktur noktalarına gömdükten sonra iplik vücudun dışındaysa, çıkarın ve yeniden çalıştırın.

4. Shenshu için iplik gömme işlemi (BL 23)

  1. Sıçanlarda akupunktur noktası Shenshu (BL 23), 2. bel omurunun 5 mm lateralinde bulunur (Şekil 2B). İlk olarak, sıçanın kalça tüberkülüne dayanarak 6. bel omurunu bulun. Daha sonra dört omur gövdesini yukarı doğru sayarak 2. bel omurunu bulun. Shenshu (BL 23) 5 mm yanal olacak23.
    NOT: Baihui (GV 20) ve Shenshu (BL 23) akupunktur noktalarının kombinasyonu, serebral bozuklukların önlenmesi ve tedavisi için Geleneksel Çin Tıbbı (TCM) teorisinde sıklıkla kullanılan bir settir. Önceki araştırmalar20,21 tarafından onaylandığı gibi, bu akupunktur noktası eşleşmesi etkinliği için kurulmuştur.
  2. Shenshu'yu (BL 23) işaretlemek için bir işaretleyici kullanın. Bir düzeltici (genellikle elektrikli sakal düzeltici) kullanarak farenin akupunktur noktası etrafındaki sırt ve bel bölgesini tıraş edin.
  3. Ameliyattan önce, merkezden başlayarak dışa doğru hareket ederek% 0.5 iyot solüsyonu uygulayarak akupunktur noktalarını ve çevresindeki cildi dezenfekte edin. Daha sonra, üçlü bir dezenfeksiyon işlemi gerçekleştirin: iyodoforu üç kez kullanın, her biri uygun şekilde dekontaminasyonu ve alanın aseptik teknik için hazırlanmasını sağlamak için bir alkol uygulaması takip eder.
  4. Tuzlu suya batırılmış 0,5 cm'lik emilebilir cerrahi ipliği sıkıştırmak için forseps kullanın ve iğne tüpünün ön ucuna yerleştirin. Ardından, iğne çekirdeğine bağlayın.
  5. Cildi, baskı yapan elin işaret ve orta parmakları veya başparmak ve işaret parmakları ile gerin. İğneyi delici elinizle tutun.
  6. İğneyi Shenshu'nun (BL 23) 0,25 cm altındaki noktaya dik olarak hızlıca sokun. Şekil 4A'ya bakın.
  7. İğne ucu cilt altında 0,5 cm altına ulaştıktan sonra, iğne ucunu, yerleştirme yönünü merkezcil yaparak, cilt yüzeyi ile 45°'lik bir açı oluşturacak şekilde ayarlayın ve 0,5 cm eğik olarak yerleştirin (Şekil 4B).
    NOT: Böbreğin yakınında bulunan Shenshu'yu (BL 23) iğnelerken dikkatli olmak önemlidir. İğnenin derine sokulması veya tekrar tekrar kaldırılması ve itilmesi hasara neden olabilir. Bu nedenle, yaklaşık 0,3-0,6 cm'lik bir yerleştirme derinliği öneriyoruz.
  8. Tüpü geri çekerken iğne çekirdeğini itin ve 0,5 cm'lik emilebilir cerrahi ipliği akupunktur noktasının kas dokusuna tam olarak implante edin (Şekil 4C).
  9. İğneyi yavaşça dışarı çekin ve hiçbir dikişin açığa çıkmadığından emin olun. Ardından, kanamayı önlemek için iğne deliğine steril kuru pamukla 10 saniye boyunca bastırın. Çizgiyi akupunktur noktalarına gömdükten sonra iplik vücudun dışındaysa, çıkarın ve yeniden çalıştırın.

5. Ameliyat sonrası bakım

  1. Ameliyat sonrası, anesteziden iyileşmeyi kolaylaştırmak için fareyi 32 ° C sıcaklığa ayarlanmış küçük bir hayvan ısıtma yastığına yerleştirin. Hayvanı barınağına geri koymadan önce tamamen bilinçli olduğundan ve durumunun tatmin edici olduğundan emin olun.
  2. Ameliyattan sonra, etkilenen bölgede bir hafta içinde steril enflamatuar yanıtların belirtilerini gözlemleyin. Bu belirtiler kızarıklık, şişme veya irin benzeri bir akıntı içerebilir. Tipik olarak, bu semptomlar herhangi bir tedavi gerektirmez. Bununla birlikte, aşırı miktarda eksüda varsa, etkilenen bölgeyi boşaltın ve dezenfekte edin. Bu gibi durumlarda, yara tamamen iyileşene kadar eritromisin merhem uygulayın.

6. Davranış testi ve histolojik inceleme

  1. Müdahaleyi takiben, 8. haftada, öğrenme ve hafıza yeteneklerini değerlendirmek için Morris Su Labirenti (MWM) deneyi 2,24'ü gerçekleştirin. Öğrenme denemelerini günde dört deneme ile 5 gün boyunca gerçekleştirin. Ardından, son satın alma gününden 24 saat sonra bir araştırma denemesi yapın.
  2. İstatistiksel analiz yazılımı kullanarak istatistiksel karşılaştırmalar yapın. Öğrenme becerisinin davranışsal verilerini tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve post-hoc Tukey testi ile analiz eder. İki yönlü tekrarlanan varyans ölçümü analizi (ANOVA) ve ardından post-hoc Bonferroni testi ile kaçış gecikmesi verilerinin önemini değerlendirin. Tüm testlerde p <0.05 değeri anlamlı kabul edilir.
  3. Davranışsal değerlendirmeden sonra, sıçanları yukarıdaki gibi uyuşturun ve 150 mg / kg vücut ağırlığı pentobarbital sodyum intraperitoneal enjeksiyonları ile ötenazi yapın.
  4. Sıçanın beynini, vasküler sistem25 yoluyla perfüze edilen% 4 paraformaldehit kullanarak perfüzyon yoluyla sabitleyin.
    1. Gavaj iğnesinin yerleştirilmesi ve sabitlenmesi
      1. 12G'lik bir iğne hazırlayın ve düz olduğundan ve farenin ventrikülünden geçmeye uygun olduğundan emin olun. Tipik olarak sol ventrikül olan sıçanın ventrikülünü bulun ve iğneyi içinden çıkan aortun içine sokun. Bu adım, hassasiyet ve sıçan anatomisinin iyi anlaşılmasını gerektirir.
      2. İğne yerine oturduktan sonra, gavaj iğnesini aort içine girdiği noktanın yakınına sıkıştırmak için bir kanama durdurucu kullanın. Bu, iğneyi sabitlemeye ve hareket etmesini önlemeye yardımcı olacaktır.
      3. Kelepçenin iğneyi güvenli bir şekilde tutacak kadar sıkı olduğundan, ancak aorta zarar verecek veya kan akışını engelleyecek kadar sıkı olmadığından emin olun. Gavaj iğnesi, uygun perfüzyonu sağlamak için prosedür boyunca çıkan aortta kalmalıdır.
    2. Normal tuzlu su ile perfüzyon
      1. Perfüzyon için iğnesiz 50cc'lik bir şırınga hazırlayın. Farenin vücudunun dışında bulunan gavaj iğnesinin diğer ucunu normal tuzlu su ile doldurulmuş şırıngaya takın.
      2. Kanın kalpten dışarı akmasına izin vermek için sağ atriyal apendiksti kesmek için küçük bir kesi yapın. Bu adım, perfüzyon sırasında kanın salin tarafından yer değiştirmesini sağlar.
      3. Normal salini yükselen aort içine sabit ve sabit bir oranda enjekte etmeye başlayın. Bu, kanı temizleyecek ve dokuları fiksasyon için hazırlayacaktır.
      4. Sağ atriyal apendiksten çıkan sıvıyı izleyin ve taze salin ile sürekli bir perfüzyonu sürdürmek için şırıngayı gerektiği gibi değiştirmeye hazır olun.
        yerleştirilmiş, sabitleyici ile perfüze etmeye hazırlanın.
      5. Salin içeren şırıngayı, histolojide yaygın olarak kullanılan bir fiksatif olan% 4 paraformaldehit içeren bir şırınga ile değiştirin. Sonraki işleme ve analiz için dokuları yerine sabitlemek için paraformaldehit kullanarak perfüzyona devam edin.
        NOT: Bu prosedür boyunca, enfeksiyonu önlemek için aseptik tekniklerin sürdürülmesi ve yaralanmayı en aza indirmek için farenin nazikçe ele alınması çok önemlidir. Ek olarak, tutarlılık ve etkinliği sağlamak için ilgili tüm personel teknik konusunda eğitilmelidir.
  5. Sıçan beynini çıkarın ve 4 ° C'de 24-48 saatboyunca% 25,26 paraformaldehit içeren bir numune şişesine koyun. Etanol dehidrasyonu ve ksilen işlemini adım adım gerçekleştirin, ardından ölçüm için geleneksel sürekli koronal bölümler (4-5 μm) uygulayın. Hematoksilen ve Eozin (H & E) boyaması (200x) kullanarak her gruptaki hipokampal nöronların morfolojisini ve kaybını değerlendirin.
    NOT: Deneysel süre boyunca GI bozukluklarını gösteren klinik belirtilerin olmamasına bağlı olarak kemirgenler üzerinde gastrointestinal (GI) lezyonları değerlendirmek için bir nekropsi incelemesi yapılmamıştır. Hayvanlar, bu tür patolojilerin varlığını düşündürecek açık bir advers reaksiyon göstermedi.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu makale, Alzheimer hastalığı benzeri sıçanlarda TEAT'ın spesifik çalışma yöntemini tanıtmaktadır. Gelecekteki çalışmalar için bir referans sağlamak amacıyla deneysel araştırmalarda TEAT'ın kritik operasyonel unsurlarını tartışır.

TEAT, Alzheimer hastalığı benzeri sıçanlarda öğrenmeyi geliştiriyor
Akış şemasında gösterildiği gibi (Şekil 5), uyarlanabilir eğitim süresi boyunca, her gruptaki sıçanların yüzerken çevredeki ortamı gözlemlediği gözlemlendi. Yüzme hızının analizi (Şekil 6) gruplar arasında anlamlı bir fark göstermedi, bu da hareket hızı ve görsel algının tutarlı temel seviyelerini gösterdi. Deneysel sonuçlarda gözlenen herhangi bir farklılık, hareket kabiliyeti veya görsel algıdaki değişikliklerden kaynaklanmamıştır.

Sıçanlara 5 günlük platform arama eğitimi verildi. Şekil 7A'da, her bir sıçan grubunun hareket yörüngelerinin, eğitimin erken ve geç aşamalarında farklılık gösterdiği gözlemlenebilir. 2. günde, kaçış güdümlü sıçan gruplarının çoğu rastgele yüzdü. Bununla birlikte, 5. günde, kontrol grubundaki sıçanlar yön ile yüzerken, model grup sıçanları havuz duvarı boyunca rastgele yüzdü. TEAT grubu sıçanların hareketi hedef kadranda daha yoğun hale geldi. Deney, kaçış gecikmesini ölçtü ve daha kısa gecikme süresi daha güçlü yeteneklere işaret etti. Şekil 7B , model grubunun kontrol grubuna kıyasla daha düşük öğrenme ve hafıza yetenekleri sergilediğini göstermektedir. Bununla birlikte, TEAT grubu, AD benzeri patolojisi olan sıçanlarda uzamsal referans hafıza bozukluğunda önemli bir iyileşme göstermiştir.

TEAT, Alzheimer hastalığı benzeri sıçanlarda uzamsal hafızayı geliştirir
Prob denemesinde, hayvanın zaman geçirdiği yer mekansal önyargıyı gösterir27. Sıçanlar, platformları aramak için dört ana yöntem kullanır: kenar tabanlı, rastgele tabanlı, trend tabanlı ve doğrusal tabanlı28. Sonuçlar, her sıçan grubunun farklı arama stratejileri kullandığını göstermektedir (Şekil 8A). Kontrol grubu öncelikle doğrusal ve yönlü arama stratejileri kullandı, bu da güçlü bir hafıza ve platformun konumunu hatırlama yeteneği olduğunu düşündürdü. Buna karşılık, model grubundaki sıçanlar, hafıza yeteneklerinde önemli bir düşüşe işaret eden kenar benzeri bir ana arama stratejisi sergilediler. Platformu bulmayı veya konumunu hatırlamayı öğrenmediler. TEAT grubundaki fareler, trend tabanlı bir arama stratejisi gösterdi. Yörünge yoğunluğu, orijinal platformun bulunduğu kadranda ve bitişik kadranlarda en yüksekti. Bu, model grubuna kıyasla bir bellek iyileştirmesi olduğunu gösterir.

Şekil 8B ve Şekil 8C , orijinal platformun çeyreğinde kalış süresinin sonuçlarını ve sıçanların platformu kaç kez geçtiğini göstermektedir. Model grubu sıçanlar, kontrol grubuna kıyasla orijinal platform kadranında kalış sürelerinde ve platformu geçme sayılarında önemli bir azalma gösterdi (p <0.01). Model grubuyla karşılaştırıldığında, TEAT grubu sıçanlar, orijinal platform kadranında kalış sürelerinde ve platformu geçme sayılarında anlamlı bir artış gösterdi (p <0.01). Bu sonuçlar, TEAT'ın AD benzeri patolojisi olan sıçanlarda uzamsal öğrenmeyi ve hafıza bozukluğunu iyileştirebileceğini düşündürmektedir.

TEAT, sıçanlarda hipokampal yaşlanmayı iyileştirir (Şekil 9). Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, model grubundaki sıçanlar, piramidal hücrelerin sayısında önemli bir azalma ve düzensiz düzenlemeleri dahil olmak üzere ciddi patolojik değişiklikler sergiledi. Ek olarak, nükleer yoğunlaşma, nöronal dejenerasyon ve diğer anormallikler gözlendi. Bununla birlikte, TEAT tedavisini takiben, sıçanlarda hipokampal piramidal hücrelerin sayısı artmış ve daha organize olmuştur. Bazı çekirdekler yoğunlaşma gösterse de, genel hücre morfolojisi daha normal görünüyordu. Hücreler daha yoğun dağıldı ve sıralandı, sitoplazmik boyama daha tutarlıydı ve hücreleri çevreleyen ödem önemli ölçüde azaldı. Özellikle, normal piramidal hücreler gözlendi.

figure-results-1
Şekil 1: Deneyin akış diyagramı. 1 haftalık adaptasyondan sonra (0. hafta), çalışma 18 sıçanı üç gruba ayırdı: Kontrol, Model ve TEAT. 1 ila 7. haftalar arasında, kontrol grubuna salin enjeksiyonları yapılırken, model ve TEAT gruplarına D-galaktoz uygulandı. TEAT grubuna ayrıca 2, 4 ve 6. haftalarda iplik gömme akupunktur tedavisi uygulandı. Tüm sıçanlar 8. haftada Morris su labirenti testine tabi tutuldu ve ardından ötenazi yapıldı. Kısaltmalar: Adapt = adaptasyon, Con = Kontrol grubu, Mod = Model grubu, TEAT = İplik gömme Akupunktur Terapisi grubu, D-gal = D-galaktoz, MWM = Morris su labirenti testi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-2
Şekil 2: Akupunktur noktasının konumu. (A) Sıçanlarda akupunktur noktası Baihui (GV 20). Parietal kemiğin sağ orta noktasında bulunur. (B) Sıçanlarda akupunktur noktası Shenshu (BL 23). İkinci bel omurunun 5 mm lateralinde bulunur. Kısaltmalar: GV = Geleneksel Çin Tıbbı'nda (TCM) vücudun arka yönünün orta hattı boyunca uzanan ana meridyene atıfta bulunan bir kavram olan Vali Gemisi, BL = Mesane, TCM'de vücudun ve bacakların arkası boyunca uzanan altı yang meridyeninden biri olan Ayak-Taiyang meridyenine karşılık gelen Mesane Meridyeni anlamına gelir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-3
Şekil 3: Baihui'nin (GV 20) ayrıntılı diş gömme işlemi. (A) İğne, cilt yüzeyine 15 ° 'lik bir açıyla, Baihui (GV 20) akupunktur noktasının 0,1 cm altına yatay olarak yerleştirilir ve prosedürü kolaylaştırmak için cilt sıkıştırılır. (B) İğne ucu Baihui (GV 20) akupunktur noktasının 0,1 cm üzerinde bir konuma ulaştığında, 0,2 cm'lik emilebilir cerrahi ipliği akupunktur noktasındaki deri altı dokuya tam olarak implante etmek için iğne tüpü geri çekilirken iğne çekirdeği itilir. Kısaltmalar: GV = Vali Gemisi, Geleneksel Çin Tıbbında (TCM) vücudun arka yönünün orta hattı boyunca uzanan ana meridyene atıfta bulunan bir kavram. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-4
Şekil 4: Shenshu'nun (BL 23) ayrıntılı diş gömme işlemi. (A) İğne, Shenshu'nun (BL 23) 0,25 cm altında bir derinliğe kadar akupunktur noktasına dik olarak hızla sokulur. (B) İğne ucu cilt yüzeyinin altında 0,5 cm derinliğe ulaştığında, iğne akupunktur noktasının merkezine doğru yönlendirilir, cilt ile 45 ° 'lik bir açı oluşturulur ve daha sonra 0,5 cm derinliğe eğik olarak yerleştirilir. (C) İğne mili ilerletildiğinde, tüp geri çekilir ve 0,5 cm'lik emilebilir bir cerrahi sütür segmentinin Shenshu'daki kas dokusuna tam implantasyonu sağlanır (BL 23) Akupunktur noktası. Kısaltmalar: BL = Mesane, TCM'de vücudun ve bacakların arkası boyunca uzanan altı yang meridyeninden biri olan Foot-Taiyang meridyenine karşılık gelen Mesane Meridyeni anlamına gelir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-5
Şekil 5: WMW testinin akış şeması. Deney öncesi adaptasyon eğitimi, sıçanların motor yeteneklerinin gözlemlendiği ve yüzme hızının istatistiksel olarak analiz edildiği Gün 0 olarak gösterilir. Bunu, kaçma gecikmesinin (kaçış gecikmesi) farklı gruplar arasında karşılaştırıldığı ve analiz edildiği beş günlük bir yer gezinme aşaması (1 ila 5. günler) takip eder. 6. Günde, hedef kadranda (hedef kadranda kalma süresi) harcanan süreyi ve platform geçişlerinin sayısını değerlendirmek için bir mekansal araştırma denemesi yapılır. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-6
Şekil 6: Gruplar arasında yüzme hızının (m/s) karşılaştırılması. Bu şekil, her biri altı hayvandan (n = 6) oluşan çeşitli deney gruplarındaki sıçanların ortalama yüzme hızlarını (saniyede metre cinsinden) göstermektedir. Hata çubukları standart sapmayı gösterir. ns ile belirtildiği gibi gruplar arası fark elde edilmedi (p > 0.05). İstatistiksel analiz, SPSS programı kullanılarak, tüm veriler normal dağılıma bağlı kalarak gerçekleştirildi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-7
Şekil 7: WMW'nin yer navigasyonunun sonuçları. (A) Bu panel, yer navigasyon denemeleri sırasında her bir deney grubu içindeki sıçanların seyir yollarını gösteren temsili hareket yörünge diyagramlarını sunar. (B) Saniye (s) cinsinden ölçülen kaçış gecikmesi, her grup altı sıçandan (n = 6) oluşacak şekilde gruplar arasında karşılaştırılır. İstatistiksel analiz, navigasyon denemeleri boyunca denek içi etkilerini ve gruplar arasındaki denekler arasındaki farklılıkları değerlendirmek için iki yönlü tekrarlanan ölçümler ANOVA kullanılarak gerçekleştirildi. Veriler normal dağılım varsayımlarıyla uyumludur ve standart sapma ± grup ortalaması olarak gösterilir. Kontrol grubuna göre yıldız işaretleri (*p < 0.05, **p < 0.01) ve model grubuna göre hashtag'lerle (#p < 0.05, ##p < 0.01) önemli farklılıklar gösterilmiştir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-8
Şekil 8: WMW'nin sonda izinin sonuçları. (A) Panel, her bir deney grubu içindeki prob denemesindeki sıçanların uzamsal keşif davranışlarını yakalayan temsili hareket yörünge diyagramlarını görüntüler. (B) Bu grafik, gruplar arasındaki hedef kadran içindeki bekleme süresini (saniye, s cinsinden) karşılaştırır ve sıçanların platform konumunu hafızada tutmasını yansıtır. (C) Grafik, sıçanların platform alanını geçme sıklığını (frekans) gösterir ve uzamsal hafıza performanslarını gösterir. Her grup altı sıçandan (n = 6) oluşuyordu ve veriler, gruplar arasındaki farklılıkları değerlendirmek için tek yönlü ANOVA kullanılarak istatistiksel olarak analiz edildi. Veriler normal bir dağılıma bağlı kalır ve ortalama ± standart sapma olarak sunulur. Kontrol grubuna göre yıldız işaretleri (**p < 0.01) ve model grubuna göre hashtag'lerle (#p < 0.05, ##p < 0.01) anlamlı farklılıklar gösterilmiştir. **P < 0.01'e karşı kontrol grubu, #p < 0.05'e karşı model grubu, ##p < 0.01'e karşı model grubu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-9
Şekil 9: Sıçan Gruplarında Hipokampal CA1 Bölgesinin 200x büyütmede Hematoksilen ve Eozin Boyama Değerlendirmesi. (A) Kontrol grubu, iyi korunmuş piramidal hücrelere sahip tipik nöronal yapı sergiler. (B) Model grubu, piramidal hücrelerin yoğunluğunda belirgin bir azalma, koyu lekeli dejenere nöronlar ve düzensiz düzenleme ile karakterize belirgin patolojik değişiklikler gösterir. (C) TEAT grubu, daha düzenli ve daha normatif bir morfolojiye sahip olan artan sayıda piramidal hücre ile gelişmiş hipokampal mimari gösterir. Ara sıra nükleer yoğunlaşmaya rağmen, hücreler daha yoğun bir şekilde paketlenir, tek tip sitoplazmik boyama sergiler ve periselüler ödemde önemli bir azalma gösterir. Normatif piramidal hücrelerin varlığı özellikle gözlenir. Ölçek çubuğu = 50 μm. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Müdahale süresi
AH'nin etiyolojisi karmaşıktır ve patogenezi belirsizliğini korumaktadır. Şu anda, hastalık için etkili bir tedavi yoktur ve seyri geri döndürülemez. Bu nedenle, akademik topluluk, AH'nin önlenmesi ve tedavisine odaklanmanın önemi konusunda fikir birliğine varmıştır. AD için önleme ve tedavi stratejileri, TCM'nin durumları ortaya çıkmadan önce tedavi etme kavramını takip ederek, başlangıcından, bulaşmasından ve nüksünden önce tedaviyi vurgulayarak erken müdahaleyi vurgular. İnsanlarda (29,30) ve kemirgenlerde(kemirgenler) 31,32 biriken araştırmalar, erken akupunktur ve yakı müdahalesinin belirgin yan etkiler olmadan önemli sonuçlar elde edebileceğini ve bu da onu AD'yi önlemek ve tedavi etmek için umut verici bir potansiyel yöntem haline getirdiğini göstermiştir. Bu nedenle, bu çalışmada modelleme sürecinde tedavi uygulanmıştır. TEAT, D-gal intraperitoneal enjeksiyonun başlangıcında uygulandı.

Akupunktur noktası seçimi
AD, öncelikle hafıza, dil, akıl yürütme ve sosyal davranıştan sorumlu beyin bölgelerini etkileyen ciddi bir nörodejeneratif hastalıktır. Beyin (Nao), TCM'de ilik denizi (Sui) olarak kabul edilir. İlik (Sui), vücudun temel anayasal gücü, canlılığı ve direnci olduğuna inanılan TCM'de benzersiz bir madde olan özden (Jing) yapılmıştır. Esans (Jing) esas olarak böbreklerde (Shen) depolanır. Böbrek özü (Shen Jing) zayıfsa, beyin (Nao) beslenmeyebilir ve bilişsel bozukluk meydana gelebilir. Bu nedenle, TCM böbrekleri tonlamayı ve özden (Jing) yararlanmanın beyin fonksiyonlarını iyileştirmeye yardımcı olabileceğini önerir. Beyin, beyne girerken Vali damarı (GV) ve ayak Taiyang'ın (BL) mesane meridyeni gibi belirli meridyenlerden doğrudan etkilenebilir. AD'yi önlemek ve tedavi etmek için kullanılan Governor damarı (GV) ve ayak Taiyang'ın (BL) mesane meridyeninin kombinasyonu yüksek oranda kullanılmaktadır33,34. Baihui (GV 20), başın tepe noktasında bulunan bir akupunktur noktasıdır ve Vali gemisinin bir parçasıdır. Literatüre göre, AD'nin önlenmesi ve tedavisi için akupunktur ve yakı kullanan çalışmalarda, Baihui (GV 20) en yüksek görülme sıklığına sahiptir ve formül35'te kritik bir nokta olarak kabul edilir. Shenshu (BL 23), Taiyang ayağının mesane meridyeni üzerinde bir akupunktur noktasıdır. İkinci bel omurun spinöz sürecinin alt sınırına 1.5 cun lateral bulunur. Böbrek geri taşıma-Shu noktası olarak, böbrek yin, yang, öz (Jing) ve qi dahil olmak üzere böbreklerin tüm yönlerini güçlendirebilir. Baihui (GV 20) ve Shenshu'da (BL 23) akupunktur ve yakı, bilişsel işlevi iyileştirebilir ve AD semptomlarını çeşitli şekillerde hafifletebilir36,37.

Aralık süresi
TEAT38'in çalışma standartları, tedavi aralığının ve tedavi seyrinin hastalığın durumuna ve seçilen ameliyat bölgesine göre 1 hafta ile 1 ay arasında bir aralıkla belirlenmesi gerektiğini belirtir. Tedavi süresi 1 ila 5 kez arasında değişebilir. Bu öneri deney hayvanı araştırmalarında da uygulanabilir. İncelenen literatüre39 dayanarak, tedavi genellikle haftada bir veya 2 haftada bir uygulanır ve çoğu vaka 4-8 ardışık tedaviyi içerir. Deney 49 gün sürdü ve bu süre zarfında iplikler 14., 28. ve 42. günlerde gömüldü.

Araç ve yöntemler
Mevcut deney hayvanı araştırmalarında çeşitli iplik gömme araçları kullanılmaktadır. Bunlar arasında No. 740 veya No. 941 tek kullanımlık iplik gömme iğneleri, kendi kendine icat edilen iğneler ve No. 12 lomber ponksiyon iğnesi42 bulunur. Kendi kendini yeniden icat eden iğneler, tüp olarak 5-7 numaralı şırıngaları ve iğne çekirdeği için uygun bir filiform iğneyi kullanır. İğne ucu önceden düzleştirilmiştir. Örneğin, 250 ± 20 g ağırlığındaki SD sıçanları kullanan bir çalışmada (metinde ay yaşı belirtilmemiştir), No.7 şırıngayı ve 0.30 x 0.40 mm filiform iğneyi43,44 seçin. Bununla birlikte, kendi kendine icat edilen iğneler kesinlikle dezenfekte edilmelidir, bu da onları yaygın olarak kullanılamaz hale getirir. İğne ucu çok büyük veya keskinse, kan damarlarına ve sinirlere zarar vererek morarma olasılığını artırabilir45. Geniş çaplı ve keskin uçlara sahip olan lomber ponksiyon iğnelerinin kan damarlarına ve sinirlere zarar verme olasılığı daha yüksektir. Tek kullanımlık gömme iğnesi, klinik uygulamada en çok kullanılanıdır39. Kendi kendine icat edilen iğneler ve lomber ponksiyon iğnelerine kıyasla kullanımı daha uygun ve kullanımı daha güvenlidir, bu da onu TEAT için ideal hale getirir. Ek olarak, deneyin amacı insan sağlığını iyileştirmektir. Bu nedenle, hayvan çalışmaları klinik durumu yansıtmalıdır. Bu nedenle, iplik gömme aletleri olarak tek kullanımlık iplik gömme iğnelerinin kullanılması tavsiye edilir.

Katgüt, TEAT'ta kullanılan birincil iplik materyaliydi, ancak doku reddi ve hayvansal kaynaklı bileşenler nedeniyle yerini biyosentetik emilebilir cerrahi ipliklere bırakmıştır. Dikişler çeşitli boyutlarda mevcuttur ve 4-0 veya 3-0 dikişler için No.7 gibi iğneye uygun olmalıdır. Hayvan araştırmalarında ağırlıklı olarak 3-041, 4-046 ve 5-047 kullanılır. Dikişlerin çoğu 1-2 cm uzunluğundadır. Bununla birlikte, kemirgenler insanlardan çok daha küçük vücutlara sahiptir, bu nedenle vücut büyüklükleri için uygun boyut eksikliği vardır. Bu nedenle, araştırmacılar dikişleri kemirgenler için uygun hale getirmek için 0,2-0,5 cm'lik segmentler halinde kesmelidir. Bu nedenle, enfeksiyon riskini azaltmak için dikişlerin kesildikten sonra ve daha sonra kullanılmak veya hemen uygulanmak üzere ıslatılmadan önce temiz ve steril damıtılmış su veya tuzlu su ile durulanması önerilir46.

Bazı çalışmalar, iğnelerin akupunktur noktasının yaklaşık 0,5 cm altından akupunktur noktası48'e doğru akupunktur noktasına hızlı bir şekilde yerleştirilmesi gibi gömme yöntemi için ayrıntılı gereksinimler önermiştir. Bu önemlidir çünkü kemirgenler küçüktür. Alt ekstremitelerinde bol miktarda kas dokusuna sahip olmasının yanı sıra, baş, sırt ve karın bölgesindeki deri altı dokusu ve kas katmanları nispeten zayıftır. Bu nedenle, hayvan araştırmalarında meme başının giriş noktaları ve yerleştirme açısı konusunun burada vurgulanması gerekmektedir. Kemirgenlerin alt ekstremitelerinde TEAT yapılırken, akupunktur noktalarında doğrudan iğneleme mümkündür. Gövdeye gelince, iç organlara zarar vermemek için iğnenin akupunktur noktalarının altına (mesafe, iplik gövdesinin uzunluğuna göre esnek bir şekilde ayarlanabilir) eğik iğneleme (<45°) veya düz iğneleme (<15°) kullanılarak sokulması önerilir.

Alzheimer hastalığının önlenmesi ve tedavisi için TEAT'ın potansiyeli
Son zamanlarda, TEAT ile ilgili araştırmalar ortaya çıkmaktadır, ancak etkileri ve mekanizmaları belirsizliğini korumaktadır. Yukarıda bahsedildiği gibi, TEAT obezite 13,14, diyabet15, uykusuzluk16, menopoz sonrası osteoporoz17 ve depresyon 18 gibi AD ile ilişkili risk faktörlerini iyileştirebilir. VD sıçanlarında öğrenme ve hafıza bozukluğu üzerinde yararlı bir etkiye sahiptir19. TEAT, egzersize bağlı yorgun sıçanlarda49 doku hasarını iyileştirmek için PPAR yolu yoluyla lipid metabolizmasını düzenler ve TRPV1 yolu50 aracılığıyla aralıklı soğuk strese bağlı farelerde anti-enflamatuar ve analjezik etkiler gösterir. Bu çalışmada, AD benzeri sıçanlarda iplik gömme tedavisinin, mekansal hafıza kaybını iyileştirerek ve hipokampal CA1 bölgelerindeki dejenere hücreleri azaltarak öğrenme ve hafıza bozukluklarını hafifletebileceğini gösterdik. Bununla birlikte, mevcut araştırmanın, gömme yöntemi, gömme aracı, iş parçacığı ve gömme aralık süresi dahil olmak üzere TEAT operasyonunun birçok kritik unsurunda tekdüzelik ve standardizasyon eksikliği nedeniyle, bu makale esas olarak deneysel araştırmalarda TEAT'ın kritik operasyonel unsurlarını tartışmaktadır. Bu araştırma, TEAT'ın AH üzerindeki etkisinin yalnızca bir ön araştırmasıydı ve bu, aralarındaki tam moleküler ve etkileşimi açıklığa kavuşturmak için çok daha fazla tamamlayıcı ve iyileştirme gerektiriyordu. Bununla birlikte, kaçınılmaz AD süreci için yeni bir deneme önerdi ve bu da halk sağlığı sistemi üzerindeki ağır yükü bir şekilde hafifletebilir.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar açıklayacak hiçbir şeyleri olmadığını beyan ederler.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (NSFC) No. 82374564 (YJD'ye) ve No. 82074566 (YJD'ye) ve Wuhan, Çin'deki Dünya Akupunktur-Yakı Dernekleri Federasyonu TCM Akupunktur-Yakı için Sun Guojie Miras Üssü'nden (Dünya Akupunktur-Yakı Dernekleri Federasyonu [2019] No. 26) (YJD'ye) ve Ulusal Geleneksel Çin Tıbbı İdaresi'nin Ulusal Ünlü TCM Miras Stüdyosu inşaat projesi, Çin (Geleneksel Çin Tıbbı Ulusal İdaresi [2022] No. 5) (YJD'ye).

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
%0.9 salin, %4 paraformaldehit, Hematoksilen, Eosin Y (suda çözünür), mutlak etanol, 0.01M PBS tozu, ksilen, hidroklorik asit, gömülü parafin, nötr sakızsinopharm (www.sinopharm.com)
5-0 emilebilir cerrahi sütürbodamedikal (www.bodamedical.com)
%70 alkol, iyodofor, pamuk topuDezenfeksiyon için kullanılır.
kloral hidratsigmaC8383
lameller, cam slaytlarGuangzhou Wuqiang Experimental Equipment Co., Ltd
KurutucuWuhan Junjie JT-12J Bilgisayarlı Biyolojik Doku Kurutucu
DELUXE TERMOSTAT ISI MATIZhenhua AletleriSıçanların vücut ısısını korumak için.
D-galaktozsigmaG0750
elektrikli erkek sakal düzelticiFareleri tıraş etmek için kullanılır.
Küçük hayvanlar için elektronik terazi (ZK-DST)Henan Zhike Information Technology Co., Ltd
eritromisin merhemfrontpharm
cam tabakKesilmiş emilebilir dikişleri yerleştirmek için kullanılır.
Yüksek Basınçlı Buhar Sterilizasyon Kabı (YM100Z)Şanghay Sanshen tıbbi ekipman fabrikasıCerrahi aletlerin sterilizasyonu için.
Buz yapıcı (CMB40)Shanghai Sheyan Instrument Co., Ltd.
Mikroskop (BX-53)OLYMPUS
süt tozuMWM testi için kullanılır.
Morris Water Maze Video Takip Sistemi & Veri Analiz Yazılımı (Sürüm: Watermaze 2.0)Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd
No.6 iplik gömme iğne bodamedical(www.bodamedical.com)
oftalmik makas, tepsiler, cımbız
Patoloji Mikrotom ve nbsp; (RM 2016)LEICA, Almanya
pentobarbitalAlmanyaP11011
kalıcı işaretleyiciAkupunktur noktasını işaretlemek için kullanılır.
Dilimleme bıçakları (R35)Tüyler, Japon
sabunuElleri yıkamak için kullanılır.
steril eldivenler
,

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Huang, W., et al. Acupoint catgut embedding for obesity: A protocol systematic review. Medicine (Baltimore). 99 (51), e23728(2020).
  2. Zhou, M., et al. Acupoint catgut embedding improves senescence in a rat model of ageing by regulating mitophagy via the pink1 pathway. J Cell Mol Med. 25 (8), 3816-3828 (2021).
  3. Zhang, X., et al. Acupoint catgut-embedding therapy: Superiorities and principles of application. Zhongguo Zhen Jiu. 32 (10), 947-951 (2012).
  4. Lin, J., Deng, Q. Observation on therapeutic effect of 160 cases of epilepsy treated with acupoint catgut embedding therapy. Zhongguo Zhen Jiu. 36 (11), 14-15 (2001).
  5. Li, L. Acupuncture combined with catgut embedding therapy for treatment of 158 cases of facial paralysis. Zhongguo Zhen Jiu. 25 (3), 23-24 (2005).
  6. Wang, J., Wu, Z., Huo, J., Yuan, Y. Questionnaire investigation on cost-effectiveness analysis of acupuncture for migraine. Zhongguo Zhen Jiu. 35 (4), 377-383 (2015).
  7. Huang, L., Pan, W. Comparation of effect and cost-benefit analysis between acupoint catgut-embedding and electroacupuncture on simple obesity. Zhongguo Zhen Jiu. 31 (10), 883-886 (2011).
  8. Jack, C. R., et al. Tracking pathophysiological processes in alzheimer's disease: An updated hypothetical model of dynamic biomarkers. Lancet Neurol. 12 (2), 207-216 (2013).
  9. Sperling, R. A., et al. Toward defining the preclinical stages of alzheimer's disease: Recommendations from the national institute on aging-alzheimer's association workgroups on diagnostic guidelines for alzheimer's disease. Alzheimer's Dementia. 7 (3), 280-292 (2011).
  10. Guzman-Martinez, L., et al. New frontiers in the prevention, diagnosis, and treatment of alzheimer's disease. J Alzheimers Dis. 82, S51-S63 (2021).
  11. Yang, W. T., et al. Chinese herbal medicine for alzheimer's disease: Clinical evidence and possible mechanism of neurogenesis. Biochem Pharmacol. 141, 143-155 (2017).
  12. Zhao, J. L., Yang, J., Ding, L., Wang, F., Lin, L. A review of the pathogenesis and chinese medicine intervention of alzheimer's disease. J Integr Neurosci. 22 (1), 2(2022).
  13. Chen, I. J., Yeh, Y. H., Hsu, C. H. Therapeutic effect of acupoint catgut embedding in abdominally obese women: A randomized, double-blind, placebo-controlled study. J Womens Health (Larchmt). 27 (6), 782-790 (2018).
  14. Zhang, X., et al. Effect of catgut embedding at acupoints versus non-acupoints in abdominal obesity: A randomized clinical trial. J Tradit Chin Med. 43 (4), 780-786 (2023).
  15. Xia, T., Yang, Y., Li, W., Tang, Z., Guo, Y. Acupoint catgut embedding for diabetic gastroparesis: A protocol of systematic review. Medicine (Baltimore). 98 (43), e17718(2019).
  16. Xu, F., et al. Acupoint catgut embedding alleviates insomnia in different chinese medicine syndrome types: A randomized controlled trial. Chin J Integr Med. 25 (7), 543-549 (2019).
  17. Shi, N., et al. Effects of acupoint catgut embedding on the postmenopausal osteoporosis patients and related mechanism. Am J Transl Res. 13 (3), 1789-1798 (2021).
  18. Li, Y., Zhou, J., Wei, Z., He, X., Kejimu, S. The efficacy and safety of acupoint catgut embedding therapy for depression: A protocol for systematic review and meta-analysis. Front Psychiatry. 14, 1331780(2023).
  19. Zhu, S., et al. Acupoint catgut embedding improves learning and memory impairment in vascular dementia rats. Ann Transl Med. 11 (2), 108(2023).
  20. Yu, C. C., et al. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like pathology and memory deficits probably via inhibition of gsk3β/mtor signaling pathway. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 1428752(2020).
  21. He, C., et al. Preventive electroacupuncture ameliorates d-galactose-induced alzheimer's disease-like inflammation and memory deficits, probably via modulating the microbiota-gut-brain axis. Iran J Basic Med Sci. 24 (3), 341-348 (2021).
  22. Hong, X. P., et al. Puerarin ameliorates d-galactose induced enhanced hippocampal neurogenesis and tau hyperphosphorylation in rat brain. J Alzheimers Dis. 51 (2), 605-617 (2016).
  23. Gao, S., Li, R., Tian, H. H. Research progress of Shenshu (BL 23). Zhongguo Zhen Jiu. 37 (8), 845-850 (2017).
  24. Su J, S. K., Wyss, J. m Sripanidkulchai B. Curcuma comosa improves learning and memory function on ovariectomized rats in a long-term morris water maze test. J Ethnopharmacol. 130 (1), 70-75 (2010).
  25. Gage Gj, K. D., Shain, W. Whole animal perfusion fixation for rodents. J Vis Exp. (65), e3564(2012).
  26. Jacobowitz, D. M. Removal of discrete fresh regions of the rat brain. Brain Res. 80 (1), 111-115 (1974).
  27. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Assessing spatial learning and memory in rodents. Ilar j. 55 (2), 310-332 (2014).
  28. Zhou, J., et al. Methodology of morris water maze for detecting animal learning and memory levels. Chinese Journal of gerontology. 37 (24), 4(2017).
  29. Wang, Y., et al. Effectiveness and safety of acupuncture for the treatment of Alzheimer's disease: A systematic review and meta-analysis. Front Aging Neurosci. 12, 98(2020).
  30. Jia, Y. J., et al. Acupuncture for patients with mild to moderate alzheimer's disease: A randomized controlled trial. BMC Complement Altern Med. 17 (1), 556(2017).
  31. Yu, C. C., et al. Experimental evidence of the benefits of acupuncture for alzheimer's disease: An updated review. Front Neurosci. 14, 549772(2020).
  32. Zheng, X., et al. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of tfeb (transcription factor eb). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).
  33. Hu, J., Zhao, J., Lu, M., Li, Z. Treatment of alzheimer's disease by using "tongdu qishen" acupuncture therapy. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 22 (8), 2634-2640 (2020).
  34. Liang, X., et al. Visualization analysis of literature on acupuncture-moxibustion treatment of alzheimer's disease based on citespace. World Science and Technology-Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica. 24 (10), 3998-4006 (2022).
  35. Xia, Y. W., et al. Acupoint selection rules in treating alzheimer's disease with acupuncture and moxibustion in china and abroad based on data mining. Journal of Yunnan University of Chinese Medicine. 44 (02), 46-52 (2021).
  36. Zhang, H., Zhu, M., Zhang, W. Effects of serum acetyl choline and amyloid-beta protein by using acupuncture baihui ( gv20) and yongguan ( ki1) acupoint to treat patients with alzheimer disease. World Chinese Medicine. 13 (11), 2855-2857 (2018).
  37. Wang, Y. Y., et al. effect of electroacupuncture of different acupoint groups on learning-memory ability and expression of il-1β and tnf-α in hippocampus and prefrontal cortex in rats with alzheimer's disease. Zhen Ci Yan Jiu. 45 (8), 617-622 (2020).
  38. Guan, L., Zuo, F., Song, Q., Shi, X. study on standardization of thread-embedding technique: Elucidation on the establishment of the national standard standardized manipulation of acupuncture and moxibustion, part x, thread-embedding. Zhongguo Zhen Jiu. 29 (5), 401-405 (2009).
  39. Cheng, L., et al. bibliometric analysis on key elements of clinical application of acupoint catgut embedding therapy in recent ten years. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (9), 830-836 (2022).
  40. Dan, Y. Experimental study on the effects of acupoint thread burial and acupoint injection on insulin resistance and islet morphology in diabetic rats. Hubei University of Traditional Chinese Medicine. , (2015).
  41. Huang, Y. To investigate the regulation of th1/th2 balance in rats with allergic rhinitis by acting on dc at yingxiang acupoint thread burial. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2020).
  42. Zhang, X. Y., Shen, L., Fan, H., Liao, Y., Liang, L. Influence of catgut implantation at acupoints on splenic lymphocyte nuclear factor (nf-κb p65) and correlated signaling molecules (β2ar) in rats with experimental colitis. World J Acupuncture-Moxibustion. 20 (4), 48-53 (2010).
  43. Yu, Q. H. Experimental study on the effect of acupoint thread insertion combined with moxibustion on il-6/jak/stat3 signaling pathway in rats with ulcerative colitis. Guizhou Medical University. , (2020).
  44. Wang, Y. J., et al. Effect of moxibustion combined with acupoint catgut embedding on il-6/jak/stat3 signaling pathway in colonic mucosa of ulcerative colitis rats. Zhen Ci Yan Jiu. 47 (6), 525-530 (2022).
  45. Ke, C., et al. Application development of acupoint embedding line body and needle. China J Tradl Chinese Med Pharm. 35 (11), 5644-5647 (2020).
  46. Yue, Y. R., et al. Regulatory effect of acupoint thread-embedding therapy at the shu points of the five organs on the hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis in senescent rats under stress. Hunan J Tradl Chinese Med. 34 (05), 180-182 (2018).
  47. Bao, J. Experimental study on the intervention of acupoint thread insertion in the expression of bcl-2 and bax in cochlear spiral ganglion cells in presbycus mice. Liaoning University of Traditional Chinese Medicine. , (2019).
  48. Liu, M. Effect of acupoint thread insertion on nasal mucosa th1/th2, treg/th17 in rats with allergic rhinitis. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. , (2013).
  49. Song, Y., et al. Acupoint catgut embedding improves lipid metabolism in exercise-induced fatigue rats via the ppar signaling pathway. Animals (Basel). 13 (4), 558(2023).
  50. Lai, P. C., Yen, C. M., Hsiao, I. H., Chen, Y. H., Lin, Y. W. Acupoint catgut embedding diminishes fibromyalgia pain through trpv1 in the mouse brain. J Integr Neurosci. 22 (4), 97(2023).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Thread Embedding TherapyAcupuncture TherapyAlzheimer DiseaseLearning And MemoryMorris Water MazeAcupoint SelectionBiodegradable SutureAnimal ModelSpatial MemoryHistological Examination

Related Articles