Bu protokol, dekstran sülfat sodyum ile birlikte azometan tarafından indüklenen ülseratif koloproktit ile ilişkili kolorektal kanserin bir fare modelini sağlar. Model, kolorektal kanserin önlenmesi ve tedavisinde geleneksel Çin tıbbı bileşiklerinin etkinliğini değerlendirmek için kullanıldı.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Farelerde Koloproktit Kanser Modelinin Oluşturulması ve Çin Tıbbının Terapötik Etkisinin Değerlendirilmesi
Bu makalede
Özet
Özet
Kolorektal kanser (KRK), sindirim sisteminin yaygın bir malignitesidir ve dünya çapında en sık görülen üçüncü malignite ve maligniteye bağlı ölümlerin ikinci önde gelen nedeni haline gelmiştir. Ülseratif koloproktit (ÜK) prekanseröz bir lezyondur ve ÜK ile ilişkili KRK (ÜK-KRK) KRK'NIN EN SıK GÖRÜLEN ALT TIPIDIR. Bu nedenle, makul bir UC-CRC modeli, yeni ilaç geliştirmenin temel taşı ve garantisidir. Geleneksel Çin tıbbı (TCM), iyi etkinliği nedeniyle UC-CRC tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. TCM'nin klasik bir tonik reçetesi olan Liujunzi kaynatma (LJZD), UC-CRC tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada, azometan ve dekstran sülfat sodyum birleştirilerek UC-KRK modeli oluşturulmuş ve LJZD uygulanmıştır. Veriler, LJZD'nin fare vücut ağırlığı, kolorektal uzunluk, patolojik ve inflamatuar faktörler, kolorektal bariyer fonksiyonu ve kanser belirteçlerini kullanarak UC-CRC'de kanser geçişini etkili bir şekilde inhibe edebileceğini doğruladı. Bu protokol, UC-CRC'nin önlenmesi ve tedavisinde TCM'nin etkinliğini değerlendirmek için bir sistem sağlar.
Giriş
Kolorektal kanser (KRK), küresel kanser insidansının %10'unu ve toplam kansere bağlı ölümlerin %9,4'ünü oluşturan, dünyada en sık görülen üçüncü malignite ve ikinci en yaygın ölüm nedeni olan yaygın bir gastrointestinal malignitedir 1,2. Genetik faktörler, kronik inflamasyon, yüksek yağlı diyet, diyabet ve anormal bağırsak florası CRC 3,4 için risk faktörleridir. Bunlar arasında inflamatuar barsak hastalığı, özellikle ülseratif koloproktit (ÜK), CRC 5,6 için açık bir risk faktörüdür. UC ile ili....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Hayvan prosedürü, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (Kayıt numarası: 2021214). Spesifik patojen içermeyen C57BL/6J fareler (8-10 hafta, ağırlık 18-22 g), erkek ve dişi, 22 °C ve %65 bağıl nemde bağımsız olarak havalandırılan kafeslere yerleştirildi. Fareler, suya ve diyete serbestçe erişebildikleri 7 günlük uyarlanabilir beslenmeden sonra deneye başladılar.
1. İlaç hazırlama
- LJZD'nin Hazırlanması
NOT: Kullanılan Çin tıbbı, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Bağlı Hastanesinden satın alınmış ve gerçek Çin tıbbı olarak tanımlanmıştır (bakınız Tablo 1).- Dan....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
LJZD'nin kaynatma işlemi, Tablo 1'deki ilaçların bileşim oranına ve Şekil 1A'daki TCM'nin kaynatma yöntemine göre hazırlanmıştır. Şekil 1B'de belirtilen zaman noktasına göre, farelere 7. günde intraperitoneal olarak 1 mg/mL AOM enjekte edildi ve farelere3., 6. ve 9. haftalarda %2 DSS içeren içme suyuna serbest erişim sağlandı. UC-CRC fare modeli 15. haftada başarıyla kuruldu. Bu arada, farel.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
KRK, her yıl yaklaşık 1.148.000 yeni vaka ve 576.000'den fazla ölümle dünya çapında en yaygın kanserlerden biridir. KRK, kalıtsal, sporadik ve UC-KRK olmak üzere farklı nedenlere göre üç tipe ayrılabilir31. ÜK gibi inflamatuar barsak hastalıkları olan hastalarda KRK insidansı, genel popülasyondan anlamlı olarak daha yüksektir. UC, tipik adenom-adenokarsinomyolu 6'dan farklı olan inflamatuar-kanser yolu yoluyla KRK gelişimini uyarır. Şu anda, UC-KRK'nin nedeni bilinmemektedi.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Teşekkürler
Bu çalışma Jilin İl Bilim ve Teknoloji Departmanı (YDZJ202201ZYTS181) tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Azoksimetan | Sigma | A5486 | |
| 5-amino salisilik asit | Kuihua İlaç Grubu Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd | 3819413 | |
| C57BL/6J fareler | Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd | NO 210726210100853716 | |
| Kapak kayması | Jiangsu Shitai Deneysel Equipment Co., Ltd | 10212432C | |
| DAB rengi geliştirme kiti | Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd | 2005289 | |
| Susuzlaştırma makinesi | Wuhan Junjie Elektronik Co, Ltd | JJ-12J | |
| Dekstran sülfat sodyum | Dalian Meilun Biyoteknoloji Co, Ltd | MB5535 | |
| Gömme makinesi | Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd | JB-P5 | |
| Hematoksilen-eozin boya | Wuhan Yüz Derece Biyoteknoloji Co., Ltd | B1000 | |
| IL-6 | Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd | MM-0163M2 | |
| Isofluran | RWD Life Science Co., Ltd | R510-22-10 | |
| KI67 birincil antikor | Google Biyoteknoloji A.Ş | GB121141 | |
| Nötr sakız | Wuhan Yüz Derece Biyoteknoloji Co, Ltd | 10004160 | |
| Nesne slaytı | Jiangsu Shitai Deneysel Ekipman Co, Ltd | 10212432A | |
| Okkludin birincil antikor | Affnity | DF7504 | |
| Ortostatik optik mikroskop | Nikon | Nikon Eclipse CI | |
| Patolojik mikrotom | Shanghai Leica Instrument Co., Ltd | RM2016 | |
| ZO-1 birincil antikor | Abcam | ab221547 |
Kaynaklar
- Sung, H., et al. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA Cancer J Clin. 71 (3), 209-249 (2021).
- Tsai, K. Y., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
