Yöntem makalesi

İnsan Osteosarkom Dokuları ile Hasta Kaynaklı Ksenogreft Fare Modelinin Kurulması

2K görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/66491

⸱

22 Mart 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, 2Key Laboratory of theory and therapy of muscles and bones, Ministry of Education

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Mevcut protokol, insan osteosarkom dokusu kullanılarak hasta kaynaklı bir ksenogreft (PDX) fare modeli oluşturma yöntemini açıklamaktadır.

Özet

Osteosarkom, çocuk ve adolesanlarda en sık görülen primer malign kemik tümörüdür. Son yıllarda yeni tedavi planlarının geliştirilmesine rağmen, osteosarkom hastalarının prognozu önemli ölçüde iyileşmemiştir. Bu nedenle, yüksek sadakate sahip sağlam bir klinik öncesi model oluşturmak çok önemlidir. Hasta kaynaklı ksenogreft (PDX) modeli, her hasta için insan malignitelerinin genetik, epigenetik ve heterojen özelliklerini aslına uygun olarak korur. Sonuç olarak, PDX modelleri, dönüşüm çalışmalarında çeşitli kanserleri incelemek için otantik in vivo modeller olarak kabul edilir. Bu makale, insan osteosarkomunun morfolojik özelliklerini doğru bir şekilde yansıtan bir PDX fare modeli oluşturmak ve sürdürmek için kapsamlı bir protokol sunmaktadır. Bu, yeni rezeke edilmiş insan osteosarkom dokusunun immün sistemi baskılanmış farelere derhal nakledilmesini ve ardından ardışık pasajı içerir. Açıklanan model, osteosarkomun büyümesini, ilaç direncini, nüksetmesini ve metastazını incelemek için bir platform görevi görür. Ek olarak, hedef terapötiklerin taranmasına ve kişiselleştirilmiş tedavi şemalarının oluşturulmasına yardımcı olur.

Giriş

Osteosarkom, interosseöz lob hücrelerinden türetilen primer bir kemik malignitesidir ve en sık ergenlerde ve çocuklarda görülür. Sıklıkla uzun diyafizin epifizinde ortaya çıkar ve yüksek malignite, erken metastaz ve kötü prognoz ile karakterizedir 1,2. Akciğer metastazı, osteosarkom hastalarında ana ölüm nedenidir. Metastatik olmayan osteosarkomlu hastaların 5 yıllık sağkalım oranı %65-%70'tir3. Bununla birlikte, son 40 yılda, metastatik osteosarkomlu hastaların 5 yıllık sağkalım oranı (sadece% 20) önemli ölçüde iyileşmemiştir ve osteosarkom hastalarının% 25'inde tanı anında metastaz vardır4. Şu anda, osteosarkom tedavisi için birinci basamak ilaçlar bir fikir birliğine varmıştır, ancak kemoterapi rejimi ve tedavi süresinde hala önemli farklılıklar vardır5. Daha etkili kemoterapi rejimleri elde etmek için uygun hayvan modellerine dayalı klinik öncesi deneyler yapmak önemlidir.

Şu anda, osteosarkom klinik öncesi deneyler için yaygın olarak kullanılan modeller arasında hücre hattı bazlı in vitro hücre kültürü ve in vivo hücre kaynaklı ksenogreftler (CDX) ile hasta kaynaklı ksenogreftler (PDX) bulunmaktadır6,7.

Hücre hatları, kültürleme ve in vitro çalışmalarda kullanım için veya CDX modelleri oluşturmak için immün yetmezliği olan farelere transplantasyon için uygundur8. Bununla birlikte, in vitro kültürlenen hücre hatları, tekrarlanan geçişler sırasında in vitro kültür ortamına uyum sağlamak için ortaya çıkan potansiyel mutasyonlar nedeniyle malignitelerin heterojenliğini ve hastaların bireysel özelliklerini doğru bir şekilde yansıtmayabilir. Ek olarak, in vivo olarak tümör büyümesi ve gelişimi için gerekli mikro çevre ve bağışıklık sisteminden yoksundurlar. CDX modelleri in vitro hücre kültürüne göre bazı avantajlar sunsa da, CDX modellerinden elde edilen tümör dokuları, in vitro9 kültürlenen hücre hatlarına kıyasla sınırlı intratümöral heterojenliğe ve bağışıklık sistemi temsiline sahip olmasına rağmen, osteosarkom hastalarının bireysel özelliklerini tam olarak yansıtmayabilir. Bu nedenle, yüksek sadakate sahip bir klinik öncesi model oluşturmak çok önemlidir.

PDX modelleri, yeni rezeke edilmiş insan kanser dokularının immün yetmezliği olan farelere derhal nakledilmesini içerir. Bu yöntem, farelerde ardışık geçişlerden sonra bile her hasta için insan malignitelerinin genetik, epigenetik ve heterojen özelliklerinin sadık bir şekilde korunmasına izin verir. Ayrıca, PDX modellerinin daha sonraki klinik sonuçları10 doğru bir şekilde tahmin ettiği bilinmektedir, bu da onları kişiselleştirilmiş tedaviler oluşturmak ve hassas tıp araştırmalarını ilerletmek için değerli araçlar haline getirir11.

Bu çalışma, insan osteosarkom dokusunu naklederek immün yetmezliği olan farelerde bir PDX modeli oluşturma prosedürünü açıklamaktadır. Bu tür modeller, osteosarkom için klinik öncesi deneyler yapmak için platformlar olarak hizmet eder.

Protokol

İnsan dokusunu içeren tüm çalışmalar, Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'ne (Şangay, Çin) bağlı Longhua Hastanesi Kurumsal Etik İnceleme Komitesi tarafından onaylanmış (2013LC52) ve Helsinki Deklarasyonu'na uygun olarak hastalardan yazılı bilgilendirilmiş onam alınmıştır. Bu hayvan çalışması için IACUC numarası PZSHUTCM221017013'dir. Dört haftalık erkek CAnN.Cg-Foxn1nu / Crl farelerine çift aslan Işınlanmış Kemirgen Diyeti GB 14924.3 ve steril su sağlandı ve 12 saatlik bir aydınlık / karanlık döngüsü ile SPF koşulları altında, kafes başına beş fare ile IVC'lerin fare kafesine yerleştirildi. Malzeme Tablosu, bu protokolde kullanılan tüm malzemeler, reaktifler ve aletler hakkında ayrıntılı bilgi içerir.

1. İnsan osteosarkom dokusunun hazırlanması

NOT: Bu çalışmada, 15 yaşındaki osteosarkom hastasının kemoterapi öncesi femur lezyonundan12 adet insan osteosarkom dokusu rezeke edildi.

  1. Steril fizyolojik salin ile duruladıktan sonra osteosarkom hücre aktivasyonunun korunmasını en üst düzeye çıkarmak için yeni rezeke edilmiş osteosarkom dokusunu hemen doku koruyucu bir solüsyonda saklayın.
    NOT: Yeni rezeke edilmiş osteosarkom dokuları mümkün olan en kısa sürede farelere nakledilmelidir. Transplantasyondan önce en fazla 24 saat doku koruyucu solüsyon içinde saklanabilirler. Modelleme için kullanılan osteosarkom dokuları kemoterapi almamış hastalardan olmalıdır. Kemoterapi alan hastalardan alınan tümör hücrelerinin aktivitesi zayıf olacak, bu da model oluşturmanın başarısızlığına ve yüksek sadakat kaybına yol açacaktır.
  2. Doku koruyucu solüsyon içinde saklanan yeni çıkarılmış osteosarkom dokularını mümkün olan en kısa sürede laboratuvara aktarın.
  3. PDX modelini oluşturmak için deneysel araçlar ve materyaller hazırlayın: neşterler (Şekil 1A); oftalmik cımbız (Şekil 1B,C); oftalmik makas (Şekil 1D); sütür iğnesi (Şekil 1E); sütür hattı (Şekil 1F); düz iğne tutucu (Şekil 1G); işaretleme kalemi (Şekil 1H).
    NOT: Kullanmadan önce tüm cerrahi aletlerin otoklavlama ile sterilize edildiğinden emin olun.
  4. Osteosarkom dokularını steril bir başlıkta önceden soğutulmuş steril fizyolojik salin ile iki kez durulayın.
  5. Osteosarkom dokusunun kanama ve nekroz olan bölgelerini çıkarın.
  6. Temizlenmiş osteosarkom dokusunu önceden soğutulmuş steril serum fizyolojik içeren bir kültür kabında bistüri yardımıyla3 mm 3 parçaya kesin ve buz üzerinde bekletin.

2. Fare yan bölgesinde osteosarkom doku nakli ile PDX modellerinin oluşturulması

  1. Farelerde deri altı enjeksiyonu ile preoperatif meloksikam analjezisi (5 mg / kg / 24 saat) uygulayın ve çıplak fareleri steril cerrahi örtülere yerleştirin. Prosedür boyunca termal destek sağlayın.
  2. Farelerde% 3 izofluran ve% 97 oksijene maruz bırakarak anesteziyi indükleyin. Fareler tamamen uyuşturulduktan sonra, onları burun konisine aktarın ve% 1.5 izofluran ve% 98.5 oksijen ile anesteziyi sürdürün.
  3. Farelerin tamamen uyuşturulduğundan emin olmak için ayak parmaklarını sıkıştırın ve hala spazmlar veya konvülsif reaksiyonlar varsa daha uzun süre bekleyin.
    NOT: Tüm prosedürler steril bir başlıkta steril ekipman kullanılarak gerçekleştirilmelidir. Anestezi sırasında gözlerine oftalmik merhem sürerek farelerin kuruluğunu önleyin.
  4. Fareyi yanal dekübit pozisyonunda sabitleyin (Şekil 2A). Osteosarkom doku nakli için fare yan bölgesinin bir tarafını alternatif povidon iyot ve% 70 etanol dezenfektan pamuk topları ile 3 kez dezenfekte edin.
    NOT: Cerrahi dezenfeksiyon, merkezden başlayıp dışa doğru spiral şeklinde dairesel bir şekilde gerçekleştirilir.
  5. Ciltteki cerrahi kesi bölgesini bir işaretleyici kalemle işaretleyin.
  6. Neşter ile ciltten cilt altı dokulara doğru 5 mm'lik bir kesi yapın (Şekil 2B).
  7. Sol elinizi kullanarak insizyon kenarının üst yan derisini oftalmik cımbızla kaldırın ve sağ elinizi kullanarak düz bir iğne tutucu ile farelerin dermisinin altında yukarı doğru künt diseksiyon yapın (Şekil 2C).
  8. Sol elinizi kullanarak oftalmik cımbızla insizyonun üst yan cildini tutun ve osteosarkom dokusunu nakletmek için sağ elinizi kullanarak osteosarkom dokusunu insizyon kenarının yaklaşık 5 mm yukarısına oftalmik cımbızla cilt altına yerleştirin (Şekil 2C).
    NOT: Osteosarkom dokusunun cildin dermisinin hemen altına nakledildiğinden emin olun. Künt diseksiyon, fare derisinin dermis tabakasını bulurken fare göğüs boşluğuna nüfuz etmemek için düz bir iğne tutucu gibi düz ve künt bir diseksiyon forseps ile yapılır.
  9. 5 mm'lik bir kesi için 2-3 dikişli emilebilir sütür kullanarak insizyonu dikin (Şekil 2D).
  10. Fareleri temiz kafeslere geri koyun ve anesteziden tamamen iyileşene kadar izleyin.
    NOT: İnsan osteosarkom dokusunun nakledilmesiyle kurulan PDX, pasaj 0 (P0) olarak adlandırılır, PDX dokusunun P0'da nakledilmesiyle kurulan PDX, pasaj 1 (P1) olarak adlandırılır, ardından P2 ve P3 gelir.

3. PDX tümör dokularının toplanması

  1. Tümör hacmini haftada bir kez ölçün. Tümör boyutu 1500 mm'yeulaştığında 3, CO2 inhalasyonundan sonra servikal çıkık yöntemini kullanarak farelere ötenazi yapın. İnsancıl uç noktalar, tümör ülseri veya ön ekstremite hareketliliği ile ilgili sorunları içerir.
    NOT: Bir kumpas kullanarak tümörün uzun çapını (a) ve kısa çapını (b) ölçün. Aşağıdaki formülü kullanarak tümör hacmini (V) hesaplayın: V = 1/2 × a × b2.
  2. Tümörü ortaya çıkarmak için fareyi yanlamasına konumlandırın ve tümör bölgesindeki cildi alkole batırılmış bir pamuk topuyla dezenfekte edin.
  3. Tüm tümörü ayırmak için oftalmik makas kullanın. Tümör kütlesini elektronik bir ölçek kullanarak tartın.

4. Primer klinik ve PDX tümör dokularının patolojik incelemesi

  1. Tümör dokularını13 24 saat boyunca 30 mL% 10 nötr tamponlu formalin çözeltisi içeren 50 mL'lik bir tüpe sabitleyin. Fiksatifi çıkarmak için tümör dokularını akan su ile iyice durulayın.
  2. Tümör dokularını kurutun ve parafin14'e gömün.
  3. Tümör dokularını dilimleyin ve rutin histolojik muayeneyi yapın15.

Sonuçlar

Bu protokol, farelerde yeni rezeke edilmiş insan osteosarkom dokusunun ve ardışık pasajların hemen transplantasyonundan sonra insan osteosarkomunun morfolojik özelliklerini koruyarak bir PDX fare modeli oluşturmak için ayrıntılı prosedürü açıklar. Burada, insan osteosarkom dokusu kullanılarak bir PDX fare modeli başarıyla kuruldu.

Şekil 3A , 15 yaşındaki bir hastadan femoral osteosarkom dokusunun transplantasyonundan iki ay sonra, P0'da PDX'in temsili bir faresini göstermektedir. Şekil 3B , P0'da PDX dokusunun transplantasyonundan bir ay sonra, P1'de PDX'in temsili bir faresini göstermektedir. Şekil 3C , P1'de PDX dokusunun transplantasyonundan bir ay sonra, P2'de PDX'in temsili bir faresini göstermektedir. Şekil 3D , P2'de PDX dokusunun transplantasyonundan bir ay sonra, P3'te PDX'in temsili bir faresini göstermektedir.

Fareler, PDX tümör dokularını toplamak için tümör boyutu 1.500mm3'e ulaştığında CO2 inhalasyonundan sonra servikal çıkık yöntemi kullanılarak sakrifiye edildi. Klinik hastalardan ve farelerden alınan tümör dokuları daha sonra parafine gömüldü ve H & E boyamaya tabi tutuldu. Klinik hasta tümör dokusunun temsili bir H&E boyama görüntüsü Şekil 4A'da gösterilmiştir. P0, P1 ve P2'deki PDX fare tümör dokularının temsili H&E boyama görüntüleri Şekil 4B, C, D'de gösterilmiştir. Ebeveyn klinik hasta tümör dokularında yuvarlak, hiperkromatik çekirdekli küçük hücrelerle karakterize osteosarkom özellikleri, P0, P1 ve P2'de yerleşik PDX'lerde korunmuştur.

figure-results-1
Şekil 1: Cerrahi aletler. (A) Neşter. (B,C) Oftalmik cımbız. (D) Oftalmik makas. (E) Dikiş iğnesi. (F) Sütür hattı. (G) Düz iğne tutucu. (H) İşaretleme kalemi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-2
Şekil 2: PDX modelinin kurulması. (A) Fare yan bölgesindeki osteosarkom doku nakli bölgesi bir işaretleme kalemi ile işaretlenmiştir. (B) Ciltten cilt altı dokuya doğru 5 mm uzunluğunda bir kesi yapıldı. (C) Künt diseksiyon ve osteosarkom doku nakli. (D) Dikişli insizyon. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-3
Şekil 3: Başlangıçta 15 yaşındaki bir hastadan alınan femoral osteosarkom dokusu ile nakledilen PDX'in büyümesi. (A) İnsan osteosarkom dokusunun (P0) nakledilmesiyle kurulan PDX. (B) PDX dokusunun P0 (P1)'de nakledilmesiyle oluşturulan PDX. (C) PDX dokusunun P1 (P2)'de nakledilmesiyle oluşturulan PDX. (D) PDX dokusunun P2 (P3)'te nakledilmesiyle kurulan PDX. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-results-4
Şekil 4: Primer klinik ve PDX dokulardan doku kesitlerinin hematoksilen-Eozin (H & E) boyaması. H&E boyamasında 15 yaşındaki hastada (A) Femoral osteosarkom, (B) P0'da PDX, (C) P1'de PDX, (D) P2'de PDX histolojik özellikleri tespit edildi. Ölçek çubukları: (A-D) 100 μm; (E-H) 20 μm. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Tartışma

PDX modelleri, insan kanserlerinin özelliklerini simüle edebilir ve genetik ve genomik değişiklikler, histoloji, heterojenlik ve gen ekspresyon profili 16,17,18,19 dahil olmak üzere birincil tümör ile daha fazla benzerliği koruyabilir. Bu nedenle, kanser hastalarının moleküler fenotiplerini ve genotiplerini korurlar, biyoloji eğitimi ve potansiyel terapötikleri değerlendirmek için yenilikçi yaklaşımlar sağlarlar. Bu yaklaşımlar, gerçek klinik yanıtlara oldukça benzer yanıtlara sahip yeni antikanser ilaçların klinik öncesi taranmasını, ilaç direnci biyobelirteçlerinin saptanmasını, kişiselleştirilmiş klinik tedavi rejimi seçiminde hassas ilaçların taranmasını ve hasta sonuçlarının tahmin edilmesini içerir20. Ayrıca, PDX modellerinin kuruluş süreci nispeten basittir ve özel ekipman gerektirmez.

Bu çalışma, insan osteosarkom dokularını kullanarak bir PDX fare modelini başarıyla kurdu. İnsan osteosarkom dokuları ile başarılı bir PDX modeli oluşturmanın birkaç önemli yönü ortaya çıktı. İlk olarak, insan osteosarkom dokularının farelerde nakledilebilirliği mümkündür ve bu da bir fare sisteminde insan osteosarkom biyolojisinin incelenmesini sağlar. Yüksek tümör oluşum hızı, fonksiyonel bağışıklık sistemlerinden yoksun immün yetmezliği olan farelerin kullanımına bağlanabilir ve nakledilen osteosarkom hücrelerinin reddedilmeden çoğalmasına izin verir. Ayrıca, bu çalışma, PDX modelinin orijinal insan osteosarkom dokularının histolojisini koruduğunu göstermiştir. Tümör morfolojisi ve histopatolojik özellikler primer hasta tümörü ile PDX tümörleri arasında benzerdi. Bu, PDX modelinin osteosarkomu doğru bir şekilde özetlediğini ve onu osteosarkomun ilerlemesini, metastazı ve tedavilere yanıtı incelemek için değerli bir araç haline getirdiğini gösterir.

Bununla birlikte, PDX modellemesi sırasında birkaç önemli noktanın ele alınması gerekir. İlk olarak, transplantasyon için kullanılan insan osteosarkom dokuları taze olarak çıkarılmalı ve mümkün olan en kısa sürede doku koruyucu bir solüsyonda saklanmalıdır. Rezeksiyondan sonraki 12 saat içinde transplantasyonun tamamlanması tercih edilir, ancak doku koruyucu solüsyonda depolanan insan osteosarkom dokularındaki tümör hücrelerinin aktivitesi en fazla 24 saat boyunca korunabilir16. İkinci olarak, hastaların moleküler fenotiplerini ve genotiplerini maksimum düzeyde korumak için kemoterapi almayan hastalardan alınan tümör dokularının kullanılması tercih edilir, ancak bir veya iki kez kemoterapi almış hastalardan alınan insan osteosarkom dokuları immün yetmezliği olan farelere başarılı bir şekilde nakledilebilir. Ayrıca, bir hasta birden fazla kemoterapi alırsa tümör hücresi aktivitesi zayıf olacak ve bu da transplantasyon modelleme başarısızlığına yol açacaktır; Bununla birlikte, nükseden hastalardan alınan osteosarkom dokuları, immün yetmezliği olan farelere nakledildikten sonra, başlangıçta teşhis edilen hastalardan alınan osteosarkom dokularından daha yüksek bir başarılı tümör oluşum oranına sahip olabilir. Üçüncüsü, osteosarkom dokularının cildin dermisinin hemen altına nakledilmesi, immün yetmezliği olan farelerde tümör oluşum oranını iyileştirecektir21.

Bu çalışmanın sınırlılıklarını kabul etmek önemlidir. İlk olarak, PDX modelinin kuruluş döngüsü uzundur ve transplantasyondan tümör oluşumuna kadar 4-12 hafta sürer22. İkinci olarak, tümör başlangıcı ve etiyolojisi ile ilgili bilgiler eksik olabilir, çünkü tam gelişmiş kanser hücresi osteosarkom dokuları nakledilir ve transplantasyon işlemi sırasında nadir alt klonlar veya genomik değişiklikler kaybolabilir. PDX tümörlerinin tüm genom dizilimi ve hasta örnekleriyle karşılaştırılması, model23'ün genetik doğruluğunu değerlendirmek için değerli olacaktır. Üçüncüsü, fare konak hücreleri tümörlere sızabilir ve potansiyel olarak tümör hücresi aktivitesinietkileyebilir 9. Dördüncüsü, PDX modeli yaklaşık %50'lik bir başarısızlık oranına sahiptir24,25. Son olarak, bazı durumlarda, immün yetmezliği olan farelere nakledildikten sonra tümör hücresi metastazı olmaması nedeniyle kanser metastazı incelenemez26.

Sonuç olarak, bu çalışma, insan osteosarkom dokularını kullanan bir PDX fare modelinin başarılı bir şekilde kurulmasını doğrulamaktadır. Bu model, orijinal tümörün histopatolojik özelliklerini aslına uygun olarak özetleyerek, osteosarkom biyolojisini keşfetmek ve potansiyel terapötikleri test etmek için değerli bir araç sağlar. Bu PDX modelini kullanan daha ileri çalışmalar, osteosarkom anlayışımızı geliştirecek ve bu hastalar için daha etkili stratejilerin geliştirilmesine yol açacaktır.

Açıklamalar

Yazarlar rekabet eden hiçbir mali çıkar beyan etmemektedir.

Teşekkürler

Bu çalışma, (1) Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81973877 ve 82174408); (2) Şanghay En Öncelikli Araştırma Merkezi inşaat projesi (2022ZZ01009); (3) Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2020YFE0201600); (4) Şanghay Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Bütçesi Bütçesi Kapsamında Hastane TCM Hazırlığının Endüstriyel Dönüşümü ve (5) Araştırma Projesi (2021LK047) Şanghay İşbirlikçi İnovasyon Merkezi.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
% 10 formalin nötr çözeltiWuhan Saiweier Biotechnology Co., LtdG1101-500mlDokuları düzeltin
OtoklavJaponya Hiryama ŞirketiHVE-50Sterilizasyon cerrahi aletleri
CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlShanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd./Hayvan
KaliperYantai Yeşil Orman Araçları Co., Ltd.034180ATümör hacmini ölçün
Çanak (60mm)Shanghai NianYue Biotechnology Co., Ltd430166, CorningTransplantasyon sırasında numune yerleştirme
Dezenfektan pamuk toplarıShanghai Honglong Industrial Co., Ltd.20230627Farelerin cildini dezenfekte
Tek kullanımlık steril eldivenlerGuilin Hengbao Health Protection Co., Ltd.YT21131Steril operasyon
Çift aslan Işınlanmış Kemirgen DiyetiSuzhou Shuangshi Deneysel Hayvan Yemi Technology Co., Ltd.GB 14924.3Hayvan yemi
Elektronik teraziŞangay NianYue Biotechnology Co., Ltd1-2000Tümörün ağırlığını tartın
EosinShanghai Gengyun Biotechnology Co., LtdE4009-25GHematoksilen eozin lekesi
HematoksilenŞangay Gengyun Biotechnology Co., LtdH3136-25GHematoksilen eozin lekesi
İzofluranShenzhen RWD Life Technology Co., LtdVETEASYFare anestezi 
IVC'ler fare kafesiSuzhou Maymun Kral Hayvan Deneysel Ekipman Technology Co., Ltd.HH-MMB-2Hayvan bariyeri
Mark kalemZebra Trading (Shenzhen) Co., Ltd.YYST5Cerrahi insizyonu işaretleyin
Olympus Optik mikroskopJapon Olympus ŞirketiBH20Doku dilimlerini tarayın
Oftalmik merhemŞangay Gengyun Biotechnology Co., LtdSOICOEYEGRLAnestezi sırasında farelerin kuru gözlerinden kaçının
Oftalmik makasShanghai NianYue Biotechnology Co., LtdY00030 JZCildi kesin
Oftalmik cımbızShanghai NianYue Biotechnology Co., LtdBS-ZER-S-100 BiosharpTransplantasyon sırasında osteosarkom dokularını tutun
ParafinJiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd.80200-0015Gömülü osteosarkom dokusu
Parafin dilimleme makinesiLyca Microsystem (Shanghai) Trading Co., Ltd.RM2235Osteosarkom doku kesiti
fizyolojik salinGuangzhou Jinsheng Biotechnology Co., Ltd.605-004057Osteosarkom dokusunun durulanması ve geçici depolanması
NeşterCerrahi Alet Fabrikası Şangay Tıbbi Cihazlar (Grup) Co., Ltd.J11010-10 # JZOsteosarkom dokusunun ayrılması ve cerrahi insizyonların yapılması
Steril başlıkThermo Fisher Technology (China) Co., Ltd.ECO0.9Cerrahi ameliyat masası
steril cerrahi örtülerHenan Huayu Medical Equipment Co., Ltd.20160090Steril cerrahi alanı sağlayın
Düz iğne tutucuShanghai Gengyun Biotechnology Co., LtdJ31050 JZYarayı sütür Sütür
hattıShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LtdF3124Yarayı dikin
Sütür iğnesiShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LtdF3124Yarayı dikin
Doku koruyucu solüsyonNanjing Shenghang Biotechnology Co., LTDBC-CFM-03Doku hücrelerinin aktivitesini koruyun
Tüp (50 mL)Shanghai Baisai, Biotechnology Co., Ltd.BLD-BL2002500Formalin fiksasyon çözeltisini yükleyin
edin

Kaynaklar

  1. Saraf, A. J., Fenger, J. M., Roberts, R. D. Osteosarcoma: accelerating progress makes for a hopeful future. Front Oncol. 8, 4(2018).
  2. Ligon, J. A., et al. Pathways of immune exclusion in metastatic osteosarcoma are associated with inferior patient outcomes. J Immunother Cancer. 9 (5), e001772(2021).
  3. Miwa, S., et al. Current and emerging targets in immunotherapy for osteosarcoma. J Oncol. 2019, 7035045(2019).
  4. Eaton, B. R., et al. Osteosarcoma. Pediatr Blood Cancer. 68 (2), e28352(2021).
  5. Ritter, J. Osteosarcoma. Ann Oncol. 21, 320-325 (2010).
  6. Lowery, C. D., et al. Broad spectrum activity of the checkpoint kinase 1 inhibitor prexasertib as a single agent or chemo potentiator across a range of preclinical pediatric tumor models. Clin Cancer Res. 25 (7), 2278-2289 (2019).
  7. Hingorani, P., et al. Trastuzumab deruxtecan, antibody-drug conjugate targeting Her2, is effective in pediatric malignancies: a report by the pediatric preclinical testing consortium. Mol Cancer Ther. 21 (8), 1318-1325 (2022).
  8. Brennecke, P., et al. CXCR4 antibody treatment suppresses metastatic spread to the lung of intratibial human osteosarcoma xenografts in mice. Clin Exp Metastasis. 31 (3), 339-349 (2014).
  9. Pan, B., Wei, X., Xu, X. Patient-derived xenograft models in hepatopancreatobiliary cancer. Cancer Cell Int. 22 (1), 41(2022).
  10. Tentler, J. J., et al. Patient-derived tumor xenografts as models for oncology drug development. Nat Rev Clin Oncol. 9 (6), 338-350 (2012).
  11. Yoshida, G. J. Applications of patient-derived tumor xenograft models and tumor organoids. J Hematol Oncol. 13 (1), 4(2020).
  12. Stitzlein, R. N., Wojcik, J., Sebro, R. A., Balamuth, N. J., Weber, K. L. Team approach: Osteosarcoma of the distal part of the femur in adolescents. JBJS Rev. 5 (12), 5(2017).
  13. Kai, K., et al. Formalin fixation on Her-2 and PD-l1 expression in gastric cancer: A pilot analysis using the same surgical specimens with different fixation times. World J Clin Cases. 7 (4), 419-430 (2019).
  14. Yang, T. S., et al. A practical protocol to prepare paraffin-embedded whole tick histology sections. Ticks Tick Borne Dis. 14 (4), 102162(2023).
  15. Chang, J., et al. Matrine inhibits prostate cancer via activation of the unfolded protein response/endoplasmic reticulum stress signaling and reversal of epithelial to mesenchymal transition. Mol Med Rep. 18 (1), 945-957 (2018).
  16. de Alava, E. Ewing sarcoma, an update on molecular pathology with therapeutic implications. Surg Pathol Clin. 10 (3), 575-585 (2017).
  17. Hidalgo, M., et al. Patient-derived xenograft models: An emerging platform for translational cancer research. Cancer Discov. 4 (9), 998-1013 (2014).
  18. Eoh, K. J., et al. Comparison of clinical features and outcomes in epithelial ovarian cancer according to tumorigenicity in patient-derived xenograft models. Cancer Res Treat. 50 (3), 956-963 (2018).
  19. Stewart, E. L., et al. Clinical utility of patient-derived xenografts to determine biomarkers of prognosis and map resistance pathways in EGFR-mutant lung adenocarcinoma. J Clin Oncol. 33 (22), 2472-2480 (2015).
  20. Kresse, S. H., Meza-Zepeda, L. A., Machado, I., Llombart-Bosch, A., Myklebost, O. Preclinical xenograft models of human sarcoma show nonrandom loss of aberrations. Cancer. 118 (2), 558-570 (2012).
  21. Dobrolecki, L. E., et al. Patient-derived xenograft (PDX) models in basic and translational breast cancer research. Cancer Metastasis Rev. 35 (4), 547-573 (2016).
  22. Abdolahi, S., et al. Patient-derived xenograft (PDX) models, applications and challenges in cancer research. J Transl Med. 20 (1), 206(2022).
  23. Deng, N., et al. Deep whole-genome sequencing identifies recurrent genomic alterations in commonly used breast cancer cell lines and patient-derived xenograft models. Breast Cancer Res. 24 (1), 63(2022).
  24. Chen, F., et al. Generation and characterization of patient-derived xenografts from patients with osteosarcoma. Tissue Cell. 79, 101911(2022).
  25. Fortuna-Costa, A., et al. An association between successful engraftment of osteosarcoma patient-derived xenografts and clinicopathological findings. Histol Histopathol. 35 (11), 1295-1307 (2020).
  26. Beck, J., et al. Canine and murine models of osteosarcoma. Vet Pathol. 59 (3), 399-414 (2022).

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Osteosarkom Modelinsan Osteosarkom DokusuPreklinik Kanser ModeliT m r Transplantasyonumm nodefisyent Farelerla DirenciT m r MetastazKi iselle tirilmi Kanser Tedavisi
İnsan Osteosarkom Dokuları ile Hasta Kaynaklı Ksenogreft Fare Modelinin Kurulması
Bize ulaşın
Kütüphaneye tavsiye et

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Telif hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.