Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

İntravezikal Hücre Uygulama Tekniği ile Murin Yüzeysel Mesane Kanseri Modelinin Oluşturulması

1.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/67402

⸱

18 Ekim 2024

 ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Bu protokol, yüzeysel mesane kanserinin ortotopik bir modelini oluşturmak için benzersiz bir yöntemi tanımlar.

Özet

Bu çalışma, yüksek verimlilik ve hassas tümör lokalizasyonu ile ortotopik bir murin mesane tümör modeli oluşturmak için yenilikçi bir yöntem sunmaktadır. Dişi C57BL / 6J fareleri sırtüstü pozisyonda uyuşturduktan sonra, içeriğini boşaltmak için mesaneye 24 G'lik bir intravenöz iğne yerleştirilir. Daha sonra 34 G'lik bir dağıtım iğnesi kateterden sokulur, mesane kubbe mukozasında fokal bir yaralanma oluşturmak için beş kez döndürülür ve ardından çıkarılır. MB49 hücre süspansiyonu aspire edilir ve kateter yoluyla mesaneye yerleştirilen 30 G'lık bir dağıtım iğnesine bağlanır. Tümör hücreleri basınç altında mesaneye submukozal olarak enjekte edilir. Bu teknik, farelerde minimal travma, yüksek tümör alma oranı ve sabit bir tümör konumu ile sonuçlanır. Basitlik ve mükemmel tekrarlanabilirlik ile karakterizedir. Bu model, mesane kanseri için intravezikal tedaviler geliştirmek için ideal bir deneysel platform sağlar ve bu malignite için tedavi stratejilerinin ilerlemesini ve optimizasyonunu kolaylaştırır.

Giriş

Mesane kanseri, insidans ve prognozda cinsiyete özgü belirgin eşitsizliklerle birlikte önemli bir küresel sağlık yükünü temsil etmektedir. Bu malignite, her biri farklı patojenik yolaklarla ilişkili farklı moleküler alt tiplerle karakterizedir. Kas invaziv olmayan mesane kanseri (NMIBC) ve kas invaziv mesane kanseri (MIBC) arasında moleküler ve patolojik özellikler önemli ölçüde farklılık gösterir1,2. NMIBC, vakaların yaklaşık% 75'ini oluşturur ve metastaz veya yayılma olmadan lokalize kalan geçiş epitel kökenli tümörleri içerir. Tersine, MIBC, kanser hücrelerinin mesanenin ka....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan deney protokolleri ve prosedürleri, Tianjin, Çin'deki Tianjin Tıp Üniversitesi Hayvan Deneyleri için Etik İnceleme Komitesi tarafından onaylanmıştır (onay numarası SYXK: 2020-0010). Bu çalışma için altı ila sekiz haftalık dişi C57BL / 6J fareleri kullanıldı. Hayvanlar, 12 saatlik aydınlık-karanlık döngüsü, 21-25 °C arasında değişen sıcaklıklar, %30-%70 arasında ayarlanabilir nem seviyeleri ve aksi belirtilmedikçe yiyecek ve suya sınırsız erişim dahil olmak üzere kontrollü çevre koşulları altında barındırıldı. Kullanılan reaktiflerin ve ekipmanın ayrıntıları Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Submukozal enjeksiyonların etkinliği başlangıçta Tripan Mavisi uygulaması ile değerlendirildi. Enjeksiyondan sonra, boyanın submukozal tabaka içindeki dağılımı net bir şekilde görüntülendi ve enjekte edilen maddelerin kesin ve kontrollü bir şekilde verildiğini doğruladı (Şekil 1).

Tümör gelişimi titizlikle takip edildi. İmplantasyondan yaklaşık 14 gün sonra, mesane neoplazisinin göstergesi olan kritik bir semptom olan kayda değer bir hematüri insidansı gözlendi. T.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Mesane kanseri ile ilgili araştırmalar, hem temel hem de uygulamalı araştırmalar için vazgeçilmez olan hayvan modellerine dayanmaktadır. Tümör büyüme ortamını daha iyi taklit etmek için, ortotopik mesane tümör modelleri, deri altı tümör modellerine kıyasla üstün bir yaklaşım sağlar11.

Şu anda, ortotopik mesane kanseri modelleri deneysel amaçlara dayalı olarak iki ana tipe ayrılabilir: hastadan türetilmiş ksenogreft (PDX) modelleri

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar rekabet eden çıkarları olmadığını beyan ederler.

Teşekkürler

Bu çalışma, Tianjin Belediye Sağlık Endüstrisi Anahtar Proje fonu tarafından desteklenmiştir (hibe no. TJWJ2022XK014), Tianjin Belediye Eğitim Komisyonu'nun Bilimsel Araştırma Projesi fonu (hibe no. 2022ZD069), Tianjin Üroloji Enstitüsü Yetenek Finansman Programı (hibe no. MYSRC202310), Tianjin Tıp Üniversitesi İkinci Hastanesi Klinik Tıp Araştırma Projesi fonu (hibe no. 2023LC03), Tianjin Tıp Üniversitesi İkinci Hastanesi Gençlik Fonu (hibe no. 2022ydey15) ve Tianjin Tıp Üniversitesi İkinci Hastanesi Üroloji Anabilim Dalı Yetenek Geliştirme Projesi (hibe no. MNRC202313). Sponsorlar, makalenin hazırlanmasında, gözden geçirilmesinde ve....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
34 G dağıtım iğnesiSuzhou Haorun Fluid Technology Co., Ltd., Suzhou, ÇinSGL-362
30 G dağıtım iğnesiSuzhou Haorun Fluid Technology Co., Ltd., Suzhou, ÇinSGL-362
AvertinSigma-Aldrich LLCT48402
Tripan mavisiSigma-Aldrich LLC302643

Kaynaklar

  1. Tran, L., Xiao, J. F., Agarwal, N., Duex, J. E., Theodorescu, D. Advances in bladder cancer biology and therapy. Nat Rev Cancer. 21 (2), 104-121 (2021).
  2. Dyrskjøt, L., et al. Bladder cancer. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 58(2023).
  3. Sim, W. J., et al.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Fare Mesane KanseriOrtotopik Tümör ModeliMB49 Hücre EnjeksiyonuMesane Tümörü LokalizasyonuSubmukozal Hücre EnjeksiyonuMesane Yaralama Tekniğiİntravezikal TerapiTümör Tutunma Oranı

Bu makale yayımlandı

Video yakında