Yöntem makalesi

Pulmoner Fibrozis ile İlişkili Pulmoner Arteriyel Hipertansiyonun Bir Sıçan Modelinin Oluşturulması ve Doğrulanması

DOI:

10.3791/67747

⸱

23 Mayıs 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Diseases, National Center for Respiratory Medicine, Guangdong Key Laboratory of Vascular Diseases, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Guangzhou Institute of Respiratory Health, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Department of Critical Care Medicine, The Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 3GMU-GIBH Joint School of Life Sciences, Guangzhou Medical University, 4Guangzhou laboratory, Guangzhou International Bio Island

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, pulmoner fibrozis (PF-PH) sıçan modeli ile ilişkili pulmoner arteriyel hipertansiyonun hava yoluna bleomisin enjeksiyonu ile indüklenmesi yöntemi tanıtılmıştır. Ayrıca bu hayvan modelini doğrulamak için adım adım bir yaklaşım sunuyoruz.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pulmoner fibrozisli hastalar, kötü prognozlu bir komplikasyon olan pulmoner hipertansiyon gelişme riski daha yüksektir. Şu anda, bu bağlantının mekanizması hala tam olarak anlaşılamamıştır. Bu alandaki ilerlemenin önündeki en büyük engel, PF-PH'yi taklit edecek güvenilir bir hayvan modelinin olmamasıdır. Bu çalışmada stabil bir PF-PH sıçan modeli oluşturulması amaçlanmıştır. Sıçanlar müdahaleden önce gece boyunca aç bırakıldı. Sodyum pentobarbital anestezi (45 mg/kg) altında trakea PE50 tüpü ile 3 cm derinliğe (glottis ile tüp arasındaki mesafe) kadar yerleştirilerek entübe edildi. Bleomisin (BLM) intratrakeal olarak tek bir doz olarak uygulandı (5 mg / kg, 0.2 mL% 0.9 NaCl içinde çözüldü). Enjeksiyonu takiben, BLM'nin eşit dağılımını sağlamak için sıçanlar hemen döndürüldü. BLM enjeksiyonundan 35 gün sonra, sıçanlar akciğer fonksiyonunda ilerleyici bir bozulma ve artmış sağ ventrikül sistolik basıncı ve sağ ventrikül hipertrofisi sergiledi ve pulmoner hipertansiyonun patolojik özelliklerini ortaya çıkardı. PF-PH'nin bir sıçan modelini oluşturmak için genel ve güvenilir bir yöntem sunuyoruz.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İnterstisyel akciğer hastalığına (İAH) bağlı pulmoner hipertansiyon (PH) klinik olarak yaygındır ve idiyopatik pulmoner fibrozisli (İPF) hastalarda tahmini prevalansı %10 ila %80 arasındadır ve diğer fibrotik İAH'lerde de sıklıkla görülür 1,2. Çok sayıda çalışma, PH gelişiminin önemli morbidite ve azalmış sağkalım ile bağlantılı olduğunu göstermiştir 3,4,5. Grup 1 pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH) ile karşılaştırıldığında, pulmoner fibrozis (PF-PH) ile ilişkili pulmoner arteriyel hipertansiyonun patogenezi tam olarak anlaşılamamıştır6. Sıçanlarda PF-PH'nin bir hayvan modeli oluşturmanın amacı, pulmoner hipertansiyon ile ilişkili pulmoner fibroz üzerine bilimsel araştırmalar için güvenilir bir çerçeve sağlamak ve klinik terapötik uygulamalar için potansiyel yolları araştırmaktır.

Bleomisin, hayvan modellerinde yaygın olarak kullanılan klasik bir pulmoner fibroz indükleyicisidir7. Blackburn ve ark.8 ve laboratuvarımız9 tarafından yapılan daha ileri araştırmalar, bleomisinin artmış sağ ventrikül sistolik basıncı (RVSP) ve sağ ventrikül hipertrofisi gibi pulmoner hipertansiyonun tipik patolojik özelliklerini de tetikleyebileceğini ortaya koymuştur. Mekanik olarak, bleomisin pulmoner parankimal fibrozis, hipoksik vazokonstriksiyon ve pulmoner vasküler yatak yoğunluğunda bir azalmaya neden olur, böylece pulmoner hipertansiyon gelişimine yol açar6. Ek olarak, bleomisin tedavisinin 7. gününden itibaren pulmoner vasküler endotel hücrelerinde önemli bir kayıp gözlemledik ve bu kayıp deney9 boyunca giderek kötüleşti. Bu fenomen, bleomisin ile indüklenen pulmoner vasküler endotel disfonksiyonunun pulmoner hipertansiyonun başlamasında ve ilerlemesinde potansiyel bir rol oynayabileceğini düşündürmektedir.

Pulmoner interstisyel fibroz nedeniyle, İPF hastaları uzun süre hipoksi durumundadır ve kardiyopulmoner damarlarda telafi edici değişiklikler meydana gelir, bu da pulmoner hipertansiyona yol açar6. Hayvan modellerinin kullanımı, pulmoner hipertansiyon ile ilişkili insan idiyopatik pulmoner fibrozunun altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamamıza yardımcı olabilir. Bu model, insan hastalığının patolojik özelliklerini tam olarak simüle edemese de, bu model yine de değerli bilgiler sağlayabilir. Tek doz bleomisin hava yolu infüzyonu, transforme edici büyüme faktörlerinin viral vektör iletimi ve silika 8,10'a maruz kalma gibi pulmoner fibrozu simüle eden birçok deneysel model vardır. Şu anda, BLM modeli, kısa sürede kolayca indüklenebilmesi ve yüksek tekrarlanabilirliğe sahip olması nedeniyle en yaygın kullanılan ve karakterize edilen modeldir. Ek olarak, pulmoner fibrozdaki zamansal değişiklikler, 15-218. günler arasında fibroz belirteçlerinin ve Col1A1 ve Col1A2 gibi hastalık patolojisi ile ilişkili genlerin artan ekspresyonunun gözlendiği bir bleomisin fare modelinde değerlendirilmiştir. Sağ ventrikül hipertrofisi ve RVSP'de önemli bir artış gibi kardiyovasküler değişiklikler 3311. günde veya sonrasında tespit edildi. Aynı zamanda laboratuvarımız daha önce bleomisin9'un neden olduğu sıçan modellerinin PH ve PF parametrelerindeki değişiklikleri değerlendirmiştir. Sıçanlarda ilerleyici akciğer fonksiyon bozukluğu ve kollajen birikimi gibi pulmoner fibroz (PF) özelliklerine ek olarak, pulmoner hipertansiyonun (PH) tipik özelliklerinin, tek bir hava yolu bleomisin damlatılmasından sonraki 7 ila 35 gün içinde yavaş yavaş ortaya çıktığını bulduk. RVSP ve Fulton indeksi zaman bağımlılığında artış göstermiştir. Şu anda, literatürde pulmoner fibrozisli çeşitli hayvanlar bildirilmiştir. Bazı uzmanlar, sıçan modellerinin fare modellerinden daha belirgin bir fibrotik tepki sergilediğini öne sürmüşlerdir12. Bu nedenle, pulmoner hipertansiyon ile birlikte pulmoner fibrozun ilerlemesini daha iyi incelemek için, bleomisin kaynaklı bir sıçan modeli anahtardır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışmada açıklanan hayvan deneyleri, Guangzhou Tıp Üniversitesi Birinci Bağlı Hastanesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır (etik onay numarası: 2018-456).

1. Deney farelerinin temini

  1. Sıçanları iki gruba ayırın: normal kontrol grubu ve model grubu, her grupta 7 sıçan. Çalışma için 200 ila 20 g ağırlığında 10 haftalık erkek Sprague-Dawley ± 20 sıçanları kullanın

2. PF-PH sıçan modelinin indüksiyonu

  1. İşlem sırasında aspirasyonların tekrarlanmasını önlemek için, modellemeden önce fareleri gece boyunca aç bırakın.
  2. Prosedürel doğruluğu ve güvenliği sağlamak ve hayvan ağrısını ve stresini en aza indirmek için intraperitoneal pentobarbital sodyum (45 mg / kg) enjeksiyonu ile sıçanları uyuşturun. Ayak parmağını sıkıştırmaya yanıt vermeyerek cerrahi anestezi seviyelerini onaylayın. Aynı zamanda, kuruluğu önlemek için farelerin gözlerine bir merhem sürün.
  3. Sıçanın trakeasını 3 cm derinliğe (glottis ile tüpe olan mesafe) yerleştirilmiş bir PE50 tüpü ile entübe edin.
  4. 1 mL'lik bir şırınga (26G) kullanarak, 0.2 mL Bleomisin (5 mg / kg, 0.2 mL% 0.9 NaCl içinde çözülmüş) çizin. BLM içeren şırıngayı tek bir doz olarak bir kanül yoluyla hava yoluna enjekte edin. Kontrol grubundaki sıçanlar için, steril normal salinin (0.2 mL) intratrakeal uygulamasını gerçekleştirin. Bu işlem sırasında, sıçanların ağrı kesiciye ihtiyacı yoktur.
  5. Bleomisinin eşit dağılımını sağlamak için, fareyi sırtüstü pozisyona getirin, hafifçe tutun ve yavaşça döndürün. Önerilen dönüş açısı, kenarlar arasında dönüşümlü olarak 30°-45°'dir. Her dönüş 10-15 saniye boyunca muhafaza edilmeli, 3x-4x tekrarlanmalıdır.
  6. Vücut ısısını korumaya yardımcı olmak ve durumlarını yakından izlemek için fareleri ısıtma yastıklarına yerleştirin. Sıçanların kendi başlarına hareket etmeye başladıklarını gözlemleyin ve hayvanları ısıtma yastığından kurtarma için ayrı bir kafese aktarın.
  7. 5 haftalık BLM enjeksiyonundan sonra, ekokardiyografik izleme, hemodinamik ölçümler ve histolojik analiz gibi yöntemler kullanılarak PF-PH modelinin başarılı bir şekilde kurulup kurulamayacağını belirlemek için sıçanları değerlendirin.

3. Ekokardiyografik izleme

  1. % 4 izofluran kullanarak sıçanları uyuşturun. Farenin kürkünü bir epilasyon kremi ile çıkarın ve göğsüne ultrasonik jel uygulayın.
  2. 250 MHz ultrasonik prob ile sıçanlarda sağ kalbin fonksiyonel ve yapısal parametrelerini değerlendirin. Ventrikülün en iyi uzun eksen görünümünü elde etmek için, probu hayvanın göğsünün medyan çizgisinin sol tarafına yerleştirin.
  3. Bireysel anatomiye göre, probu kesici sağ omzuna bakacak şekilde sol parasternal çizgiye göre saat yönünün tersine 15° döndürün ve x ve y eksenlerini B Modunda tüm kalp görme alanının merkezinde olacak şekilde ayarlayın.
  4. Pulmoner arteri ayırt etmek için kan akışı rengini görüntülemek için Renk'i seçin (bu konumdaki pulmoner arter kan akışı sinyali mavidir).
  5. PW (PW Doppler) modunu seçin, örnekleme hattını pulmoner valfin altına yerleştirin ve örnekleme yönünü, örnekleme yönü pulmoner arter kan akışının yönüne paralel olacak şekilde (yaklaşık 25°) ayarlamak için PW açı düğmesini çevirin. PW tuşuna tekrar basın ve pulmoner arter kan akışı hızlandırma süresini/ejeksiyon süresini (PAT/PET) elde edin. En az beş kardiyak döngüyü ve ortalamayı ölçün. Görüntüyü kaydetmek için Cine'yi kullanın.
  6. Hayvanı düşük bir başa ve yüksek bir ayağa ayarlayın, ultrasonik probu hayvanın kalbinin tepesine yerleştirin ve dört odacıklı insizal yüzeyi elde etmek için ultrasonu kalbin tepesi boyunca sürün. Dört kalp odasının görünür olduğundan emin olmak için x ve y eksenlerini B modunda ayarlayın.
  7. M modunu basılı tutarak ölçüm çizgisini 2x görüntüleyin ve triküspit kapak halkası ile sağ ventrikülsüz duvarın birleştiği yere yerleştirin. Triküspit kapak yer değiştirme mesafesini (TAPSE) en az üç kardiyak döngü içinde ölçün ve Çin'de koruyun.
  8. Probu, hayvanın göğsünün sağ köprücük kemiğinin orta hattına yerleştirin ve prob ile hayvanın göğüs çentiği arasındaki açıyı yaklaşık 45°'ye ayarlayın. Görüntüyü, sağ ventrikül ventrikül ve interventriküler septum görünecek şekilde B Modunda ayarlayın.
  9. Ölçüm çizgisi 2x'i görüntülemek için M Modunu seçin ve ölçüm çizgisini interventriküler septumun ortasına yerleştirin. Örnekleme hattı sağ ventrikül serbest duvarına dik idi. Sağ ventrikülsüz duvarın kalınlığını elde etmek için görüntüyü kaydedin.

4. Akciğer fonksiyonunun tahmini

  1. PFT yazılımını açın ve cihazın tanınıp tanınmadığını kontrol edin. Akış sensörlerinin ve basınç sensörlerinin doğruluğunu sağlamak için ekipman talimatlarına göre kalibre edin. PFT yazılımında solunum hızı, tidal hacim, test süresi vb. gibi test parametrelerini ayarlayın.
  2. Hayvan algılama modu, sıçan çalışmaları için moddur. Ana kontrol cihazının anahtarını açın ve her bir sinyalin anahtarının olduğundan emin olun.
  3. Hava akışını hayvanın vücut ağırlığına göre ayarlayın. Emme hava akışı düzenleyici somununu açın ve ilhamı 5'e ayarlayın. Ekspiratuar hava akışı düzenleyici somunu açın ve yavaş ekspirasyonu -4'e ayarlayın. Basınç değerini 60 cm H2O'ya ayarlayın ve ardından cihazı FRC akışı, akış, yüksek akış ve akciğer basıncı sırasına göre %0,5'ten daha az bir hatayla kalibre edin.
  4. Sıçanları, adım 2.2'deki gibi pentobarbital sodyum (45 mg / kg) ile intraperitoneal enjeksiyon ile anestezileştirin. Cildi boynun ortası boyunca kesin ve kas tabakasını tabaka tabaka çıkarın.
  5. Servikal trakeanın açıkta kalan üst kısmında, trakeal kıkırdak halkaları arasında yatay bir kesi yapın. Metal kanülü hızlı bir şekilde trakeal insizyona yerleştirin ve kanülün doğru şekilde yerleştirildiğinden ve güvenli olduğundan emin olun. Kanülü soluk borusuna sabitleyerek kaymasını veya yerinden çıkmasını önlemek için 4-0 ipek iplikli dikişler kullanın. Fareyi PFT hayvan bölmesine yerleştirin ve trakeal kanülü cihazın dışındaki hava akış kanalı arayüzüne bağlayın.
  6. Başlat düğmesine tıklayın ve zorlanmış hayati kapasiteyi (FVC) ve dinamik akciğer uyumluluğunu inceleyin. Veri tutarlılığını sağlamak için her göstergeyi en az 3x kaydedin.
  7. Test tamamlandıktan sonra veriler kaydedilir ve analiz yazılımına aktarılır. Verileri analiz etmek ve farklı grupların akciğer fonksiyon parametrelerini karşılaştırmak için istatistiksel yazılım kullanın.

5. Hemodinamik ve histolojik ölçümler

  1. Sağ ventrikül sistolik basıncının (RVSP) tespiti
    1. Sıçanları, adım 2.2'deki gibi pentobarbital sodyum (45 mg / kg) ile intraperitoneal enjeksiyon ile anestezileştirin. Sıçanın yanıt vermemesini sağlamak için ayak parmağını sıkıştırarak sıçanın uygun şekilde uyuşturulduğunu onaylayın. Farenin karnını deney tezgahına yukarı doğru sabitleyin ve kuruluğu önlemek için farenin gözlerine göz kremi sürün.
    2. Cerrahi makasla boynun sağ tarafında bir kesi (yaklaşık 4 cm) yapın ve mikrocerrahi forseps ile dış juguler veni ayırın. Yaklaşık 1 cm uzunluğundaki damarları mikro forseps ile nazikçe ayırın ve distal ve proksimal uçlara iki cerrahi çizgi yerleştirin.
    3. Entübasyondan önce, PE50 tüpünü en az 30 dakika boyunca% 1 heparin sodyum veya EDTA içeren normal salin içinde bekletin. Basıncı 0 çizgisine geri getirmek için fizyolojik kayıt cihazını ayarlayın ve basınç aralığını 0-150 mmHg'ye ayarlayın.
    4. Dış juguler venin distal ucunu 4-0 ipek iplikle bağlayın, proksimal cerrahi çizgiyi nazikçe kaldırın ve distal ven duvarına yerleştirin. Küçük bir kesi yapmak için küçük bir makas kullanın (yaklaşık 0,3 mm). PE50 tüpünü dış juguler ven içine yerleştirdikten sonra, kan sızıntısını önlemek için kateteri dış juguler ven ile birlikte bağlamak için 4-0 ipek iplik kullanın.
    5. Kayıt cihazındaki venöz basınç dalga biçimini gözlemleyin. Kateteri yavaşça sağ atriyuma itin ve yaklaşık 0-5 mmHg genlik ile sağ atriyum dalga formu görülebilir. Kateter sağ kulakçıktan sağ karıncığa doğru ilerlemeye devam ettikten sonra sağ karıncık basınç dalga formu görülebilir. Basınç sabit olduğunda, RVP'yi 5 dakika boyunca kaydedin ve veriler analiz yazılımı ile kaydedilir ve analiz edilir.
  2. Fulton indeksinin tespiti
    1. RVSP tespit edildikten sonra, izofluran anestezisini takiben (% 5, 2 L / dak O2), sıçanları kan kaybı yoluyla ötenazi yapın.
    2. Torakotomiden sonra, farenin sağlam kalbini cımbızla çıkarın. Kulak kepçesini ve kalbin yakınındaki bağ dokusunu makasla kesin.
    3. Sağ ventrikülün serbest duvarını pulmoner arter boyunca kesin. Bu doku sağ ventriküldür (RV). Kalan dokular sol ventrikül artı interventriküler septum (LV+S)'dir. Ayırma işleminden sonra, sağ ventrikül (RV) ve sol ventrikül artı interventriküler septumun (LV+S) yüzeyini filtre kağıdı ile boşaltın ve analitik terazi kullanarak ayrı olarak tartın. Sağ ventrikül (RV) ve sol ventrikül artı ventriküler septumun (LV+S) ağırlığını kaydettikten sonra, sağ ventrikülün sol ventrikül artı ventriküler septuma (RV/(LV+S)) ağırlık oranını hesaplayın.
  3. Histolojik boyama
    1. Göğüs boşluğunu açtıktan sonra, 3 mL salin çekmek için 10 mL'lik bir şırınga kullanın. Şırıngayı pulmoner artere yerleştirin ve akciğerleri yıkamak, kan ve diğer kalıntıları gidermek için salini yavaşça enjekte edin.
    2. Akciğerin sağ aksesuar lobunu ve sağ ön lobunu incelemek için makas kullanın. Doku morfolojisini ve yapısını korumak için bu iki akciğer lobunu fiksasyon için% 4 formaline yerleştirin. Akciğerin kalan üç lobunu (sol akciğer, sağ orta lob ve sağ arka lob gibi) donmuş saklama için sıvı nitrojene hızlı bir şekilde yerleştirin ve sonraki deneyler için hazır olun.
    3. Doku bloklarının temiz ve düzenli olduğundan emin olmak için akciğer dokusunun yüzeyindeki fazla yağ ve bağ dokusunu çıkarın. Akciğer loblarını 5 mm x 5 mm x 3 mm ölçülerinde küçük bloklar halinde kesin. Kesilmiş doku bloklarını kurutucuya yerleştirin ve gradyan bir dizi alkol (%60, %70, %80, %90, %100) kullanarak kademeli olarak kurutun.
    4. Şeffaflık elde etmek için akciğer dokusunu 2 saat boyunca ksilene batırın. Çıkardıktan sonra, tam sızmayı sağlamak için 2 saat boyunca 56-58 ° C'de erimiş parafin içinde bekletin. Ardından, dokuyu bir kalıba yerleştirin ve sonraki kesitleme için kesme yüzeyi aşağı bakacak şekilde konumlandırın.
    5. Balmumu bloğunu mikrotom üzerinde 4-8 μm13 kalınlığında dilimleyin ve patolojik boyama için oda sıcaklığında saklayın.
    6. Eosin ve Masson'un trikrom boyama işlemini gerçekleştirin14.

6. Hidroksiprolin (HYP) tespiti

  1. Bir cam tüpte 30-100 mg akciğer dokusunu tartın. 2 mL hidroklorik asit çözeltisi (6 mol/L) ekleyin ve 110 °C'de bir fırında 2-6 saat büyük topaklar görünmeyene kadar sindirin.
  2. Soğuduktan sonra, 1 mL NaOH çözeltisi (10 mol/L) kullanarak pH değerini 6-8 aralığına ayarlayın, ardından damıtılmış suyu 4 mL çözeltiye yoğunlaştırın. Son olarak, 20 dakika boyunca 25 ° C'de 28.620 x g'de santrifüjleyin ve süpernatanı alın.
  3. Mikroplaka okuyucuyu 30 dakika önceden ısıtın, dalga boyunu 560 nm'ye ayarlayın ve damıtılmış su kullanarak cihazı sıfırlayın.
  4. 30, 15, 7.5, 3.75, 1.875, 0.938, 0.469 ve 0.234 μg/mL konsantrasyonlarda standart çözeltiler hazırlamak için standart çözeltiyi damıtılmış su ile seyreltin.
  5. Numune süpernatanından 60 μL alın ve 60 μL Reaktif A ile karıştırın, ardından oda sıcaklığında 20 dakika bekletin.
  6. 60 μL Reaktif B ve 120 μL damıtılmış su ekleyin. Karışık çözeltiyi 20 dakika boyunca 60 ° C su banyosuna koyun. Standart çözeltilerin her konsantrasyonu için aynı adımları izleyin (örn., 30, 15, 7.5, 3.75, 1.875, 0.938, 0.469, 0.234 μg/mL) ve işlemleri buna göre gerçekleştirin.
  7. Oda sıcaklığında 15 dakika bekletildikten sonra, 560 nm'deki ışık absorpsiyon değerini tespit etmek için 96 oyuklu plakaya 200 μL çözelti alın. Standart eğriyi, standart çözeltilerin konsantrasyonu x ekseni ve ölçülen değerler y ekseni olarak çizin ve y=kx+b denklemini elde edin. Numunenin konsantrasyonunu belirlemek için numunenin ölçülen değerini denkleme koyun.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Sıçanlarda bleomisin kaynaklı pulmoner fibroz
Bleomisin, hayvan modellerinde pulmoner fibrozun klasik bir indükleyicisi olarak bildirilmiştir7. Burada, BLM stimülasyonunu takiben pulmoner fibroz indeksleri değerlendirildi. İlk olarak, 35 günlük BLM tedavisinden sonra, akciğer fonksiyon testleri yaptık ve model grubundaki hem FVC'nin (Şekil 1E) hem de dinamik akciğer kompliyansının (Şekil 1F) önemli ölçüde azaldığını gö...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

İdiyopatik pulmoner fibrozis, tanıdan itibaren medyan sağkalımı 2-3 yıl olan ilerleyici, ölümcül bir hastalıktır ve kasvetli bir prognozu düşündürür9. Pulmoner hipertansiyon, İPF'nin yaygın bir komorbiditesidir ve İPF'yi hızla kötüleştirir ve prognozu kötüleşir15. Dahası, IPF-PH7 için sınırlı terapötik seçenekler vardı. Bu nedenle, hastalık için potansiyel bir terapötik yaklaşım sağlayabilecek PF-PH'nin altında yatan...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların ilgili herhangi bir finansal açıklaması yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, kısmen Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82370063, 82170069, 82120108001, 82241012), Guangzhou Ulusal Laboratuvarı Ar-Ge Programı (GZNl2023A02013), Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2022YFE0131500), Guangdong Bilim ve Teknoloji Departmanı (2024A1515011208, 2022A1515012052, 2024A1515013104, 202102020019, 202201020538, 202201010069, 2023A03J0334), Solunum Hastalıkları Devlet Anahtar Laboratuvarı (SKlRD-Z-202513), Guangdong Tıbbi Araştırma Vakfı (A2023379) Guangzhou Tıp Üniversitesi Bağımsız Projesi ve GMU'da bilimsel araştırmaları geliştirme planı ve Guangzhou Tıp Üniversitesi Altıncı Bağlı Hastanesi'nden Açık Araştırma Fonları (Qingyuan Halk Hastanesi) (202201-101).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
BleomisinMedChemExpressHY-17565A
Birleştirme maddesiHYNAUTBX-CSRH
Formalin sabitleyiciBiosharp)BL401B
Epilasyon kremiLUSENLS-B-TMG-50
Hematoksilen eozin (HE) boyama kitiBeyotimeC0189S
İzofluranRWD Yaşam Bilimleri ( Çin)R510-22-10
Masson Üç renkli boyama kitiBeyotimeC0189S
Normal tuzlusu KERONGSLYS-001
şırıngaBeyotimeFS701-50 adet

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Sm, N., et al. Clinical significance of pulmonary hypertension in interstitial lung disease: A consensus statement from the Pulmonary Vascular Research Institute's innovative drug development initiative-Group 3 pulmonary hypertension. Pulm Circ. 12 (3), e12127(2022).
  2. Nathan, S. D., et al. Pulmonary hypertension in chronic lung disease and hypoxia. Eur Resp J. 53 (1), 1801914(2019).
  3. King, C. S., Shlobin, O. A. The Trouble With Group 3 Pulmonary Hypertension in Interstitial Lung Disease. Chest. 158 (4), 1651-1664 (2020).
  4. Meyer, K. C. Pulmonary fibrosis, part I: epidemiology, pathogenesis, and diagnosis. Expert Rev Respir Med. 11 (5), 343-359 (2017).
  5. Raghu, G., et al. Idiopathic Pulmonary Fibrosis (an Update) and Progressive Pulmonary Fibrosis in Adults: An Official ATS/ERS/JRS/ALAT Clinical Practice Guideline. Am J Respir Critic Care Med. 205 (9), e18-e47 (2022).
  6. Ruffenach, G., Hong, J., Vaillancourt, M., Medzikovic, L., Eghbali, M. Pulmonary hypertension secondary to pulmonary fibrosis: clinical data, histopathology and molecular insights. Respir Res. 21 (1), 303(2020).
  7. Li, S., Shi, J., Tang, H. Animal models of drug-induced pulmonary fibrosis: an overview of molecular mechanisms and characteristics. Cell Biol Toxicol. 38 (5), 699-723 (2022).
  8. Karmouty-Quintana, H., et al. Deletion of ADORA2B from myeloid cells dampens lung fibrosis and pulmonary hypertension. FASEB J. 29 (1), 50-60 (2015).
  9. Jiang, Q., et al. Dysregulation of BMP9/BMPR2/SMAD signalling pathway contributes to pulmonary fibrosis and pulmonary hypertension induced by bleomycin in rats. Br J Pharmacol. 178 (1), 203-216 (2021).
  10. Degryse, A. L., Lawson, W. E. Progress toward improving animal models for idiopathic pulmonary fibrosis. Am J Med Sci. 341 (6), 444-449 (2011).
  11. Collum, S. D., et al. Inhibition of hyaluronan synthesis attenuates pulmonary hypertension associated with lung fibrosis. Br J Pharmacol. 174 (19), 3284-3301 (2017).
  12. Ye, X., et al. Animal models of acute exacerbation of pulmonary fibrosis. Respir Res. 24 (1), 296(2023).
  13. León-Mancilla, B., et al. Three-Dimensional Collagen Matrix Scaffold Implantation as a Liver Regeneration Strategy. J Vis Exp. (172), e62697(2021).
  14. Oldham, S., Rivera, C., Boland, M. L., Trevaskis, J. L. Incorporation of a Survivable Liver Biopsy Procedure in Mice to Assess Non-alcoholic Steatohepatitis (NASH) Resolution. J Vis Exp. (146), e59130(2019).
  15. Jiang, Q., et al. Nephrectomy and high-salt diet inducing pulmonary hypertension and kidney damage by increasing Ang II concentration in rats. Respir Res. 25 (1), 288(2024).
  16. Moore, B. B., Hogaboam, C. M. Murine models of pulmonary fibrosis. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 294 (2), L152-L160 (2008).
  17. Jenkins, R. G., et al. An Official American Thoracic Society Workshop Report: Use of Animal Models for the Preclinical Assessment of Potential Therapies for Pulmonary Fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol. 56 (5), 667-679 (2017).
  18. Lahm, T., et al. The effects of estrogen on pulmonary artery vasoreactivity and hypoxic pulmonary vasoconstriction: Potential new clinical implications for an old hormone. Crit Care Med. 36 (7), 2174-2183 (2008).
  19. Chen, Y., et al. Tetramethylpyrazine: A promising drug for the treatment of pulmonary hypertension. Br J Pharmacol. 177 (12), 2743-2764 (2020).
  20. Zheng, Q., et al. Established pulmonary hypertension in rats was reversed by a combination of a HIF-2α antagonist and a p53 agonist. Br J Pharmacol. 179 (5), 1065-1081 (2022).
  21. Chen, J., et al. Upregulation of mechanosensitive channel Piezo1 involved in high shear stress-induced pulmonary hypertension. Thrombo Res. 218, 52-63 (2022).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Bleomisin nd ksiyonuSa Ventrik l Bas ncAkci er FonksiyonuPulmoner Vask ler RemodellemeTrakeal Ent basyonZorlu Vital KapasiteHistolojik Boyama

İlgili makaleler