Yöntem makalesi

Helicobacter pylori virülansının hızlı tespiti ve kuantum nokta etiketleme teknolojisi kullanılarak tiplendirilmesi

DOI:

10.3791/67792

⸱

13 Haziran 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory Medicine, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Helicobacter pylori için sayısız tanı yöntemi arasında, kuantum nokta immünofloresan, Helicobacter pylori'yi hızlı bir şekilde yazıp tespit edebilir ve klinik tedavi kararları için bir temel sağlar. Bu makale, Helicobacter pylori'nin tiplendirilmesi ve tespitinde kuantum nokta teknolojisinin uygulama değerine ayrıntılı bir giriş sağlar.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Helicobacter pylori'nin virülansını hızlı bir şekilde tespit etmek ve tiplemeyi gerçekleştirmek için kuantum nokta etiketleme teknolojisine dayalı, geleneksel tanı yöntemlerinin sınırlamalarının üstesinden gelmeyi ve kişiselleştirilmiş klinik tedavi için bir temel sağlamayı amaçlayan bir yöntem sunuyoruz. Çift antijenli sandviç yöntemi kullanılarak bir kit tasarlandı. Bu, tampon reaksiyon sistemlerinin kurulması ve kitin hazırlanması sırasında antijen-antikor reaksiyonları için aktivasyon ve birleştirme işlemlerinin yürütülmesi dahil olmak üzere bir dizi titiz adımı içeriyordu. Ek olarak, Helicobacter pylori'nin enfeksiyon durumunu ve virülans tipini belirlemek için numune toplama, işleme ve test işlemleri için özel prosedürler vardı. Farklı sonuçlar (negatif, tip II ve tip I) için veri modelleri oluşturularak, kuantum nokta teknolojisinin tip algılamadaki etkinliği doğrulandı. Negatif numuneler söz konusu olduğunda, ilgili tespit alanlarında zayıf sinyal değerleri vardı veya hiç yoktu. Tip II numuneler için, farklı antikorlar için spesifik bir pozitif ve negatif sinyal değerleri modeli gözlendi ve tip I numuneler için, anahtar antikorlara karşılık gelen farklı bir pozitif sinyal değerleri seti not edildi. Ayrıca, kronik gastrit ve mide kanseri ile ilgili çalışmalarda uygulanması, bir tarama göstergesi olarak hizmet etmedeki değerini göstermiştir. Kuantum nokta tabanlı yöntem, geleneksel tanı yöntemlerine kıyasla gelişmiş duyarlılık ve özgüllük gibi avantajlara sahiptir. Bununla birlikte, numune depolama süresinden kaynaklanan potansiyel etkiler ve nispeten yüksek maliyetler gibi zorluklarla da karşı karşıyadır. Bununla birlikte, sürekli teknolojik yeniliklerle birlikte, gelecekte Helicobacter pylori tespiti ve ilgili hastalık teşhisi için biyomedikal alanda daha önemli bir rol oynaması beklenmektedir.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Helicobacter pylori (H. pylori), mide antrumununpilor mukozası ile submukozası arasında bulunan Gram negatif bir bakteridir 1,2. 1994 yılında, Dünya Sağlık Örgütü / Uluslararası Kanser Araştırmaları Ajansı (WHO / IARC) onu Sınıf I kanserojen olarak sınıflandırdı. Vakuoler sitotoksin A (VacA) ve sitotoksin ile ilişkili gen A (CagA) toksinlerini eksprese edip etmediklerine göre iki tipe ayrılırlar: tip I H. pylori enfeksiyonu virülan suşu: daha öldürücü ve hastalar için daha zararlı. Mide ve duodenum ülseri ve mide kanseri insidansı ile yakından ilişkili olan Tip II H. pylori enfeksiyonu, genellikle hafif hazımsızlık olarak ortaya çıkan, zayıf patojeniteye sahip düşük virülanslı suşları içerir 3,4. Araştırmacılar, tip I enfeksiyon oranının tip II'den daha yüksek olduğunu, tip I ve tip II enfeksiyon oranlarının sırasıyla %72.4 ve %27.6 olduğunu bulmuşlardır5. H. pylori tiplerinin hızlı tespiti, özellikle tip I ve tip II arasındaki ayrım, klinik tedavi ve hastalığın önlenmesi için çok önemlidir.

H. pylori enfeksiyonunun neden olduğu kronik gastrit, enfekte hastalarda atrofik gastrit, peptik ülser hastalığı, mide adenokarsinomu ve mukoza ile ilişkili lenfoid doku (MALT) lenfoma gibi ciddi sindirim sistemi hastalıklarına yol açabilir 6,7,8. 2014 Küresel Hastalık Yükü Çalışması, 2010'dan başlayarak, her yıl 100.000 kişi başına yaklaşık 3,5 ölümün peptik ülser hastalığından kaynaklanacağını tahmin etmektedir9. Araştırma raporları, 2018 yılında dünya çapında yaklaşık 800.000 yeni mide kanseri vakasının H. pylori enfeksiyonu ile ilişkili olduğunu bulmuştur10. Son yıllarda yapılan çalışmalar, H. pylori enfeksiyonunun nörolojik hastalıklar, kardiyovasküler hastalıklar, diyabet vb. ile de yakından ilişkili olduğunu bulmuştur. Bu nedenle H. pylori enfeksiyonunun doğru saptanması, ilgili hastalıkların saptanması için önemlidir. Tedavi çok önemlidir ve H. pylori'nin doğru tespitini bir araştırma noktası haline getirir.

Çin'de H. pylori enfeksiyon oranı yüksek olduğundan, H. pylori enfeksiyonunun zamanında ve doğru tespiti, erken teşhis ve tedavi için yardımcıdır ve mide kanserinin önlenmesi ve tedavisi için olumlu öneme sahiptir. H. pylori enfeksiyonunu tespit etmek için hızlı üreaz testi (RUT), mide mukozal doku kesitlerinin boyalı mikroskobu, endoskopi ve C13 veya C14 üre nefes testi gibi invaziv yöntemler dahil olmak üzere çeşitli yöntemler vardır. (UBT), H. pylori dışkı antijen testi (SAT) ve diğer non-invaziv yöntemler 11,12,13. Bu algılama yöntemlerinin belirli sınırlamaları vardır. Örneğin, histolojik inceleme, biyopsi bölgesinde seçilen biyopsi örneğinin kalitesi ve boyutu nedeniyle yanlış negatif sonuçlar verebilir; nefes testi, hastanın yakın zamanda antibiyotik veya proton pompa inhibitörleri (PPI) kullanmasından ve çeşitli etkileyen faktörlerinetkisinden etkilenebilir 11,14,15. Zaman alıcı ve yetersiz duyarlılık ve özgüllük gibi geleneksel yöntemlerin sınırlamaları göz önüne alındığında, kuantum nokta immünofloresan (QD-IF) bazlı hızlı tanı yöntemlerinin geliştirilmesi, biyo-tahliller alanında büyük uygulama potansiyeli göstermiştir16,17. QD-IF analizi, moleküler hedeflere spesifik bağlanma yoluyla moleküler hedeflerin spesifik tespitini sağlamak için kuantum nokta floresan problarını tanıtır18,19.

Kuantum noktaları, Bohr eksiton yarıçapından daha küçük veya ona yakın bir yarıçapa sahip, genellikle 1 ila 10 nm arasında yarı iletken nanoparçacıklardır. Kuantum noktaları floresan problar olarak kullanılır. Floresan sinyalleri, heyecan verici kuantum noktaları tarafından üretilir ve cihazın ölçülmesiyle nicel veriler elde edilir. Avantajları arasında çok çeşitli uyarma dalga boyları, dar emisyon dalga boyları, ayarlanabilir floresan boyutu, yüksek hassasiyet, iyi optik kararlılık, uzun floresan ömrü, büyük Stokes kayması ve yüksek kuantum floresan verimliliği bulunur. Kuantum noktaları, kısa lüminesans süresi, hassas çevresel gereksinimler, zayıf tekrarlanabilirlik, zayıf stabilite (floresan boyalar gibi), enzim inaktivasyonu ve düşük hassasiyet gibi diğer belirteçlerin eksikliklerinin üstesinden gelir. Kuantum nokta floresan immünoassay, kuantum nokta floresan immünoassay ve biyobelirteç floresan immünoassay avantajlarını birleştirir ve basitlik, hızlılık, yüksek özgüllük ve yüksek hassasiyet avantajlarına sahiptir20,21.

Bakteri kültürü, üre nefes testi ve serolojik testler dahil olmak üzere H. pylori tespiti için geleneksel tanı araçlarının kendi sınırlamaları vardır. Bakteri kültürü zaman alıcıdır ve sıkı laboratuvar koşulları gerektirir, bu da genellikle H. pylori'nin titiz büyüme gereksinimleri nedeniyle nispeten düşük hassasiyetle sonuçlanır. Üre nefes testi, yakın zamanda antibiyotik kullanımı veya proton pompa inhibitörleri 22,23,24 gibi belirli koşullar altında yanlış negatif sonuçlar verebilir. Serolojik testler, bazı durumlarda mevcut enfeksiyon durumundan ziyade yalnızca geçmiş maruziyeti gösterebilir ve patojenin farklı virülans türleri arasında ayrım yapma yeteneğinden yoksundur.

Buna karşılık, Quantum Dot İmmünofloresan (QD-IF) teknolojisi umut verici bir alternatif olarak ortaya çıkmıştır. QD-IF, yüksek floresan yoğunluğu, dar emisyon spektrumları ve iyi fotostabilite gibi kuantum noktalarının mükemmel optik özelliklerini immünolojik reaksiyonların özgüllüğü ile birleştirir. Bu, biyolojik örneklerde H. pylori antijenlerinin veya antikorlarının hızlı ve hassas bir şekilde tespit edilmesini sağlar. Ayrıca, geleneksel yöntemlerin başarmakta zorlandığı, enfekte edici suşun virülans tipini aynı anda tanımlayabilme gibi benzersiz bir avantaja sahiptir. Teşhis sürecindeki bu boşluğu doldurarak, QD-IF teknolojisi, H. pylori enfeksiyonlarını teşhis etme ve yönetme şeklimizde devrim yaratmak, daha kişiselleştirilmiş ve etkili tıbbi müdahaleleri kolaylaştırmak için büyük bir potansiyele sahiptir.

Genel olarak, H. pylori enfeksiyonunu ve virülans tiplerini (tip I ve tip II) aynı anda tespit edebilen non-invaziv, etkili bir tanı yöntemine acil bir klinik ihtiyaç vardır. Bu makale, doku örneklerinde H. pylori enfeksiyonunun varlığını değerlendirmek ve H. pylori enfeksiyon tiplerini tespit etmek için hızlı ve doğru bir yöntem oluşturmak için QD-IF yöntemini kullanmayı amaçlamaktadır. H. pylori enfeksiyonu ve virülans tiplerinin hızlı tespiti, hassas tıbbın elde edilmesi, tedavi etkilerinin iyileştirilmesi, ilgili hastalıkların riskinin azaltılması ve mide kanserinin önlenmesi için büyük önem taşımaktadır. Klinik personelin doğru H. pylori enfeksiyonu tespit yöntemlerini seçmesi için bilimsel bir teorik temel sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma (KY2025-191-01), Güney Tıp Üniversitesi, Guangdong İl Halk Hastanesi (Guangdong Tıp Bilimleri Akademisi) insan araştırmaları etik komitesinin yönergelerine bağlı kalınarak gerçekleştirilmiştir. Bu makale, bilgilendirilmiş onamdan muafiyet başvurusu ile uyumludur.

NOT: Bu çalışma, katılımcıların kan türlerinin Helicobacter pylori üreaz (Üreaz) antikorları, vakuolar sitotoksin A (VacA) antikorları ve sitotoksin ile ilişkili gen A (CagA) toksin antikorları içerip içermediğini teşhis etmek için bir kit tasarlamak ve geliştirmek için kuantum nokta teknolojisini kullanmayı amaçlamaktadır. Bu tasarlanmış kit, Helicobacter pylori Üreaz antikorlarını, CagA antikorlarını ve VacA antikorlarını ölçmek için çift antijenli bir sandviç yöntemi kullanır. Hedef maddeyi içeren test numunesi, numune pedine eklendiğinde, sifon hareketi yoluyla kuantum pedi ve zardan akar ve katı fazlı bir antijen-antikor kompleksi oluşturur. Tespit işleminden sonra, tespit hattı ve kütle analizör tarafından sırasıyla okunur. Kontrol hattının sinyal değeri, üç antikorun her birinin T/C sinyal değerlerine dayalı olarak Urase antikoru, CagA antikoru ve VacA antikorunun negatif ve pozitif durumunu belirlemek için kullanılır. Tasarım şeması Şekil 1'de gösterilmiştir.

figure-protocol-1
Şekil 1: H. pylori tipleme test kartının şematik diyagramı. Şekil, test kartının yapısını ve bileşimini göstermektedir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

1. Kit hazırlığı

  1. QDs-2-(n-morfin) etansülfonik asit (MES) tampon reaksiyon sisteminin kurulması
    1. Orijinal QDs çözeltisini oda sıcaklığına (RT) dengeleyin. Daha sonra 1000 μL'yi aspire edin ve eşit hacimde 2x MES çözeltisi ekleyin (MES'in nihai konsantrasyonu 10 mmol/L idi).
    2. 30 s ila 3 dakika boyunca karıştırın, çalkalayın ve sonikasyon yapın.
  2. Etkinleştirme
    1. QDs-MES tampon sistemine 10:1 oranında 20 mg / mL 1-Etil-3- (3-dimetilaminopropil) karbodiimid (EDC) / N-Hidroksisüksinimid (NHS) ekleyin. 3 dakika boyunca karıştırın, çalkalayın ve sonikleştirin.
    2. Hazırlanan çözeltiyi 15 dakika boyunca 37 ° C'lik bir su banyosuna koyun ve 20 dakika boyunca 13.000 × g'da santrifüjleyin.
    3. Süpernatanı santrifüjlenmiş çözeltiden çıkarın ve 1x MES çözeltisi ile yeniden çözün. Solüsyonu bir pipetle tekrar tekrar üfleyin, eşit şekilde karıştırmak için sallayın ve 3 dakika boyunca sonikasyon yapın.
    4. Yukarıdaki çözeltiyi 15 dakika boyunca 37 ° C'lik bir su banyosuna yerleştirin ve 20 dakika boyunca 13.000 × g'da santrifüjleyin.
  3. Bağlama
    1. 1000 μL aktivasyon çözeltisine 0.03 mg Üreaz antijeni, CagA antijeni, VacA antijeni ve keçi anti-fare IgG ekleyin, ucu tekrar tekrar pipetleyin, sallayın ve 3 dakika boyunca sonikasyon yapın.
    2. Yukarıdaki çözeltiyi 37 °C'lik bir su banyosuna yerleştirin ve 3 saat boyunca reaksiyona sokun.
  4. Kapatma ve depolama
    1. 100 μL bloke edici çözelti ekleyin (Ek Tablo 1) ve 1 saat inkübe edin.
    2. Bloke edilmiş çözeltiyi 13.000 × g'da 15 dakika santrifüjleyin.
    3. Süpernatanı santrifüjlenmiş çözeltiden çıkarın, 750 μL sulandırma çözeltisi ekleyin (Ek Tablo 1), tekrar tekrar pipetleyin, sallayın ve 5 dakika boyunca sonikasyon yapın, ardından 4 ° C'de saklayın.

2. Kaplanmış plakaların hazırlanması

  1. Kuantum pedlerinin hazırlanması
    1. Toplu üretime göre gerekli miktarı hazırlamak için kuantum nokta etiketli H. pylori antijen kompleksi 1:5'i kuantum nokta seyreltme tamponu ile seyreltin.
    2. Kuantum pedini alın ve bir film püskürtücü kullanarak pedin üzerine belirli miktarda kuantum nokta etiketli H. pylori antijen kompleksi eşit şekilde püskürtün ve 37 ° C'de 30 dakika kurutun.
  2. Membran hazırlama
    1. Kontrol hattını ve test hattı kaplama malzemelerini seyreltmek ve toplu üretim hacmine göre gerekli miktarı hazırlamak için baskı tamponunu kullanın.
    2. Nitroselüloz membranı polivinil klorür (PVC) plakaya yapıştırın, kalite kontrol çizgisini ve test çizgisi malzemelerini membran üzerine eşit şekilde kaplamak için film çizik altın püskürtücü kullanın ve 57 °C'de 24 saat kurutun.

3. Montaj

  1. Kuantum ve numune pedlerini sırayla film kaplı PVC plakaya yapıştırın.

4. Şeritler halinde kesme

  1. Monte edilmiş büyük tahtayı test şeritleri halinde kesmek için bir şerit kesici kullanın.

5. İç ambalaj

  1. Ambalajı kit bileşimi gereksinimlerine göre tamamlayın.
    NOT: Kitin bileşenleri aşağıdaki gibidir: (i) Test kartı: Bir test şeridi kabuğu ve bir test şeridinden oluşur. Test şeridi bir PVC plaka, bir numune pedi, bir kuantum pedi (kuantum noktaları ile etiketlenmiş bir antijen kompleksi; kompleks Üreaz antijeni, CagA antijeni, VacA antijeni ve fare IgG içerir), bir nitroselüloz membrandan oluşur (algılama alanı VacA antijeni, CagA antijeni ve Üreaz antijeni (rekombinant antijen ökaryotik ekspresyonu) ile sabitlenir ve kalite kontrol alanı keçi anti-fare IgG (keçi poli antikoru) ile kaplanmıştır), ve emici kağıt. Farklı paketleme özelliklerinin farklı test kartı miktarları vardır. Bir kişinin reaktifi için bir test kartı gereklidir. (ii) SD kart: 1 adet / kutu. Farklı test kitleri partilerinden test kartı ve güvenli dijital (SD) kart bileşenleri karıştırılmamalıdır.

6. Numune işleme

NOT: Numune toplama için Ulusal Klinik Laboratuvar Operasyon Prosedürlerine bakın.

  1. Kanı bir ayırma jeli tüpünde toplayın. Hemolizden kaçınmaya dikkat edin.
  2. Ayrılan serum örneğini oda sıcaklığında (RT) 4 saat içinde test edin. Zamanında test edilemezse, numuneyi 3 gün boyunca 2-8 °C'de saklayın. Uzun süreli (1 yıl içinde) kapatın ve -20 °C'nin altında saklayın.
  3. Numuneleri RT'ye geri yükleyin ve kullanmadan önce iyice karıştırın.
    NOT: Donmuş ve çözülmüş numuneler kullanımdan önce tamamen çözülmeli ve donma-çözülme döngülerinin sayısı beşi geçmemelidir. Tekrarlanan dondurularak çözülmüş numuneler analitin bozulmasına neden olabilir ve bundan kaçınılmalıdır. Şiddetli kil ve hemoliz örnekleri de testi etkileyecektir ve bundan kaçınılmalıdır.

7. Test prosedürü

  1. RT'ye dengelemek için reaktif kitini ve kalite kontrol malzemelerini çıkarın.
  2. Numune hazırlama: Tam kan numunelerini 1467 g'da 10 dakika santrifüjleyin.
  3. SD kart lot numarasının reaktif kitininkiyle eşleştiğini doğrulayın. Otomatik kalibrasyon için SD kartı cihaza takın.
  4. Enstrümanı ve işletim bilgisayarını açın. Belirlenen yazılımı başlatın ve Test modülünü seçin. Enstrümanı başlatmak ve başarılı bir şekilde tamamlanmasını beklemek için Başlatma Ayarları'nı seçin.
  5. Cihazın reaktif alanına erişin ve test kartı yuvasını çıkarın. Reaktif kitini açın ve gerekli sayıda test kartı seçin.
  6. Test kartlarının folyo poşetlerini açın ve belirtilen yöne göre yuvaya yerleştirin. Kart yuvasını cihazın reaktif alanına yeniden takın.
  7. Kalite Kontrol (QC) Testi
    1. Test modülünde Manuel Giriş'i seçin. Bilgi Girişi'ne tıklayın ve belirli QC malzeme bilgilerini girin. Oluştur'u tıklayın. QC malzemelerini belirlenen numune rafına yerleştirin, doğru sıra ve yönlendirmeyi sağlayın.
    2. QC testini başlatmak için Testi Başlat'a tıklayın. Cihazın numune iğnesi, numunenin 80 μL'sini aspire edecek ve numune kuyucuğuna dikey olarak dağıtacaktır. Cihaz, numune dağıtımından sonra otomatik olarak zamanlamaya başlayacaktır. 15 dakika sonra, cihaz algılama yapacak, ölçüm değerlerini okuyacak ve sonuçları çıkaracaktır.
  8. Örnek Test: Test modülünde Çift Yönlü LIS'i seçin. Test edilecek numuneleri, uygun düzen ve yönlendirmeyi sağlayarak belirlenen numune rafına yerleştirin. Testi Başlat'a tıklayın. Cihaz benzer şekilde her birinden 80 μL numune aspire edecek ve bunları kalite kontrol prosesiyle aynı şekilde işleyecektir.
  9. Test tamamlandıktan sonra, kullanılmış test kartlarını cihazdan çıkarın ve tıbbi atık olarak atın.

8. Kalite kontrol

  1. H. pylori negatif: Helicobacter pylori negatif referans ürünlerinin, yani Üreaz antikoru, CagA antikoru ve VacA antikoru sonuçlarının negatif olduğundan emin olun ve kontrol edin.
  2. H. pylori tip II enfeksiyonu: Helicobacter pylori tip II referans ürününün yani Üreaz antikorunun pozitif, CagA antikoru ve VacA antikoru sonuçlarının tamamının negatif olduğunu kontrol edin ve emin olun.
  3. H. pylori tip I enfeksiyonu: Helicobacter pylori tip I referans ürün yani Üreaz antikorunun pozitif, CagA antikoru ve/veya VacA antikorunun pozitif olduğunu kontrol edin ve emin olun.

9. Sonuç analizi

  1. Zayıf veya toksijenik olmayan suşlarla tip II enfeksiyon: Üreaz antikoru okuması pozitif olduğunda ve CagA antikoru ve VacA antikor okumaları negatif olduğunda, bunu zayıf veya toksijenik olmayan bir H. pylori suşu ile bir enfeksiyon olarak yorumlayın.
  2. Yüksek derecede patojenik toksin üreten suşlarla tip I enfeksiyon: Üreaz antikoru okuması pozitif olduğunda ve CagA antikoru veya VacA antikor okuması pozitif olduğunda veya her ikisi de pozitif olduğunda, bunu yüksek derecede patojenik bir H. pylori toksin üreten suş ile bir enfeksiyon olarak yorumlayın.
  3. Negatif: Üreaz antikoru, CagA antikoru ve VacA antikorunun okumaları negatif olduğunda, bunu H. pylori suşları ile enfeksiyon olmadığı şeklinde yorumlayın.
  4. Geçersiz: Cihaz sonucu geçersiz olarak değerlendirdiğinde, yanlış çalışma veya reaktif kiti arızası olup olmadığını kontrol edin ve prosedürü tekrar deneyin.

10. Floresan analizörünün kalibrasyonu

  1. İlk olarak, analizörü açın ve performansını stabilize etmek için yaklaşık 15 dakika ısınmasına izin verin. Ardından, üretici tarafından sağlanan kalibrasyon standardını numune tutucuya yerleştirin.
  2. Ardından, analizörün arayüzündeki kalibrasyon fonksiyonuna erişin ve işlemi başlatın. Analizör, standardın floresansını otomatik olarak algılayacak ve dahili parametrelerini önceden ayarlanmış referans değerlerine uyacak şekilde ayarlayacaktır.
  3. Bundan sonra, kalibrasyon standardını çıkarın ve okumaların kabul edilebilir aralıkta olduğunu doğrulamak için boş bir numune yerleştirin.
  4. Bu adımları önerilen programa göre düzenli olarak tekrarlamak, güvenilir ölçümler için analizörün doğruluğunun korunmasına yardımcı olur.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Şekil 2, kuantum nokta floresan immünoanalizörünün çalışma prensibini göstermektedir. Esas olarak bir uyarma ışık kaynağı, bir alıcı ışık kaynağı, bir fotoelektrik dönüşüm devresi modülü, bir sinyal işleme devresi, bir AD değeri dönüştürme devresi ve bir sinyal işleme hesaplama modülünden oluşur; Uyarma ışık kaynağı, floresan işaretleyiciler üretir. Benzer bir dalga boyuna sahip monokromatik ışığı emer ve monokromatik ışık, uyarma ışık yolu boyunca reaktif şeridinin sabit tarama noktasında (...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Helicobacter pylori için güncel tanı yöntemleri temel olarak iki kategoriye ayrılır: invaziv ve non-invaziv26. Hızlı üreaz testi (RUT), histoloji, moleküler biyoloji ve bakteri kültürü gibi yöntemlerin invazivlik, duyarlılık, özgüllük, zaman kısıtlamaları, maliyet, ekipman gereksinimleri, numune işleme ve gerçek zamanlı izleme açısından sınırlamaları vardır. Daha yaygın olanları, üre nefes testi, fekal antijen ve serolojik antikor testi gibi yöntemler kul...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu araştırma, Guangdong İli Temel ve Uygulamalı Temel Araştırma Fonu Projesi (Hibe No.: 2021A1515220022, 2022A1515220023) tarafından finanse edilmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilkarbodiimid hidroklorür (EDC)Sigma25952-53-85 g / şişe
2- (n-morfin) etansülfonik asit (MES)Sigma145224-94-8100 g / şişe
SantrifüjSigma3K15
Floresan İmmünoanalizörGuangzhou Labsim Biotech Co., LtdGuangdong Eyaleti Tıbbi Cihaz Kayıt No.
Helicobacter pylori Tiplendirme Test Kiti Chongqing iSIA BIO-Technology Co., LtdUlusal tıbbi cihaz kayıt No. 20203400330QDs İmmünofloresan Yöntemi
N-hidroksitiyosüksinimidin sodyum tuzu (NHS)Sigma106627-54-71 g / şişe
2017221743

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Tacconelli, E., et al. research and development of new antibiotics: WHO priority list of antibioticresistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18 (3), 318-327 (2018).
  2. Kamboj, A. K., et al. Helicobacter pylori: past, present, and future of treatment. Mayo Clin Proc. 92 (4), 599-604 (2017).
  3. Yamaoka, Y. Disease mechanisms: Helicobacter pylori virulence factors. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 7 (11), 629-641 (2010).
  4. Sharndama, H. C., Mba, I. E. Helicobacter pylori: an updated overview on its virulence and pathogenesis. Braz J Microbiol. 53 (1), 33-50 (2022).
  5. Lin, Y., et al. Infection status of type I and type II Helicobacter pylori in areas with high incidence of gastric cancer and its impact on gastrin and pepsinogen levels. World J Gastroenterol. 26 (25), 3673-3685 (2020).
  6. Li, Y. H., et al. Global prevalence of Helicobacter pylori infection from 1980 to 2022: a systematic review and metaanalysis. Lancet Gastroenterol Hepatol. 8 (6), 553-564 (2023).
  7. Karbalaei, M., Keikha, M. Rescue effect of lactobacillicontaining bismuth regimen on Helicobacter pylori treatment failure. New Microbiol New Infect. 42, 100904(2021).
  8. Malfertheiner, P., et al. Helicobacter pylori infection. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 19(2023).
  9. Stewart, B., et al. Global burden of disease requiring emergency surgery. Br J Surg. 101 (1), e9-e22 (2014).
  10. de Martel, C., et al. The global burden of cancer attributable to infection in 2018: a global incidence analysis. Lancet Glob Health. 8 (2), e180-e190 (2020).
  11. Godbole, G., et al. Review: diagnosis of Helicobacter pylori infection. Helicobacter. 25 (S1), e12735(2020).
  12. Lee, Y. C., et al. Diagnosis and treatment of Helicobacter pylori infection. Annu Rev Med. 73 (1), 183-195 (2022).
  13. Fischbach, W., Malfertheiner, P. Helicobacter pylori infection. Ger Int Med J. 115, 429-436 (2018).
  14. Zhang, C., et al. Survey on the quantitative detection of serum Helicobacter pylori antibodies in clinical laboratories in my country. J Clin Lab Anal. 36 (1), e24069(2021).
  15. Wan, W. S., et al. Improving the detection rate of Helicobacter pylori in chronic gastritis biopsies: a comparative analysis of H&E, methylene blue, WarthinStarry, immunohistochemistry, and quantum dot immunohistochemistry. Front Oncol. 13, 1229871(2023).
  16. Bodo, J., et al. Quantitative in situ detection of phosphoproteins in fixed tissues using quantum dot technology. J Histochem Cytochem. 57 (7), 701-708 (2009).
  17. Chen, C., et al. Quantum dotbased immunofluorescence technology for quantitative determination of HER2 expression in breast cancer. Biomaterials. 30 (15), 2912-2918 (2009).
  18. Kuang, H., et al. Recent developments in quantum dot analytical applications. TrAC Trends Anal Chem. 30 (10), 1620-1636 (2011).
  19. Park, Y., et al. Medically transformable quantum dots for biosensing and imaging. J Photochem Photobiol C Photochem Rev. 30, 51-70 (2017).
  20. SanmartinMatalbobs, J., et al. Semiconductor quantum dots as target analytes: properties, surface chemistry and detection. Chem Detect Nanomaterials. 12 (14), 2501(2022).
  21. Katan, C., Mercier, N., Even, J. Quantum and dielectric confinement effects in lowerdimensional hybrid perovskite semiconductors. Chem Rev. 119 (5), 3140-3192 (2019).
  22. Chinese Medical Association Branch of Health Management. Physical examination population 13C expert consensus on technical specifications for urea breath tests. Health Exam Manag. 2 (2), 94-96 (2021).
  23. National Clinical Medical Research Center for Digestive Diseases. Expert consensus on clinical application of Helicobacter pyloriurea breath test (2020). Chin J Health Manag. 14 (2020), 510-513 (2020).
  24. Zhang, Y., et al. The influence factors of Helicobacter pylori infection were detected by urea breath test. Chin J Clin Gastroenterol. 32 (3), 197-202 (2020).
  25. Lin, B., et al. Diagnostic value of gastric function triad and Helicobacter pylori typing in chronic gastritis and gastric cancer. Labeled Immunoassays Clin Med. 30 (1), 74-76 (2023).
  26. Cardos, A. I., et al. Evolution of diagnostic methods for Helicobacter pylori infection: from traditional tests to hightech, advanced sensitivity and identification tools. Diagnostics. 12 (508), 1-23 (2022).
  27. Ding, S. Z., et al. Chinese consensus report on familybased Helicobacter pylori infection control and management (2021 edition). Gut. 71 (2), 238-253 (2021).
  28. Wan, W., et al. Comparison of quantum dot immunofluorescence histochemistry and conventional immunohistochemistry in detecting Helicobacter pylori infection in paraffinembedded tissue of gastric biopsy. J Mol Histol. 52, 461-466 (2021).
  29. Zhou, Y., et al. Development of a fast and sensitive doubleantigen sandwich lateral flow immunoassay based on quantum dot nanobeads and its clinical performance in detecting SARSCoV2 total antibodies. Sens Actuators B Chem. 343, 130139(2021).
  30. Liu, H., et al. Consistency analysis of highsensitivity cardiac troponin I in peripheral blood and venous blood using quantum dot immunofluorescence method and its clinical application in acute myocardial infarction. J Chest Dis. 14 (4), 1267-1274 (2022).
  31. Xirong, W., et al. Development of quantum dotbased lateral flow immunoassay test strips for rapid and sensitive detection of SARSCoV2 neutralizing antibodies. Sci Rep. 13, 22253(2023).
  32. Purwidyantri, A., et al. Programmable graphenebased microfluidic sensor for DNA detection. Sens Actuators B Chem. 367, 132044(2022).
  33. Lee, K. S., Wagner, M., Stocker, R. Ramanbased sorting of microbial cells to link functions to their genes. Microb Cell. 7 (3), 62-65 (2020).
  34. Hu, C., et al. Design and fabrication of carbon dots for energy conversion and storage. Chem Soc Rev. 48 (8), 2315-2337 (2019).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Helicobacter Pylori TespitiVir lans TiplemesiAntijen Antikor Ba lanmasmm nokromatografi Reaktifleriift Antijen SandviKronik Gastrit TaramasGastrik Kanser Biyobelirte leriletim Karakteristi i E risiTan sal Duyarl l k

İlgili makaleler