Helicobacter pylori için sayısız tanı yöntemi arasında, kuantum nokta immünofloresan, Helicobacter pylori'yi hızlı bir şekilde yazıp tespit edebilir ve klinik tedavi kararları için bir temel sağlar. Bu makale, Helicobacter pylori'nin tiplendirilmesi ve tespitinde kuantum nokta teknolojisinin uygulama değerine ayrıntılı bir giriş sağlar.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Helicobacter pylori virülansının hızlı tespiti ve kuantum nokta etiketleme teknolojisi kullanılarak tiplendirilmesi
* These authors contributed equally
Bu makalede
Özet
Özet
Helicobacter pylori'nin virülansını hızlı bir şekilde tespit etmek ve tiplemeyi gerçekleştirmek için kuantum nokta etiketleme teknolojisine dayalı, geleneksel tanı yöntemlerinin sınırlamalarının üstesinden gelmeyi ve kişiselleştirilmiş klinik tedavi için bir temel sağlamayı amaçlayan bir yöntem sunuyoruz. Çift antijenli sandviç yöntemi kullanılarak bir kit tasarlandı. Bu, tampon reaksiyon sistemlerinin kurulması ve kitin hazırlanması sırasında antijen-antikor reaksiyonları için aktivasyon ve birleştirme işlemlerinin yürütülmesi dahil olmak üzere bir dizi titiz adımı içeriyordu. Ek olarak, Helicobacter pylori'nin enfeksiyon durumunu ve virülans tipini belirlemek için numune toplama, işleme ve test işlemleri için özel prosedürler vardı. Farklı sonuçlar (negatif, tip II ve tip I) için veri modelleri oluşturularak, kuantum nokta teknolojisinin tip algılamadaki etkinliği doğrulandı. Negatif numuneler söz konusu olduğunda, ilgili tespit alanlarında zayıf sinyal değerleri vardı veya hiç yoktu. Tip II numuneler için, farklı antikorlar için spesifik bir pozitif ve negatif sinyal değerleri modeli gözlendi ve tip I numuneler için, anahtar antikorlara karşılık gelen farklı bir pozitif sinyal değerleri seti not edildi. Ayrıca, kronik gastrit ve mide kanseri ile ilgili çalışmalarda uygulanması, bir tarama göstergesi olarak hizmet etmedeki değerini göstermiştir. Kuantum nokta tabanlı yöntem, geleneksel tanı yöntemlerine kıyasla gelişmiş duyarlılık ve özgüllük gibi avantajlara sahiptir. Bununla birlikte, numune depolama süresinden kaynaklanan potansiyel etkiler ve nispeten yüksek maliyetler gibi zorluklarla da karşı karşıyadır. Bununla birlikte, sürekli teknolojik yeniliklerle birlikte, gelecekte Helicobacter pylori tespiti ve ilgili hastalık teşhisi için biyomedikal alanda daha önemli bir rol oynaması beklenmektedir.
Giriş
Helicobacter pylori (H. pylori), mide antrumununpilor mukozası ile submukozası arasında bulunan Gram negatif bir bakteridir 1,2. 1994 yılında, Dünya Sağlık Örgütü / Uluslararası Kanser Araştırmaları Ajansı (WHO / IARC) onu Sınıf I kanserojen olarak sınıflandırdı. Vakuoler sitotoksin A (VacA) ve sitotoksin ile ilişkili gen A (CagA) toksinlerini eksprese edip etmediklerine göre iki tipe ayrılırlar: tip I H. pylori enfeksiyonu virülan suşu: daha öldürücü ve hastalar için daha zararlı. Mide ve duodenum ülseri ve mide kanseri insidansı ile yakından ilişki....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Bu çalışma (KY2025-191-01), Güney Tıp Üniversitesi, Guangdong İl Halk Hastanesi (Guangdong Tıp Bilimleri Akademisi) insan araştırmaları etik komitesinin yönergelerine bağlı kalınarak gerçekleştirilmiştir. Bu makale, bilgilendirilmiş onamdan muafiyet başvurusu ile uyumludur.
NOT: Bu çalışma, katılımcıların kan türlerinin Helicobacter pylori üreaz (Üreaz) antikorları, vakuolar sitotoksin A (VacA) antikorları ve sitotoksin ile ilişkili gen A (CagA) toksin antikorları içerip içermediğini teşhis etmek için bir kit tasarlamak ve geliştirmek için kuantum nokta teknolojisini kullanmayı amaçlamaktadır. Bu tasarlanmış kit, Hel....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Şekil 2, kuantum nokta floresan immünoanalizörünün çalışma prensibini göstermektedir. Esas olarak bir uyarma ışık kaynağı, bir alıcı ışık kaynağı, bir fotoelektrik dönüşüm devresi modülü, bir sinyal işleme devresi, bir AD değeri dönüştürme devresi ve bir sinyal işleme hesaplama modülünden oluşur; Uyarma ışık kaynağı, floresan işaretleyiciler üretir. Benzer bir dalga boyuna sahip monokromatik ışığı emer ve monokromatik ışık, uyarma ışık yolu boyunca reaktif şeridinin sabit tarama noktasında (.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Helicobacter pylori için güncel tanı yöntemleri temel olarak iki kategoriye ayrılır: invaziv ve non-invaziv26. Hızlı üreaz testi (RUT), histoloji, moleküler biyoloji ve bakteri kültürü gibi yöntemlerin invazivlik, duyarlılık, özgüllük, zaman kısıtlamaları, maliyet, ekipman gereksinimleri, numune işleme ve gerçek zamanlı izleme açısından sınırlamaları vardır. Daha yaygın olanları, üre nefes testi, fekal antijen ve serolojik antikor testi gibi yöntemler kul.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.
Teşekkürler
Bu araştırma, Guangdong İli Temel ve Uygulamalı Temel Araştırma Fonu Projesi (Hibe No.: 2021A1515220022, 2022A1515220023) tarafından finanse edilmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilkarbodiimid hidroklorür (EDC) | Sigma | 25952-53-8 | 5 g / şişe |
| 2- (n-morfin) etansülfonik asit (MES) | Sigma | 145224-94-8 | 100 g / şişe |
| Santrifüj | Sigma | 3K15 | |
| Floresan İmmünoanalizör | Guangzhou Labsim Biotech Co., Ltd | Guangdong Eyaleti Tıbbi Cihaz Kayıt No. | |
| Helicobacter pylori Tiplendirme Test Kiti | Chongqing iSIA BIO-Technology Co., Ltd | Ulusal tıbbi cihaz kayıt No. 20203400330 | QDs İmmünofloresan Yöntemi |
| N-hidroksitiyosüksinimidin sodyum tuzu (NHS) | Sigma | 106627-54-7 | 1 g / şişe |
Kaynaklar
- Tacconelli, E., et al. research and development of new antibiotics: WHO priority list of antibioticresistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18 (3), 318-327 (2018).
- Kamboj, A. K., et al. Helicobacter ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
