Yöntem makalesi

Preklinik Modellerde Pulmoner Fibrozisin Gelişmiş Değerlendirmesi için Mikro-BT Kullanılarak Tek Taraflı Akciğer Hacmi Analizi

DOI:

10.3791/67837

⸱

20 Haziran 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Respiratory Diseases, National Clinical Research Center for Respiratory Diseases, Guangzhou Institute of Respiratory Health, the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Guangzhou National Laboratory, 3Second Department of Elderly Respiratory, Guangdong Provincial People's Hospital (Guangdong Academy of Medical Sciences), Southern Medical University, Guangdong Provincial Geriatric Institute

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, lezyon tarafında intratrakeal damlatma yoluyla tek taraflı bleomisin ile indüklenen pulmoner fibrozis modelinde ventilasyon bölgelerini ölçmek için mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) kullanan bir protokol sunuyoruz.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pulmoner fibrozis (PF), kötü prognoz ve sınırlı tedavi seçenekleri ile karakterize, ilerleyici ve geri dönüşümsüz bir interstisyel akciğer hastalığıdır. Bleomisinin intratrakeal damlatılmasıyla indüklenen geleneksel fare pulmoner fibroz modeli, eşit olmayan ilaç dağılımına ve yüksek mortalite oranlarına neden olabilir. Farelerde bleomisin uygulaması için rafine edilmiş tek taraflı intratrakeal damlatma yöntemi, insanlarda hastalığın daha iyi bir simülasyonunu sağlayarak daha düzgün ve kontrollü bir pulmoner fibroz modelinin oluşturulmasını sağlar. Burada, lezyon tarafında intratrakeal damlatma yoluyla tek taraflı bleomisin ile indüklenen pulmoner fibrozis modelinde ventilasyon bölgelerini ölçmek için mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) kullanmak için bir protokol sunuyoruz. Bu yaklaşım, genel akciğer hacminin ve ventilasyona tabi akciğer bölgelerinin ölçülmesine izin vererek, hastalığın ilerlemesinin ve tedavi yanıtının hassas ve doğru bir ölçümünü sağlar. Bu çalışma, anestezi, hassas ilaç uygulaması, mikro-CT taraması ve görüntü analizi için 3D Slicer yazılımı kullanılarak son işlemeyi içerir. Bleomisin tedavisini takiben yapılan tek taraflı akciğer hacmi analizi, kontrollere kıyasla akciğer hacminde anlamlı bir azalma olduğunu gösterdi. Masson'un Trikrom boyaması, BLM ile tedavi edilen farelerde kollajen varlığını ve artan birikimini doğruladı. Burada, mikro-BT kullanarak tek taraflı akciğer hacimsel analizi yaparak klinik öncesi modellerde pulmoner fibrozu değerlendirdik ve araştırmacılara PF çalışmalarında terapötik müdahaleleri değerlendirmek için kesin ve kapsamlı bir değerlendirme yöntemi sağladık.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pulmoner fibrozis (PF), sınırlı tedavi yöntemleri ile yıkıcı ve geri dönüşü olmayan bir akciğer hastalığıdır. Küresel PF insidansı 100.000 kişi başına 1 ila 13 arasında değişmektedir ve ilerleyen yaşla birlikte prevalansta önemli bir artış gözlenmiştir1. Son on yıllardaki önemli çabalara rağmen, PF için terapötik manzara sınırlı kalmaktadır ve şu anda PF2 tedavisi için onaylanmış sadece iki antifibrotik ajan, nintedanib ve pirfenidon bulunmaktadır. Pulmoner fibrozisin altta yatan patogenezi oldukça karmaşıktır ve moleküler ve hücresel fizyolojinin çeşitli yönlerini kapsar3. Çeşitli ajanlar tarafından indüklenen deneysel in vivo hayvan modelleri, şu anda patojenik mekanizmaları ve hastalık fenotiplerini araştırmak için gerekli araçlardır.

İntratrakeal damlatma yoluyla uygulanan bleomisin ile indüklenen pulmoner fibrozis fare modeli, altta yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları aydınlatmak ve potansiyel terapötik hedefleri belirlemek için yaygın olarak kabul edilmektedir4. Bununla birlikte, intratrakeal olarak aşılanan bleomisinin asimetrik ve seçici olmayan dağılımı, esas olarak homojen olmayan fibroz ve bilateral akciğer hasarı nedeniyle yüksek mortalite oranlarına yol açabilir 5,6. Bu sorunu ele almak için, deneysel ajanların sol akciğer içinde eşit şekilde verilmesini sağlamak ve PF hastalarında gözlenen patolojik süreci daha iyi taklit etmek için tek taraflı bir intratrakeal uygulama yaklaşımı önerdik 7,8,9. Ayrıca, tek taraflı uygulama tekniği, lokalize dağılım gerektiren ilaçların değerlendirilmesi veya belirli bir akciğeri hedef alan diğer deneysel müdahaleler için de kullanılabilir.

Klinik öncesi modellerde, mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-BT), pulmoner patolojileri araştırmak için giderek daha değerli hale gelmiştir ve hastalığın ilerlemesini ve tedavi girişimlerine yanıtı izlemek için kalitatif ve kantitatif veriler sağlayabilen uzunlamasına çalışmalar için güçlü bir araç olduğu kanıtlanmıştır10. Mikro-BT, toplam hacmi, ventilasyonlu ve ventilasyonsuz bölgeleri, bronşiyal morfolojiyi ve doku yoğunluğunu değerlendirmek için kullanılmıştır. Önceki çalışmalarımıza dayanarak, akciğer fibrozunun bir fare modelinde tek taraflı akciğer hacmini analiz etmek ve fibroz düzeylerini değerlendirmek için mikro-BT'nin kullanıldığı yeni bir görüntüleme yöntemi geliştirdik 7,8,9. Bu yöntem, havalandırılmış akciğer bölgelerinin nicelleştirilmesine izin vererek, hastalığın ilerlemesinin ve tedaviye yanıtın daha doğru ve hassas bir ölçümünü sağlar.

Bu çalışma, bleomisin ile tedavi edilen farelerde mikro-BT taramalarından türetilen tek taraflı ventilasyonlu akciğer hacmi analiz yöntemini tanıtmaktadır. Bu yenilikçi yöntem, akciğer fibrozunun daha kesin ve kapsamlı bir değerlendirmesini sunarak, klinik öncesi çalışmalarda terapötik müdahalelerin etkinliğini değerlendirme şeklimizi potansiyel olarak dönüştürür. Bu çalışma, klinik öncesi akciğer fibroz modellerinin analizinde mükemmel bir iyileştirmeye katkıda bulunur ve hastalığın ilerlemesinin yanı sıra tedavi etkilerini değerlendirmek için güçlü bir kantitatif analiz yöntemi sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm hayvan deneyleri, Guangzhou Tıp Üniversitesi Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Deneyler 6-8 haftalık, 25-30 g erkek C57BL / 6 fareler üzerinde yapıldı. Fareler, yiyecek ve suya ad libitum erişimi olan 12 saatlik bir aydınlık / karanlık döngüsü (ışık: 25 lüks) altında barındırıldı ve rastgele kontrol ve BLM gruplarına atandı.

1. Tek taraflı pulmoner intratrakeal damlatma

  1. % 1 pentobarbital sodyum (50 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonu ile C57BL / 6 erkek fareyi (6-8 haftalık, 25-30 g) uyuşturun.
  2. Solunum hızını ve uzuv çekme refleksini gözlemleyerek anestezi seviyesini izleyin.
  3. Fareyi, kesici dişler ve uzuvlar tarafından tutularak 70°-90° açılı plastik bir tahta üzerine sırtüstü pozisyonda sabitleyin.
  4. Dili nazikçe geri çekmek için steril künt uçlu forseps kullanın.
  5. Epiglot ve orofarenks yapılarını görselleştirmek için küçük bir hayvan laringoskopu kullanarak trakeaya özel bir 22 G künt iğne yerleştirin. Sol ana bronşu ana bronşlara paralel hale getirmek için tahtayı saat yönünün tersine -70° döndürün. Direnç hissedilene kadar iğneyi ilerletin.
    NOT: Optimum yerleştirme uzunluğunu sağlamak için benzer boyutta bir alıştırma faresi kullanarak kateter uzunluğunu önceden ölçün.
  6. Hızla 30 ° 'lik bir açıyla döndürün ve 40 μL bleomisin solüsyonu (0.02 mg) infüze edin. İğneyi çıkarın.
  7. Uygun ilaç dağılımını sağlamak için fareyi en az 30 saniye yerinde tutun.
  8. Farenin ısınan bir battaniyeye yüzüstü dönmesine izin verin.

2. Mikro bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) taraması

NOT: Fareler, üreticinin talimatlarına göre mikro-CT sistemi kullanılarak taranmıştır.

  1. Bleomisin damlatılmasından sonra 3 hafta boyunca fareler üzerinde mikro-BT taraması yapın.
  2. Küçük hayvan gazı anestezi makinesinin buharlaştırıcısına uygun miktarda izofluran ekleyin, buharlaştırıcıyı açın, indüksiyon konsantrasyonunu% 3'e ayarlayın ve fareleri flip-flop refleksini kaybedene ve yavaş, derin nefes alana kadar indüksiyon kutusuna yerleştirin.
  3. Fareleri indüksiyon kutusundan çıkarın ve farelerin uzuvları uzatılacak ve vücutları orta hat boyunca hizalanacak şekilde tarama masasına sırtüstü yatırın.
  4. Tarama tablosundaki izofluran bakım konsantrasyonunu %1'e ayarlayın.
  5. Mikro-CT tarama modunu ayarlayın: enine görüş alanı 43 mm, çözünürlük 2K x 2K, piksel boyutu 0,042 mm, dilim kalınlığı 0,042 mm.
  6. Taramadan sonra, fareleri uyanana kadar ısınan bir battaniyenin üzerine koyun.

3. Mikro-CT işlem sonrası: Tek taraflı seçici akciğer segmentasyonu ve hacim analizi

NOT: Görüntü işleme ve nicel analiz, üreticinin talimatlarına uygun olarak ücretsiz, açık kaynaklı yazılım 3D Slicer (http://www.slicer.org) kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Daha önce bildirildiği gibi akciğer parankimini normo-gazlı bölgelere ([-1000, -350] HU) bölerek HU görüntülerini normalleştirmek için akciğer penceresi için klinik Hounsfield Ünitesi (HU) aralıkları uygulandı 8,9,11. Görüntü işleme prosedürü aşağıdaki gibi özetlenmiştir:

  1. 3B Dilimleyici'yi açın. Operasyonel arayüz Şekil 1'de gösterilmiştir.
  2. Görüntüleme verilerini DICOM formatında içe aktarmak için Yükle'ye tıklayın. Aksiyal, koronal ve sagital görüntüler ana arayüzde görüntülenecektir (Şekil 2).
  3. Sagital görünümle ilgili parametreleri Şekil 3'te gösterildiği gibi ayarlayın (isteğe bağlı). (1: gizli seçenekleri göster; 2: Geçerli birimi yeniden adlandır'ı seçin; 3: Yeni ad girin).
  4. Segment Düzenleyici modülünde, seçici akciğer analizi (sağ akciğer) için bir segmentasyon oluşturmak üzere Ekle'ye tıklayın (Şekil 4) (1: Birimler; 2: Segment Düzenleyici; 3: Segment Ekle; 4: Eşiği Ayarla; 5: Eşik aralığını ayarla; 6: Maskeleme için kullanın; 7: Küre fırçasını ayarlayın).
  5. Eşik aralığını [-1000, -350] HU olarak ayarlayın ve Maskeleme için Kullan seçeneğini etkinleştirin.
  6. İstenen akciğer bölgelerini segmentlere ayırmak için Boya aracını bir küre fırçasıyla kullanın.
  7. Ada aracını seçin ve Seçili Adayı Koru'yu seçin. Sağ akciğeri vurgulayın, ardından 3D modeli görselleştirme panelinde görüntülemek için 3D Göster'e tıklayın (Şekil 5) (1: Adaları düzenle (bağlı bileşenler); 2: 'Seçili adayı koru'yu seçin; 3: 3D modeli göster).
  8. Terminoloji panelinde, 3D modelin rengini mavi olarak değiştirin (isteğe bağlı).
  9. Sol akciğer için 3.4-3.6 adımlarını tekrarlayın. Ventilasyonlu sol akciğer hacmini hesaplamak ve bir 3D model oluşturmak için aksiyel göğüs BT görüntülerini katman katman işleyin (Şekil 6).
  10. 3D sol akciğer modelinin rengini sarı olarak değiştirin (isteğe bağlı).
  11. Sağ akciğer segmentasyonunun opaklığını 0.2 olarak ayarlayın.
  12. 3D modeli gerektiği gibi dışa aktarın (Şekil 7).
  13. 3B görünümün ekran görüntülerini yakalayın veya görüntüleri dilimleyin ve kaydedin (Şekil 8) (1: Ek Açıklama Ekran Görüntüsü; 2: Görüntünün biçimini seçin; 3: Kaydetme yolunu değiştirin).
  14. Her segment için akciğer hacmini (mm3) hesaplamak ve normo-gazlı bölgelerin kantitatif analizini yapmak için Segment İstatistikleri modülünü kullanın (Şekil 9).

figure-protocol-1
Şekil 1: 3D Slicer yazılımının arayüzü. Şekil, 3D Slicer yazılımının ana operasyonel arayüzünü gösterir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-2
Şekil 2: Farelerde tek taraflı intratrakeal damlatma ile indüklenen pulmoner fibrozisin BT görüntüleri. Eksenel, koronal ve sagital görünümlerin yanı sıra bleomisin damlatma sonrası 3D akciğer rekonstrüksiyonu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-3
Şekil 3: Sagital görünüm parametre ayarı. Şekil, hassas görselleştirme ve analiz sağlayan parametrelerin ayarlanmasını göstermektedir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-4
Şekil 4: Segmentasyon düzenleme ve parametre ayarlamaları. Şekil, segmentasyon düzenleme sürecini ve ilgili parametre ayarlamalarını göstermektedir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-5
Şekil 5: Sağ akciğerin 3 boyutlu segmentasyonu. İşlem üç ardışık adımdan oluşur: akciğer segmentasyonu için bağlı bileşenleri düzenleme (Adım 1), sağ akciğeri izole etmek için Seçili adayı koru'yu seçme (Adım 2) ve modeli görselleştirme panelinde oluşturmak için 3D Göster'i tıklama (Adım 3). Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-6
Şekil 6: Mikro-BT analizine dayalı olarak sol akciğerin 3D rekonstrüksiyonu. Aksiyel göğüs BT görüntüleri, havalandırılan bölgeleri segmentlere ayırmak, ventilasyon hacmini ölçmek ve bir 3D modeli yeniden oluşturmak için katman katman işlendi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-7
Şekil 7: Tek taraflı pulmoner fibroz modelinde ventilasyonlu akciğer hacminin mikro-BT analizine dayalı 3D akciğer rekonstrüksiyonu. Yeniden yapılandırılmış modeller, belirtilen formatlarda önceden tanımlanmış dizinlere aktarıldı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-8
Şekil 8: Görüntüleri kaydetme kılavuzu. Şekil, Ek Açıklama Ekran Görüntüsü menüsü aracılığıyla kaydetme işlevini başlatmaktan biçimleri seçmeye ve depolama yollarını tanımlamaya kadar görüntüleri kaydetmek için sıralı adımları özetlemektedir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

figure-protocol-9
Şekil 9: Tek taraflı pulmoner fibroz modelinde mikro-BT'ye dayalı istatistiksel analiz. Normo-havalandırılmış bölgelerden elde edilen nicel veriler analiz edildi. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

4. Masson'un trikom boyaması

  1. Akciğer örneğini gece boyunca oda sıcaklığında (RT) %4 paraformaldehit ile sabitleyin, dereceli bir etanol serisi kullanarak dehidre edin ve parafine gömün. Döner bir mikrotom ile 5 μm kalınlığında dilimler hazırlayın.
  2. Masson'un trikrom boyamayı bölümler üzerinde aşağıdaki gibi gerçekleştirin.
    1. Deparafinleştirilmiş ve rehidre edilmiş bölümleri damıtılmış suda durulayın, ardından önceden ısıtılmış Bouin Sıvısında 56-60 ° C'de 1 saat veya gece boyunca RT'de mordan işlemi yapın.
    2. Yıkadıktan sonra, bölümleri Weigert'in demir hematoksilen solüsyonu ile 10 dakika boyayın, akan ılık musluk suyu altında 10 dakika durulayın ve 10-15 dakika Biebrich kırmızı asit fuksin solüsyonuna batırın.
    3. 10-15 dakika boyunca fosfomilibdik-fosfotungstik asit çözeltisi kullanarak farklılaşma elde edin ve kollajen açısından zengin bölgeler kırmızıdan berrak hale gelene kadar izleyin.
    4. Daha sonra, slaytları 5-10 dakika boyunca doğrudan anilin mavisi çözeltisine aktarın, damıtılmış suda durulayın ve% 1 asetik asit çözeltisinde 2-5 dakika boyunca farklılaştırın.
    5. Dereceli etanol (% 95 ila mutlak alkol) ve ksilen temizleme yoluyla dehidrasyonun ardından, bölümleri reçineli bir ortamla monte edin.

5. Masson'un trikrom boyama makine öğrenimi analizi

  1. Masson'un Trikrom boyamasını kullanarak kontrol ve bleomisin ile tedavi edilen akciğerlerde kollajen kompozisyon analizini histopatolojik olarak değerlendirin.
  2. Gözlemciye bağlı önyargıları azaltmak için, tam slayt görüntü tarayıcı kullanarak lekeli akciğer bölümlerinin yüksek çözünürlüklü dijital görüntülerini elde edin.
  3. Ardından, otomatik yazılım yörünge görüntü analizi 8,9,12 ile kollajen alanlarını kantitatif olarak analiz edin. Eğitim süreci aşağıda kısaca anlatılmıştır.
    1. Her doku kategorisi (örneğin, kollajen, normal doku ve fibrotik doku) için birkaç temsili ek açıklamayı manuel olarak tanımlayın. Destek vektör makinesi (SVM) için eğitim setini oluşturmak için açıklamalı eğitim bölgelerinden çıkarılan piksel bazında özellikleri kullanın.
    2. Masson lekeli bölümler için doku sınıflandırmasını üç kategoriye ayırın: kollajen, normal doku ve arka plan.
      NOT: Makine öğrenimi modeli, patolog tarafından doğrulanmış değerlendirmeler doğru doku kategorizasyonunu doğrulayana kadar tekrarlanan açıklama ve iyileştirme yoluyla tüm slayt görüntüleri (WSI'ler) üzerinde yinelemeli eğitime tabi tutulur. Tatmin edici bir sınıflandırma doğruluğu elde edildiğinde, süreç tamamen otomatik hale gelir: Geçerli ilgi alanları (ROI'ler) içindeki her pikselden özellikler çıkarılır ve SVM daha sonra ilgili doku kategorisini yüksek hassasiyetle tahmin eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Şekil 10A-D, akciğer hacmi değişikliklerinin ve boyama analizinin sonuçlarını göstermektedir.

Bleomisinin (BLM) akciğer dokusu üzerindeki etkisini değerlendirmek için, 3D görüntüleme teknikleri kullanarak salin ile tedavi edilen gruplar (Ctrl) ve BLM ile tedavi edilen gruplar arasında akciğer hacimlerinin karşılaştırmalı bir analizini yaptık. Sol akciğer hacmi, BLM grubunda Ctrl'ye kıyasla önemli ölçüde azalmıştır. Sol akciğer hac...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pulmoner fibroz, akciğer dokusunun ilerleyici yara izi ile karakterize, akciğer fonksiyonunda düşüşe ve nihayetinde solunum yetmezliğine yol açan yıkıcı bir hastalıktır1. Çeşitli farmakolojik ajanlar ve uygulama yöntemleri ile indüklenen pulmoner fibrozis fare modeli, hastalığın ilerlemesini anlamak ve özellikle bleomisin intratrakeal damlatmada potansiyel terapötiklerin etkinliğini değerlendirmek için önemli bir araçtır13. Bununla birlikte...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82300092) ve Devlet Anahtar Solunum Hastalıkları Laboratuvarı Bağımsız Araştırmaları (SKLRD-Z-202302) ve Guangdong İl Araştırma Enstitüleri İnovasyon Kapasitesi Geliştirme Projesi Finansmanı (KD032024001) tarafından desteklenmiştir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
%0,9 tuzlu suumut biyografisiHBPP008-100
22G kör iğneBD383922
3D Dilimleyici  Görüntü Bilgi İşlem Platformu3D Dilimleyici https://www.slicer.org/
BleomisinMCEHY-17565 Serisi
İzofluranGeri sarR510-22 Serisi
Masson Leke KitiEvet60532ES58
Mikro CTPinsengSNC-100 Serisi
YörüngeYörünge Görüntü analizihttps://www.orbit.bio/
Pentobarbital sodyumSigmaP3761
Küçük hayvan laringoskopuYuyan EnstrümanlarıCG-02M
SPSS DergisiIBMSürüm 19.0 
Sıcak BattaniyeLaboratuvar Animasyon TeknolojisiLAT-16-0323

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Podolanczuk, A. J., et al. Idiopathic pulmonary fibrosis: state of the art for 2023. Eur Respir J. 61 (4), 2200957(2023).
  2. Raghu, G., Selman, M. Nintedanib and pirfenidone: new antifibrotic treatments indicated for idiopathic pulmonary fibrosis offer hopes and raises questions. Am J Respir Crit Care Med. 191 (3), 252-254 (2015).
  3. Moss, B. J., Ryter, S. W., Rosas, I. O. Pathogenic mechanisms underlying idiopathic pulmonary fibrosis. Annu Rev Pathol. 17, 515-546 (2022).
  4. Kolb, P., et al. The importance of interventional timing in the bleomycin model of pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 55 (6), 1901105(2020).
  5. Jenkins, R. G., et al. An official American Thoracic Society workshop report: use of animal models for the preclinical assessment of potential therapies for pulmonary fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol. 56 (5), 667-679 (2017).
  6. Wu, Z., et al. Integrating network pharmacology, experimental validation and molecular docking to reveal the alleviation of Yinhuang granule on idiopathic pulmonary fibrosis. Phytomedicine. 128, 155368(2024).
  7. Liao, S., et al. Direct intrabronchial administration to improve the selective agent deposition within the mouse lung. J Vis Exp. (147), e59450(2019).
  8. Fu, Z., et al. Therapeutic effects of fatty acid binding protein 1 in mice with pulmonary fibrosis by regulating alveolar epithelial regeneration. BMJ Open Respir Res. 10 (1), e001568(2023).
  9. Song, S., et al. Intracellular hydroxyproline imprinting following resolution of bleomycin-induced pulmonary fibrosis. Eur Respir J. 59 (5), 2100864(2022).
  10. Pennati, F., et al. Micro-CT-derived ventilation biomarkers for the longitudinal assessment of pathology and response to therapy in a mouse model of lung fibrosis. Sci Rep. 13 (1), 4462(2023).
  11. Choi, E. J., et al. Serial micro-CT assessment of the therapeutic effects of rosiglitazone in a bleomycin-induced lung fibrosis mouse model. Korean J Radiol. 15 (4), 448-455 (2014).
  12. Yang, P., et al. Comprehensive analysis of fibroblast activation protein expression in interstitial lung diseases. Am J Respir Crit Care Med. 207 (2), 160-172 (2023).
  13. Liu, T., De Los, S. F., Phan, S. H. The bleomycin model of pulmonary fibrosis. Methods Mol Biol. 1627, 27-42 (2017).
  14. Ruscitti, F., et al. Longitudinal assessment of bleomycin-induced lung fibrosis by micro-CT correlates with histological evaluation in mice. Multidiscip Respir Med. 12, 8(2017).
  15. Vande, V. G., et al. Longitudinal micro-CT provides biomarkers of lung disease that can be used to assess the effect of therapy in preclinical mouse models, and reveal compensatory changes in lung volume. Dis Model Mech. 9 (1), 91-98 (2016).
  16. Buccardi, M., et al. A fully automated microCT deep learning approach for precision preclinical investigation of lung fibrosis progression and response to therapy. Respir Res. 24 (1), 126(2023).
  17. Ferrini, E., et al. A new anesthesia protocol enabling longitudinal lungfunction measurements in neonatal rabbits by microCT. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 321 (6), L1206-L1214 (2021).
  18. Jensen, M., et al. 3D whole body preclinical microCT database of subcutaneous tumors in mice with annotations from 3 annotators. Sci Data. 11 (1), 1021(2024).
  19. Lai, R., et al. The longitudinal and regional analysis of bleomycininduced pulmonary fibrosis in mice by microcomputed tomography. Heliyon. 9 (5), e15681(2023).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Mikro CT G r nt lemeUnilateral Bleomisin3D SlicerAkci er SegmentasyonuKolajen BirikimiMasson un Trikrom BoyamasVentile Akci er B lgeleri

İlgili makaleler