Bu video ve protokol kemirgenlerde bir cam kaplı kafatası pencere nasıl implant göstermektedir. Bu hazırlıklar, kronik in vivo iki ay zaman ölçekleri üzerinde neokorteks foton görüntüleme için kullanılabilir. Optik içsel sinyal görüntüleme gibi diğer görüntüleme türleri için de kullanılıyor olabilir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kronik Beyin Görüntüleme Kraniyotomi Cerrahi Prosedür
Bu makalede
Özet
Özet
Görüntüleme teknikleri, çalışma beyin fonksiyonu giderek daha önemli hale gelmektedir. Bunlar arasında, canlı bozulmamış beyin çalışma sağlar çünkü iki-foton lazer tarama mikroskopisi, son derece yararlı bir yöntem olarak ortaya çıkmıştır. Uygun hazırlıklar, bu tekniğin dakika ay, kronik aynı kortikal alanda gözlem sağlar. Bu video, beynin iki foton mikroskopi kullanılarak in vivo görüntüleme kronik bir hazırlık göstermektedir. Bu teknik, başlangıçta şimdi Janelia Farm Howard Hughes Tıp Enstitüsü'nden Araştırmacı Dr. Karel Svoboda, öncülük oldu. Burada gösterilen gibi hazırlıklar görüntü kortikal kan akımı dinamikleri, kalsiyum duyarlı boyalar kullanarak, ya da içsel optik görüntüleme çalışmaları nöronal aktivite kayıt neokortikal yapısı (örneğin, dendritik ve aksonal dinamikleri), görüntüleme için kullanılabilir. Neokorteks Derin görüntüleme optimum kafatası pencere ameliyatları ile mümkündür. Duramater ameliyat sırasında zarar vermez aşırı bakım ile birlikte, enfeksiyonları önlemek için mümkün olan en steril koşullar altında faaliyet gösteren, başarılı ve uzun ömürlü cam kaplı kafatası pencereler neden olacaktır.
Protokol
- IACUC onaylanmış prosedürlerini kullanarak izofluran ile fareler (indüksiyon için% 4, cerrahi için% 1.5-2) anestezisi. Kuyruk ve / veya ayak tutam hayvan tam sedasyon sağlamak amacıyla kullanılır önemlidir.
- Kemirgen düzeltici kullanarak, gözleri boyun arkasından saç tıraş.
- Bir ameliyat su yeniden dolaşımdaki battaniye üzerinde fare, bir stereotaksik çerçeve yerleştirin. Kulak çubukları ile baş sıkıca sabitleyin.
- Hayvan göz kurumasını önlemek için, göz merhemi sürün.
- Deksametazon (0.2 mg / kg) ve Carprofen (5 mg / kg) sırasıyla, beyin ve / veya inflamatuvar yanıt şişme önlemek için, subkutan, yönetme.
- Ameliyat başlamadan önce, çalışma....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Video ve iki foton mikroskopi kullanımı ile birlikte ek rakamlar, kafatası pencere hazırlanması, gösterildiği gibi, in vivo neokorteks yapısı ve fonksiyonu çalışma için çok güçlü bir araçtır. Teknik ilgili anatomi ve ince cerrahi işlemler ve bu hazırlık gerektirir becerileri aşina olmak için sıkı bir eğitim gerektirir. Sadece bozulmamış ameliyatlar, kronik görüntüleme için kullanılabilir. Dura aşırı veya delinmiş manipüle ise, hazırlık görüntüleme için kullanılan olmamalıdır.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
Titanyum çubuklar ısmarlama
Kaynaklar
- Svoboda, K., Denk, W., Kleinfeld, D., Tank, D. W. In vivo dendritic calcium dynamics in neocortical pyramidal neurons. Nature. 85, 161-165 (1997).
- Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
