Bu protokol, akciğer adenokarsinomunu incelemek için non-invaziv, basit ve etkili bir yöntem sunan araştırma teknikleri olarak fare pulmoner fonksiyonu ve Doppler ultrasonunu kullanır.
Yöntem makalesi
Bu protokol, akciğer adenokarsinomunu incelemek için non-invaziv, basit ve etkili bir yöntem sunan araştırma teknikleri olarak fare pulmoner fonksiyonu ve Doppler ultrasonunu kullanır.
Akciğer adenokarsinomu (LUAD) sık görülen bir malign akciğer tümörüdür ve ilerlemesi ventilasyon ve kan akışında değişikliklere yol açarak patolojik koşullar altında akciğerin farklı fonksiyonel özelliklerini vurgular. Non-invaziv tüm vücut pletismografi (WBP) sistemi, uyanık farelerde akciğer fonksiyonunun ve hava yolu duyarlılığının gerçek zamanlı olarak izlenmesini sağlayarak trakeotomi ve anesteziden kaynaklanan parazitleri önler. Yüksek frekanslı görüntüleme teknolojisini kullanan küçük hayvan Doppler ultrasonu (DU), mikrovasküler yapıları ve pulmoner kan akış hızındaki değişiklikleri non-invaziv olarak yakalar ve LUAD ile ilişkili ventilasyon ve perfüzyon anormalliklerini araştırmak için önemli destek sunar. Bu çalışmada, A/J farelerde 100 mg/kg 4- (metilnitrosamino) -1- (3-piridil) -1-bütanon (NNK) kullanılarak bir LUAD modeli kurulmuştur. Farelerde solunum fonksiyonunu ve hemodinamik parametreleri izlemek için DU ile birlikte WBP kullanıldı. Sonuçlar, %50 ekspiratuar akış (EF50), dakika ventilasyonu (MV), tepe ekspiratuar akış (PEF), tepe inspiratuar akış (PIF), gelişmiş duraklama (Penh) ve tidal hacim (TV) dahil olmak üzere temel metriklerde önemli bir düşüş (p < 0.05) ve ayrıca tümör ilerlemesi sırasında model grubunda pulmoner arteriyel kan akış hızında belirgin bir azalma (p < 0.05) ortaya koydu. Bu birleşik yaklaşım, farelerde LUAD'ın patolojik gelişimi sırasında meydana gelen fonksiyonel bozulmaları etkili bir şekilde yakalayarak, solunum yolu hastalıklarına yönelik araştırmaları ilerletmek için invaziv olmayan ve etkili bir yöntem sağlar.
Akciğer adenokarsinomu (LUAD), küçük hücreli dışı akciğer kanserinin en sık görülen alt tipidir1. Artan çevre kirliliği, tütün kullanımı ve yaşlanan nüfusla birlikte, LUAD'ın küresel prevalansı her yıl artmaktadır 2,3,4. Mevcut çalışmalar, LUAD ilerledikçe hastaların solunum fonksiyonlarında ilerleyici düşüşler ve hemodinamik bozukluklar yaşadığını göstermektedir 5,6,7,8. Pulmoner fonksiyonu ve pulmoner arter kan akışı dalgalanmalarını izlemek ve değerlendirmek için non-invaziv, verimli ve uygun maliyetli yöntemler geliştirmek, klinik LUAD yönetimi için kritik kanıtlar sağlayabilir.
Mevcut araştırmalar, LUAD tümör büyümesinin hava yollarını aşamalı olarak tıkadığını, akciğer kapasitesini ve ventilasyonu9 azalttığını ve lokalize kronik inflamasyon10 yoluyla hava yolu darlığını şiddetlendiren inflamatuar sitokin sekresyonunu tetiklediğini göstermektedir. Sonuç olarak, azalmış pulmoner fonksiyon, ağırlaştırılmış hipoksiye ve kan akışı anormalliklerine yol açar11,12. Bu patolojik değişiklikler sıklıkla klinik olarak ilerleyici nefes darlığı ve göğüs sıkışması olarak ortaya çıkar. BT görüntüleme, LUAD ilerlemesinin neden olduğu gerçek zamanlı solunum fonksiyon parametre anormalliklerini veya hemodinamik değişiklikleri yakalayamazken, tekrarlanan kısa süreli BT taramaları da radyasyona maruz kalmayı artırır13. Buna karşılık, tüm vücut pletismografisi (WBP) ve Doppler ultrason akış metrisi, dinamik izleme için non-invaziv, operatör dostu ve tekrarlanabilir tamamlayıcı yaklaşımlar olarak hizmet eder. Solunum fonksiyonunu ve hemodinamiği izlemek için bu tekniklerin entegre edilmesi, hastalığın ilerlemesini değerlendirmeyi ve terapötik karar vermeyi iyileştirebilir.
Bu çalışmada, LUAD başlangıcını ve ilerlemesini modellemek için A / J farelerde 4- (metilnitrosamino) -1- (3-piridil) -1-bütanon (NNK) kullandık. Solunum fonksiyonu ve hemodinamik değişiklikler 4, 10 ve 20. haftalarda WBP ve Doppler ultrason (DU) ile uzunlamasına izlendi. Bu yaklaşım, LUAD patofizyolojisi ve terapötik stratejileri hakkında yeni bilgiler sağlamayı amaçlamaktadır.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmada açıklanan tüm hayvan deneyleri, Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvan Refahı Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır ve hayvan araştırma etiği için ilgili yasa ve standartlara uygun olarak yürütülmüştür (20240616IV). Dişi akraba A / JGpt fareleri (7-8 haftalık) 20-24 ° C'de ve% 40 -% 70 bağıl nemde tutuldu. 12 saatlik aydınlık-karanlık döngüsü boyunca, farelere standart hayvan yemi ve arıtılmış su sağlandı. Hayvanlar, deneylere başlamadan 7 gün önce bu ortama alıştırıldı.
1. Hayvan modelinin oluşturulması ve hazırlanması
2. Non-invaziv solunum fonksiyon testi
NOT: WBP sistemi, özel olarak tasarlanmış bir ölçüm odası kullanarak uyanık, serbestçe hareket eden hayvanlarda solunum fonksiyonunu ölçer. Oda, havanın odaya girip çıkmasına izin veren pnömotak ekranları ile donatılmıştır. Pnömotak ızgaraları tarafından oluşturulan hava direnci, ortam havasına göre haznede küçük basınç değişikliklerine neden olur. Hazne içindeki bu basınç değişikliklerini ölçmek için hassas bir basınç dönüştürücü bağlanır ve buradan akış elde edilebilir (kutu akışı olarak adlandırılır). Yazılım, gerçek zamanlı raporlamanın yanı sıra akış ve hacim gibi solunum parametreleri sağlar.
3. Pulmoner arteriyel kan akış hızı ölçümü
4. Veri analizi
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Pulmoner fonksiyonun ve pulmoner arteriyel kan akışı değerlendirme metodolojisinin fizibilitesini, doğruluğunu ve tekrarlanabilirliğini doğrulamak için, boş grupta 4. hafta izleme süresi boyunca hayati kapasitenin P'sinde (EF50, 10 kat büyütülmüş) PIF, PEF ve ekspiratuar akışın dakika dakika ortalama eğrilerini çizdik (Şekil 1A). Bu panelde gösterildiği gibi, karşılık gelen üç eğri, şekil olarak yüksek derecede uygunluk sergiler. Özellikle EF50'deki minimal mutlak değişikliklere rağmen, bu v...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu çalışmada, önceki raporlara göre bir akciğer adenokarsinomu modeli oluşturmak için A/J fareleri ile kombine NNK seçildi. İlgili çalışmalar, A/J farelerle kombine edilen NNK'nın 10. haftada minimal tümör oluşumuna ve 16. ila 20. haftalarda stabil tümör oluşumuna sahip olabileceğini göstermiştir 18,19. Bu nedenle, tümör gelişiminin erken evresinde akciğer fonksiyonu ve pulmoner arter kan akışında...
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.
Chengdu Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Temel Tıp Bilimleri Okulu'ndan Profesör Cong Huang'a destekleri için teşekkür ederiz. Bu araştırma Sichuan Bilim ve Teknoloji Programı tarafından desteklenmiştir (Proje Onay No: 2024YFFK0173)
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| A / J fareler | GemPharmatech LLC. | ||
| 0.5ml EDTA tüpleri | Labshark | ||
| 1-Bütanon, 4- (metilnitrosoamino) -1- (3-piridinil) | Gu Shi Gong Yuan Tıbbi Cihazlar A.Ş. | ||
| %75 etanol | ChengDu Chron Kimyasallar A.Ş. Ltd | 2023052901 | |
| Anestezi indüksiyon odası | Shanghai Tawans Intelligent Technology Co., Ltd. | MZ-MR | |
| Tüy dökücü krem | Shanghai Yuyan Instruments Co., Ltd. | ||
| Tüy dökücü cihaz | Shanghai Yuyan Instruments Co., Ltd. | 3180 | |
| Isoflurane | Şanghay Duma Biyoteknoloji Co, Ltd | DM-M9462 | |
| Tıbbi bant | Beijing Lanbokangs Technology Co., Ltd. | 19-5023 | |
| tıbbi tricorder | MedChemexpress | 69652 | |
| PBS tampon çözeltisi | Shanghai Fusheng Co., Ltd. | A-RY5256 | |
| Tuzlu su (tıp) | Beijing Biolabs Technology Co. | GL1736 | |
| Ultrason birleştirme ajanı | Qisheng (Şangay) Tıbbi Ekipman Co., Ltd. |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste
İzin iste