Yöntem makalesi

Sıçanlarda Miyokardiyal İskemi-Reperfüzyon Yaralanması Modellemesi için Minimal İnvaziv Çift Canlı Düğüm Tekniği

789 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/68430

⸱

25 Temmuz 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Shaanxi Key Laboratory of Chinese Medicine Fundamentals and New Drugs Research, School of Pharmacy, Shaanxi University of Chinese Medicine, 2People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Burada, sekonder torakotomi olmadan talep üzerine reperfüzyon için in vitro olarak salınabilen ve minimal invaziv olan sol ön inen koroner arter (LAD) hedefli çift aktif düğüm koil ligasyonu ile miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını indüklemek için bir şema öneriyoruz.

Özet

Miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (MI/RI) modeli, miyokard infarktüsünün patofizyolojik mekanizmalarının araştırılmasında ve ilgili ilaçların geliştirilmesinin kolaylaştırılmasında büyük önem taşımaktadır. Bununla birlikte, yaygın olarak kullanılan modelleme yöntemleri arasında, geleneksel polietilen tüp yardımlı koroner arter ligasyonu yönteminin önemli dezavantajları vardır. Bağı çözmek için göğsün yeniden açılmasını gerektirir, bu sadece zaman alıcı olmakla kalmaz, aynı zamanda deney hayvanlarında önemli hasara neden olur ve kolayca ölümlerine yol açabilir. Bu çalışmanın amacı, geliştirilmiş bir model hazırlama yöntemini tanıtmaktır. Bu yöntemde, Sol Ön İnen Koroner Arter (LAD), çift canlı düğüm bobini kullanılarak bağlanır ve canlı düğüm, reperfüzyon elde etmek için in vitro olarak açılabilir, böylece ikinci bir invaziv prosedürden kaçınılabilir. Elektrokardiyogram (EKG) monitörizasyonu, M-mod ekokardiyografi (ME) tayini, Evans Blue ve 2,3,5-trifenit-trazoliumklorür boyaması (EB-TTC) gibi değerlendirme yöntemleri, bu yöntemin stabil MI/RI'yi indükleyebileceğini göstermiştir. Bu geliştirilmiş MI/RI model şeması, basitliği ve hızı ile karakterize edilir ve modelleme başarı oranı oldukça tatmin edicidir. Genel olarak, MI/RI araştırması alanında çalışan araştırmacılar için pratik ve değerli rehberlik sunar.

Giriş

Dünya Sağlık Örgütü'ne göre, koroner kalp hastalığı, yüksek insidans, yüksek mortalite ve yüksek komplikasyon oranı ile karakterize edilen küresel kardiyovasküler hastalık yükünde önemli bir yere sahiptir. Dahası, hastalık giderek daha genç bir eğilim göstermektedir. Bazı gelişmiş ülkelerden elde edilen istatistikler, 35 ila 40 yaş grubunda koroner kalp hastalığı insidansının son on yılda yaklaşık %15-20 oranında arttığını göstermektedir. İlaç trombolizi, girişimsel tedavi ve koroner arter baypas greftleme gibi reperfüzyon yöntemleri güvenli, etkili ve yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, kan akışının ani restorasyonu sıklıkla iskemik miyokardın yapısal ve fonksiyonel hasarını şiddetlendirir ve bir dizi olumsuz sonuca yol açar. Bunlar arasında kardiyomiyosit apoptozu ve nekroz, aritmiler ve sistolik disfonksiyon bulunur ve sonuçta miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (MI/RI) ile sonuçlanır1,2. MI/RI yaralanmasının insidansı %25-30 gibi yüksek bir orandadır ve mekanizması tam olarak aydınlatılamamıştır3. Bu nedenle, etkili önleme ve tedavi stratejilerinin araştırılması, kardiyovasküler alanda ele alınması gereken önemli bir konu haline gelmiştir.

Hayvan modelleri, kardiyovasküler hastalık araştırmalarında büyük önem taşımaktadır. MI/RI'nin patolojik mekanizmalarını aydınlatmak ve yeni terapötik stratejiler geliştirmek için vazgeçilmez araçlar olarak hizmet ederler4. Miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı olan hayvan modelinin güvenilirliği ve stabilitesi, klinik uygulamada tedavi stratejilerinin başarılı bir şekilde çevrilmesini ve uygulanmasını doğrudan etkilemektedir. Sol ön inen koroner arter (LAD), miyokard iskemisinden etkilenen yaygın bir damardır5. LAD'nin bağlanmasıyla oluşturulan MI/RI modeli, insan miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarının patogenezi ve patolojik sürecine oldukça benzerdir6. Bu modeller arasında, geleneksel polietilen tüp yardımlı koroner arter ligasyonu yöntemi önceki çalışmalarda yaygın olarak kullanılmıştır. Yaygın kullanımı, ligasyon kuvvetinin düzgün dağılımı ve vasküler endotel7 için bir dereceye kadar koruma gibi avantajlara bağlanabilir. Bununla birlikte, birçok avantajına rağmen, operasyonel detaylar birçok araştırmacı arasında tartışma odağı olmaya devam etmektedir.

Geleneksel polietilen tüp yardımlı koroner arter ligasyonu yönteminde, reperfüzyon sırasında bağın çözülmesi için göğsün yeniden açılması gerekir. Günümüzde klasik torakotomi ligasyon yöntemi ve modifiye minimal invaziv ligasyon yöntemi olmak üzere iki ana ameliyat yöntemi bulunmaktadır. Klasik torakotomi ligasyonu yöntemi, kalbi ligasyon için tamamen açığa çıkarmak için göğsün büyük ölçekli bir kesisini gerektirir6. Modifiye minimal invaziv ligasyon yöntemi, ligasyonu daha küçük bir kesi ile tamamlamak için özel aletler kullanır8. Reperfüzyon aşamasında, klasik torakotomi ligasyonu yöntemi, bağın çözülmesi için göğsün yeniden açılmasını gerektirir, bu sadece zaman alıcı olmakla kalmaz, aynı zamanda deney hayvanlarında ciddi travmaya neden olur ve ölümlerine yol açması muhtemeldir. Ek olarak, tekrarlanan torakotomi, deneysel sonuçların doğruluğunu engelleyerek enfeksiyon gibi komplikasyonları tetikleyebilir 7,9. Ayrıca, her torakotomi ameliyatının derecesinin tamamen tutarlı olması zor olduğundan, deneysel verilerin değişkenliğini artıracaktır. Modifiye minimal invaziv ligasyon yönteminin uygulanması ile ilgili olarak, daha küçük insizyonuna rağmen, prosedür önemli teknik zorluklar ortaya çıkarmaktadır. Deneycilerin son derece gelişmiş teknik yeterliliğe sahip olmalarını ve stereomikroskop gibi üst düzey hassas aletlere güvenmelerini gerektirir. Bu tür aletlerin yardımı olmadan kapalı bir alanda denendiğinde, yanlışlıkla çevredeki dokulara zarar verme riski yüksektir. Bu da deneysel sonuçların istikrarını ve güvenilirliğini zayıflatabilir.

Sonuç olarak, bu zorlukların üstesinden gelmek için gelişmiş bir model - hazırlık yaklaşımı için acil bir gereklilik vardır. Bu çalışma, MI/RI modellemesi için geliştirilmiş bir yöntem sunmaktadır. Yöntem, LAD'yi bağlamak için bir çift canlı düğüm bobini kullanmayı içerir ve reperfüzyon elde etmek için canlı düğümün in vitro olarak serbest bırakılmasını sağlar, böylece ikinci bir torakotomi ihtiyacını ortadan kaldırır. Operasyon basitliği ve ustalık kolaylığı ile karakterize edilen bu yöntem, miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını sürekli olarak indükleyebilir ve MI/RI alanındaki araştırmacılara değerli referans ve ilham kaynağı sunar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Deney protokolü, ShaanXi Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'nde (Kayıt numarası: SUCML20240820006) Laboratuvar Hayvanlarının Kullanımı ve Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi yönergelerine uygun olarak yürütülmüştür. Tüm hayvan araştırma verileri, ARRIVE (Hayvan Araştırmaları: İn Vivo Deneylerin Raporlanması) yönergelerine göre belgelenmiştir. Bu çalışma için 250 g ± 20 g ağırlığında ve 6-8 haftalık erkek Sprague Dawley (SD) sıçanları kullanıldı. Kullanılan hayvanlar, reaktifler ve ekipmanla ilgili ayrıntılar Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Ameliyat öncesi hazırlık

  1. 1.1. Oruç tutun: Sıçanları suya ücretsiz erişimi olan 8 saatlik bir oruç süresine tabi tutun
  2. Kalibre edin ve tartın: Anestezik dozu hesaplamak için elektronik bir terazi (0,1 g doğruluk) kullanarak vücut ağırlığını hassas bir şekilde ölçün.
  3. Anesteziyi indükleyin: Steril 2.5 mL'lik bir şırınga kullanarak 100 g vücut ağırlığı başına 0.4 mL'lik bir dozda intraperitoneal enjeksiyon yoluyla% 20 üretan çözeltisi uygulayın; Ventral orta hatta 1 cm lateral enjekte edin.
  4. Anesteziyi onaylayın: Arka pençeyi steril forseps ile kelepçeleyin; Uzuv çekme refleksinin olmaması derin anesteziyi doğrular.

2. Elektrokardiyogram (EKG) izleme (Şekil 1, Adım 1)

  1. Fareyi sırtüstü pozisyonda hareketsiz hale getirin: Ameliyat masasında tıbbi yapışkan bant kullanarak gövdeyi ve uzuvları "uzuvlar uzatılmış duruşta" sabitleyin.
  2. Elektrotları bağlayın: Sterilize edilmiş elektrot iğnelerini deri altına şu sırayla yerleştirin: sağ ön ayak (beyaz elektroda bağlı), sağ arka bacak (siyah elektroda bağlı) ve sol arka bacak (kırmızı elektroda bağlı). Ardından, bu elektrotları bir Lead II EKG monitörüne takın. İstikrarlı bir taban çizgisinin oluşturulduğundan ve QRS komplekslerinin monitörde net bir şekilde görülebildiğinden emin olun.
    NOT: Prosedür boyunca sürekli EKG izlemesini sürdürün. Dalga formu anormallikleri aracılığıyla anestezi derinliğini ve sıçan durumunu gerçek zamanlı olarak değerlendirin.

3. Cerrahi alan epilasyonu ve dezenfeksiyonu (Şekil 1, Adım 2)

  1. Mekanik epilasyon: Boyundaki ve sol göğüsteki tüyleri çıkarmak için elektrikli bir kesme makinesi kullanın (kalan uzunluk ≤0,5 mm).
    NOT: Bıçağı 30°'lik bir açıyla tutun ve tüyün çıkış yönünün tersine hareket ettirin.
  2. Kimyasal epilasyon: Tüy dökücü kremi açıkta kalan cilde 2 dakika boyunca eşit şekilde uygulayın. Steril bir kazıyıcı ile iyice çıkarın, ardından 37 °C tuzlu su ile 2,5 mL'lik bir şırınga kullanarak darbeli yıkama yapın. Kalıntı kalmayana kadar 3 kez tekrarlayın.
  3. Kademeli dezenfeksiyon: Steril pamuk topları kullanarak% 75 etanol-iyodofor karışımı (1: 1) ile cildi eşmerkezli daireler halinde (içten dışa) üç kez dezenfekte edin.

4. Ventilatör parametre kurulumu

  1. Ameliyat öncesi ekipman kontrolü: Ventilatör devresini Y şeklindeki trakeal tüp adaptörüne bağlayın.
  2. Parametreleri ayarlayın ( Şekil 1, Adım 3): Türe özgü parametreleri ayarlayın: tidal hacim 3.0 ml, solunum hızı 80 nefes/dk ve inspiratuar-ekspiratuar oran (I:E) 2:1.
  3. Devre açıklığını doğrulayın: Ventilatörü etkinleştirin ve devre ucunu tuzlu suya batırın. Ritmik kabarcık oluşumunu gözlemleyin. Yoksa, sistematik olarak sızıntı olup olmadığını kontrol edin ve sorun giderin.

5. Trakeal entübasyon

  1. Kesi konumlandırma: Cerrahi alanı steril bir bezle örtün. Subtiroid kıkırdak derisini keskin forsepslerle kaldırın ve düz makas kullanarak soluk borusu boyunca 2,5 cm boyuna bir kesi yapın.
  2. Katman katman diseksiyon: Steril forseps (sol el) ile cildi geri çekin ve mikromakasla (sağ el) yüzeysel ilerleyici diseksiyon yapın.
    NOT: İlk katmanı epidermis ve dermis ile sınırlayın; Kas tabakası hasarından kaçının.
  3. Trakeal maruziyet (Şekil 1, Adım 4): 4-5 trakeal kıkırdağı ortaya çıkarmak için platisma ve kayış kaslarının künt diseksiyonu için hemostatik forseps kullanın. Trakeayı forseps ile hareket ettirin ve stabilizasyon için altına silikon bir tüp yerleştirin.
    NOT: Soluk borusunun her iki tarafında karotis arter ve vagus siniri görülebilir, bu nedenle ameliyat sırasında bu yapılara zarar vermekten kaçının.
  4. Trakeal entübasyon ( Şekil 1, Adım 5): Mikromakas kullanarak 3. ve 4. trakeal kıkırdak halkaları arasında enine Ω şeklinde bir kesi (yaklaşık 1/3 çevre) oluşturun. Derinlik işaretleyicisini insizyon kenarı ile hizalayarak 14 G'lik bir silikon endotrakeal tüpü hızlı bir şekilde yerleştirin.
    NOT: Entübasyon sonrası, torasik hareketi ventilatör ritmi ile senkronize edin. Anormallikler için hava yolu basıncını ve solunum frekansını izleyin. Ventilatör ayarlarını yapın veya sapmalar meydana gelirse tüp açıklığını kontrol edin.

6. İnterkostal insizyon hazırlığı

  1. İnsizyon bölgesini işaretleyin: 3.-4. interkostal boşlukta sol sternal sınırı tanımlamak için steril bir cerrahi işaretleyici kullanın (maksimal apikal dürtü noktasını palpe ederek tanımlanır). 3,0 cm boyuna bir çizgi çizin.
  2. Katman katman diseksiyon: Cildi steril forseps ile yükseltin ve steril makas kullanarak işaretli çizgi boyunca kesin. Hemostatik forsepsleri deri altına 30° açıyla yerleştirin ve kas tabakasını ayırmak için interkostal boşluğa paralel künt diseksiyon yapın.
  3. Kaburga transeksiyonu: Mikromakas kullanarak 3. ve 4. kaburgaları ve interkostal kasları kesin. Not: İnterkostal arter kanaması meydana gelirse, hemostaz10 elde etmek için hemen 60 saniye boyunca sıkı bir basınçla steril bir pamuklu çubuk uygulayın.

7. Sol ön inen (LAD) arter lokalizasyonu ve ligasyonu

  1. Ligasyon bölgesini onaylayın (Şekil 1, Adım 6): Kalbi açığa çıkarmak için sternal bir ekartör kullanarak interkostal boşluğu 4 cm'ye genişletin. Perikard'ı nazikçe inceleyin (timik dokuyu kalbin üzerindeki beyaz yapı olarak tanımlayın). Pulmoner konus (sağ kulak konik çıkıntısı) ve sol kulak kepçesi (üçgen kapak yapısı) tarafından oluşturulan "V" nin orta noktasından 2 mm daha düşük LAD'yi bulun.
  2. İğne kalibrasyonu (Şekil 1, Adım 7-1): Mikro forseps kullanarak 6-0 polipropilen sütürü (iğne ile) kelepçeleyin. Miyokard'ı, miyokard yüzeyine göre 15°'lik bir açıyla (derinlik: 1 mm; genişlik: 2 mm) orta distal LAD bileşkesine 1 mm lateral olarak sağdan sola doğru ilerleyerek girin.
  3. Çift kayma tekniği (Şekil 1, Adım 7-1 - 7-5): Ligatür ipliği miyokarddan geçirildikten sonra, ligatür ipliğinin bir ucunu iğne ucu ile mikroskobik forsepsli bir bobine yuvarlayın ve diğer ucunu bobine geçirin ve sabitlemeyi sıkılaştırmak için hafifçe çekin. Çift düğümlü bir yapı oluşturmak için yukarıdaki işlemi tekrarlayarak ve bağ ipliğinin iki ucunun göğüs boşluğunun dışında birbirine paralel bırakıldığından emin olarak ligatür ipliğinin diğer ucunu tekrar düğümleyin.
    NOT: Sıkma işlemi sırasında, yumuşak ve eşit bir kuvvetle kademeli olarak sıkmak için mikrocımbız kullanılırken, damar yırtılmasına veya güvenli olmayan ligasyona yol açan aşırı eforu önlemek için iskemi derecesini belirlemek için miyokardiyal renk değişiklikleri gözlendi. Modelin başarılı bir şekilde kurulması, elektrokardiyogramda sol ventrikülün ön duvarı/apikal bölgesinin iskemik solukluğu ve 0.2 mV'≥ sürekli ST segment yükselmesi gözlenerek doğrulandı ve başarılı ligasyon onaylandıktan hemen sonra 30 dakikalık iskemik zamanlayıcı başlatıldı.

8. Sütür ve torasik negatif basınç restorasyonu

  1. Kaburga kapatma: Sternal ekartörü çıkarın. Kaburgaların etrafındaki interkostal kasları 3-4 sürekli kilitleme düzeninde (2 mm dikiş aralıkları) 4-0 emilebilir bir sütür kullanarak kapatın.
    NOT: Reperfüzyona müdahale etmesini önlemek için ligasyon sütürü ile kapatma sütürleri arasındaki temastan kaçının.
  2. Kas tabakasının kapatılması ve hava tahliyesi: Yüzeysel pektoralis majör ve minör kasları 4-0 dikişle yaklaştırın. Son sıkmadan önce, bir asistan dikişi sabitlerken intratorasik havayı aspire etmek için son dikiş deliğine iğnesiz 2,5 mL'lik bir şırınga yerleştirin.
    NOT: Spontan solunum için torasik hareketi izleyin (ventilatöre göre asenkron ritim ile gösterildiği gibi).
  3. Cildin kapatılması ve dezenfeksiyonu: Cildi 4-0 dikiş ile sürekli olarak dikin. Protokol 3.3 yönergelerini izleyerek üç kez dezenfekte edin.

9. Ventilatörün devre dışı bırakılması

  1. Ekstübasyon: Spontan solunumu gözlemlerken endotrakeal tüpü yavaşça geri çekin.
  2. Trakeal ve kas kapanması: Hava geçirmez bir sızdırmazlık sağlamak için 4-0 sütür kullanarak trakeal kıkırdak halkaları uzunlamasına dikilir. Boyun kaslarını yeniden yaklaştırın.
  3. Cildin kapatılması ve dezenfeksiyonu (Şekil 1, Adım 8): Boyun derisini 4-0 dikiş ile kapatın. Etanol ve povidon-iyot ile ıslatılmış steril bezler kullanarak dezenfekte edin. Perdeleri çıkarın ve fareyi reperfüzyon için 38 ° C'lik bir ısıtma yastığına aktarın.
    NOT: Spontan solunum başarısız olursa, endotrakeal tüpü yeniden yerleştirin ve ekstübasyonu yeniden denemeden önce Adım 8.1-8.3'ü tekrarlayın.

10. İskemi-reperfüzyon

  1. Bağı gevşetin (Şekil 1, Adım 9): 30 dakikalık iskemiden sonra, bantlama iğnesinin bir ucundaki ligatür telini yatay olarak çekerek ilk düğümü çözün, ardından diğer ucundaki ligatür telini çekerek ikinci düğümü çözün ve ardından çift düğümün başarıyla çözüldüğünü kanıtlayan herhangi bir direnç olmadığından emin olmak için yatay olarak bir yandan diğer yana çekin.
    NOT: EB-TTC çift boyama gerekiyorsa, ligatür hattı dışarı çekilemez.
  2. Reperfüzyon validasyonu: Başarılı reperfüzyonun kanıtı olarak EKG'de ST segment çözünürlüğünü onaylayın12.

11. M-mod ekokardiyografi (ME) tayini 10

  1. İşlem öncesi hazırlık: Reperfüzyondan 2 saat sonra, anestezi derinliğini değerlendirin ve gerekirse takviye edin. Sıçanı sırtüstü hareketsiz hale getirin ve prekordiyal bölgeye 2 mm 37 °C ultrason jeli uygulayın.
  2. Veri toplama: Ultrason sistemini açın. Ön ayar protokolünü seçin, MX250 probunu 18 MHz'e ayarlayın ve sol ventrikül hareketinin M modu görüntülerini kaydedin. Görüntüleri uygun şekilde kaydedin.
  3. Veri analizi: Sisteme entegre yazılımı kullanarak sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu (LVEF), fraksiyonel kısalma (LVFS), sistolik sonu çapı (LVID'ler), diyastol sonu çapı (LVIDd) ve strok hacmini (SV) hesaplayın.
    NOT: ≥3 ardışık kardiyak döngüden veri yakalayın; İstatistiksel titizlik için ortalama değerleri rapor edin.

12. Evans Mavisi ve 2,3,5-Trifenit-trazoliumklorür (EB-TTC) boyama

  1. Yeniden entübasyon: Boyun derisinden, kaslardan ve trakeadan dikişleri sırayla çıkarın. Bir endotrakeal tüp yerleştirin ve solunumu sürdürmek için ventilatöre bağlayın.
  2. Yeniden torakotomi: Göğüs derisinden, kaslardan ve kaburgalardan dikişleri çıkarın. İnterkostal boşluğu genişletmek ve kalbi tamamen ortaya çıkarmak için torasik bir ekartör kullanın.
  3. LAD arterini yeniden bağlayın: LAD arterini yeniden bağlayın; EKG'de apikal solukluk ve kalıcı ST segment yükselmesini gözlemleyerek başarılı ligasyonu onaylayın.
  4. EB enjekte edin: 0.5 mL'lik bir insülin şırıngası kullanarak, 0.3 mL% 1.5 Evans Blue solüsyonunu aspire edin. Ardından, aort arkını hızlı bir şekilde inceleyin, şırınga iğnesini aort içine yerleştirin ve mikrohemostatik bir kelepçe ile sabitleyin. Ardından, Evans Blue solüsyonunu enjekte edin ve kalbi tek tip mavi lekelenme açısından gözlemleyin.
  5. Kalbi eksize edin: Enjeksiyondan 30 saniye sonra kalbi steril makasla eksize edin. Hemen tuzlu suya batırın ve kalan kanı ve Evans Blue'yu çıkarmak için tekrar tekrar durulayın. Kalbi -80 °C'de dondurun.
  6. Kalbi bölümlere ayırın: 20 dakika donduktan sonra kalbi çıkarın. Cerrahi bir bıçak kullanarak, tepeden tabana kardiyak uzun eksene dik olarak 1 mm kalınlığında beş enine dilim kesin.
  7. TTC ile lekeleyin: Dilimlerin oda sıcaklığına dengelenmesini bekleyin. Bunları% 1.5 TTC çözeltisi içeren 50 mL'lik amber santrifüj tüpüne aktarın. Tüpü, ışık korumalı koşullar altında 30 dakika boyunca 37 ° C'de önceden ısıtılmış bir termostatik çalkalayıcıda inkübe edin.
  8. Görüntü elde etme ve analiz: Boyamadan sonra, dilimleri 12 saat boyunca paraformaldehit içinde sabitleyin. Image J yazılımını kullanarak yüksek çözünürlüklü görüntüler yakalayın ve enfarktüs alanını (IA), risk altındaki alanı (AAR) ve toplam sol ventrikül alanını (LV) ölçün. Cai ve ark.12 tarafından açıklanan metodolojiyi izleyerek miyokard enfarktüsü oranını IA/(AAR+IA) ve iskemi risk oranını (AAR+IA)/LV olarak hesaplayın.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

EKG
Elektrokardiyogram, sıçan kalbinin ligasyonundan öncesinden iskemi-reperfüzyondan 120 dakika sonrasına kadar olan süreç boyunca kaydedildi. Elektrokardiyogram değişiklikleri Şekil 2A'da gösterilmiştir. İskemi sırasında, ST segmenti yukarı doğru kemerli bir yükselme gösterdi ve T dalgası uzun ve zirveliydi. Reperfüzyondan sonra, ST segmentinin yükselmesi yavaş yavaş geri düştü.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Miyokardiyal iskemi-reperfüzyon yaralanması modelinin oluşturulmasında klasik bir yöntem olan koroner arter ligasyonu, kardiyovasküler hastalık araştırmalarında büyük önem taşımaktadır12. 1980'lerden bu yana, Yamamoto ve arkadaşlarının öncülük ettiği polietilen tüp yardımlı koroner arter ligasyonu yöntemi, dünya çapında bilimsel araştırma laboratuvarlarında yaygın olarak benimsenmiştir. Bu yöntem, kontrol edilebilir ligasyon kuvveti, görselleştirilmiş çalışma ve i...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların ifşa edecek hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma, Shaanxi Çin Tıbbı Üniversitesi Bilim ve Teknoloji Yenilikçi Yetenek Programı (No. 2024-CXTD-03), Shaanxi İl Geleneksel Çin Tıbbı Araştırma Projeleri İdaresi (No. SZY-KJCYC-2025-JC-043) ve Shaanxi İl Bilim ve Teknoloji Departmanı Araştırma ve Geliştirme Programı (No. 2024CY-JJQ-36).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
0.5 mL insülin şırıngası Wuxi Yushou Tıbbi Ekipman A.Ş.https://e.tb.cn/h.6NJ9o4dBdpXt4bT?tk=YobMVflhtgI EB'yi emmek ve aort arkından enjekte etmek için kullanılır 
2,3,5-trifenit-trazoliumklorürShanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.S19026Kalp boyama için 
2.5 mL Tek kullanımlık steril şırıngaSağlam Ping An Medical Technology Co., Ltd.20231230Anestezikleri aspire etmek ve sıçanları intraperitoneal enjeksiyonla uyuşturmak için kullanılır; kapalı göğüs operasyonları sırasında sıçanların göğüs boşluğundan hava çıkarmak için kullanılır.
% 4 paraformaldehitGuangzhou Viggs Biotechnology Co., Ltd.SW002lekelendikten sonra kalbi düzeltmek için kullanılır
Shandong Haidike Medical Products Co., Ltd.Kaburgaları, kasları ve cildi dikmek için 
6-0 sütürJiangsu Beiyueshen Medical Device Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NKQ9XNVD1J56np?tk=R8NKVfPJIUMLAD 'nin bağlanması için;
Akupunktur iğnesi Pekin Luoya Shanchuan Tıbbi Ekipman A.Ş.https://e.tb.cn/h.6NQZzrSfBLQ9OYZ?tk=yW5aVfPuXP3Sıçan uzuvlarının derisini delmek ve elektrokardiyogram elektrot hattını bağlamak için kullanılır.
Hayvan tüyü çıkarıcıJinyun Yeni Konsept Ev Ürünleri A.Ş.https://e.tb.cn/h.6NJe67IEMgxPfUt?tk=9boIVflb6mm Epilasyon için 
Tüy dökücü kremGuangzhou Miyanshe Brand Management Co., Ltd.https://3.cn/2fP-knZw Derin epilasyon için 
EtanolTianjin Tianli Kimyasal Reaktif Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NnxsK8EAvBV1Zu?tk=ja1XVflVhfM Dezenfeksiyon için 
Evans BlueSigmaE2129Kalp boyama için 
Hemostatik forseps Şangay Yardımcısı Tıbbi Alet A.Ş.https://e.tb.cn/h.6NQkHWD25dxnsv4?tk=xA1VVflTXjWİnsülin şırıngasını sabitlemek ve aort kemerinin kanını durdurmak için kullanılır.
Tıbbi mikro makasNanjing Ji Xiaobao Trading Co.https://e.tb.cn/h.6NJu33PgNRJCO1L?tk=smZjVflr730Trakea ve kaburgaları kesmek için kullanılır.
Tıbbi mikroskobik cımbızNanjing Ji Xiaobao Ticaret A.Ş.https://e.tb.cn/h.6Nqn2dyJIUjUN6n?tk=MEMaVflGK0byu bağlamak için 6-0 sütürü sıkıştırmak için
https://e.tb.cn/h.6NJyfb9CWH5Sj32?tk=HW0kVflEyOL EB-TTC boyama sırasında kalbi kesmek için
Tıbbi makasShandong Boryuida Analitik Instrument Co.https://e.tb.cn/h.6NJCLzckQnXXEPe?tk=CtcTVflFJQw Sıçan derisini ve dikişi kesmek için kullanılır.
Tıbbi cerrahi bezHenan Meideqi Tıbbi Ekipman A.Ş.https://e.tb.cn/h.6NqItN9yA0xttr9?tk=cCCIVflzFjr Steril cerrahi alan sağlamak için kullanılır 
Tıbbi bantZhejiang Aotai Tıp Teknolojisi A.Ş.https://e.tb.cn/h.6N93etxLPPlJ9ZQ?tk=DfblVflAo5dFareleri düzeltmek için kullanılır 
Tıbbi cımbızJiangsu Videocon Medical Technology Co.https://e.tb.cn/h.6NreHXQv2YTJkIl?tk=S1imVfO17QVSıçanlarda anestezi derecesini değerlendirmek, cildi, kaburgaları ve diğer dokuları sıkıştırmak ve deri altı kasları ve perikardları soymak için kullanılır.
Tıbbi ultrasonik birleştirme ajanı Qingdao Hainuo Biyoloji Mühendisliği Co., Ltd.https://3.cn/2fPpwB-j Ultrasonik şanzımanın verimliliğini artırmak için kullanılır
Normal tuzlu su Shandong Qidu İlaç Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NMCUFJIti2EsiU?tk=FXBBVfOV1iNArtık tüy dökücü kremi yıkamak için kullanılır.
Taşınabilir renkli Doppler ultrasonVINNO Technology Co., Ltd.Vinno 6 Sıçanlarda M-mod ekokardiyografinin belirlenmesi için kullanılır 
Povidone iyotShandong Anjie Yüksek Teknoloji Dezenfeksiyon Technology Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NqAb4WsT3xjMb9?tk=mhFxVfO4G1GDezenfeksiyon için 
Sıçan cerrahi plakaShandong Boryuida Analitik Instrument Co.https://e.tb.cn/h.6NQyjjGNGInF3Eu?tk=qgQwVflHilH Fareleri düzeltmek için kullanılır 
Buzdolabı ve nbsp;Zhejiang Zhixing Ultra Düşük Sıcaklık Teknolojisi A.Ş.DL-78Kalbi dondurmak için 
Silika jel tüpleriShandong Chengwu Sano Tıbbi Cihazlar A.Ş.https://e.tb.cn/h.6N9L82XWNGlgDDG?tk=pWzCVfOQIgNSoluk borusunu desteklemek için kullanılır 
Küçük hayvan yapay solunum makinesiAnhui Zhenghua Biological Equipment Co., Ltd.DW-3000HTorakotomi sonrası sıçanların nefes almasına yardımcı olmak için kullanılır 
Steril pamuk topu Qingdao Hainuo Biyoloji Mühendisliği Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NJbKVmD0b7QhTf?tk=wMceVfOTrBX Etanol ve povidon iyot dezenfeksiyonunu daldırmak için 
steril pamuklu çubukQingdao Hainuo Biyoloji Mühendisliği Co., Ltd.https://e.tb.cn/h.6NMAQz1252EJHSM?tk=nyfLVfOUSBi Göğüs boşluğunda kalan kanı temizlemek için kullanılır 
Isı yalıtım örtüsüGuangdong Zhongke Yaşam Bilimleri & Teknoloji A.Ş.https://e.tb.cn/h.6N9OyBVWuSXTUDy?tk=d6OqVfOSTlISıçanlarda postoperatif vücut izolasyonu için 
Torakotomi ekartörüGuangdong Zhongke Yaşam Bilimleri & Teknoloji A.Ş.https://e.tb.cn/h.6NQra4Z9UG8dnvo?tk=6eFUVfllCFWCerrahi görüş alanını ortaya çıkarmak için kullanılır 
Tip II kurşun elektrokardiyogram monitörüChengdu Taimeng Technology Co., Ltd.BL-420NElektrokardiyogramı izlemek için 
ÜretanShandong Keyuan Biyokimya Co, LtdU820333Anestezi uygulanmış sıçanlarda kullanılır 
Su sabit sıcaklık osilatörüShanghai Boxun Medical Biological Instrument Co., Ltd.SHZ-BKalp boyama için 
4-0 sütür LAD Medical neşter Shandong Boryuida Analytical Instrument Co.'

Kaynaklar

  1. Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. Myocardial ischemia-reperfusion injury: a neglected therapeutic target. J Clin Invest. 123 (1), 92-100 (2013).
  2. Ibáñez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury. J Am Coll Cardiol. 65 (14), 1454-1471 (2015).
  3. Algoet, M., et al. Myocardial ischemia-reperfusion injury and the influence of inflammation. Trends Cardiovasc Med. 33 (6), 357-366 (2023).
  4. Rahman, A., et al. Large animal models of cardiac ischemia-reperfusion injury: Where are we now. Zool Res. 44 (3), 591-603 (2023).
  5. Luan, F., et al. Cardioprotective effect of cinnamaldehyde pretreatment on ischemia/ reperfusion injury via inhibiting NLRP3 inflammasome activation and gasdermin D mediated cardiomyocyte pyroptosis. Chem Biol Interact. 368, 110245(2022).
  6. Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery. J Vis Exp. (86), e51329(2014).
  7. Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury. Methods Mol Biol. 1717, 145-153 (2018).
  8. Marek-Iannucci, S., Thomas, A., Gottlieb, R. A. Minimal invasive pericardial perfusion model in swine: A translational model for cardiac remodeling after ischemia/reperfusion injury. Front Physiol. 11, 346(2020).
  9. Xiong, Y., et al. Decreased MFN2 activates the cGAS-STING pathway in diabetic myocardial ischaemia-reperfusion by triggering the release of mitochondrial DNA. Cell Commun Signal. 21 (1), 192(2023).
  10. Peng, L., et al. Cardioprotective activity of ethyl acetate extract of Cinnamomi Ramulus against myocardial ischemia/reperfusion injury in rats via inhibiting NLRP3 inflammasome activation and pyroptosis. Phytomedicine. 93, 153798(2021).
  11. Xu, H., et al. Resveratrol pretreatment alleviates myocardial ischemia/reperfusion injury by inhibiting STIM1-mediated intracellular calcium accumulation. J Physiol Biochem. 75 (4), 607-618 (2019).
  12. Cai, W., et al. Alox15/15-HpETE aggravates myocardial ischemia-reperfusion injury by promoting cardiomyocyte ferroptosis. Circulation. 147 (19), 1444-1460 (2023).
  13. Zhao, G., et al. A novel anti-inflammatory strategy for myocardial ischemia-reperfusion in rats with cinnamamide derivative compound 7. Int Immunopharmacol. 136, 112370(2024).
  14. Chen, L. Q., Wang, W. S., Li, S. Q., Liu, J. H. Minocycline relieves myocardial ischemia-reperfusion injury in rats by inhibiting inflammation, oxidative stress and apoptosis. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 26 (8), 3001-3009 (2022).
  15. Liu, Z., et al. Shuangshen ningxin formula attenuates cardiac microvascular ischemia/reperfusion injury through improving mitochondrial function. J Ethnopharmacol. 323, 117690(2024).
  16. J'Undra, N., Pegues, M. M., et al. Disparities in 180-day infection rates following coronary artery bypass grafting and aortic valve replacement. J Thorac Cardiovasc Surg. S0022-5223 (25), 00017-00020 (2025).
  17. Peng, J. -F., et al. Targeted mitochondrial drugs for treatment of myocardial ischaemia-reperfusion injury. J Drug Target. 30 (8), 833-844 (2022).
  18. Sun, Q., et al. A minimally invasive approach to induce myocardial infarction in mice without thoracotomy. J Cell Mol Med. 22 (11), 5208-5219 (2018).
  19. Olatoye, O., Yasir, A. -O., Gregory, D. R. Initial experience of left atrial appendage ligation using penditure in a minimally invasive cardiac surgical approach. Innovations. 20 (1), 19-21 (2025).
  20. Wagenaar, A., Wiegerinck, R. F., Heijnen, V. V. T., Post, M. J. Percutaneous microembolization of the left coronary artery to model ischemic heart disease in rats. Lab Animal. 45 (1), 20-27 (2016).
  21. Kainuma, S., et al. Influence of coronary architecture on the variability in myocardial infarction induced by coronary ligation in rats. PLoS One. 2 (8), e0183323(2017).
  22. Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Hajjar, R. Abstract 130: The Diversity of Coronary Artery and Myocardial Infarction in Mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 37 (Suppl_1), A130(2021).
  23. Lysenko, A. V., Salagaev, G. I., Lednev, P. V., Belov, Y. V. The results of coronary artery bypass grafting by using of surgical microscope. Pirogov J Surg. 6, 5-10 (2019).
  24. Guo, Y., et al. Genetic background, gender, age, body temperature, and arterial blood pH have a major impact on myocardial infarct size in the mouse and need to be carefully measured and/or taken into account: results of a comprehensive analysis of determinants of infarct size in 1,074 mice. Basic Res Cardiol. 107 (5), 288(2012).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

S an ModeliKoroner Arter LigasyonuSol n nen ArterElektrokardiyogram zlemeEkokardiyografiEvans Blue Boyama
Video yakında

İlgili makaleler