Yöntem makalesi

Tam Kalınlıkta Osteokondral Defektli Bir Koyun Modelinin Oluşturulması ve Değerlendirilmesi

DOI:

10.3791/68842

⸱

14 Nisan 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Laboratory of Stem Cells Basic Biology, Carlos Chagas Institute, 2Hospital Israelita Albert Einstein, 3Postgraduate Program in Animal Science - School of Medicine and Life Sciences, Pontifícia Universidade Católica do Paraná, 4Knee Surgery Department at Cajuru University Hospital, Pontifícia Universidade Católica do Paraná, 5Core for Cell Technology - School of Medicine and Life Sciences, Pontifícia Universidade Católica do Paraná, 6National Institute of Science and Technology for Regenerative Medicine, INCT-REGENERA

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, kemik ve kıkırdak dokusu yenileme çalışmaları için uygun deneysel bir model oluşturmak amacıyla, koyun dizlerinde kontrollü osteokondral lezyonlar oluşturmak için entegre bir protokol sunuyoruz. Protokol, femoral kondilde tam kalınlıkta osteokondral defekt oluşturmak için hayvan refahı etkilerini ve sonuçlardaki değişkenliği en aza indiren teknikler kullanarak bir yöntem ortaya koyuyor.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yaşlanma, travma, genetik yatkınlık ve yaşam tarzı, insan vücudunun kıkırdak bozulmasını etkiler. Yaralanmadan sonra, günlük aktivitelerden kaynaklanan sürekli hakaretler, dünya genelinde engelliliğin ve sosyoekonomik kaybın başlıca nedeni olan osteoartrit gibi patolojik durumları tetikleyebilir. Eklem kıkırdak yaralanmalarını tedavi eden tüm ortopedi cerrahlarının ana hedefi, lezyonun anatomik olarak boyutunu azaltmak, kıkırdak yüzeyini onarmak ve eklem stabilitesini yeniden sağlamaktır. Hayvan modelleri tedavi amaçlı ilaçların geliştirilmesi için gereklidir, ancak kıkırdak kusurları için mevcut modeller tatmin edici değildir. Koyunlardaki osteokondral lezyonlar, insan eklem ortamlarında kıkırdak ve kemiğin iyileşmesine yardımcı olabilecek yeni tedaviler ve biyomalzemelerin test edilmesinde değerli bir modeldir. Bu çalışma, büyük hayvanlarda akut osteokondral kusurların indüklenmesi için etkili bir protokol oluşturdu. Her iki medial femoral kondilde standart bir lezyon oluşturuldu. Bir diz rastgele olarak jelatin-metakriloyl tedavisi almak üzere atandı, kontralateral diz ise kontrol görevi gördü. Cerrahi işlemden altı ay sonra, femoral kondil bölgesi çıkarıldı, diseksiyon edilen diz eklemleri kalsifiye edilip parafine gömüldü ve hematoksilin ile eozin ile boyanan kesimlere ayrıldı. Lezyonu değerlendirmek için puanlar kullanıldı. Bu metodoloji, yaralanma indüksiyonundan sonra anında makroskopik gözlem yapılmasını sağlar. Ayrıca, bu model klinik kıkırdak kusurlarını etkili bir şekilde çoğaltarak patolojilerini incelemek ve yenilikçi terapötik yaklaşımlar geliştirmek için değerli bir model sunar.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kıkırdak, diartrod eklemlerdeki kemikler arasında sürtünmesiz bir yüzey sağlayarak iskelet sisteminin mekanik yeterliliğini korumak için gereklidir ve böylece eklem yüzeyi erozyonuönlenir. Kıkırdakların bu zorlu mekanik işlevleri yerine getirebilme yeteneği, özellikle olağanüstü yüksek su içeriğine - hücre dışı matriksinin benzersiz yapısı ve düzenine bağlıdır. Su, eklem kıkırdaklarının yapısında ve işlevinde kritik bir rol oynar ve bileşiminin yaklaşık %70-80'ini oluşturur. Su, sıkıştırma sırasında yük taşımaktan sorumlu birincil elementtir. Dokunun baskı kuvvetlerine karşı direnç gösterme yeteneği, suyun matriks içindeki yapılandırılışına ve kısıtlanmasına bağlıdır. Bu organizasyon, suyun kıkırdak ana makromolekülleri, örneğin kolajen ve proteoglikanlar, özellikle hyaluronik asitle bağlıagregalar 1 ile etkileşimi yoluyla mümkündür. Bunlar, su hareketini düzenleyen ve sınırlayan bir tutma yapısı olarak görev yapar. Bu etkileşim, dokuya sadece sertlik kazandırmakla kalmaz, aynı zamanda dayanıklılık ve deformasyon sonrası iyileşme yeteneği de sağlar. Serbest su, bağlı su ve makromoleküler matriks arasındaki etkileşim, kıkırdak biyomekanik davranışının çekirdeğinioluşturur 2.

Eklemlere ulaşan fiziksel ve mekanik yükleri destekleme ve dağıtma konusundaki olağanüstü yeteneğine rağmen, yaralandıktan sonra eklem kıkırdak (AC), düşük kondrosit mitotik aktivitesi ve zayıf doku vaskülerleşmesi nedeniyle spontan onarım potansiyeli sınırlıdır2. Eklem hasarı genellikle doku %95'ini oluşturan ekstraselüler matriks (ECM) molekülleri ve proteinlerinin kademeli olarak kaybıyla ilişkilidir ve AC3'e biyomekanik özellikler kazandırır. ECM bileşenlerinin sentezi ve bozulması arasındaki dengesizlik, katabolik süreçlere kaymak, dünya genelinde en yaygın dejeneratif eklem hastalığı olan osteoartrit'e (OA) yol açabilir. Osteoartrit yetişkin nüfusun yaklaşık %10-12'sini etkiler, ağrıya yol açar, hareket kabiliyetini kısıtlar ve hastaların özerkliğini belirgin şekilde azaltır4. Osteoartrit, yaşlanan popülasyonlarda eklemde bir ömür boyunca birikmiş hakaretler nedeniyle daha yaygındır; Ancak, cinsiyet, genetik yatkınlık, obezite ve günlük alışkanlıklar gibi çeşitli risk faktörleri klinik durumun başlangıcıylailişkilendirilmiştir 4. Şimdiye kadar, OA tedavisinde terapötik yaklaşımlar en ağır vakalarda klinik semptomlar yönetimi ve tam eklem protezindenoluşuyordu 5. OA'yı etkili şekilde tedavi etmek için sağlam, tekrarlanabilir ve güvenilir bir terapötik strateji olmadan, eklem kıkırdak yaralanmasıyla ilgili sorunları anlamak ve ele almak için yenilikçi yaklaşımlar incelenmektedir.

Artritik eklemlerde eklem hareketini onarmak, yenilemek ve artırmak için, yenileyici tıptaki ilerleme, hasarlı AC 6,7'nin onarılması için yeni bir umut olarak ortaya çıkmıştır. Otolog kondrositlerin ECM implantasyonu ve kök hücrelerin eklem içi enjeksiyonu ile birleşen kullanımı, bu alandaki güncel en sonteknolojiyi temsil etmektedir 8,9,10. Bu yaklaşımların temel zorluğu, implante edilmiş hücreler tarafından uygun farklılaşma ve fonksiyonel ECM sentezinin sağlanmasıdır. Otolog kondrositler fibrokıkırdak oluşturma eğiliminde veya hipertrofik bir duruma ilerler; bu da AC'nin fizyolojik özelliklerini tekrarlamayan yeni işlevsiz dokular oluşturur; bu da tam iyileşmeye ve genellikle geç bozulmaya yolaçar. Biyomalzemeler, doku yenilenmesi sırasında hücre davranışını yönlendirmek için kullanılabilir; bu da hücrelerin yeni, doğal ve işlevsel ekstrasellülermatriks 12,13,14'ün yapışması ve sentezlenmesi için geçici bir iskelet sağlar. Kıkırdak mühendisliği için ideal biyomateryal, özellikle subkondral kemik olmak üzere çevredeki dokularla güçlü entegrasyonu sağlamalıdır; çünkü bu arayüzdeki arıza uzun vadeli onarımı tehlikeye atar. Ancak, osteokondral iskelelerin kıkırdak ve kemik katmanları arasındaki zayıf bağlar ve konak dokusuyla zayıf entegrasyon büyük zorluklar olarak kalmaktadır15. İskeleler doğal osteokondral mimariyi taklit etmeye çalışsa da, karmaşık arayüz mikroyapısını yeniden üretmek hâlâ zordur. Bu, kıkırdak ve kemik yenilenmesini aynı anda destekleyebilecek ve arayüz stabilitesini koruyabilen biyolojik özelliklere sahip iskelelerin araştırma ve geliştirilmesininönemini pekiştiriyor 16. Kıkırdak dokusunun önemli bir bileşeni olan kolajenden türetilen jelatin, hücre bağlama motifleri ve biyoparçalanabilirlik gibi özelliklere sahiptir; bu da osteokondral lezyonların tedavisinde rejeneratif faktörlerle birleştiğinde destekleyici bir biyomateryal potansiyelini gösterir. Metakrilik anhidrit ile kimyasal olarak modifiye edildiğinde jelatin metakriloyl (GelMA) oluşturulduğunda, foto-çapraz bağlanabilir hale gelir; enjeksiyon ve yerinde fotopolimerizasyonu mümkün kılarak rejeneratif tıbbda uygulamalar için mekanik stabiliteyiartırır 17.

Osteokondral lezyonların rejeneratif kapasitesi sınırlıdır ve bu da klinik bir zorluk teşkil eder. Diz eklemi yaralanmasının büyük hayvan modellerini kullanan preklinik araştırmalar, hastalık mekanizmalarını ve terapötik sonuçları etkileyen değişkenlerin sistematik olarak değerlendirilmesine olanak tanıdığı için translasyonel araştırmalar için gereklidir. Yaygın kullanılan türler arasında domuzlar, keçiler, köpekler, atlar ve koyunlar bulunur; her biri deneysel tasarımda dikkate alınması gereken özel avantajlar ve sınırlamalar sunar. Ayrıca, bu türlerin hepsi insanlarda gözlemlendiği gibi kondral ve osteokondral kusurların sınırlı endogen onarımınasahiptir 18. Bu modellerin insan sonuçlarını öngörmesini sağlamak için, anatomi, fizyoloji ve biyomekanik özellikler gibi ilgili parametreleri yenidenüretmelidirler 18. Karşılaştırma için, femoral kondillerdeki insan eklem kıkırdağının kalınlığı 1,8 ila 2 mm19 arasında değişir ve genellikle tedavi gerektiren kıkırdak lezyonlarının çapı 10 mm veya dahafazladır 20.

Domuz modeli, eklem boyutu, kıkırdak kalınlığı ve ağırlık taşıma gereksinimleri insanlarda gözlemlenenlere çok benzer olduğu için kıkırdak ve osteokondral rejenerasyon çalışmaları için avantajlarsunar 18. Göttingen minipig gibi bazı minyatür domuz ırkları kolayca kullanılır ve 18 ila 22 aylık21 yaş arasında iskelet olgunluğuna ulaşır. Kıkırdak kalınlığı 1 ila 2 mm arasında değişir ve 6 ila 8 mm arasında kusurlar oluşabilir18. Kemik özellikleri, trabeküler kalınlık, kemik apozisyon oranı ve kollajen lifi organizasyonu gibi insanlarınkiylekarşılaştırılabilir 22. Ancak domuz modelinin de sınırlamaları vardır: minyatür ırklarda bile diz (boğucu) eklem insanlara göre daha küçüktür, bu da büyük deneysel kusurların oluşmasını sınırlar. Ayrıca, çoğu çalışmada iskelet olarak olgunlaşmamış hayvanlar kullanılır; çünkü bakım maliyetleri onarım potansiyelini fazlatahmin edebilir 23.

Keçiler, insanlarınki gibi eklem anatomisi, biyomekanik ve kıkırdak kalınlığına sahiptir24. Özel tesisler gerektirmezler, kullanımı kolaydır ve nispeten uygunfiyatlıdırlar 25. Keçi kıkırdak kalınlığı 0,8 ila 2,0 mm arasında değişir ve en çok bildirilen kritik kusur boyutu 6 mm26'dır. Ancak, ırklar, boyutlar ve cinsiyetler arasında kıkırdak kalınlığında önemli farklılıklar vardır ve bu da tutarsız sonuçlara yol açabilir27. Kıkırdak-subkondral kemik oranı ve trabeküler kemik yapısı da insanlarınkiylekarşılaştırılabilir 28. İskelet olgunluğu nispeten geç olur, 24 ile 36 ayarasında, 29 yaşında. Biyomekanik açıdan, keçi dizinde insanlarda olduğu gibi eklem baskıları ve döngüselyükler yaşar 25, ancak yürüyüş sırasında diz fleksiyonu daha fazladır (keçilerde 50°-70°, insanlarda <30°), bu da belirgin temas alanlarıoluşturur 30. Bu fark, yüksek zirve basınçlarıyla birleşince, kıkırdak onarımının daha az verimliolmasına katkıda bulunabilir.

Büyük hayvan modelleri arasında köpekler, rehabilitasyon rejimlerine, eklemlerin hareketsizleştirilmesine ve koşu bandında yürüyüş, yüzme ve kontrollü yük taşıma egzersizlerine katlanma yetenekleriyle öneçıkar 18. Eklem kıkırdak kalınlığı 0,9 ila 1,3 mm arasında değişir ve kritik kusur boyutu yaklaşık 4 mm'dir; bu da insan modeli25 ile doğrudan karşılaştırmayı sınırlar. İskelet olgunluğu31 yaş arasında 8,5 ile 13,7 ay arasında gerçekleşir. Anatomik olarak, köpek dizi insan dizinden farklıdır ve ırklar arasında biyomekanik, yükleme kalıpları ve olgunluktaki farklılıklar sonuçların çıkarılmasınızorlaştırır32. Bu anatomik farklılıklara ve küçük kusur boyutuna rağmen, köpek modeli rehabilitasyon protokolleri veya insanlardakilere benzer spontan kıkırdak patolojileri gibi çalışmalar için değerli olmaya devam etmektedir. Ancak, deneysel kullanımı etik nedenlerlesınırlıdır 29.

At modeli, kıkırdak onarım araştırmaları için mevcut en büyük hayvan modelidir ve insanlardakilere benzer yaş veya travmaya bağlı kondral lezyonlar ve osteoartrit doğal olarakgeliştirir 33. Atlar, dik diz eklemi, büyük eklem büyüklüğü, kıkırdak kalınlığı 2 ila 3 mm arasında değişen kıkırdak kalınlığı (yürüyüş sırasında tam diz ekstantasyonu) ve karşılaştırılabilir kemik mineral yoğunluğu gibi anatomik ve biyomekanik özelliklere sahiptir. İskelet olgunluğu 24 ile 48 ay arasında gerçekleşir ve yaygın olarak incelenen defekt boyutları 6 ila 20 mm arasındadeğişir 32,33. Sınırlamalar arasında, hareket sırasında atların boğucu ekleminde yüksek dikey yük yer alır; bu da implantları insanlara göre daha fazla kuvvete maruz bırakır ve uzun vadeli iyileşmeyi engeller35. Ayrıca, satın alma ve bakım maliyetleri yüksektir ve özel tesisler gereklidir36.

Koyunlar, kullanılabilirlikleri, uysal mizacları, eklem cerrahisine iyi toleransları ve kolayca ele alınmaları nedeniyle kıkırdak onarım çalışmalarında yaygın olarak model olarak kullanılır37. Koyunlarda iskelet olgunluğu genellikle yaklaşık 2-3 yaşve 25 yaşlarında elde edilir. Ayrıca, dişin dizinde insan diz eklemine anatomik ve biyomekanikbenzerlikler gösterilir 38. Medial femoral kondilde kıkırdak kalınlığı 0,7 ila 1,7 mm arasında değişir ve kemik mineral yoğunluğu ile temas basınçları da karşılaştırılabilir, ancak kemik hacmi koyunlarda dahayüksektir. Kıkırdak kalınlığının azalması nedeniyle, indüklenen defektler genellikle subkondral kemiğe kadar uzanır ve bu modeli osteokondral defekt çalışmaları için daha uygunkılar 32. 6 ila 8 mm çapında lezyonlar genellikle femoral kondiller vetroklea 32 gibi yerlerde oluşur. Ayrıca, koşuk modeli çift taraflı çalışmalar için avantajlar sunar; aynı hayvan içindeki tedavi edilen ve kontrol alanlarının karşılaştırılmasına olanak tanır; böylece konakçı ile ilgili değişkenliği azaltır, tutarlılığı ve tekrarlanabilirliği artırır ve gereken hayvansayısını en aza indirir 40. Her model, insan fizyolojisi ve biyomekaniğine farklı derecelerde benzerlik sunar. Bu nedenle, model seçimi biyolojik önemi, pratik fizibilite ve etik hususları dengelemelidir. Mevcut çalışmada, mevsimsel anestrus döneminde değerlendirilen 12 aylık nulliparous dişi koyunlar dahil edilmiştir.

Bu çalışma, büyük hayvanlarda akut osteokondral kusurların oluşturulması için etkili bir protokol tasarlamayı amaçladı. Protokol, rejeneratif tıp çalışmalarına uygun bir model oluşturmak amacıyla tam kalınlıkta osteokondral bir lezyon oluşturulmasını içerir. Ayrıca, GelMA hidrojelinin kullanımı doku iyileşmesi için bir rehber ve rejeneratif moleküller ile hücrelerin iletilmesi için prospektif bir yöntem olarak araştırılmaktadır. Protokol, koyun dizindeki eklem kıkırdaklarında osteokondral lezyonların oluşturulması için cerrahi prosedürü özetlemektedir. Rejeneratif tıp için diğer büyük hayvan modellerinde benzer yaralanmaların indüklenmesi dahil olmak üzere çeşitli doku mühendisliği uygulamalarına uyarlanabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Çalışma, Araştırma Etik Komitesi'nden onay aldı ve 6092250823/2023 numaralı Etik Sunum Sertifikası ile sertifikalandırıldı. Mevcut çalışmada, 12 aylık dokuz Beyaz Suffolk dişi koyunu seçildi. Bu kusur, her iki hayvanın medial femoral kondillerinde oluştu. Boş kusurlar kontrol olarak kullanıldı. Her hayvanın bir dizi GelMA tedavisine rastgele gösterildi, diğeri ise kontrol olarak kullanıldı. Bu strateji, doğal yenilenebilir kapasiteyi değerlendirmemize ve genetik faktörler ile iskelet olgunluğu gibi bireysel varyasyonların etkisini azaltmamıza olanak sağladı. Hayvanlar 6 ay boyunca hiyalin kıkırdak oluşumu değerlendirilmek için takip edildi.

1. Anestezi prosedürü

  1. Ameliyattan önce hayvanları yaklaşık 24 saat boyunca yiyecek ve sudan mahrum bırakın.
  2. Hayvanları intramusküler meperidin 4 mg/kg ile midazolam 0.3 mg/kg ile premedik yapın.
  3. Anestezik buharlaştırıcıyı kullanımdan bir gün önce, odayı boş doldurun ve mesleki maruziyet riskini en aza indirmek için koruyucu eldiven takın.
  4. Her işlemden önce anestezi devresinde sızıntı olup olmadığını kontrol edin ve tüm manipülasyonları iyi havalandırılan bir alanda kurumsal biyogüvenlik yönergelerine uygun olarak gerçekleştirin.
  5. 15 dakika sonra, hayvanları 18 G kateterle kanülle geçirin ve 10 mL∙kg-1∙h-1 oranında Laktasyon Ringer çözeltisi uygulanır.
  6. %1 propofol kullanarak 4 mg/kg dozda intravenöz anestezi uygulanır.
  7. Hayvanları 7,5-8,0 mm ölçülerinde kelepçeli endotrakeal tüple entübe edin ve 1,0 FiO₂ ve 50 mL/kg akış hızında oksijen sağlayan yarı kapalı dairesel solunum sistemi kullanılarak spontan bir nefes alma sistemi altında tutulun.
  8. Kısmi intravenöz anestezi (PIVA) tekniğini kullanın, propofolu sürekli infüzyon olarak 0,1 mg∙kg-1 min-1 aralığında tutun ve izofluran konsantrasyonunu yalnızca yeterli cerrahi anestezi düzlemi elde etmek için ayarlayın. İşlem boyunca anestezi derinliğini takip edin.
  9. Femoral ve siyatik sinirlerin perineral bloklarını bir nörolokalizör tarafından yönlendirilerek gerçekleştirin. Her blokata için %2 lidokain %0,2 mL/kg uygulanır.
    NOT: Ameliyat ancak hayvanın cerrahi anestezi altında olduğu doğrulandığında başlamalıdır (sert bir toynak sıkmasına tepki yok ve çene tonusu yok).

2. Cerrahi prosedür in vivo

  1. Tıraş edilmiş diz topikal antiseptik klorheksidin glukonat ile dezenfekte edilip hayvanı ameliyat odasında dorsal dekübit pozisyonuna yerleştirin.
  2. Kesi yerini belirlemek için hayvanın dizine dokunarak eklem boşluğunu tespit edin. Çift kavisli bir deri kesisi yapın (lateral femoral epikondilden distal başlayıp tibial tüberoz seviyesinde medial olarak sona erer).
  3. Patellar tendonu, patella, patellar ligamenti ve eklem kapsülünün medial kısmını tespit edin. Kapsülü keserek medial femoral kondili ortaya çıkarın. Dizin hiperfleksasyonunu yaparak kondilin eklem kıkırdakının en distal bölgesini görselleştirin.
  4. Hayvanın kondil bölgesinde yaklaşık 3-5 cm derinliğinde cerrahi bir kesi yapın. Kondile ulaşmak için cildin altındaki doku katmanlarını çıkarın ve kontaminasyonu önlemek için kesi alanını temiz tutun.
  5. Sinovyal sıvıyı bir şırınga ve iğne kullanarak toplayın. Numunenin bir kısmını analiz için bir EDTA tüpüne aktarın ve kalan materyali smear slaytları hazırlamak için kullanın.
  6. Retraktorları kondiler yüzeyi tamamen açığa çıkaracak şekilde konumlandırın. Kondil ne kadar çok açıkta olursa, bir sonraki adımda yaralanma başlatmak o kadar kolay olur.
    NOT: Bu sırada hayvanın patisine dikkat edin. Dizin fleksiyonu veya uzatılması, kondilin açığa çıkmasına yardımcı olabilir.
  7. Medial femoral kondilin ortasında, 8 mm trefin ucu ile donatılmış ortopedik bir matkap ile 8 mm çapında ve 5 mm derinlikte bir kusur delin; istenmeyen boyut veya şekillerden kaçınmak için doğru hizalanmayı sağlayacak şekilde ve eklem kıkırdağının en distal bölgesine göre 0° açı korun.
    NOT: Trepanasyonu mümkün olan en düşük hızda gerçekleştirin, matkap kontrolünü nazikçe çalıştırın ve sadece kıkırdak ile subkondral kemiği kesmek için yeterli dönüş kullanın; ayrıca düşük hızda bile oda sıcaklığında %0,9 NaCl ile yerel soğutma uygulanır.
  8. Ortopedik çekiç ve osteotom kullanılarak osteokondral tıkaçın cerrahi olarak çıkarılmasını gerçekleştirin.
  9. Yara uzantısı steril gazlı bezle temizlenerek lezyonun içinin kan ve doku kalıntılarından arındığından emin olun.
  10. Yaralanmanın iç kısmına 200 μL sıvı 20% (w/v) GelMA formülasyonu, fotobaşlatıcı olarak %0,25 (w/v) lityum fenil-2,4,6-trimetilbenzoylfosfinat (LAP) içeren sıvı 20 μL sıvı GelMA formülünden sıvı uygulanarak yüzeye ulaşın.
  11. GelMA hidrojelini 395-405 nm LED (toplam 9 W) altında yaklaşık 5 cm mesafede 180 saniye boyunca fotoçapraz bağlantıya yerleştirin. Bu koşullar altında, yüzeydeki tahmini ışınlanma ~10 mW/cm²'dir ve toplam maruz kalma enerjisi yaklaşık 1,8 J/cm²'dir.
    NOT: Ultraviyole ışık kullanırken koruyucu gözlük kullanın.
  12. Retraktörleri dikkatlice çıkarın.
  13. Lezyonu farklı doku katmanlarında bağımsız dikişlerle kapatarak seroma oluşumunu önleyin. Gerekli dikiş sayısı, cerrahi kesinin boyutuna bağlıdır.
  14. Enfeksiyonları önlemek için dikişlere steril bir bandaj uygulayın.

3. Ameliyat sonrası bakım

  1. Anestezi iyileşme sürecinde hayvanları, kalp atış hızı (70-90 vuruş/dakika), solunum hızı (12-20 nefes/dakika), vücut sıcaklığı (39 °C ile 40,5 °C) ve normal mukoza zarları gibi hayati belirtileri takip edin; 1-2 saniyelik kahiller dolgu süresi. Nabızın kolayca algılanabilir olup olmadığını kontrol etmek için yüz ve femoral arterleri düzenli olarak palpasyon yapın.
    NOT: Anestezi iyileşmesi, sessiz, temiz, sıcak, yastıklı bir ortamda, minimum aydınlatma ve düşük gürültü seviyelerinde gerçekleşmelidir.
  2. Cerrahi bölge pansumkaları kullanarak topikal penisilin (benzatin penisilin G: 1.250.000 IU; prokain penisilin G: 1.250.000 IU; dihidrostreptomisin sülfat: 1.25 g; ürea: 2.50 g) günde bir kez, 10 gün boyunca uygulanır.
  3. Hayvanların anesteziden uyandıktan hemen sonra dört ayak pozisyonunda kaldığından ve ameliyat edilen uzuvlara ağırlık verdiğinden ve rahatsızlık belirtisi göstermediğinden emin olun.
  4. Ameliyat sonrası analjezi, 5 gün boyunca meloksikam (her 24 saatte 0,4 mg/kg) ve tramadol (her 12 saatte 2 mg) içeriyordu. Ağrıyla ilgili yüz ifadeleri koyunlarda ameliyat sonrası ağrı ve sıkıntı değerlendirmek için belirli yüz aksiyon birimlerine (orbital sıkıştırma, flehmen yanıtı, kulak pozisyonu ve baş pozisyonu dahil) dayanan doğrulanmış bir araç olan Sheep GrimaceScale 41 kullanılarak tanımlandığında ek bir kurtarma dozu tramadol verildi.

4. Histoloji analizi

  1. Ameliyattan altı ay sonra ötenazi yapın. Ötenazi ajanı uygulamadan önce derin sedasyon sağlamak için, hayvanları damar içi ketamin (10 mg/kg) ve ksilazin (1 mg/kg) ile premedik olarak tedavi edin; bu dozlar kabul edilmiş ötenazi protokolleriyle desteklenerek derin sedasyonun hızlı başlangıcını sağlamak için klinik prosedürlerde genellikle önerilen dozlardan kasıtlı olarak daha yüksek dozlar kullanmaktır. Daha sonra, anestezik koma oluşturmak için propofol uygulanır. Sonra, solunum ve kardiyovasküler durma gerçekleşene kadar ve tüm koruyucu refleksler yok olana kadar 2 mEq/kg IV olarak potasyum klorür uygulanır.
  2. Distal femoral epifizi keserek kondillerin bölgesini çıkarın. Disseksiyon edilen diz eklemlerini %10 nötr tamponlu formalin ile sabitleyin ve %5 EDTA (etilenediaminetetraasetik asit) ile 34 °C'de kalsifiye edin, EDTA çözeltisini her 3 günde bir değiştirin.
  3. Malzemeyi parafine gömüp 4 μm kesitlere kesin. Parafini slaytlardan ksilende 65 °C'de 3 x 5 dakika bekleterek çıkarın. Etanol ile 10-20 kez (%99, %95, %70) su ile hidratlayın, ardından 5 dakika42 dakika boyunca deionize su alın.
  4. Hematoksilin ve eozin (H&E) boyama için, bölümleri Harris hematoksilin ile boyandırın, karşı boyama ile eozin yapın, 20× büyütme ile otomatik slayt tarama mikroskobu ile taranınız ve bağlantılı yazılım kullanılarak analiz yapın.
  5. Osteoartrit Araştırma Derneği Uluslararası (OARSI) histopatoloji girişimi43'e göre lezyonu değerlendirin: 0 puan normal kıkırdak gösterir; 1 puan, kıkırdak kaybı olmadan yüzeysel fibrilasyonu yansıtır; 2 puan, yüzeysel bölgenin hemen altındaki tabakaya ulaşan dikey yarıklara karşılık gelir ve yüzey laminası kısmi kaybıyla birlikte olur; 3 puanı, kalsifikasyona ulaşan ve eklem yüzeyinin %25'inden azını etkileyen dikey yarıklar veya erozyon belirtileridir; 4, 5 ve 6 puanları, kalsifikasyon noktasına ulaşan dikey yarıklar veya erozyonu temsil eder ve sırasıyla eklem yüzeyinin %25-50, %50-75 ve %75'inden fazlasını içerir.
    NOT: Bu çalışmada, kalsifikasyona ulaşan ve eklem yüzeyinin %25'inden fazlasını kapsayan dikey yarıklar veya erozyonlar olan lezyonlara 4 puan verildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Osteokondral defekt indüksiyonu

Bu çalışma, büyük hayvanlarda akut osteokondral kusurları indüklemek için etkili bir protokol geliştirmeyi amaçladı. Yaralanmalar cerrahi işlem sırasında mekanik olarak oluşmuş ve yaklaşık 8 mm çapında ve 5 mm derinliğinde bir lezyon oluşmuştur (Şekil 1). Uluslararası Kıkırdak Yenileme ve Eklem Koruma Derneği tarafından belirlenen puanlar göz önüne alındığında, bu tür yaralanma, kık...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kıkırdak tedavisindeki kondrojenik farklılaşmanın yetersizliği ve ECM olgunlaşma gibi zorlukların üstesinden gelmek için, tedavi stratejilerini değerlendirmek için klinik dışı çalışmalar gereklidir. Yaralı kıkırdak dokusunun klinik olmayan modelleri için yöntemler daha önce çeşitli tekniklerle raporedilmiştir 45. Ancak, literatürde hâlâ büyük hayvanların dizinde akut osteokondral yaralanma indüktörlüğüne yönelik ayrıntılı raporlar ve standart prosedürler bulunmama...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların beyan edecek çıkar çatışmaları yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Araucaria Vakfı (hibe numarası PDT2020221000005) tarafından desteklendi. Carlos Chagas Enstitüsü ve Sağlık için Araçlarda Teknolojik Geliştirme Programı-RPT-FIOCRUZ'un tüm personeline FIOCRUZ/PR, Hücre Teknolojisi Çekirdeği ve Pontificia Universidade Catolica do Parana Deneysel Çiftliği'ndeki mikroskopi tesislerini kullandıkları için teşekkür ederiz. Yazarlar, Programa de Estímulo à Pesquisa à Instituto Carlos Chagas – Fiocruz Paraná'dan maddi destek almaktadır. Ayrıca Carlos Chagas Enstitüsü İletişim Ofisi'nden Wagner Nagib'e görsel-işitsel prodüksiyona katkıları için teşekkür ederiz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
25 poliglekaprone dikiş ipliği, no. 2-0EtikonGenel yumuşak doku kapsülü için dikiş ipliği, eklem kapsülü ve deri altı hücresel dokunun dikişi için kullanıldı.
Antikor anti-β-TubulinInvitrogenPA516863β-tubuline karşı antikor, iki alt birim (α/β) sitoskeletin mikrotübüllerini oluşturan
Anestezi cihazıHB hospitalarShalasyon anestezi ekipmanı
Axio Scan Z1Zeiss, Münih, AlmanyaMikroskop
Benzathine penisilin GOurofinoAntibiyotikler
Kateter 18 G SolidorDamar içi kateter
SefaleksinVirbacAntimikrobiyal tedavi
Klorheksidin Digluconat Sulu ÇözeltisiRIOQUí MICACilt antisepsisiyle ilgili antiseptik
Manşetli endotrakeal tüp 7.5– 8,0 mmSolidorManşetli endotrakeal tüp
DAPISigmaD9542Floresan boya
Dulbecco'nun Modifiye Kartal Orta ModeliGibco12100-046
Hücre kültürü ortamı
Dihidrostreptomisin sülfatOurofinoAntibiyotikler
EDTA tüpüBecton Dickinson362788Toplama tüpü
EosinNeon1795Hücre morfolojisini, boyamanı görselleştirmek için kullanılan bir boya; Sitoplazma.
Etilenediamintetraasetik asitSigmaE5134Kemik dokusunun kademeli demineralizasyonunu destekler
Fetal Sığır SerumuGibco12657-029Büyüme faktörleriyle hücre kültürü takviyesi
FormalinSigma-Aldrich47608Doku morfolojisini korumak
GelMA LiyofilizeTissueLabsGLMA-LYO-1Fotoçapraz bağlanabilir hidrojel
Harris hematoksilin Laborclin620503Hücre morfolojisini görselleştirmek için kullanılan bir boya, çekirdekleri boyamak.
İzofluranoCristá liaanestezik bakım
Ketamin %10VETNILÖtenazi prosedürü
Laktasyonlu Ringer çözümüFresenius KabiSıvı terapisi
L-Glutamin 200 mMGibco25030-081Hücre kültürü için esansiyel amino asit
Lidokain hidroklorür Cristá liaLokal anestezi
CANLI/ÖLÜ canlılık/sitotoksite KitiInvitrogenL3224Hücre yaşamlılığını değerlendirmek için floresan test kiti
MeloksikamOuro finoAmeliyat sonrası dönem için anti-inflamatuar ve ağrı aljezikleri
Midazolam hidroklorürCristá liaPreanestezik ilaçlar
Mononylon dikiş ipliği, no. 3-0EtikonDeri kapanması için kullanılan dikiş
NaCl %0,9CristaliaTuzlu çözelti
NörolokalizörNörolokalizador DL 250 DeltaLifeNörololoizer ve periferik sinir elektrostimlatörü tarafından yönlendirilen lokal anestezi.
Ortopedi MatkapKanülasyonlu Mini Ortopedik Matkap (Narin) - Kromlu Mandrel - Makita MarkasıOrtopedi ameliyatları için kullanılır.
Ortopedik çekiç EdloHammer Neufield (10-3155)Genel özellikler: 20cm uzunluğunda ve 560gr ağırlığında; malzeme: yüksek kaliteli paslanmaz çelik; Kullanım: Travmatoloji ve ortopedi işlemleri için kontrollü etki gerektiriyor. Sertifikalar: Ürünler, ISO (Uluslararası Standartlaştırma Örgütü): 13485:2016) gibi kalite sertifikalarına sahiptir; Avrupa uyumu ve İyi Üretim Uygulamaları standartlarına sahiptir.
Lambotte osteotomuEdloLambotte osteotomu (10-0749)Lambotte osteotomu (6 mm x 17 cm / 6 3/4") ağırlıklı olarak ortopedi cerrahilerinde ve kemik manipülasyonunu içeren beyin cerrahisi işlemlerinde kullanılan yüksek hassasiyetli bir cerrahi alettir.

6 mm genişliğindeki ucuyla, hassas kesimler, yeniden şekillendirme ve kompakt kıkırdak ile subkondral kemiğin çıkarılması için idealdir.
Penisilin StreptomisinGibco15140-122Hücre kültüründe yaygın olarak kullanılan geniş spektrumlu antibiyotik
Pethidin hidroklorür Cristá liaPreanestezik ilaçlar
Potasyum klorür %19,1SamtecÖtenazi prosedürü
Prokain penisilin GOurofinoAntibiyotikler
PropofolCristá liaAnestezi indüksiyonu ve bakımı
Ringer laktatıCristá liaSıvı terapisi
Yarı kapalı dairesel solunum sistemi HB hospitalarAnestezi için solunum devresi
Steril krep bandajCremerSteril krep bandajı, ameliyat edilen uzuvların distal uçlarını kapatmak için kullanılır.
Stimuplex D, 22 Ga. x 2 in. (50 mm) Uzatma Seti Yalıtımlı İğne, 30 derece ve derece; Eğim (30/STIMD2250)BBRAUNPerinöral lokal anestezi
Tramadol hidroklorürCristá liaPostoperatif analjezi
Trephine MatkapKemik Trefin Matkapı, mm çapı ve ndash; Model: Kontra-Açı, Marka: Cerrahi WFKemik Toplama Trefin Matkap 8.0 mm; cerrahi çelikten üretildi; kemik grefti ameliyatlarında kullanıldı; Histolojik analiz veya otograft için kemik bloğunun çıkarılmasını sağlar.
Ksilazin %10VETNILÖtenazi prosedürü

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wang, Q., et al. An ultrasound study of altered hydration behaviour of proteoglycan-degraded articular cartilage. BMC Musculoskelet Disord. 14, 289(2013).
  2. Cederlund, A. A., Aspden, R. M. Walking on water: revisiting the role of water in articular cartilage biomechanics in relation to tissue engineering and regenerative medicine. J R Soc Interface. 19 (193), 20220364(2022).
  3. Gahunia, H. K., Pritzker, K. P. H. Effect of exercise on articular cartilage. Orthop Clin North Am. 43 (2), 187-199 (2012).
  4. Hunter, D. J., Schofield, D., Callander, E. The individual and socioeconomic impact of osteoarthritis. Nat Rev Rheumatol. 10 (7), 437-441 (2014).
  5. Rahmati, M., Nalesso, G., Mobasheri, A., Mozafari, M. Aging and osteoarthritis: central role of the extracellular matrix. Ageing Res Rev. 40 (1), 20-30 (2017).
  6. Zhang, L., Hu, J., Athanasiou, K. A. The role of tissue engineering in articular cartilage repair and regeneration. Crit Rev Biomed Eng. 37, 1-57 (2009).
  7. Coccia, M. Cartilage tissue engineering with chondrogenic cells versus artificial joint replacement: the insurgence of new technological paradigms. Health Technol. 2, 235-247 (2012).
  8. Muhammad, H., et al. Human migratory meniscus progenitor cells are controlled via the TGF-β pathway. Stem Cell Rep. 3, 789-803 (2014).
  9. Shen, W., et al. Intra-articular injection of human meniscus stem/progenitor cells promotes meniscus regeneration and ameliorates osteoarthritis through stromal cell-derived factor-1/CXCR4-mediated homing. Stem Cells Transl Med. 3, 387-394 (2014).
  10. Gille, J., et al. Outcome of autologous matrix-induced chondrogenesis (AMIC) in cartilage knee surgery: data of the AMIC registry. Arch Orthop Trauma Surg. 133, 87-93 (2012).
  11. Richardson, S. M., et al. Mesenchymal stem cells in regenerative medicine: focus on articular cartilage and intervertebral disc regeneration. Methods. 99, 69-80 (2016).
  12. Kang, H., et al. In vivo cartilage repair using adipose-derived stem cell-loaded decellularized cartilage ECM scaffolds. J Tissue Eng Regen Med. 8, 442-453 (2012).
  13. Taylor, D. A., Sampaio, L. C., Ferdous, Z., Gobin, A. S., Taite, L. J. Decellularized matrices in regenerative medicine. Acta Biomater. 74, 74-89 (2018).
  14. Sun, Y., Yan, L., Chen, S., Pei, M. Functionality of decellularized matrix in cartilage regeneration: a comparison of tissue versus cell sources. Acta Biomater. 74, 56-73 (2018).
  15. Niu, X., Li, N., Du, Z., Li, X. Integrated gradient tissue-engineered osteochondral scaffolds: challenges, current efforts and future perspectives. Bioact Mater. 20, 574-597 (2023).
  16. Deng, C., et al. Bioactive scaffolds for regeneration of cartilage and subchondral bone interface. Theranostics. 8, 1940-1955 (2018).
  17. Armiento, A. R., Alini, M., Stoddart, M. J. Articular fibrocartilage: why does hyaline cartilage fail to repair. Adv Drug Deliv Rev. 146, (2018).
  18. Chu, C. R., Szczodry, M., Bruno, S. Animal models for cartilage regeneration and repair. Tissue Eng Part B Rev. 16, 105-115 (2010).
  19. Pane, R. V., Setiyaningsih, R., Widodo, G., Al Hajiri, A. Z. Z., Salsabil, J. R. Femoral cartilage thickness in knee osteoarthritis patients and healthy adults: an ultrasound measurement comparison. Sci World. 2023, e3942802(2023).
  20. Milano, F., Chevrier, A., De Crescenzo, G., Lavertu, M. Injectable lyophilized chitosan-thrombin-platelet-rich plasma implant to promote tissue regeneration: in vitro and ex vivo solidification properties. Polymers. 15 (13), 2919(2023).
  21. Dias, I. R., Viegas, C. A., Carvalho, P. P. Large animal models for osteochondral regeneration. Osteochondral tissue engineering. , 441-501 (2018).
  22. Fernandes, T. L., et al. Development of a novel large animal model to evaluate human dental pulp stem cells for articular cartilage treatment. Stem Cell Rev. 14, 734-743 (2018).
  23. González Vázquez, A. G., et al. Systematic comparison of biomaterials-based strategies for osteochondral and chondral repair in large animal models. Adv Healthc Mater. 10, e2100878(2021).
  24. Brehm, W., et al. Repair of superficial osteochondral defects with an autologous scaffold-free cartilage construct in a caprine model: implantation method and short-term results. Osteoarthritis Cartilage. 14, 1214-1226 (2006).
  25. Moran, C. J., et al. The benefits and limitations of animal models for translational research in cartilage repair. J Exp Orthop. 3, (2016).
  26. Getgood, A. M. J., et al. Evaluation of early-stage osteochondral defect repair using a biphasic scaffold based on a collagen-glycosaminoglycan biopolymer in a caprine model. Knee. 19, 422-430 (2012).
  27. Cook, J. L., et al. Animal models of cartilage repair. Bone Joint Res. 3, 89-94 (2014).
  28. Jackson, D. W., Lalor, P., Aberman, H. M., Simon, T. M. Spontaneous repair of full-thickness defects of articular cartilage in a goat model. J Bone Joint Surg Am. 83, 53-64 (2001).
  29. Meng, X., et al. Animal models of osteochondral defect for testing biomaterials. Biochem Res Int. 2020, 1-12 (2020).
  30. Patil, S., Steklov, N., Song, L., Bae, W. C., D'Lima, D. D. Comparative biomechanical analysis of human and caprine knee articular cartilage. Knee. 21, 119-125 (2014).
  31. Stewart, H. L., et al. A missed opportunity: a scoping review of the effect of sex and age on osteoarthritis using large animal models. Osteoarthritis Cartilage. 32, 501-513 (2024).
  32. Proffen, B. L., McElfresh, M., Fleming, B. C., Murray, M. M. A comparative anatomical study of the human knee and six animal species. Knee. 19, 493-499 (2012).
  33. McIlwraith, C. W., Frisbie, D. D., Kawcak, C. E. The horse as a model of naturally occurring osteoarthritis. Bone Joint Res. 1, 297-309 (2012).
  34. Liu, T. P., et al. Updates on mesenchymal stem cell therapies for articular cartilage regeneration in large animal models. Front Cell Dev Biol. 10, (2022).
  35. Murray, R. C., Vedi, S., Birch, H. L., Lakhani, K. H., Goodship, A. E. Subchondral bone thickness, hardness and remodelling are influenced by short-term exercise in a site-specific manner. J Orthop Res. 19, 1035-1042 (2001).
  36. Malda, J., et al. Comparative study of depth-dependent characteristics of equine and human osteochondral tissue from the medial and lateral femoral condyles. Osteoarthritis Cartilage. 20, 1147-1151 (2012).
  37. Kon, E., et al. Orderly osteochondral regeneration in a sheep model using a novel nano-composite multilayered biomaterial. J Orthop Res. 28, 116-124 (2009).
  38. Allen, M. J., Houlton, J. E. F., Adams, S. B., Rushton, N. The surgical anatomy of the stifle joint in sheep. Vet Surg. 27, 596-605 (1998).
  39. Chevrier, A., Kouao, A. S. M., Picard, G., Hurtig, M. B., Buschmann, M. D. Interspecies comparison of subchondral bone properties important for cartilage repair. J Orthop Res. 33, 63-70 (2015).
  40. Orth, P., et al. Reduction of sample size requirements by bilateral versus unilateral research designs in animal models for cartilage tissue engineering. Tissue Eng Part C Methods. 19, 885-891 (2013).
  41. Häger, C., et al. The sheep grimace scale as an indicator of post-operative distress and pain in laboratory sheep. PLOS ONE. 12, e0175839(2017).
  42. Smart, A., et al. Protocol for tissue processing and paraffin embedding of mouse brains following ex vivo MRI. STAR Protoc. 4, 102681(2023).
  43. Glasson, S. S., Chambers, M. G., van den Berg, W. B., Little, C. B. The OARSI histopathology initiative: recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse. Osteoarthritis Cartilage. 18, 17-23 (2010).
  44. Sprecher, D. J., Hostetler, D. E., Kaneene, J. B. A lameness scoring system that uses posture and gait to predict dairy cattle reproductive performance. Theriogenology. 47, 1179-1187 (1997).
  45. Hunziker, E. B. Articular cartilage repair: basic science and clinical progress. A review of the current status and prospects. Osteoarthritis Cartilage. 10, 432-463 (2002).
  46. Ahern, B. J., Parvizi, J., Boston, R., Schaer, T. P. Preclinical animal models in single-site cartilage defect testing: a systematic review. Osteoarthritis Cartilage. 17, 705-713 (2009).
  47. Maglio, M., Brogini, S., Pagani, S., Giavaresi, G., Tschon, M. Current trends in the evaluation of osteochondral lesion treatments: histology, histomorphometry and biomechanics in preclinical models. Biomed Res Int. 2019, 1-27 (2019).
  48. Bell, A. D., et al. Bone-induced chondroinduction in sheep Jamshidi biopsy defects with and without treatment by subchondral chitosan-blood implant. Cartilage. 4, 131-143 (2012).
  49. Levingstone, T. J., et al. Multi-layered collagen-based scaffolds for osteochondral defect repair in rabbits. Acta Biomater. 32, 149-160 (2016).
  50. Jia, S., et al. Multilayered scaffold with a compact interfacial layer enhances osteochondral defect repair. ACS Appl Mater Interfaces. 10, 20296-20305 (2018).
  51. Schinhan, M., Bijak, M., Unger, E., Nau, T. Electromyographic study of the popliteus muscle in the dynamic stabilization of the posterolateral corner structures of the knee. Am J Sports Med. 39, 173-179 (2011).
  52. Bernstein, A., et al. Microporous calcium phosphate ceramics as tissue engineering scaffolds for the repair of osteochondral defects: histological results. Acta Biomater. 9, 7490-7505 (2013).
  53. Crovace, A. M., et al. Evaluation of in vivo response of three biphasic scaffolds for osteochondral tissue regeneration in a sheep model. Vet Sci. 6, 90(2019).
  54. Salerno, M., et al. Biomimetic tri-layered osteochondral scaffold: study of early implant stability in a sheep model. Bone Joint Res. 14, 953-968 (2025).
  55. Lewis, J. A., et al. A bioactive supramolecular and covalent polymer scaffold for cartilage repair in a sheep model. Proc Natl Acad Sci U S A. 121, (2024).
  56. Tamaddon, M., et al. In vivo evaluation of additively manufactured multi-layered scaffold for the repair of large osteochondral defects. Bio-Des Manuf. 5, 481-496 (2022).
  57. Petrovova, E., et al. PHB/CHIT scaffold as a promising biopolymer in the treatment of osteochondral defects: an experimental animal study. Polymers. 13, 1232(2021).
  58. Saber, A. S., Bolbol, A. E., Schenk-Saber, B. A. A radiographic study of the development of the sheep carpus from birth to 18 months of age. Vet Radiol. 30, 189-192 (1989).
  59. Cambra-Moo, O., et al. Multidisciplinary characterization of long-bone cortex growth patterns through sheep ontogeny. J Struct Biol. 191, 1-9 (2015).
  60. Arens, D., et al. Seasonal changes in bone metabolism in sheep. Vet J. 174, 585-591 (2007).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Osteochondral DefectSheep ModelCartilage RegenerationJoint InjuryGelatin MethacryloylLarge Animal ModelHistological EvaluationOsteoarthritis ModelArticular CartilageSurgical Protocol

İlgili makaleler