Kemirgenlerde Hızlı Göz Hareketi (REM) uykusunun seçici yoksunluğu için yeni bir protokol sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kemirgenlerde Hızlı Göz Hareketi (REM) uykusunun seçici yoksunluğu için yeni bir protokol sunuyoruz.
Uyku, genel olarak Hızlı Göz Hareketi (REM) ve REM dışı evrelere ayrılır ve işlevlerini incelemek için çeşitli uyku yoksunluğu teknikleri geliştirilmiştir. Mekanik uyarım veya hayvanı REM uykusu sırasında bırakmak gibi geleneksel yöntemler genellikle hızlı alışkanlık ve istenmeyen stres etkilerine yol açar, bu da yorumlamayı zorlaştırır. Burada, kemirgenlerde REM uyku yoksunluğu için yeni, hafif ve nazik bir yöntem sunuyoruz: SNiFFer. Kemirgenlerin burun uyaranlarına karşı son derece hassas olduğu bilinir. Bu yöntemde, REM uykusu sırasında yumuşak bir fırça hayvanın burnunu nazikçe okşar ve bu da uyarılmayı güvenilir şekilde tetikler. Bu tekniği REM uykusu sırasında seçici olarak uygulamak için, yapay zeka tabanlı gerçek zamanlı Elektroensefalografi (EEG) uyku evresi sınıflandırma sistemi kullandık. Müdahale yalnızca REM ataklarında tetiklendi ve uyku durumu ne olursa olsun aynı uyarı desenini alan bir kontrol grubu dahil edildi. Ayrıca, öğrenmeden sonraki 6 saat içinde REM uyku yoksunluğunun hafıza konsolidasyonuna müdahale edip etmediğini test etmek için SNiFFer'i İz Korku Koşullandırma paradigmasında uyguladık. Yok bağlanmış kontrol gruplarına kıyasla, SNiFFer ile tedavi edilen hayvanlarda toplam REM epizon ve REM epiz süresinde anlamlı bir azalma görüldü; bu da yöntemin özgüllüğünü ve etkinliğini gösteriyor. Sonuç olarak, SNiFFer tekniği farelerde REM uyku yoksunluğu için son derece seçici, minimal invaziv dokunsal bir yaklaşım sunar. Deneysel koşulların hassas kontrolünü sağlar ve REM uykusunun hafıza ve bilişsel rolünü araştırmak için yeni olanaklar açar—gıdıklayıcı bir dokunuşla.
Hızlı göz hareketi (REM) uykusu, hafıza konsolidasyonu gibi bilişselsüreçlerde kritik bir rol oynar 1,2. Beyinde REM uykusunun işlevsel önemini araştırmak için REM uyku yoksunluğu deneysel bir yaklaşım olarak yaygın olarak kullanılır. Şu anda, kemirgenlerde REM uyku yoksunluğunu tetiklemek için yaygın olarak dört ana yöntem kullanılmaktadır: döner diskyöntemi 1, çiçek saksıyöntemi 3, hava puffyöntemi 4 ve fiziksel uyarımteknikleri 5,6. Döner disk v....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tüm hayvan deneyleri Tsukuba Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı. Bu çalışmada erkek ve dişi C57BL/6J fareleri (11–13 haftalık, 20–35 g) kullanıldı. Bu çalışmada kullanılan malzeme ve aletlerin tam listesi Materyaller Tablosu'nda sunulmaktadır.
1. EEG elektrotlarının cerrahi implantasyonu17
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
EEG elektrotlarının cerrahi implantasyonu
Ameliyat sırasında fareler tamamen anestezi edilmelidir. Eğer anestezi eksikliği belirtileri gösterirse, örneğin zorlanma gibi, protokolden çıkarılmalıdır. Benzer şekilde, kanama 10 saniyeden fazla sürerse, farenin beyninde ciddi hasar verebilir ve deneylerden uzaklaştırılması önerilir. Ameliyattan sonra, çoğu fare genellikle 1 saat içinde uyanır. Yürüyüş ve göz hareketleri, ameliyat öncesi koşullara benzer şekilde normale dön.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu protokol, kontrol fareleri boyunduruk olan farelerde seçici REM uyku yoksunluğunu sağlar. Çiçek saksı ve döner disk teknikleri gibi geleneksel yöntemlerin aksine, bu sistem hayvanların aynı sirkadiyen zamanda aynı uyarımı aldığı ince eşleşmiş kontrol gruplarının uygulanmasına olanak tanır. Ayrıca, bu yaklaşım, geleneksel nazik taşıma ve hava üfleme yöntemlerinin yaygın bir sınırlaması olan uyarım konumundaki değişkenliği en aza indirir. Sonuç olarak, bu teknik REM uyku fonksiyonunun d.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarlar rekabet eden çıkarlar belirtmemektedir.
Uyku evresi sınıflandırması için Y. Nakata'ya teşekkür ederiz. Tüm IIIS üyelerine teşekkür ederiz. Bu çalışma, AMED JP21zf0127005, JP21km0908001, JP23wm0525003, Japonya Bilimi Teşvik Derneği (JSPS) (26H02428, 24H00894, 23H02784, 22H00469, 16H06280 M.S., 23K19393 ve 24K18212 I.K., 25KJ0664 C.K., 24H00893 T.N.) ve Takeda Bilim Vakfı hibeleriyle desteklenmektedir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| %5 glukoz | Otsukba | 35061410 | |
| 6 pinli başlık | Hirose | 172-0989 | |
| Yapıştırıcı | Konishi | 16351 | |
| Anestezi makinesi | Shinano Seisakusho | SN-487-0T | |
| Sıkma yuvası | Hirose | 688-9095 | |
| Sıkma soketi | Hirose | 688-8982 | |
| Freezeflame4 | Med Associates | RRID:SCR_014429 | Sürüm 4.104 |
| GraphPad Prizması | GraphPad | RRID:SCR_002798 | Sürüm 10.5.0 |
| İbuprofen | Tokyo Kimya Endüstrisi | I0415 | |
| İzofluran | Viatris | 901036504 | |
| Loctite454 | Henkel | UFI: MAK2-7WRP-G202-F235 | |
| Fare (C57BL/6J) | Jackson Laboratuvarı | RRID: IMSR_JAX:000664 | 11.0 - 13.0 haftalık korku kondisyon seansında |
| Fırça | Namurataiseidou | 4943668000448 | SDflat No.8, Uç uzunluğu: 8.2 mm; Genişlik: 18,8 mm |
| Provinice sıvı | Shofu | 21400BZZ00451000 | 250 mL |
| Provinice tozu | Shofu | 21400BZZ00451000 | 250 g |
| SleepSignRecorder | KISSEI COMTEC | RRID:SCR_018200 | Sürüm 1.2.10 |
| Paslanmaz çelik vida | Yamazaki | Yok | φ 1.0 & Times; 2.0 |
| Standart Stereotaksik Aletler | ALA Scientific | 68038 | |
| Ayçiçeği yağı | Sigma-Aldrich | S5007-250ML | |
| Beyaz petrolatum | Taiyo Pharmaceutical | K09-TS |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.