Tekrarlanabilir ve minimal invaziv fare modelleri için Rafine Aerosol Tabanlı intratrakeal bleomicin teslimat yöntemi

Yunyi Zhou; Ru Li; Yanli Zhang

doi:10.3791/69131

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tekrarlanabilir ve minimal invaziv fare modelleri için Rafine Aerosol Tabanlı intratrakeal bleomicin teslimat yöntemi

1.5K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/69131

⸱

16 Ocak 2026

Yunyi Zhou^*¹ , Ru Li^*¹ , Yanli Zhang¹

¹State Key Laboratory of Common Mechanism Research for Major Diseases, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College

^* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Burada, trakea yoluyla taşınan aerosol bleomisin kullanarak farelerde pulmoner fibrozisin modeli için bir protokol sunuyoruz. Bu optimize edilmiş yöntem, cerrahi kesi olmadan tekiz, nicel ve hassas bir doğum sağlar ve bleomisin kaynaklı fibrozun tekrarlanabilirliğini ve güvenilirliğini artırır.

Özet

Pulmoner fibroz, akciğer parenkiminde fibrotik skar dokusunun ilerleyici birikmesiyle karakterize edilir ve bu da gaz değişiminin ciddi şekilde bozulmasına yol açar. Bu hastalık, özellikle idiopatik pulmoner fibrozis, son derece kötü bir prognozla ilişkilendirilen bir durum olmak üzere, kronik interstisyel akciğer hastalıklarının temelini oluşturur. Etkili tedavilerin eksikliği nedeniyle, sağlam fare modelleri altta yatan patolojik mekanizmaların aydınlatılması ve yeni antifibrotik müdahalelerin değerlendirilmesi için kritik öneme sahiptir. Bleomisin kaynaklı pulmoner fibroz, en yaygın kullanılan deneysel model olmaya devam etmektedir. Farelerde yaygın uygulama yolları arasında intravenöz ve intraperitoneal enjeksiyonlar, invaziv açık trakeal instillasyon ve invaziv olmayan trakeal damlama bulunur. Ancak, invaziv cerrahi yöntemler genellikle ikincil doku hasarına yol açar ve modelin tekrarlanabilirliği ile stabilitesini tehlikeye atabilir. Buna karşılık, invaziv olmayan trakeal damlama genellikle akciğer lobları arasında dengesiz bleomisin dağılımına yol açar ve boğulma riski oluşturur; böylece tekrarlanabilirlik azalır ve teknik zorlukları artırır. Bu sınırlamaları gidermek için, operasyonel olarak daha basit, minimal invaziv, yüksek tekrarlanabilir ve hayvan sıkıntısını önemli ölçüde azaltarak etik olarak üstün olan rafine aerosol tabanlı intratrakeal bir teslimat yöntemi geliştirilmiştir. Rima glottidisi doğrudan görselleştirmek için küçük hayvan laringoskobu kullanılarak, fare trakeal çapından belirgin şekilde daha dar olan özel bir aerosol iğnesi trakeaya yerleştirilir. Bleomisin çözeltisi hassas kontrol edilen basınç altında teslim edilir ve ince bir aerosol oluşur. Bu, ajanın akciğer parenximası boyunca eşit ve verimli dağılmasını sağlar. Ayrıca, iğneyi uygun bronka yönlendirerek sol veya sağ akciğeri seçici olarak hedefleyebilir. Bu optimize edilmiş modelin doz-yanıt ilişkisi, akciğer fonksiyonu, histopatolojik belirtiler ve akciğer hidroksiprolin içeriğindeki değişikliklerin sistematik olarak izlenmesiyle kapsamlı şekilde karakterize edilmiştir. Bu gelişmiş deneysel protokolün laboratuvar standartlaştırmasını kolaylaştırması ve nihayetinde yeni antifibrotik tedavilerin geliştirilmesini ve preklinik doğrulamasını hızlandırması beklenmektedir.

Giriş

Pulmoner Fibroz (PF), ilerleyici akciğer parenkimal hasarı ve anormal onarımla karakterize edilen ölümcül hastalıklar grubudur; bunların %30-40'ını İdiopatik Akciğer Fibrozisi (IPF) oluşturur; hastaların ortalama tanı yaşı 65 yaş ve %80'den fazlası 60 yaşından büyük ve %80'den fazlası 60 yaştan^{büyüktür. 1}^,². Küresel yaşlanma yoğunlaştıkça, IPF görülmesi yıl geçen yıl artmakta olup, dünya çapında IPF görülmesi 3-9/100.000/yıl olup, Amerika Birleşik Devletleri'nde 65 yaş üstü kişilerde yapılan bir çalışmaya göre, bu nüfustaki insidans 93.7/100.000/yıl