Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Tüm göz nakli, dinamik koruma ve nakil için bir domuz modeli oluşturmak

615 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/69179

⸱

25 Kasım 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Engineering in Medicine and Surgery, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 2Shriners Children's Boston, 3Plastic Surgery Research Laboratory, Department of Plastic and Reconstructive Surgery, Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, 4Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, Hospices Civils de Lyon, 5Department of Plastic, Reconstructive and Aesthetic Surgery, CHU de Rennes, University of Rennes, 6Faculty of Medicine and Health Sciences, University of Antwerp, 7Bioengineering Research Group, Cardiff Metropolitan University, 8Collaboration for the Advancement of Sustainable Medical Innovation, University College London, 9Division of Plastic Surgery Research, Vascularized Composite Allotransplantation Program Development, Cedars-Sinai Hospital

Bu makalede

Özet

Cerrahi alımdan makine perfüzyonun başlatılmasına kadar ayrıntılı ve tekrarlanabilir bir domuz tüm göz nakli modeli (WET) tanımlanır; bu model, nakilde WET dinamik korumasının incelenmesine olanak tanır.

Özet

İlk insan Tüm Göz Nakli (WET), büyük oftalmik yaralanma nedeniyle görme kaybı yaşayan hastalar için yeni umut ateşledi, ancak WET ile görme restorasyonu mümkün olmadan önce önemli zorluklar hâlâ çözülmeli. Bunlar arasında en kritik zorluklardan biri ex vivo korumadır. Göz küresi, özellikle retina ve optik sinir gibi sinir bileşenleri, uygun koruma sağlanmadıkça dakikalar içinde hızlı ve geri dönüşü olmayan bir dejenerasyon geçirir. Statik soğuk depolama (SCS), vaskülerize kompozit allotransplantasyonda (VCA) altın standart olarak kalmaktadır, ancak metabolizmayı yeterince bastıramadığı veya destekleyememesi nedeniyle greftin canlılık ve işlev kaybına yol açtığı için WET ex vivo koruma için uygun değildir. Subnormotermik makine perfüzyonu (SNMP), SCS'ye umut vadeden bir alternatif olarak ortaya çıkmıştır; sadece greftleri koruma değil, aynı zamanda onları yeniden konillendirme potansiyeli sunmaktadır. Grubumuz, SNMP'yi katı organ nakilinden birkaç VCA modeline başarıyla çevirerek uygulanabilirliğini ve avantajlarını göstermiştir. Burada, SNMP'nin domuzlarda bir WET koruma uygulamasını, anatomik model ve koruma protokolünü detaylandırarak raporluyoruz. Bu yaklaşım, ıslak koruma ve nakil tekniklerinin optimize edilmesinde önemli bir ileriye atılmayı temsil etmektedir.

Giriş

Vaskülerize kompozit allotransplantasyonlar (VCA'lar), rekonstrüksiyon cerrahisinde önemli bir ilerlemeyi temsil eder ve karmaşık lezyonları olan hastalar için eşsiz estetik ve fonksiyonel sonuçlarsunar 1,2. Ancak, göz görmesiyle ilgili görme kaybı, yüz yaralanmalarında önemli bir bozulma kaynağı olmaya devam etmektedir. Son zamanlarda yapılan ilk tam göz nakli (WET), hastalariçin yeni umut ateşledi 3,4. Görme geri kazanılmasa da, fonksiyonel görüntüleme ışık uyarısına yanıt olarak kortikal aktivasyonu gösterdi ve elektroretinografi (ERG) ışığa karşı kör ama tanınabilir bir fotoreseptöryanıtı gösterdi 5. Olağanüstü teknik başarılara rağmen, fonksiyonel WET'i klinik bir gerçekliğe dönüştürmek için önemli zorluklar hâlâ ele alınmamaktadır. Göz küresi iskemiye karşı son derece hassastır ve retina ile optik sinir, doğru oksijenasyon ve pH seviyeleri korunmadıkça sıcak iskemi süresi (WIT) dakikaları içinde geri döndürülemez dejenerasyongeçirir 6. Bu nedenle, WET VCA alanında özel zorluklar yaratır ve hem arka hem ön segmentler ile ekstraokulyar bileşenler dahil olmak üzere birden fazla faktör dikkate alınmalıdır. Özellikle, kas yapısı başarılı fonksiyonel sonuçlar elde etmek için kritik öneme sahiptir; çünkü sıcak iskemi yaralanmalarına karşı oldukça hassastır; bu yaralanmalar iskemi-reperfüzyon 7,8 ile daha da kötüleşir. Oksijen eksikliği hücre hasarına ve hasarla ilişkili moleküler desenlerin (DAMP) salınmasına yol açar. Reperfüzyon sırasında, bu DAMP'ler alıcının bağışıklık sistemini aktive eder ve iltihabı ile bağışıklık hücresi infiltrasyonunu tetikler. Bu iltihap ortamı, antijen sunumunu ve T hücresi aktivasyonunu teşvik ederek reddetmeyihızlandırır9. Optik sinir yeniden bağlanması gibi zorlukların üstesinden gelmenin yanı sıra, WET için optimize edilmiş ex vivo perfüzyon teknikleri gerekecek; böylece WIT veya statik soğuk depolama (SCS) kaynaklı hasarı önlemek ve nihayetinde görmerestorasyonu 5,7,9,10,11 elde edilecektir.

Makine perfüzyonu (MP), katı organ naklinde iskemi-reperfüzyon yaralanmasını önleme yöntemi olarak iyi köksalmıştır 12,13,14; subnormotermik makine perfüzyonu (SNMP) ise çeşitli modellerde SCS'ye kıyasla daha üstün sonuçlargöstermiştir 15,16,17. SNMP'yi kemirgenlerden domuzlara(20,21,22) ve yakın zamanda insan dışı primatlara (23) kadar uzanan hayvan modellerinde başarılı bir şekilde çevirdik. SNMP, greftleri uzun süre koruma konusunda etkinliğini kanıtlamakla kalmadı, aynı zamanda greft yeniden yapılandırma ve sıcak iskemik yaralanma azaltma potansiyelini gösterdi; böylece satın alma sonrası 24 saat boyunca güvenli yeniden dikme mümkünolmayı sağladı. 24,25. Hücre metabolizmasını kısmen koruyabilme yeteneği sayesinde, SNMP ayrıca koruma aşamasını VCA'da yeniden dikme ve nakil protokollerine entegre edilebilecek tanı, tedavi ve ön koşullandırma platformuna dönüştürerek yeni yollar açmaktadır. VCA'lar için özel olarak optimize edilmiş bir SNMP protokolü geliştirdik ve bunu bu zorlu tüm göz nakli senaryosuna uyguladık.

Bu çalışmada, SNMP, ortam sıcaklığında (yaklaşık 20 °C) oksijenli, dinamik organ koruması için kullanılmıştır. Bu teknik, perfüzyonu dolaştırmak ve oksijenlemek için peristaltik pompa ve oksijenatör kullanır. Bir domuz modeli kullanılır; bu model, insanlarla fizyolojik benzerlikleri, benzer damar boyutu ve benzersiz lateral orbital duvarın olmaması nedeniyle WET nakli ve koruma çalışmaları için son derece önemlidir(26,27,28). Bu özellik, dış karotis arter ve oftalmik arter doğrudan bağlantılı olduğundan, dış karotis arter ve juguler venerler aracılığıyla WET'in yalnızca dış karotis arter ve juguler venerler aracılığıyla temin edilmesini sağlar; ayrıca in vivo deneyler için intrakraniyal diseksiyon gerekmeden Ortotopik veya heterotopik yeniden dikme. Tedarik dolaşımından sonra yapılır, kalp ölüm protokollerinden sonra bağışı ile uyumlu hale gelir ve diğer katı organlar alınana kadar tedarikin gecikmesine olanak tanır. Bu model, sıcak iskemi sonrası yüksek hassasiyetli greftlerin yeniden yapılmasında SNMP'nin potansiyelini daha da inceler ve zaten diğer organlara odaklanan yerleşik nakil laboratuvarlarında "3-R" rafine, indirgeme ve değiştirme prensiplerine bağlı kalarak WET koruma tekniklerinin geliştirilmesinidestekler 29,30. Ayrıca, benzer adımlarla izlenen yoğun tedarik için de geçerliliğini koruyor. Amaç, dış karotis ve juguler pedikulatlara dayalı güvenilir bir koruma modeli oluşturmak ve dinamik koruma için uygulanabilirliğini değerlendirmektir. Yolsuzluk teminini, koruması ve SNMP'nin uygulanmasının temel yönlerini kapsayan ayrıntılı prosedürel adımlar sunulmaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu çalışma için kurumsal onay yerel Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'nden (protokol #2024N000205) alındı. Tüm hayvan çalışmaları, Hayvan Araştırmaları: In Vivo Deneylerin Raporlanmasırehberleri 31'e uygun şekilde yürütüldü ve ABD Ordusu Hayvan Bakım ve Kullanım İnceleme Ofisi (ACURO)32 önerilerine uygundu. Tüm WET'ler, "3-R" ilkelerine uygun olarak, terminal organ tedarik prosedürlerinden geçen domuzlardantemin edilmiştir 33. 30 kg ile 50 kg arasındaki ağırlıktaki hayvanlar, 100 IU/kg heparin alındıktan sonra kadın verilmesi yoluyla ötenazi edildi ve deneyler için sol WET greftleri kullanıldı. Sağ WET'ler kontrol görevi görüyordu. Organ alımı, ölüm sonrası 180 dakikadan az sıcak iskemiyle gerçekleşti. Protokolde kullanılan tüm reaktifler ve ekipmanlar hakkında detaylar için Malzeme Tablosu'na bakınız.

NOT: Veriler bir elektronik tabloya (örneğin Excel) kaydedildi ve istatistiksel analizler uygun bir istatistiksel yazılım kullanılarak (örneğin GraphPad Prizması) yapıldı. Alfa riski %5 olarak belirlendi ve iki kuyrukluydu. İzlenen her değişken için, ortalamanın ortalama ve standart hatası belirlendi. Spearman testi, perfüzyon parametreleri arasındaki korelasyonları incelemek için kullanıldı.

1. Makine perfüzyon hazırlığı (deneyden 1 gün önce)

  1. Makine perfüzyonsistemini 34 kurun ( bkz. Şekil 1).
    1. Perfüzyon sistemi bileşenlerini birleştirin: pompa, oksijenatör, baloncuk tuzağı, sürekli basınç sensörü ve ağırlık sensörü.
      NOT: Boru uzunluğu, tüm bileşenlerin monte edilmesi için gereken minimum düzeyde tutulmalıdır. Monte edildikten sonra, basınç kalibrasyonunun özellikle boru uzunluklarına özgü olduğunu unutmayın.
    2. Sistemi yarı kapalı bir sirkülasyon devresi olarak bağlayarak rezervuardan perfüzyonu oksijenatöre pompalayacak ve ardından greft girişine (karotis arter) pompalanacaktır. Venöz çıkış tekrar rezervuara akar (Ek Şekil 1 ve Ek Video 1).
    3. Basınç sensörünü giriş borusuna takın.
    4. Grefti elektronik ölçekte konumlandırılmış üç boyutlu (3D) baskılı platforma yerleştirin.
    5. Hem teraziyi hem de basınç sensörünü mikrodenetleyiciye bağlayın.
    6. Mikrodenetleyiciyi operatörün bilgisayarına bağlayarak gerçek zamanlı izleme ve sürekli veri kaydı yapın.
    7. Termal kamerayı sıcaklık izlemeye hazırlayın.
      NOT: Ödem oluşumu için bir vekil olarak kilo izleme,perfüzyon 35 sırasında greft yaralanmasının erken bir göstergesi olarak hizmet ettiği için çok önemlidir.
  2. Perfüzyonu başlatmadan önce devre bileşenlerini iyice temizleyin ve özellikle birkaç kez kullanılmış oksijenleyiciye özel dikkat edin.
    1. Tüm boruları ayrı ayrı %70 etanol ile yıkamak, ardından steril deionize su ile yıkamak için başlayın.
    2. Sistemi monte edin ve oksijenatörü zaten kullanmışsa 50-100 mL/dakika akış hızında yıkamak için 2 L steril deiyonize su dolaştırın.
      NOT: Canlı hayvan yeniden plantasyon çalışmaları için yeni steril oksijenatör kullanın ve diğer tüm perfüzyon bileşenlerini etilen oksit (ETO) ile sterilize edin
  3. Perfüzyon çözeltisini hazırlayın. Subnormotermik makine perfüzyonu için, VCA optimize edilmiş Steen+çözüm 24,34,36 kullanın. Toplamda, daha önce bildirilen ayrıntılı bileşime göre greft başına 1,5 Lkullanılmalıdır (34).
  4. Perfüzyona sodyum hidroksit çözeltisi ekleyin ve pH 7.5-7.6 olur. Bu başlangıç değerini kasıtlı olarak yüksek ayarlayın, çünkü karbogen karışımı (%95 oksijen, %5 karbondioksit) çözündüğünde pH dolaşım sırasında düşecektir.
  5. Doğru ölçümler için ağırlık ve basınç sensörlerini kalibre edin.
    1. Teraziyi platform ağırlığını hesaba katacak şekilde tartın.
    2. Damar basıncını hassas bir şekilde ölçmek için, sistemi kateter göstergesi ve kullanılan akış hızına göre kalibre edin: düzenli akış hızı aralıklarında (her 0,5 mL artışta, 0 ila 20 mL/dakika arasında) kullanılabilecek her kateter boyutu için sistem basıncını ölçün.
    3. Deneyler sırasında, arteriyal basıncı hesaplamak için, ölçülen toplam basınçtan kalibrasyon basıncı çıkarılır. Bu deneylerde kullanılan kalibrasyon tablosu örnek olarak sunulmaktadır (Ek Şekil 2).
      NOT: Kalibrasyon her kuruluma özgüdür. Tüp, oksijenatör veya perfüzyördeki herhangi bir değişiklikten sonra kalibrasyonu tekrarlayın, çünkü bu değişiklikler sistem basıncını değiştirebilir.

2. Otopsi sonrası WET tedariki

NOT: Kalp ölümü ve/veya ölüm sonrası tedarikten sonra bağışı simüle etmek için, hayvan yerel IACUC yönergelerine göre ötenazi yapılmalıdır. Çalışmayı engelleyebilecek ilaç toksisitesinden kaçınmak için damar içi pentobarbital enjeksiyon yerine kan dışını tercih edin.

  1. Ötenazi yapılan hayvanı yatağa yatmış pozisyonda tutun. Baş ve boyun bölgesini tıraş edin, ovalayın ve steril perdeler yerleştirin.
    NOT: Anatomik model Şekil 2'de sunulmakta olup, Ek Dosya 1'de adım adım diseksiyon rehberi sağlanmıştır.
  2. Kapağın deri işaretlerini çiz.
    1. İşaretlerin, orbital kenardan 2 cm uzaklıkta bir çizgi ve lateral kantusun 1 cm altında, boyuna doğru uzanan bir kesiden oluştuğundan emin olun.
    2. Kesi, deri ve deri altı dokudan periostum dahil olmak üzere orbitanın üst ve alt kısımlarındaki kemiğe kadar n°23 bistüri ile yapılsın. Flepin ön ve arka kısımlarında, kesinin fasyal düzleme ulaştığından emin olun.
  3. Diseksiyona Stevens makası ve Adson forsepsi kullanarak orbitanın ön tarafıyla başlayın.
    1. Periost asansörü ile orbital içeriği subperiosteal düzlemde orbital duvarlara doğru yükseltin.
    2. Orbital duvara yakın yapıları, n°15 bıçak skarpeli kullanılarak tanımlanabilir ve bölünür; bu yapılar eğik kas yerleştirmeleri ve orbitadan çıkıp frontal venöz birleşir; bu pleksus orbitadan çıkar ve frontal ven ile birleşir.
      NOT: Ön ven yüz venine akar; anastomotik dal ve oftalmik ven korunursa, zaman kazanmak için bu damar feda edilebilir.
  4. Diseksiyona yörneğin arka tarafında devam edin. Bir smashpel ile masseter kasını zigomatik yerleştirdiği yerde rezek yapın, ardından mandibulanın yükselen dalını Liston kemik kesici ile kullanın. Kondilü, mandibula parçasını dışa döndürerek manuel olarak ayrılın.
  5. Zigomatik işlemden frontal kemiğe uzanan orbital bağı ayırarak temporalis kasının orbital kısmına ulaşın. Temporalis kasını kesin.
  6. Periost asansörüyle, zigomatik kemer altında ön orbital kenara doğru bir subperiostal tünel oluşturun. Kemiği kesmek için geri dönen testere kullanın. Temporalis kasının altındaki orbital konin inferolateral kısmında bulunan oftalmik arteri tespit edin.
  7. Zigomatik kemer ve antero-inferior orbital duvarları rongeur kullanarak kesiştirin.
    NOT: Bu adımlar, orbital konin inferolateral yönüne ve damar pedikuline erişim sağlar.
  8. Oftalmik arterin her iki dalını, orbital içeriklere girerken ince Stevens makası ve mikrocerrahi forsepsle tespit edin ve disseksiye.
    NOT: Çoğu damar (dış karotis arter ve yüzeysel juguller vein) mandibulanın altında yer alır, ancak yüz ven yüzeysel olarak çeneye yüzeylidir.
  9. Dış karotis arter ve juguler venin istenen uzunluğu izole edildikten sonra, diseksiyon bir skalpel kullanılarak optik sinir, okulomotor sinirler ve damar pedikili kesitlerle tamamlanır.

3. Perfüzyon için hazırlık

  1. Yan masada, karotis arteri mikrocerrahi genişletici kullanarak genişletin ve anjiyokateter yerleştirin. Kanülasyonu 3-0 ipek bağlarıyla sabitleyin.
    NOT: Bu protokolde tüm arterler için 18-G anjiyokateter kullanıldı. Arterial pedikul kısa, kateteri çok fazla sokmamaya dikkat edilmelidir ki iki göz dalından sadece birinin seçici kanülasyonu önlenir. Juguler ven, kapalı döngü perfüzyon sistemi kullanılmadıkça kanülasyon yapılmasına gerek yoktur; bu protokolde durum böyle değildi.
  2. Karotis arterini yıkamak için, perfüzyon kurulumunda kullanılan basınç sensörüne tamamen bağlı 10 mL'lik bir şırınga kullanın. Damarları yıkamak için 10 ml heparin (100 IU birimi/mL) kullanın, böylece çıkış net olur. Yüksek basınç mikrovasküler yaralanmalara ve perfüzyon arızasına yol açabileceği için 35 ± 5 mmHg'nin altında kalın.

4. Subnormotermik makine perfüzyonu

  1. Greftin kanüllenmiş arterini makine perfüzyon sisteminin giriş borusuna bağlayın ve grefti pula yerleştirin.
  2. Pompayı 2-4 mL/dakika olarak başlatın.
    NOT: Perfüzyon akışı ve basınç oranları kullanılan protokole bağlıdır. VCA için, kapiler hasar ve ödem oluşumunu önlemek için stabil ve düşük akışlı bir rejim kullanılır.
  3. Hem giriş hem çıkışta önceden belirlenmiş her zaman noktasında 1 mL bir şırınga kullanarak ve kan gazı sistemi makinesiyle örnekleri analiz etmek (örneğin, kan gazı metrikleri [pH, pCO2, pO2, laktatlar, baz fazlalığı, bikarbonat], glikoz, sodyum, potasyum, kalsiyum, klorür) analiz etmek. Bu, greftin metabolik durumunu Tablo 1'de sunulan denklemlere göre hesaplamamıza olanak tanır.
    NOT: Bu protokolde perfüzyon 18 saat sürer ve giriş ve çıkış girişinden örnekler ilk 6 saat boyunca her saatte, kalan 12 saat boyunca ise her 3 saatte bir alınır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

6 saatlik SNMP süresi boyunca ön fizibilite testi yapıldı, ardından 2 saat boyunca tam kan ile normotermik makine perfüzyonu (NMP) yapıldı; böylece greftin doğru reperfüzyonu değerlendirildi ve yeniden dikilmeyi simüle etti. SNMP aşamasında, düzenli bir çıkış gözlemlendi ve ardından yapılan tam kan reperfüzyon simülasyonu, tüm greftin başarılı bir şekilde yeniden renklendirildiğini gösterdi. Perfüzyon parametreleri tekniğin uygulanabilirliğini daha da doğruladı (Ek Şekil 3

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

İlk klinik vakalardan yirmi yıldan fazla bir süre sonra VCA, yaygın erişimini sınırlayan önemli immünolojik ve ex vivo koruma zorluklarıyla karşı karşıyakalıyor 37. Bu zorluklar, görme geri kazanma için heyecan verici olanaklar sunan ancak başarılı optik sinir yeniden bağlanmasını sağlamak, hem ön hem de arka segmentlerin işlevselliğini korumak ve periorbital yapıların bütünlüğünü korumak gibi benzersiz engeller içeren WET örneğinde daha belirgindir. Okul...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Bazı yazarlar rekabet eden çıkarlarını belirtir. Dr. Uygun, Lellouch ve Cetrulo'nun bu çalışmayla ilgili patent başvuruları bulunmaktadır. Dr. Korkut Uygun ve Basak Uygun, yüksek sifir altındaki organ koruma teknolojisi geliştirmeye odaklanan Sylvatica Biotech Inc. şirketinde finansal çıkara sahiptir ve Bilimsel Danışma Kurulu'nda görev yapmaktadır. MGH soruşturmacıları için rekabet eden çıkarlar, MGB tarafından çıkar çatışması politikalarına uygun olarak yönetilir. Kalan tüm yazarlar çıkar çatışması belirtmemektedir.

Teşekkürler

Bu çalışma, kısmen Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından R01AR082825 numaralı (BEU), R01EB028782 (KU), DoD RTRP RT240044 (KU, AGL, CLC), Shriners Children's 84308 (YB) ve ARPA-H alt ödülü FY25.1065.001 (CLC) ile Ulusal Bilim Vakfı tarafından Grant No. EEC 1941543 (KU). HO ve YB, Fondation des Gueules Cassées'ten finansman aldı. Société Française de Chirurgie Plastique, Reconstructrice et Esthétique (SOFCPRE, Fransa) tarafından HO ve YB'ye verilen destek büyük takdir edilmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Adson PensetleriGüzel Bilim Araçları11019-12Cerrahi alet
Affinity Pixie Oksijenasyon SistemiMedtronicBBP241Oksijenatör
Angiocath (24 G)Becton Dickinson381112Kanülasyon kateteri
Bovin serum albüminiSigma-AldrichA9647Perfüzyon bileşeni
Kalsiyum klorür dihidratSigma-Aldrich223506Perfüzyon bileşeni
Karbondioksit OksijenAirgasUN3156Karbondioksit Oksijen karışımı  gas 
Kateter 24 GDutscher921048Arter kanülasyonu
D-(+)-Glikoz monohidratSigma-Aldrich49159Perfüzyon bileşeni
DeksametazonSigma-AldrichD2915Perfüzyon bileşeni
DextranTermobilimsel406271000Perfüzyon bileşeni
Genişletici forsepsAROSurgical11.946.1102Cerrahi alet
Excel MicrosoftElektronik tablo
Heparin sodyum enjeksiyonuEugia Pharma63739-953-25Perfüzyon bileşeni
Humulin Normal İnsülin insanLilly0002-8215-01Perfüzyon bileşeni
Hidrokortizon sodyum süksinatPfizer0009-0011-03Perfüzyon bileşeni
LigaclipEtikonMCS20Cerrahi damar klipleri
Liston kemik kesici makinesiGüzel Bilim Araçları16104-19Cerrahi alet
Magnezyum klorür heksa-hidratSigma-AldrichM9272Perfüzyon bileşeni
MasterFlex L/SCole-Parmer77200-32Silindirli pompa
Mikrocerrahi forsepsGüzel Bilim Araçları11253-20Cerrahi alet
Periostal asansörAROSurgical46.415.18Cerrahi alet
Polietilen glikol 35000Sigma-Aldrich25322-68-3Perfüzyon bileşeni
Potasyum klorürSigma-Aldrich7447-40-7Perfüzyon bileşeni
Basınç Monitör, Taşınabilir, PM-P-1Yaşayan Sistemler EnstrümantasyonuPM-P-1Basınç sensörü
Prism GraphPadv. 10.1.1İstatistiksel analiz yazılımı
Radnoti  Baloncuk Tuzağı Uyum OdasıRadnoti130149Baloncuk tuzağı
RAPIDPoint 500Siemens500Kan Gazı Sistemi
Testere yeniden üretimiStryker5100-37Cerrahi alet
RongeurGüzel Bilim Araçları16002-18Cerrahi alet
Skalpel bıçağı (n15)Güzel Bilim Araçları10015-00Cerrahi alet
Skalpel bıçağı (n23)Güzel Bilim Araçları10023-00Cerrahi alet
İpek dikiş 3-0EtikonP683HDikiş
Sodyum bikarbonatSigma-AldrichS5761Perfüzyon bileşeni
Sodyum klorürSigma-AldrichS9888Perfüzyon bileşeni
Sodyum hidroksitSigma-Aldrich72068Perfüzyon bileşeni
Sodyum fosfat monobasique dihidrat Sigma-Aldrich71505Perfüzyon bileşeni
Stevens makasAROSurgical07.367.13Cerrahi alet
Şırınga 1 mLBD309659Örnek alımı
Şırınga 10 mLDutscher300912Greft yıkama
Termal kameraFlir Onehttps://www.flir.fr/products/flir-one-gen-3/?vertical=condition+monitoring&segment=solutionsPerfüzyon sıcaklık izleme
Boru (n&derece; 16)Masterflex13-310-282Makine perfüzyon kurulumu
Vankomisin hidroklorürSlate Run Pharmaceuticals70436-021-82Perfüzyon bileşeni

Kaynaklar

  1. Lellouch, A. G., Lantieri, L. A second chance at life. Camb Q Healthc Ethics. 28 (3), 463-467 (2019).
  2. Tchiloemba, B., et al. Long-term outcomes after facial allotransplantation: Systematic review of the literature. Transplantation. 105 (8), 1869-1880 (2021).
  3. Nowogrodzki, J. World's first whole-eye transplant: The innovations that made it possible. Nature. 633 (8030), 500-501 (2024).
  4. Lico, M., et al. Swallowing function after pioneering partial face and whole eye transplant: Clinical insights. Am J Speech Lang Pathol. 34 (4), 1921-1930 (2025).
  5. Ceradini, D. J., et al. Combined whole eye and face transplant: Microsurgical strategy and 1-year clinical course. JAMA. 332 (18), 1551-1558 (2024).
  6. Abbas, F., et al. Revival of light signalling in the postmortem mouse and human retina. Nature. 606 (7913), 351-357 (2022).
  7. Paradis, S., et al. Chronology of mitochondrial and cellular events during skeletal muscle ischemia-reperfusion. Am J Physiol Cell Physiol. 310 (11), C968-C982 (2016).
  8. Kruit, A. S., et al. Ex-vivo perfusion as a successful strategy for reduction of ischemia-reperfusion injury in prolonged muscle flap preservation: A gene expression. Gene. 701, 89-97 (2019).
  9. He, J., Khan, U. Z., Qing, L., Wu, P., Tang, J. Improving the ischemia-reperfusion injury in vascularized composite allotransplantation: Clinical experience and experimental implications. Front Immunol. 13, 998952(2022).
  10. Dickey, R. M., et al. Composite tissue preservation. Ann Plast Surg. 84 (6), 711-716 (2020).
  11. Messner, F., Grahammer, J., Hautz, T., Brandacher, G., Schneeberger, S. Ischemia/reperfusion injury in vascularized tissue allotransplantation. Curr Opin Organ Transplant. 21 (5), 503-509 (2016).
  12. Markmann, J. F., et al. Impact of portable normothermic blood-based machine perfusion on outcomes of liver transplant. JAMA Surg. 157 (3), 189(2022).
  13. Van Rijn, R., et al. Hypothermic machine perfusion in liver transplantation: A randomized trial. N Engl J Med. 384 (15), 1391-1401 (2021).
  14. Pitchaimuthu, M., Crochet, C., Battula, N. R., Faria, I., Martins, P. N. Machine perfusion organ preservation: Highlights from the American Transplant Congress 2024. Artif Organs. 49 (2), 326-331 (2025).
  15. Berendsen, T. A., et al. A simplified subnormothermic machine perfusion system restores ischemically damaged liver grafts in a rat model of orthotopic liver transplantation. Transplant Res. 1 (1), 6(2012).
  16. Karangwa, S. A., et al. Machine perfusion of donor livers for transplantation: A proposal for standardized nomenclature and reporting guidelines. Am J Transplant. 16 (10), 2932-2942 (2016).
  17. Agius, T., et al. Subnormothermic ex vivo porcine kidney perfusion improves energy metabolism: Analysis using 31P magnetic resonance spectroscopic imaging. Transplant Direct. 8 (10), e1354(2022).
  18. Goutard, M., et al. Exceeding the limits of static cold storage in limb transplantation using subnormothermic machine perfusion. J Reconstr Microsurg. 39 (5), 350-360 (2023).
  19. Burlage, L. C., et al. Optimization of ex vivo machine perfusion and transplantation of vascularized composite allografts. J Surg Res. 270, 151-161 (2022).
  20. Berkane, Y., et al. Towards optimizing sub-normothermic machine perfusion in fasciocutaneous flaps: A large animal study. Bioeng (Basel). 10 (12), 1415(2023).
  21. Berkane, Y., et al. Continuous oxygen monitoring to enhance ex-vivo organ machine perfusion and reconstructive surgery. Biosens Bioelectron. 262, 116549(2024).
  22. Tawa, P., et al. Continuous versus pulsatile flow in 24-hour vascularized composite allograft machine perfusion in swine: A pilot study. J Surg Res. 283, 1145-1153 (2023).
  23. Oubari, H., et al. Development of a 24-h preservation protocol of forearm vascularized composite allotransplants in nonhuman primates using subnormothermic machine perfusion. Transplant Direct. 11 (9), e1849(2025).
  24. Goutard, M., et al. Machine perfusion enables 24-h preservation of vascularized composite allografts in a swine model of allotransplantation. Transpl Int. 37, e100(2024).
  25. Charlès, L., et al. Effect of subnormothermic machine perfusion on the preservation of vascularized composite allografts after prolonged warm ischemia. Transplantation. 108 (11), 2222-2232 (2024).
  26. Kyllar, M., et al. A porcine model: Surgical anatomy of the orbit for maxillofacial surgery. Lab Anim. 50 (2), 125-136 (2016).
  27. Rousou, C., et al. A technical protocol for an experimental ex vivo model using arterially perfused porcine eyes. Exp Eye Res. 181, 171-177 (2019).
  28. Bravo, M. G., Granoff, M. D., Johnson, A. R., Lee, B. T. Development of a new large-animal model for composite face and whole-eye transplantation: A novel application for anatomical mapping using indocyanine green and liquid latex. Plast Reconstr Surg. 145 (1), 67e-75e (2020).
  29. Dickens, B. M. Legal and ethical issues of uterus transplantation. Int J Gynaecol Obstet. 133 (1), 125-128 (2016).
  30. Díaz, L., et al. Ethical considerations in animal research: The principle of 3Rs. Rev Invest Clin. 73 (4), 199-209 (2021).
  31. ARRIVE guidelines. , https://arriveguidelines.org (2024).
  32. MRDC research protections. , https://mrdc.health.mil/index.cfm/collaborate/research_protections/acuro (2024).
  33. NCBI PMC. , https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6826930 (2024).
  34. Cabanel, L., et al. Establishing a swine model to study uterus dynamic preservation and transplantation. J Vis Exp. (214), e67357(2024).
  35. Meyers, A., et al. Weight gain is an early indicator of injury in ex vivo normothermic limb perfusion (EVNLP). Artif Organs. 47 (2), 290-301 (2023).
  36. Berkane, Y., et al. Towards optimizing sub-normothermic machine perfusion in fasciocutaneous flaps: A large animal study. Bioeng (Basel). 10 (12), 1415(2023).
  37. Berkane, Y., et al. Avancées et perspectives en préservation d'allotransplantations de tissus composites. Bull Acad Natl Med. 208 (9), 1299-1308 (2024).
  38. Brouwers, K., et al. 24-hour perfusion of porcine myocutaneous flaps mitigates reperfusion injury: A 7-day follow-up study. Plast Reconstr Surg Glob Open. 10 (2), e4123(2022).
  39. Cypel, M., et al. Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation. N Engl J Med. 364 (15), 1431-1440 (2011).
  40. Agarwal, A., et al. Clinicopathological analysis of uterine allografts including proposed scoring of ischemia reperfusion injury and T-cell-mediated rejection: Dallas uterus transplant study. Transplantation. 106 (1), 167-177 (2022).
  41. Ponticelli, C. Ischaemia-reperfusion injury: A major protagonist in kidney transplantation. Nephrol Dial Transplant. 29 (6), 1134-1140 (2014).
  42. Berkane, Y., et al. VCA supercooling in a swine partial hindlimb model. Sci Rep. 14 (1), 12618(2024).
  43. Filz von Reiterdank, I., et al. Subzero non-freezing of vascularized composite allografts in a rodent partial hindlimb model. Cryobiology. 116, 104950(2024).
  44. Berkane, Y., et al. Supercooling: A promising technique for prolonged preservation in solid organ transplantation, and early perspectives in vascularized composite allografts. Front Transplant. 2, 1269706(2023).
  45. De Vries, R. J., et al. Subzero non-frozen preservation of human livers in the supercooled state. Nat Protoc. 15 (6), 2024-2040 (2020).
  46. De Vries, R. J., et al. Supercooling extends preservation time of human livers. Nat Biotechnol. 37 (10), 1131-1136 (2019).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Etiketler

Ex Vivo KorumaMakine Perf zyonuStatik So uk SaklamaOptik SinirRetina KorumaVask larize Kompozit AllotransplantasyonGreft Canl lTransplantasyon Teknikleri
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.