ABCB1 C3435T (rs1045642) Gen Polimorfizmasının Deneysel Değerlendirmesi ve Kalça Değişim Cerrahisinde Ameliyat Sonrası Analjezi ile Bağlantısı

Özet

Bu çalışma, yaygın genetik bir varyantın kalça protezi sonrası ameliyat sonrası ağrı kontrolünü etkileyip etkilemediğini araştırdı. Farklı genotiplere sahip hastalarda ağrı şiddeti, ağrı aljezik kullanımı ve ağrıya bağlı biyolojik yanıtlar açısından belirgin farklılıklar gösterildi.

Özet

Bu çalışma, kalça protezi ameliyatı geçiren hastalarda ABCB1 (MDR1) C3435T (rs1045642) gen polimorfizması ile ameliyat sonrası analjezi arasındaki ilişkiyi araştırdı. Ocak 2023 ile Ocak 2024 arasında hastanemizde kalça protezi geçiren toplam 100 hasta, ameliyat sonrası hasta kontrollü intravenöz analjezi ile sufentanil aldı. Ameliyat öncesi serum örnekleri toplandı ve genomik tespiti TaqMan SNP genotipleme testi kullanılarak gerçekleştirildi. C3435T genotipine göre, hastalar vahşi tip homozigotlar (CC grubu), mutant heterozigotlar (BT grubu) ve mutant homozigotlar (TT grubu) olarak sınıflandırıldı. Başlangıç özellikleri, Görsel Analog Ölçeği (VAS) ağrı puanları, sufentanil tüketimi, serum ağrı aracıları (prostaglandin E2 (PGE2), madde P (SP) ve β-endorfin (β-EP)), Hamilton anksiyete ve depresyon puanları, uyku kalitesi ve ameliyattan sonraki 24 saat içinde advers olayların görülme sıklığı gibi klinik parametreler gruplar arasında karşılaştırıldı. Başlangıç özellikleri gruplar arasında benzerdi (p > 0.05). VAS puanları, sufentanil dozu ve serum PGE2, SP ve β-EP seviyeleri, 24 saatte BT ve TT gruplarında CC grubuna göre anlamlı şekilde daha düşüktü (p < 0.05). TT grubu ayrıca hem CC hem de BT gruplarına göre Hamilton kaygı ve depresyon puanlarında azalmış (p < 0.05), BT grubu ise CC grubuna göre daha yüksek kaygı ve depresyon puanları gösterdi (p < 0.05). Uyku kalitesi ve yan etki oranları gruplar arasında anlamlı olarak farklı değildi (p > 0.05). Bu bulgular, ABCB1 (MDR1) C3435T (rs1045642) polimorfizması ile ameliyat sonrası analjezik etkinliğindeki değişkenlik arasında potansiyel bir ilişki olduğunu göstermektedir. TT genotipini taşıyan hastalar genellikle daha iyi analjezi, daha düşük sufentanil gereksinimi ve daha iyi psikolojik sonuçlar yaşadı. Bu sonuçlar umut verici olsa da, küçük örneklem büyüklüğü ve tek merkezli tasarım nedeniyle dikkatli yorumlanmalıdır. Bu gözlemleri doğrulamak ve klinik uygulanabilirliğini değerlendirmek için daha fazla büyük ölçekli çalışmalar gerekmektedir.

Giriş

Kalça protezi, hasar görmüş kalça ekleminin cerrahi yoluyla yapay kalça proteziyle değiştirilmesini ifade eder. Erken femoral baş nekrozu, kalça osteoartriti ve diğer hastalıklarda semptomlar hafifletilebilir ve durum geleneksel Çin ve Batı tıbbının entegre edilmiş tedavisiyle^{geciktirilebilir 1}. Kalça eklemindeki ağrı ve deformite, yürümeyi etkilediğinde, yaşam kalitesini ciddi şekilde etkileyen ilaçlar gibi konservatif tedavilerle hafiflenemez. Kalça protezi ameliyatı, eklem ağrısını hafifletmek, kalça fonksiyonunu yeniden inşa etmek ve yaşam kalitesini artırmak için tercih edilebilir. Ağrının neden olduğu bir dizi patofizyolojik değişim, yaşlı hastalarda kardiyovasküler ve beyin damar hastalıkları riskini^{artırır 2,3}. Ameliyat sonrası ağrı, kalça eklemi fonksiyonunun iyileşmesini ciddi şekilde etkiler, hastaların yatak dinlenme süresini uzatır ve alt uzuvlarda tromboz riskini^{artırır 4}. Etkili analjezi, sadece ameliyat sonrası stres reaksiyonlarını hafifletmekle kalmaz, aynı zamanda hastaların hastaneye yatış süresini de azaltır. Epigenetik düzenleme, DNA dizisinin değişmemesi, ancak gen ifadesinin çevresel faktörlerden etkilenmesi ve benzeri⁵ demektir. Son çalışmalar, epigenetik düzenleme ile kronik ağrının oluşumu ve gelişimi arasında bir korelasyon olduğunu^{göstermiştir ve} kronik ağrı veya akut ağrı genellikle çevresel faktörler ile genler arasındaki etkileşimin sonucudur. Epigenetik düzenleyici bileşenler ile kronik ağrı arasındaki ilişkiyi anlamak ve ağrının oluşumu ve gelişimi ile yakından bağlantılı olan biyobelirteçlerin (epigenetik düzenlemeyle ilgili olanlar) tanımlanması, özellikle kronik ağrı ile ilişkilendirildiğinde, kronik ağrı hassasiyetinin teşhis edilmesine, ilaç tedavisi etkilerini değerlendirmeye ve nihayetinde bireysel, hassas analjezi teşvik etmeye yardımcı olabilir. ABCB1 genindeki C3435T polimorfizması (rs1045642), ekzon 26'da bulunan iyi karakterize edilmiş tek nükleotid varyantıdır. Bu polimorfizm, çeşitli ilaçların, özellikle opioidlerin hücresel alımını ve akışını düzenleyen, bu da onların farmakokinetik ve terapötik yanıtlarını etkileyen bir transmembran efflux taşıyıcısı olan P-glikoproteinin (P-gp) bir varyantını^kodlar. ABCB1'in genetik varyantları arasında, eşanlamlı polimorfizm C3435T (rs1045642), ilaç yanıtındaki bireylerarası değişkenlikle ilgili kapsamlı şekilde incelenmiştir. ABCB1 C3435T (rs1045642), MDR1 geni^9'un ekzon 26'sında bulunan eşanlamlı bir ikamedir. Amino asit dizisini değiştirmese de, biriken kanıtlar bu varyantın mRNA kararlılığını ve çeviri kinetiklerini etkileyebileceğini, böylece P-glikoprotein katlanmasını, ifade seviyelerini veya taşıma verimliliğini etkileyebileceğini göstermektedir. Çalışmalar arasındaki bulgular tamamen tutarlı olmasa da, birçok rapor T allelinin azalmış P-gp ekspresyonu veya substrat özgüllüğünün^{değişmesiyle ilişkili olduğunu göstermiştir 10}. Kan-beyin bariyerinde ifade edilen P-gp, bazı opioidler dahil olmak üzere birçok ilacın merkezi sinir sistemi nüfuzunu sınırladığı için, ABCB1 C3435T polimorfizmi, sufentanil hassasiyeti ve opioidle ilgili yan etkilerde bireysel farklılıklara katkıda bulunabilir¹¹.

Bu çalışmanın amacı, kalça protezi ameliyatı geçiren hastalarda ABCB1 C3435T polimorfizminin, ameliyat sonrası analjezik etkinliği ve ağrı ile ilgili sonuçlarda bireyler arası değişkenlikle ilişkili olup olmadığını araştırmaktı. Kalça protezi ameliyatı genellikle orta ila şiddetli ameliyat sonrası ağrılarla ilişkilidir ve sufentanil gibi opioidler ameliyat sonrası analjezi için rutin olarak kullanılır. Ancak, analjezik yanıt ve opioidle ilişkili yan etkilerde önemli bireylerarası farklılıklar vardır ve bunlar yalnızca klinik faktörlerle tam olarak açıklanamaz. ABCB1 geni tarafından kodlanan P-glikoprotein, kan-beyin bariyeri dahil olmak üzere biyolojik membranlar arasında ilaç taşınımını düzenlemede kilit rol oynadığından, ABCB1'deki genetik çeşitlilik opioid eğilimini ve merkezi analjezik etkileri etkileyebilir. Bu nedenle, ABCB1 C3435T polimorfizması ile ameliyat sonrası analjezi arasındaki ilişkiyi incelemek, kalça protezi ameliyatı sonrası ağrı kontrolündeki değişkenliğe genetik katkıyı netleştirmeye yardımcı olabilir. Farklı genotiplere sahip hastalar arasında ameliyat sonrası analjezik etkilerdeki farklılıkları tartışarak, bu çalışma ameliyat sonrası ağrıdaki bireysel varyasyonları ortaya çıkarmayı ve klinik bireyselleştirilmiş analjezi için teorik bir temel sağlamayı amaçlamaktadır. Aynı zamanda, C3435T gen polimorfizmasının ameliyat sonrası analjezi üzerindeki etkisini nasıl etkilediğinin anlaşılmasını genişleterek sonraki araştırmalar için bir temel oluşturuyor.

Protokol

Bu çalışma, Helsinki Bildirgesi'ne uygun olarak yürütülmüş ve Fuzhou Geleneksel Çin Tıbbı Hastanesi Tıbbi Etik Komitesi tarafından onaylanmış (Onay No.: LC-2023-048). Kayıt öncesinde tüm katılımcılardan yazılı bilgilendirilmiş onay alındı.

Veri ve yöntemler
Araştırma hipotezine dayanarak, prospektif kohort analizi çalışma protokolü geliştirdik. Toplam 100 hasta prospektif olarak okul replasman ameliyatı geçirdi; ortalama yaşları 58,41 ± 6,97 idi. Şekil 1 , bu protokolün teknik yol haritasını göstermekte olup, aşağıdaki bölümlerde çalışma tasarımının ayrıntılı açıklamalarını sunmaktadır.

Çalışma tasarımı ve katılımcılar
Bu, Ocak 2023 ile Ocak 2024 arasında genel anestezi altında primer kalça artroplastisi için planlanan ardışık yetişkinleri kaydeden prospektif bir kohort çalışmasıydı. Dahil etme kriterleri 18-60 yaş arası, Amerikan Anesteziologlar Derneği (ASA) sınıf I-II ve aynı ortopedi ekibi tarafından yapılan ameliyatlardı. Dışlama kriterleri arasında anlamlı kardiyopulmoner, hepatik veya böbrek disfonksiyonu (serum kreatinin >1,5 mg/dL veya ALT >normalin 3 katı üst sınırı) olarak tanımlanır; kronik ağrı öyküsü (örneğin, fibromiyalji, nöropatik ağrı); sakinleştirici veya opioidlerin kötüye kullanımı; bilinen analjeziklere alerji; mevcut hastalık sırasında diğer opioidlere maruz kalma; ve ameliyattan önceki uzun süreli analjezik veya steroid kullanımı (ameliyattan önceki 3 ay içinde 1 hafta >). Katılımcılardan, genotipleme için ameliyat öncesi 5 mL EDTA antikoagüllenmiş venöz kan toplandı. Genomik DNA, üreticinin talimatlarına göre ticari bir DNA çıkarma kiti kullanılarak periferik kandan çıkarıldı. ABCB1 C3435T (rs1045642) polimorfizması, polimeraz zincir reaksiyonuna dayalı yöntemlerle genotiplendirildi ve genotip belirleme belirlenmiş^{protokollere göre gerçekleştirildi 10}. ABCB1 C3435T (rs1045642) polimorfizması genotiplendikten sonra, katılımcılar CC, CT ve TT gruplarına ayrıldı. Dışarıdan sağlıklı bir kontrol grubu dahil edilmedi; Tüm karşılaştırmalar genotip grupları arasında yapıldı (CC, CT, TT). Biyobelirteçleri ve genotipleri analiz eden laboratuvar personeli klinik sonuçlara kör oldu.

Anestezi ve ameliyat sonrası yönetim
Standart izleme arasında elektrokardiyografi, invaziv olmayan kan basıncı (her 5 dakikada bir ölçülür), nabız oksimetrisi ve son gelgit karbondioksit (EtCO₂) yer almaktadır. 18G kateter kullanılarak damar içi bir hat oluşturuldu ve hastalar yüz maskesiyle 3 dakika boyunca %100 O₂ ile preoksijenlendirildi. Anestezi midazolam 0,05 mg/kg, sisatraküryum 0,1 mg/kg, sufentanil 0,4 μg/kg ve propofol 1-2 mg/kg olarak titredildi, bilinç kaybı ve yeterli çene gevşemesi sağlanana kadar. Trakeal entübasyon, yeterli nöromüsküler blokaj doğrulandıktan sonra yapıldı (dört sayıyı = 0). Mekanik ventilasyon, hacim kontrollü modda ayarlandı; solunum hızı dakikada 15 nefes, gelgit hacmi tahmini vücut ağırlığı 6-8 mL/kg ve PEEP 5 cm_{H 2}O olarak, EtCO_2'nin 35-45 mmHg olarak korunması için ayarlamalar yapıldı. Anestezi propofol 0,08-0,12 mg/kg ve sufentanil 0,15-0,30 μg/kg/h ile sürdürüldü. Damar içi anestezikler yara kapandığında durduruldu. Hemodinamikler, MAP'ı başlangıç seviyesinin %20'si içinde tutmak için gerektiğinde sıvı bolüsleri veya vazopresorlarla yönetildi.

Kalça artroplastisi işlemi¹²
Hastalar, operatif tarafı yukarıda lateral dekübit pozisyonunda konumlandırıldı. Postolateral bir yaklaşım kullanıldı: büyük trokanterin ortasında 15-20 cm deri kesisi yapıldı. Deri altı doku ve fascia lata kesilmiş, gluteus maximus ise küt şekilde bölünmüştür. Arka kapsül açığa çıktı ve asetabüler kenar boyunca T şeklinde kapsülotomi yapıldı. Kalça, dış rotasyon ve adduksiyonla çıkıktı. Femur başı rezeksiyona alındı ve femoral boynu, küçük trokanterin 1,0-1,5 cm yukarısına doğru kesildi. Hemiartroplasti için, femoral kanal ardışık broşlarla hazırlandı (boyut artışı: 1 mm adım) ve femoral sap yaklaşık 15° anteversiyon ile implante edildi. Total kalça artroplastisinde, asetabulum tekrar kesilerek noktalı kanama gözlemlendi; 45° kupa abdüksiyon açısı ve 15° anteversiyon açısı hedeflendi. Bileşenler, kemik kalitesi ve implant stabilitesinin ameliyat içi değerlendirmesine dayanarak çimentoya veya presle oturtuldu. Azaltıldıktan sonra, kalça stabilitesi ve hareket aralığı ameliyat cerrahı tarafından ameliyat sırasında pasif fleksiyon, ekstansiyon, iç ve dış rotasyon ve abduksiyon yoluyla değerlendirildi; özellikle baskı veya dislokasyon varlığına dikkat edildi. Gerekirse kapalı emici drenaj yerleştirildi ve yara, derin fasya ve deri altı dokusu için emilebilir dikişler ve cilt kapanması için emilmez dikişler veya deri zımbalar kullanılarak katmanlar halinde kapatıldı.

Ameliyat sonrası hasta kontrollü intravenöz analjezi (PCIA)
Tüm katılımcılar için standart bir sufentanil PCIA rejimi kullanıldı. Analjezik çözelti 1,5 μg/mL sufentanil'den oluşuyordu, %0,9 salinle seyreltildi ve programlanabilir bir infüzyon pompasına yüklendi. Pompa ayarları arka plan infüzyonu 1 mL/s, bolus dozu 1 mL ve kilitlenme intervalı 10 dakika, ancak klinik olarak belirtilmedikçe yükleme dozu kullanılmadı. Hastalar, iyileşme alanında PCIA kullanımı hakkında standart talimatlar aldılar. Pompa günlüğünden operasyon sonrası 24 saat içinde kümülatif sufentanil tüketimi kaydedildi. Tüm pompa modelleri, tek kullanımlık ve tüketim malzemeleri Malzeme Tablosu'nda listelenmiştir.

Kan örnekleme ve işleme
Ameliyat öncesi genotipleme örnekleri, hafif ters çevirme ile karıştırılmış 5 mL EDTA antikoagülasyonlu venöz kan içeriyordu. Ağrı aracı analizleri için, ameliyat sonrası 1., 2., 3. ve 7. günlerde 5 mL venöz kan toplandı. Serum hazırlığı için örnekler oda sıcaklığında 30 dakika pıhtı tutuldu; plazma için, testle belirlenen antikoagülan kullanıldı. Örnekler, oda sıcaklığında yaklaşık 1.000 x g boyunca 15 dakika boyunca santrifüjlenerek serum veya plazmayı ayırmak için kullanıldı. Süpernatant, etiketli düşük bağlanma tüplerine alikotasyon edilip analiz edilene kadar −80 °C'de depolanmıştır. Donma-erime döngülerini en aza indirmek için, her zaman noktası için en az iki aliquot hazırlandı.

Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotiplemesi
Genomik DNA, üreticinin protokolüne uygun olarak ticari olarak mevcut silika membran kolon tabanlı genomik DNA çıkarma kiti kullanılarak tam kandan çıkarıldı. DNA konsantrasyonu ve saflığı spektrofotometrik olarak ölçüldü; A260/280 oranları 1.8-2.0 olarak kabul edilebilir olarak görüldü. DNA, kullanılana kadar −20 °C'de depolanırdı.

ABCB1 C3435T (rs1045642) polimorfizması, gerçek zamanlı PCR platformunda önceden tasarlanmış TaqMan SNP Genotipleme Testi kullanılarak genotiplenmiştir. Test, önceden optimize edilmiş primerler ve hidroliz problarını içeriyordu. Termal döngü koşulları üreticinin önerilerine uyguldu (enzim aktivasyonu için 95 °C, ardından 15 saniye için 95 °C ve 60 saniye için 40 çevrim). Kalite kontrolü için şablonsuz kontroller ve tekrarlanan örnekler (toplamın %10'u ≥%10) dahil edilmiştir. Genotip çağrısı allellik ayırt edici analiz yazılımı kullanılarak gerçekleştirildi ve kabul için çağrı oranı ≥%95 ve %100 tekrarlanmış uyum gerektirdi.

Ağrı aracı testleri
Serum prostaglandin E₂ (PGE₂), madde P (SP) ve β-endorfin (β-EP), üreticilerin talimatlarına göre doğrulanmış radyoimmünoassay veya sandviç immünoassay kitleri kullanılarak ölçüldü. Kalibrasyon eğrileri, beklenen konsantrasyon aralığını kapsayan en az beş standart kullanılarak oluşturuldu; bilinmeyenler ve kontroller ikili olarak çalıştırıldı. Tespit sınırları, analiz içi varyasyon katsayıları ve analizler arası varyasyon katsayıları kaydedildi; Analiz içi CV >%10 veya testler arası CV >%15 tekrarlandı. Tüm forma isimleri ve katalog numaraları Materyaller Tablosu'nda listelenmiştir.

Sonuç ölçütleri
Başlangıç özellikleri arasında yaş, cinsiyet, vücut kitle indeksi, cerrahi süre, cerrahi yaklaşım (ön/arka), protez tipi (çimento/çimentosuz), ameliyat öncesi ağrı VAS (0-10), ameliyat öncesi anksiyete ve depresyon skorları ile ameliyat sırasında sufentanil dozu yer almaktadır. 24 saatte birincil sonuçlar, Görsel Analog Ölçeği (VAS, 0-10) ile ölçülen dinlenme şiddeti ve PCIA pompasından kaydedilen kümülatif sufentanil tüketimiydi. 24 saatte ikincil sonuçlar arasında uyku kalitesi (puan 0-3; yüksek puanlar daha kötü uykuyu gösterir), ameliyat sonrası bulantı ve kusma insidansı (PONV) ve Hamilton Anksiyete ile Hamilton Depresyon Ölçeği puanları yer aldı. Keşif sonuçlarında, ameliyat sonrası 1, 2, 3 ve 7. günlerde serum PGE₂, SP ve β-EP seviyeleri bulundu.

İstatistiksel analiz
Sürekli değişkenler, dağılıma göre ortalama ± standart sapma (SD) veya medyan (çeyrekler arası aralık) olarak sunulur; kategorik değişkenleri sayılar (yüzdeler) olarak kullanır. Veriler Shapiro-Wilk testi ile normallik açısından ve Levene testi kullanılarak varyansların homojenliği açısından test edildi. Eşit varyanslara sahip normal dağılımlı değişkenler için, Bonferroni (veya Tukey) post-hoc karşılaştırmalarıyla tek yönlü varyans analizi (ANOVA) uygulandı; aksi takdirde, Dunn'un post-hoc prosedürü ile Kruskal-Wallis testi kullanıldı. Kategorik değişkenler, uygun olduğunda χ² veya Fisher'ın tam testi kullanılarak analiz edildi. Genotip ve allel frekansları hesaplandı ve Hardy-Weinberg dengesi χ² testiyle değerlendirildi. %95 güven aralıklı (OR) olasılık oranları (OR) genotip (örneğin, T-allel taşıyıcıları vs CC) ile uygulanabilir durumlarda ikili sonuçlar arasındaki ilişkiler için tahmin edilmiştir. Parametrik testler uygulanmadan önce, veri dağılımları normallik (Shapiro-Wilk testi) ve varyans homojenliği (Levene testi) açısından test edildi. Varsayımların ihlal edildiği durumlarda, parametrik olmayan alternatifler (Kruskal-Wallis testi ve sonradan Dunn testi) kullanıldı. Ki-kare testiyle Hardy-Weinberg denge doğrulaması yapın. Genotip ile ameliyat sonrası ağrı puanı ile sufentanil tüketimi arasındaki ilişkiyi analiz etmek için olasılık oranını (OR) ve %95 güven aralığını (CI) hesaplayın. İki taraflı p < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edildi. Analizler doğrulanmış istatistiksel yazılımla gerçekleştirildi.

Sonuçlar

Katılımcı özellikleri ve genotip dağılımı
Toplamda 100 hasta kaydedildi ve ABCB1 C3435T polimorfizması için başarıyla genotiplendi. Genotip dağılımı CC için %40,0 (40/100), BT için %49,0 (49/100) ve TT için %11,0 (11/100) idi. Alel sıklıkları C için %64,5 (129/200) ve T için %35,5 (71/200) idi. Genotip dağılımı Hardy-Weinberg dengesine uygundu (χ² =0.49, p=0.48; Tablo 1). Yaş, BMI, ameliyat süresi, cinsiyet, cerrahi yaklaşım, protez tipi, ameliyat öncesi ağrı (VAS)...

Tartışma

Kalça protezi yaygın bir büyük ortopedik operasyondur ve ameliyat sonrası ağrı hastaların karşılaştığı başlıca sorunlardan biridir. Postoperatif analjezi'nin etkisi, hastanın yaşı, cinsiyeti, kilosu ve ağrı hassasiyeti gibi bireysel faktörler ile ameliyat modu ve ameliyat sonrası rehabilitasyon egzersizi gibi dış faktörler dahil olmak üzere birçok faktörden^{etkilenir. 13,14}. Ayrıca, ilaç analjezi düzeni, opioidlerin dozu ve uygula...

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi

Ad	Şirket	Katalog numarası	Yorumlar
%0,9 Sodyum klorür enjeksiyonu	Fresenius Kabi	19194	Sufentanil (PCIA çözeltisi) ve diğer ilaçlar için seyreltici; ameliyat sırasında yara sulama için kullanılır [belge: "Postoperatif PCIA", "Kalça artroplastisi prosedürü"].
Allelik Ayırma Analiz Yazılımı (gerçek zamanlı PCR için)	Belirtilmedi (gerçek zamanlı PCR platformuyla aynı)	Belirtilmedi	ABCB1 C3435T'nin genotip çağrısı için kullanılır; çağrı hızı &ge gerektirir; %95 ve %100 kopya uyumu [belge: "Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotipleme"].
Santrifüj (serum/plazma ayrımı için)	Beckman Coulter	Avanti J - E	~1000 ve kez çalışır; g (≈ 3000 rpm, 10 cm rotor yarıçapı); Kan örneklerini oda sıcaklığında 10-20 dakika boyunca santrifüj ederek serum/plazmayı ayırır [belge: "Kan örnekleme ve işleme"].
Cisatracurium enjeksiyonu	Jiangsu Hengrui İlaç A.Ş., Ltd	H20060869	Trakeal entübasyon için nöromüsküler bloke ajanı, doz 0.1 mg/kg [belge: "Anestezi ve ameliyat dışı tedavi"].
Klinik Kimya Analizörü	Roche Diagnostics	Cobas c 501	Serum biyobelirteçlerini (PGE2, SP, β-EP) tespit eder [belge: "Ağrı aracı testleri"].
EDTA Antikoagülant	BD Vacutainer	366450	Genomik DNA çıkarımı ve genotipleme için ameliyat öncesi venöz kan toplama (5 mL) için kullanılmıştır; pıhtılaşmayı önlemek için nazik ters çevirme ile karıştırılmış örnekler [belge: "Çalışma tasarımı ve katılımcılar", "Kan örnekleme ve işleme"].
Elektrokardiyograf (EKG)	Philips	CardioPerfect MX800	Standart ameliyat dışı izlemenin bir parçası [belge: "Anestezi ve ameliyat sürecinde yönetim"].
Son Not	Clarivate Analytics	X9	Referans yönetimi ve biçimlendirmede yardımcı olur (dergi atıf normlarıyla uyumlu) [referans: "JoVE_Materials.xls"].
Son Gelgit Karbondioksit (ETCO2) Monitör	Masimo	Rad - 97	Standart ameliyat sonrası izlemenin bir parçası; normokapniyi sürdürmek için kullanılır [belge: "Anestezi ve ameliyat dışı tedavi"].
Düşük Sıcaklık Buzdolabı (-80 derece ve derece; C/-20 ve derece; C)	Haier	DW - 86L626 (-80 ve derece; C); DW - 25L262 (-20 derece ve derece; C)	-80 ve derece; C aliquoted serum/plazma depolamak için; -20 ve derece; Ekstraksiyon genomik DNA'yı depolamak için C [belge: "Kan örnekleme ve işleme", "Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotipleme"].
Midazolam Enjeksiyonu	Jiangsu Enhua İlaç A.Ş., Ltd	H10980025	Anestezi indüksiyon ajanı, doz 0.05 mg/kg [belge: "Anestezi ve ameliyat içi yönetim"].
İnvaziv Olmayan Kan Basıncı Monitörü	Omron	HEM - 9072T	Standart ameliyat dışı izlemenin bir parçası [belge: "Anestezi ve ameliyat sürecinde yönetim"].
Programlanabilir Damar İçi Analjezi (PCIA) Pompası	Phoenix Pharmaceuticals	EK-022-16	Ameliyat sonrası sufentanil doğumu için kullanılır; ayarlar: arka plan infüzyonu 1 mL/s, bolus dozu 1 mL, lockout intervalı 10 dakika; kümülatif sufentanil tüketimini kaydeder [belge: "Postoperatif PCIA"].
Propofol enjeksiyonu	AstraZeneca	H20120088	Anestezi indüksiyonu (bilinç kaybına kadar titrasyonlu) ve bakım (0,08-0,12 mg· kg-1· min-1) [belge: "Anestezi ve ameliyat dışı tedavi"].
Prostaglandin E2 (PGE2) Radyoimmünoassay Kiti	Cayman Chemical	514010	Serum PGE2 tespiti için doğrulanmış kit; ikili olarak çalıştırılır, analiz içi CV ve LE ile; %10 ve analizler arası CV ≤ %15 (sınırları aşarsa tekrarlanıyor) [belge: "Ağrı aracı testleri"].
Nabız Oksimetresi			Standart ameliyat sonrası izlemenin bir parçası (ölçüm SpO2) [belge: "Anestezi ve ameliyat dışı yönetim"].
Gerçek Zamanlı PCR Platformu	Phoenix Pharmaceuticals	EK-022-16	ABCB1 C3435T genotipleme için kullanılmıştır; Termal döngü koşulları: enzim aktivasyonu, 40 denaturasyon döngüsü (95 derece ve derece; C, ~15 s) ve tavlama/uzatma (60&derece; C, ~60 s) [belge: "Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotipleme"].
Silika-Zar Kolon Tabanlı Genomik DNA Çıkarma Kiti	Qiagen	51104	Tam kandan genomik DNA çıkarmak için kullanılır; Prosedürler arasında hücre lizisi, protein sindirimi, DNA adsorpsiyonu, ardışık yıkamalar ve 100 &mu'da elülasyon bulunur; L elusyon tamponu [belge: "Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotipleme"].
Spektrofotometre	Thermo Fisher Scientific	NanoDrop One	DNA konsantrasyonunu ve saflığını ölçür; A260/280 ve asymp ile örnekler; 1.8-2.0 kabul edilebilir sayılır [belge: "Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotipleme"].
SPSS	IBM Şirketi	26	İstatistiksel analiz için kullanılan: Shapiro-Wilk normallik testi, Levene' s testi, ANOVA, Kruskal-Wallis testi, χ ² test, vb. [belge: "İstatistiksel analiz"; referans: "JoVE_Materials.xls"].
Madde P (SP) Radyoimmünoassay Kiti	Merck Millipore	RAB0456	Serum SP tespiti için doğrulanmış kit; PGE2 kiti ile aynı kalite kontrol standartları [belge: "Ağrı aracı testleri"].
Sufentanil enjeksiyonu	Chia Tai Tianqing İlaç Grubu A., Ltd.	NA	Anestezi indüksiyonu için kullanılır (0.4 μ g/kg), ameliyat içi bakım (0.15-0.30 μ g· kg-1· H-1) ve ameliyat sonrası PCIA (1.5 μ g/mL %0,9 salinle seyreltilmiş) [belge: "Anestezi ve ameliyat sonrası yönetim", "Postoperatif PCIA"].
TaqMan SNP Genotipleme Testi (ABCB1 C3435T için, rs1045642)	Qiagen	51104	ABCB1 C3435T polimorfizmasının gerçek zamanlı PCR genotiplenmesi için önceden tasarlanmış allel-spesifik hidroliz-prob testi [belge: "Genomik DNA çıkarımı ve SNP genotipleme"].
Trakeal Entübasyon Ekipmanı (laringoskop, endotrakeal tüp)	Draeger	Capnomac Ultima	Nöromüsküler blokaj onayından sonra trakeal entübasyon için kullanılır [belge: "Anestezi ve ameliyat içi tedavi"].
Hacim Kontrollü Ventilatör	Drä GER	Primus	Ameliyat sırasında mekanik ventilasyon için kullanılır; ayarlar: solunum hızı ~15 nefes/dakika, gelgit hacmi 6-8 mL/kg tahmin edilen vücut ağırlığı [belge: "Anestezi ve ameliyat dışı tedavi"].
β-Endorfin (β-EP) Sandviç İmmünoanaliz Kiti	Phoenix Pharmaceuticals	EK-022-16	Serum & beta;-EP tespiti için doğrulanmış kit; &ge ile üretilen kalibrasyon eğrileri; 5 standart [belge: "Ağrı aracı testleri"].