Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

Bitkisel bir lavman formülü, enterik glial aktivasyonu S100β/RAGE/NF-κB yolu aracılığıyla inhibe ederek ülseratif koliti hafifleter

642 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/69571

⸱

28 Kasım 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Sanguisorba officinalis, Bletilla striata ve Acacia catechu'nu birleştiren bitkisel bir lavman formülü, LC-MS/MS profilleme, S100β kenetleme, DSS kolit modeli ve LPS/IFN-γ ile aktive edilmiş enterik glia kullanılarak değerlendirildi. Formül S100β'yi etkiledi, glial aktivasyonu bastırdı ve p-NF-κB/iNOS ekspresyonunu azalttı; bu da S100β-RAGE-NF-κB ekseni üzerinden iyileşmeyi gösterdi.

Özet

Enterik glial hücrelerin (EGC) aktivasyonu, ülseratif kolitin (UC) patogenezine katkıda bulunur. Bu çalışma, Sanguisorba officinalis, Bletilla striata ve Acacia catechu kombinasyonunu içeren bitkisel bir lavmanın Dibai Lavman Sıvısı (DBE)'nin EGC kaynaklı iltihabı modüle edip etmediğini inceledi. DBE bileşenlerinin ve önceliklendirilmiş bileşiklerin LC-MS/MS profilleri S100β'ye eklendi. Vücut ağırlığı, kolon uzunluğu, histopatoloji ve sitokin seviyeleri (ELISA) kullanılarak dekstran sülfat sodyum (DSS) kaynaklı sare kolitinde etkililik değerlendirildi. Glial aktivasyon belirteçleri immünohistokimya, immünfloresans kololokalizasyonu, nicel PCR (qPCR) ve immünoblotlama ile ölçüldü. In vitro modelde, lipopolisakkarit ve interferon-γ ile aktive edilmiş CRL-2690 enterik glia kullanıldı ve müdahale DBE içeren fare serumu (%15) kullanıldı. Kesişme, birkaç DBE bileşeninin S100β'ye güçlü bir şekilde öngörülen bağlanmasını önerdi. DSS, glial hiperaktivasyonla uyumlu olarak hem mRNA hem de protein seviyelerinde TNF-α ve IL-1β seviyelerini artırdı, dar bağlantıları bozdu ve S100β/GFAP'yi yükseltti; DBE bu değişiklikleri önemli ölçüde geri aldı. In vitro DBE, S100β, RAGE, iNOS (NOS2) ve fosforile NF-κB p65'i indirgedi. Topluca, DBE EGC aktivasyonunu engelleyerek ve S100β/RAGE/NF-κB/iNOS eksenini aşağı düzenleyerek mukoza bütünlüğünü koruyarak UC'yi hafifletmiş gibi görünmektedir.

Giriş

Ülseratif kolit (KK), kolonun kronik mukozal iltihabı ile karakterize edilen inflamatuar bağırsak hastalığının (IBD) başlıca bir alt tipidir; 1990'dan bu yana küresel yük artmaktadır ve IBD vakalarının önemli bir kısmını UColuşturur 1,2. Tipik belirtiler arasında karın ağrısı ve kanlı ishal bulunur; bu da ciddi fiziksel ve psikolojik sıkıntı ile önemli tedavimaliyetlerine yol açar 3. Tedavi seçenekleri genişlemiş olsa da, sistemik bağışıklığı baskılayan immünomodülatörlere ve biyolojik ilaçlara uzun süreli maruz kalma, lenfoma ve fırsatçı enfeksiyon ris....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan prosedürleri, Pekin Çin Tıp Üniversitesi Hayvan Etik Komitesi [BUCM-2023-0912] tarafından onaylandı ve laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için kurumsal ve ulusal yönergelere uygun olarak gerçekleştirildi. Hiçbir insan denek dahil değildi.
Reaktifler ve kullanılan ekipmanlar Malzeme Tablosu'nda listelenmiştir.

1. Reaktifler ve malzemeler

Analitik derecede çözücüler ve moleküler biyoloji kalitesinde reaktifler kullanıldı. Üreticiler, katalog numaraları ve yazılım lisans detayları dahil olmak üzere tüm ticari bilgiler, Materyaller Tablosu'nda ....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

DBE bileşenlerinin ve ilaç içeren serumun tanımlanması

LC-MS/MS DBE'DE 105 BENZERSIZ KIMYASAL BILEŞEN TESPIT ETTI VE KÜTLE HATASı 10 PPM < OLDU. Tanımlama, moleküler formül, izotop deseni ve parça eşleştirme ile doğrulandı. Başlıca sınıflar arasında triterpenler, flavonoidler, bifenantrenler ve organik asitler yer alıyordu. İlaç içeren serum, boş çıkarma sonrası 59 DBE kaynaklı bileşen ortaya çıkardı. Temsilc.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Ülseratif kolit (UC), çok faktörlü patogenezi olan kronik bir inflamatuar bağırsak hastalığıdır. Düzensiz bağışıklık yanıtlarının yanı sıra, bağırsak epitel bariyer disfonksiyonu ve bağırsak mikrobiyotası disbiyozu iyi bilinen katkıcılardır; enterik sinir sisteminin (ENS) anormallikleri ise giderek UC ilerlemesinde önemli bir itici güçolarak tanımlanmaktadır 23. Özellikle, ENS'nin hem yapısal hem de fonksiyonel düzensizlikleri mukozal iltihabı ve hastalık şiddetin.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu araştırma, Ulusal Çin Tıbbı İdaresi'nin Yüksek Düzey Kilit Tıbbi Disiplinleri İnşaat Projesi (ZYYSZX-2023256) tarafından desteklenmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
AutoDock 4.2Moleküler kenetlenme yazılımı-Scripps Araştırma Enstitüsü
Dekstran Sülfat Sodyum (DSS)Farelerde kolit indükleyen kimyasal9011-18-1Sigma-Aldrich
Dibai Lavman Sıvısı (DBE)Ülseratif kolit tedavisi için bitkisel karışım-Pekin Çin Tıp Üniversitesi
DMEM (Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı)Hücre kültürü ortamı11965-092Thermo Fisher
Fetal Sığır Serumu (FBS)Hücre kültürü için takviye16000-044Thermo Fisher
Floresans Mikroskobuİmmünoflüoresans görüntüleme aleti-Olympus
LC-MS/MS SistemiLC-MS analizi için kütle spektrometresi-Waters Corporation
Lipopolisakkarit (LPS)Hücre kültüründe iltihaplanma indükörüL2630Sigma-Aldrich
PCR Termal DöngücüqPCR için ekipmanT100Bio-Rad
Birincil Antikor (S100)S100 protein tespiti için antikorABC1234Abcam
Protein Analiz Kiti (BCA)Protein nicelik kiti23225Thermo Fisher
Rekombinant İnterfon- (IFN)Hücre kültüründe EGC aktivasyonu için sitokin-Sigma-Aldrich
İkincil Antikor (HRP ile konjuge)İmmünohistokimya için ikincil antikorXYZ5678Thermo Fisher
Sülkürazalazin (SASP)Ülseratif kolit için pozitif kontrol-Sigma-Aldrich
Western Blot EkipmanıProtein analizi için elektroforez sistemi-Bio-Rad

Kaynaklar

  1. Lin, D., et al. Global, regional, and national burden of inflammatory bowel disease, 1990-2021: Insights from the global burden of disease 2021. Int J Colorectal Dis. 39 (1), 139(2024).
  2. Le Berre, C., Honap, S., Peyrin-Biroulet, L. Ulcerative colitis.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Enterik Glial HücrelerS100β YolağıRAGE Sinyal iletimiNF-κB AktivasyonuDSS Kolit ModeliİmmünohistokimyaSitokin SeviyeleriSıkı Bağlar

Bu makale yayımlandı

Video yakında