Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Araştırma makalesi

Plasma metabolitlerinin Aşil Tendonu Yaralanması Üzerindeki Nedensel Etkileri: Bir Mendel Randomizasyon Çalışması

268 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/69807

⸱

27 Mart 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Orthopaedic Centre Hand-Foot Surgery, People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University, 2Ningxia Yinchuan Energy College, Nursing College, 3General Surgery Department, People's Hospital of Ningxia Hui Autonomous Region, Ningxia Medical University

Bu makalede

Özet

Burada, Aşil tendon hasarında nedensel metabolitleri belirlemek için birleşik bir Mendel randomizasyon ve deneysel doğrulama protokolü sunuyoruz; Aşil tendon hasarına nedensel bağlantıları olan 19 plazma metabolitini tespit ediyoruz ve doku onarımını teşvik etmek ve iltihabı azaltmak için 5,6-dihidrotimin ve hidroksiasparaginin terapötik uygulamasını gösteriyoruz.

Özet

Plazma metabolitlerinin Aşil tendon yaralanmasının (ATI) ilerlemesi ve iyileşmesi üzerindeki nedensel etkilerini araştırmak için, iki büyük veri setinden genetik verilerle iki örneklemli yaklaşımla Mendel randomizasyonu (MR) uygulanmıştır. ATI verileri IEU-OpenGWAS projesinden (ebi-a-GCST90018895) alınmışken, plazma metaboliti verileri 1.400 metaboliti içermektedir. Metabolitler için önemli enstrümantal değişkenler (IV) belirlendi ve nedensel ilişkileri değerlendirmek için beş MR yöntemi—IVW, MR-Egger, ağırlıklı median, basit mod ve ağırlıklı mod—uygulandı. ATI'nin metabolit seviyeleri üzerindeki etkisini incelemek için ters MR analizi yapılmıştır. Fare Aşil tendonu dokusunda doku onarımı ve IL-6, TNF-α, VEGFA ve TGF-β1 ekspresyonu, tedavi sonrası 7. günde, 5,6-dihidrotimin (Dih) ve hidroksiasparagin (Hyd) ile H&E boyama ve Western blot kullanılarak değerlendirildi. MR analizi, ATI ile önemli nedensel ilişkileri olan 19 metabolit tespit etti. Bunlardan 12'si metabolit, bunlar arasında Dih (IVW: OR = 1.197, %95 CI: 1.074-1.334; P = 0.001) ve Pregnanediol-3-glukuronid (IVW: OR = 1.098, %95 GA: 1.023-1.177; P = 0.001), ATI ilerlemesiyle pozitif ilişkilendirildi. Buna karşılık, Hyd (IVW: OR = 0.789, %95 CI: 0.707-0.880; P < 0.001), ATI'nin geri kazanılmasıyla bağlantılıydı. Ters MR analizi, ATI'nin metabolit seviyeleri üzerindeki anlamlı nedensel etkilerini göstermedi, bu da tek yönlü bir ilişki olduğunu düşündürdü. Röntgen ve H&E analizleri, Dih ve Hyd tedavisinin Aşil tendonunun doz bağımlı iyileşmesini önemli ölçüde artırdığını ortaya koydu. Ayrıca, Dih ve Hyd tedavisi IL-6 ve TNF-α ekspresyonunu (P < 0.05) belirgin şekilde azaltmış, VEGFA ve TGF-β seviyelerini (P < 0.05) artırmış, bu da iltihaplanmada azalma ve doku onarımının teşvik edildiğini göstermektedir. Bu çalışma, spesifik plazma metabolitleri ile ATI sonuçları arasında potansiyel nedensel ilişkileri belirlemiştir. Bu bulgular, gelecekteki tedavi stratejilerini şekillendirebilir ve metabolit-hastalık ilişkilerini araştırmada MR'nin faydasını vurgulayabilir.

Giriş

Aşil tendonu yaralanması (ATI), özellikle sporcular ve fiziksel olarak aktif bireyler arasında yaygın ve zayıflatıcı bir kas-iskelet sistemidir 1,2. İnsan vücudundaki en büyük ve en güçlü tendon olan Aşil tendonu, yürüyüş, koşma ve zıplama gibi aktiviteler sırasında baldır kaslarından topuka kuvvetleri ileten harekette kritik bir roloynar 3,4,5,6. Sınırlı kan akışı ve yüksek mekanik stresi, aşırı kullanım ve yaralanmaya karşı özellikle savunmasızhale getirir 2,7. ATI, hafif tendinopatiden tam yırtılmaya kadar çeşitli şekillerde kendini gösterir; bu da ciddi ağrıya, hareket kabiliyetinin azalmasına ve uzun süreli rehabilitasyona yol açar. 8,9. Tedavideki ilerlemelere rağmen, ATI genellikle kalıcı ağrı, hareket kabiliyetinin azalması ve iyileşme sürelerinin uzamasına yol açar; kronik komplikasyonlar ve yeniden yaralanma riskiartar. 5,10,11,12.

Son çalışmalar, plazma metabolitlerinin ATI 13,14'ün iyileşme sürecindeki kritik rolünü vurgulamıştır. Bu metabolitler, çeşitli biyokimyasal yollarda yer alır ve iltihap, doku onarımı ve tendon sağlığı gibi temel faktörleri etkilediğineinanılmaktadır 15. Örneğin, belirli amino asitler ve lipidler, kolajen sentezi ve oksidatif stresin yönetimi için gereklidir; bunlar tendonpatolojisinde kritik öneme sahiptir 16,17. PDGF, TGF-β, VEGF ve IGF gibi büyüme faktörleri açısından zengin trombosit zengin plazma (PRP), tendon iyileşmesini teşvik etme potansiyeli göstermiştir; ancak kronik Aşil tendinopatisinin tedavisindeki etkinliği hâlâ tartışmalıdır14. Son yıllarda, metabolomik ve proteomik gibi yüksek verimli omik teknolojileri, ATI18,19 gibi karmaşık koşulların moleküler dünyasını keşfetmek için eşi benzeri görülmemiş fırsatlar sağlamıştır. İleri metabolomik teknolojiler, ATI sonuçlarıyla bağlantılı biyobelirteçlerin tanımlanmasını kolaylaştırmış ve belirli metabolitlerin yaralanma ilerlemesi ve iyileşmesini nasıl etkilediğine dair içgörüler sağlamıştır.

Metabolit profilleme ve metabolik yolların analizi, yaralanma ile ilişkili biyobelirteçleri ve yolları tanımlamada güçlü bir yaklaşımhaline gelmiştir 20,21. Mendel randomizasyonu (MR), geleneksel epidemiyolojik çalışmalarda yaygın olan karıştırıcı önyargıları ele almak için genetik varyantları araçsal değişkenler (IV) olarak kullanan sağlam bir nedensel çıkarımyöntemidir 22,23,24,25,26,27. MR, plazma metabolitleri gibi maruziyetler ile ATI gibi sonuçlar arasındaki nedensel ilişkileri incelemek için özellikle faydalıdır. Geleneksel gözlemsel çalışmaların aksine, ki bunlar karıştırıcı ve ters nedenselliğe duyarlıdır, MR genetik varyantları IV olarak kullanarak daha güçlü nedensel çıkarımlar sağlar. Plazma metabolitlerinin tendon sağlığını nasıl etkilediğine dair daha derin bir anlayış, terapötik stratejilerin ilerletilmesi ve iyileşme sonuçlarının iyileştirilmesi için gereklidir.

Bu gelişmeler üzerine inşa edilen çalışma, ATI'de plazma metabolitlerinin nedensel rolünü MR kullanarak incelemektedir. Metabolit seviyeleriyle ilişkili genetik varyasyonlar, ATI'nin ilerlemesi ve iyileşmesiyle bağlantılı spesifik metabolitleri belirlemek için analiz edilmiştir. Ayrıca, 5,6-dihidrotimin (Dih) ve hidroksiasparagin (Hyd) gibi aday metabolitler, ATI'nin gidişi ve iyileşmesi üzerindeki etkilerini açıklamak için hayvan modellerinde deneysel olarak doğrulandı.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Etik onay ve katılım onayı

Tüm hayvan deney tasarımları, Ningxia Eyaleti Laboratuvar Hayvan Yönetimi Önlemlerine sıkı sıkıya uyarak yürütüldü ve Ningxia Tıp Üniversitesi Ningxia Hui Özerk Bölgesi Halk Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylandı.

Çalışma Tasarımı

Bu çalışma, 1.400 plazma metaboliti ile ATI arasındaki nedensel ilişkileri iki örneklemli MR metodolojisi kullanarak incelemiştir. IV'lerin nedensel çıkarımda geçerliliğini sağlamak için üç kritik varsayım sağlanmalıdır: (1) genetik varyasyon doğrudan ilgi gören maruziyetle ilişkilidir; (2) genetik varyasyon, maruziyet ile sonuç arasındaki potansiyel karıştırıcı faktörlerle karıştırılmaz; ve (3) genetik varyasyon, sonucu yalnızca maruziyet yoluyla etkiler, alternatif yollarla değil.

ATI için GWAS veri kaynakları

ATI'deki Genom Çapında İlişki Çalışması (GWAS) verileri, özellikle ebi-a-GCST90018895 veri seti kullanılarak IEU-OpenGWAS projesinden (https://gwas.mrcieu.ac.uk/) alınmıştır. GWAS analizi, 7.746 vaka ve 349.912 kontrol grubundan oluşan 357.658 Avrupa kökenli bireyi kapsıyordu. Kalite kontrol prosedürlerinin ardından toplam 19.072.056 tek nükleotid polimorfizmi (SNP) tespit edildi. Kalite kontrol prosedürleri, az allel sıklığına sahip SNP'lerin <0.01, Hardy-Weinberg denge P<1×10-⁶ ve genotip çağrı oranının <0.95 olarak alınmasını içeriyordu. Popülasyon tabakalaşması ana bileşen analiziyle değerlendirildi ve genomik enflasyon faktörü (λ) sistematik önyargıyı değerlendirmek için hesaplandı.

Plazma metabolitleri için GWAS veri kaynakları

Exposure Factors veri seti, GWAS veritabanında kataloglanmış olarak 1.400 plazma metaboliti için GWAS verilerini içermektedir; bunlar 1.091 metabolit seviyesi ve 309 metabolit oranından oluşmaktadır (https://www.ebi.ac.uk/gwas/studies/GCST90199621-90201020). MR analizleri yalnızca Avrupa kökenli bireylerle sınırlıydı. Veri seti hakkında ayrıntılı bilgiler Ek Materyaller, Tablo S1'de verilmiştir.

IV Seçimi

IV'lerin tanımlanmasında, plazma metabolitiyle ilişkili 19.072.056 SNP'nin istatistiksel anlamlılık eşiği P < 1 × 10-5 olarak belirlendi. Analizlerin bağımsızlığını sağlamak için, SNP'ler r2 = 0.001 ve kilobaz (kb) = 10.000 eşikleri kullanılarak birleştirildi; bu eşikler r2 > 0.001 ve kb < 10.000 ile 19.037.213 SNP hariç tutularak potansiyel Bağlantı Dengesizliği (LD) etkilerini ortadan kaldırdı. F-istatistiksel değerleri < 10'a sahip SNP'ler, yüksek heterojenlikleri nedeniyle ek analizlerden hariç tutulurken, kriterleri karşılayan 34843 SNP geçerli IV olarak korundu.

Hayvanlar ve deneysel tasarım

Tüm hayvan deneyleri, Ningxia Eyaleti Laboratuvar Hayvan Yönetimi Önlemlerine sıkı sıkıya uyarak yapıldı ve Ningxia Hui Özerk Bölgesi Halk Hastanesi Etik Komitesi, Ningxia Tıp Üniversitesi tarafından onaylandı. Erkek BALB/c fareleri (8 haftalık, SPF derecesi) Pekin Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.'den (Pekin, Çin) satın alındı. Fareler, kontrollü bir ortamda bir hafta boyunca (sıcaklık 23 ± 1°C, nem %60 ± 10%) adapte edildi; standart yiyecek ve suya ücretsiz erişim sağlandı ve 12 saat ışık/12 saat karanlık döngü uygulandı. Alışma sonrası bir fare tendon yaralanması modeli oluşturuldu. Uzunlamasına bir cilt kesisinin ardından sol Aşil tendonu açığa çıkarıldı ve tendonun ortasında mikrocerrahi makasla standart tam kalınlıkta enine kesim yapıldı. Tendon, hemen stereomikroskop altında 6-0 emilemez dikişlerle onarıldı. Ameliyattan hemen sonra, ATI fare modelinin başarılı şekilde kurulduğunu doğrulamak için röntgen görüntülemesi yapıldı. Aynı zamanda, kontrol grubu için aynı anestezik koşullarda boş kontrol28 olarak kullanılmak üzere röntgen görüntüleri alındı. Tüm işlemler genel anestezi altında incelenerek intraperitoneal pentobarbital sodyum (50 mg·kg-1) enjeksiyonu ile gerçekleştirildi ve ameliyat sonrası analjezi, her 12 saatte bir 48saat 29 boyunca buprenorfin (deri altı 0,05 mg·kg-1) verildi. Modelin başarılı bir şekilde indüklenmesinden sonra fareler rastgele olarak aşağıdaki gruplara ayrıldı: düşük (10 mg·kg-1, LD-Hyd), orta (30 mg·kg-1, MD-Hyd) ve yüksek (50 mg·kg-1, HD-Hyd) dozlarda Dih alan kontrol, model ve tedavi grupları. Örneklem büyüklüğü hesaplaması: Metabolit tedavisiyle iyileşme puanlarında %40 iyileşme gösteren ön verilere (SD = %15) dayanarak, grup başına n = 6 farenin bu farkı tespit etmek için %80 güç sağlayacağı belirlendi α = 0.05 (iki kuyruklu). Randomizasyon, grup dağılımı kör edilmiş bir araştırmacı tarafından bilgisayar tarafından oluşturulmuş rastgele sayılarla gerçekleştirildi. Deneysel prosedürler ve sonuç değerlendirmeleri, grup atamalarına kör olan araştırmacılartarafından yürütüldü 30.

Hematoksilin ve Eozin (HE) boyama

Tedaviden sonraki 7. günde, fareler intraperitoneal pentobarbital sodyum (100 mg·kg-1) enjeksiyonuyla derin anestezi altında ötenazi edildi; böylece doku toplanmadan önce reflekslerin tamamen kaybı oldu. Yaralı Aşil tendon dokusu, çevresindeki yumuşak dokunun küçük bir kısmı da dahil olmak üzere, dikkatlice toplanıp işlendi. Aşil tendonunun ortasında 15mm 2 parça bir deri kesildi. Deri örnekleri oda sıcaklığında %4 paraformaldehit çözeltisine 48 saat sabitlendi, ardından dehidrasyon, parafin gömülmesi ve 5 μm kesitlenme yapıldı. Yara derisinin yapısal özellikleri, granülasyon dokusu oluşumu ve inflamatuar hücre infiltrasyonu H&E boyama kullanılarak değerlendirildi. Histolojik değerlendirme için, kesitler ksilenle deparaffinize edildi (2 × 10 dakika), derecelendirilmiş etanol ile yeniden hidlendirildi (her biri 5 dakika) ve damıtılmış suyla durulandı. Slaytlar 5 dakika boyunca Harris hematoksiliniyle boyandı, akan musluk suyunda 5 dakika durulandı, 10 saniye boyunca %1 asit alkolle diferentasyon yapıldı ve %0,2 amonyak suyla 30 saniye mavi boyandı. Yıkamadan sonra, bölümler %0,5 eosin ile 2 dakika boyunca karşı boyandı, ardından kurutma, temizleme ve montaj yapıldı. Histolojik değerlendirme güvenilirliği: Ölçüm doğruluğunu sağlamak için, rastgele seçilmiş örneklerin %20'si iki kör gözlemci tarafından bağımsız olarak puanlandı. Derecelendirme aracı güvenilirliği sınıf içi korelasyon katsayısı (ICC) kullanılarak değerlendirildi. Kolajen organizasyonu için ICC 0,89 (%95 GA: 0,81-0,94), doku dejenerasyonu için 0,92 (%95 GA: 0,86-0,96) ve inflamatuar hücre infiltrasyonu için 0,87 (%95 GA: 0,78-0,93) olup, mükemmel güvenilirlik göstermektedir. Dereceleyici içi güvenilirlik, bir gözlemcinin iki haftalık aralık içinde örneklerin %15'ini yeniden puanlaması ile değerlendirildi ve tümparametreler 31 için ICC değerleri > 0,85 çıktı.

Western Blot analizi

Protein ifadesi Western Blot ile analiz edildi. Protein miktarı BCA protein konsantrasyon test kiti kullanılarak gerçekleştirildi. Eşit miktarda protein, %10 sodyum dodekil sülfat-poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile ayrılarak nitroselüloz membranına aktarıldı. Zar, oda sıcaklığında %0,1 Tween-20 içeren Tris tamponlu tuzlu sümle %5 yağsız sütle 1 saat boyunca tıkandı. Zarlar gece boyunca 4°C'de VEGFA (1:1000, ab46154), TGF-β1 (1:1000, 21898-1-AP), IL-6 (1:1000, 26404-1-AP) ve TNF-α (1:1000, 17590-1-AP) için primer antikorlarla inkubasyon edildi. PBS ile üç yıkamadan sonra, zarlar oda sıcaklığında 90 dakika boyunca ikincil antikorlarla (1:5000) kuluçka edildi. Protein bantları, üreticinin protokolünü takip ederek ECL kemilyüminesans substrat kiti kullanılarak görselleştirildi (ayrıntılar için Malzemeler Tablosu'na bakınız) ve ImageJ yazılımı (sürüm 1.8; Ulusal Sağlık Enstitüleri). GAPDH (10494-1-AP) yükleme kontrolü olarak kullanıldı.

İstatistiksel analiz

İstatistiksel analizler R Studio yazılımı kullanılarak gerçekleştirildi. TwoSampleMR ve ieugwasr R paketleri, maruz kalma verilerini çıkarmak ve geçerli IV'leri ekranlamak için kullanıldı; bunlara kümelenme (r² < 0.001, pencere boyutu = 10.000 kb), allel uyumlaştırması ve F-istatistiksel hesaplama (F = β²_exposure/SE²_exposure) dahil. MR ve ters MR analizleri için, sağlam nedensel çıkarım ve hassasiyet testini kolaylaştıran VariantAnnotation, gwasglue ve TwoSampleMR paketlerini kullandık. Plazma metabolitiyle ilgili özellikleri incelemek için iki örnekli bir MR çalışması yapıldı. Beş farklı analitik yaklaşım kullanıldı: Ters Varyans Ağırlıklandırma (IVW), MR-Egger, Ağırlıklı Medyan (WM), Basit Mod ve Ağırlıklı Mod. Birincil sonuçlar IVW yöntemiyle belirlendi ve istatistiksel anlamlılık P < 0.01 olarak belirlendi. IVW yöntemi, varyasyonun etkisini en aza indirmek için ağırlıklar atar ve böylece daha hassas etki tahminleri sağlar. MR-Egger regresyonu, pleiotropiyi (genlerin birden fazla özelliği etkilediği fenomen) değerlendirmek için kullanıldı; yatay pleiotropi kesimin P-değeri ile (P > 0.05) ve heterojenlik IVW yöntemiyle MR-Egger'in Q istatistiği kullanılarak test edildi. P 0.05 > belirgin bir heterojenlik gözlemlenmedi. Benjamini-Hochberg yanlış keşf oranı (FDR) yöntemiyle çoklu test düzeltmesi uygulandı ve FDR < 0.05 anlamlı olarak değerlendirildi. Heterojenlik, Cochran'ın Q istatistiği ve I2 istatistiği kullanılarak nicelendirildi; burada I2 > %50 önemli heterojenlik gösterdi. I2 değerleri için, Ioannidis ve ark. tarafından tanımlanan yöntemle %95 güven aralıkları hesaplandı. Duyarlılık analizleri, her SNP'nin sıralı olarak çıkarılarak bireysel varyantların genel sonuçlar üzerindeki etkisini değerlendirerek gerçekleştirildi.

Ölçüm güvenilirliğini değerlendirmek için, sınıf içi korelasyon katsayıları (ICC) kullanılarak temel sonuç ölçütleri (WB niceltmesi ve histolojik puanlama) üzerinde test-tekrar test analizleri yapıldı. ICC, Western Blot (WB) niceliklendirme ve histolojik puanlamanın derecelendirici ve dereceleme içi güvenilirliğini değerlendirmek için kullanıldı. Kriterler şu şekilde yorumlandı: 0,50'nin altında (zayıf), 0,50 ile 0,75 arasında (orta), 0,75 ile 0,90 arasında (iyi) ve 0,90'ın üzerinde (mükemmel)32. Üç bağımsız araştırmacı, aynı örneklemleri iki zaman noktasında, bir hafta arayla körü körüne değerlendirdi. IL-6, TNF-α, VEGFA ve TGF-β'nin Western blot niclemi için ICC'ler 0.87 ile 0.93 arasında değişiyordu ve bu da mükemmel güvenilirliği gösteriyor. Histolojik puanlama için ICC'ler kollajen organizasyonu için 0,85, neovaskülarizasiya değerlendirmesi için ise 0,82 idi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

1.400 plazma metaboliti ile ATI'ler arasındaki nedensel ilişki

ATI üzerindeki nedensel etkilerini değerlendirmek için 1.400 plazma metabolitinin kapsamlı bir MR analizi yapıldı. Birincil analiz, ATI'nin ilerlemesini ve iyileşmesini önemli ölçüde etkileyen metabolitleri belirlemek için LD ve potansiyel karıştırıcılar için sıkı kontrollerle IVW yaklaşımını kullandı. Şekil 1 , 144 plazma metaboliti ile ATI arasındaki nedensel ilişkileri göstermekte; ...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışma, 1.400 plazma metaboliti ile ATI arasındaki nedensel ilişkileri incelemek için kapsamlı bir MR analizi gerçekleştirdi. On dokuz plazma metaboliti ATI ilerlemesi ve iyileşmesiyle anlamlı ilişkili olarak tanımlanmış, Dih ve Hyd ise ATI sonuçlarını etkileyen ana faktörler olarak ortaya çıkmıştır. Sonraki in vivo deneyler, bu metabolitlerin tendon iyileşmesini desteklemedeki faydalı rollerini doğruladı. Dih ve Hyd ile tedavi, pro-inflamatuar sitokinler IL-6 ve TNF-α'nin d...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar rekabet eden çıkarlar belirtmemektedir.

Teşekkürler

Diyabetik Ayakta Kronik Ülserlerin Bağırsak Florası Değerlendirmesi ve Adımlı Tedavisi Üzerine Klinik Uygulama Araştırmaları, Yinchuan Bilim ve Teknoloji İnovasyon Projesi (2024SF005). Ningxia Key Araştırma ve Geliştirme Programı kapsamında Çeşitli Cerrahi Yöntemlerin Peritendal Doku Kan Teminiği ve Akut Kapalı Aşil Tendonunun Biyomekanik Onarımına Etkileri üzerine Uygulama Araştırması (2019BEG3036).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
5,6-DihidrotiminReaktif696-04-8Reaktif
BCA Protein Test KitiReaktifP0012Reaktif
ECL Kemimilüminesans Substrat KitiReaktifP0018SReaktif
GAPDH AntikorAntikor10494-1-APAntikor
Hematoksilin ve Eozin Boyama KitiReaktifG1120Reaktif
HidroksiyasparaginReaktifH1126Reaktif
IL-6 AntikorAntikor26404-1-APAntikor
ImageJYazılımsürüm 1.8Yazılım
Nitroselüloz ZarıTüketim MalzemesiHATF08130Tüketim Malzemesi
ParaformaldehitReaktifP0099-3LReaktif
RStudioYazılımsürüm 4.5.2Yazılım
SDS-PAGE Jel Hazırlık KitiReaktifP0012ACReaktif
Sodyum PentobarbitalAnestezik200-323-9Anestezik
TGF-β 1 AntikorAntikor21898-1-APAntikor
TNF-α AntikorAntikor17590-1-APAntikor
VEGFA AntibodyAntikorAB46154Antikor
X-ışını sistemiEnstrümanMX-20Enstrüman

Kaynaklar

  1. Kvist, M. Achilles tendon injuries in athletes. Sports Med. 18 (3), 173-201 (1994).
  2. Järvinen, T. A., et al. Achilles tendon injuries. Curr Opin Rheumatol. 13 (2), 150-155 (2001).
  3. Barfod, K. W. Achilles tendon rupture; assessment of nonoperative treatment. Dan Med J. 61 (4), B4837(2014).
  4. Buddecke, D. Jr Acute Achilles Tendon Ruptures. Clin Podiatr Med Surg. 38 (2), 201-226 (2021).
  5. Bullock, M., Pierson, Z. Achilles Tendon Rupture. Clin Podiatr Med Surg. 41 (3), 535-549 (2024).
  6. Oliva, F., et al. Influence of Exercise on Musculoskeletal Disorders Associated with Gut Microbiota: A Narrative Review. MLTJ. 13 (1), (2023).
  7. Caldwell, J. E., Vosseller, J. T. Maximizing Return to Sports After Achilles Tendon Rupture in Athletes. Foot Ankle Clin. 24 (3), (2019).
  8. King, C. M., Vartivarian, M. Achilles Tendon Rupture Repair: Simple to Complex. Clin Podiatr Med Surg. 40 (1), 75-96 (2023).
  9. Kraeutler, M. J., Purcell, J. M., Hunt, K. J. Chronic Achilles Tendon Ruptures. Foot Ankle Int. 38 (8), 921-929 (2017).
  10. Vascellari, A., et al. Orthobiologics Injection Therapies in the Treatment of Muscle and Tendon Disorders in Athletes: Fact or Fake. MLTJ. 14 (2), (2024).
  11. Winnicki, K., Ochała-Kłos, A., Rutowicz, B., Pękala, P. A., Tomaszewski, K. A. Functional anatomy, histology and biomechanics of the human Achilles tendon - A comprehensive review. Ann Anat. 229, 151461(2020).
  12. Strom, A. C., Casillas, M. M. Achilles tendon rehabilitation. Foot Ankle Clin. 14 (4), 773-782 (2009).
  13. Sun, J. Y., Li, C., Du, F. Y. Adenylate cyclase activates the cAMP signalling pathway to enhance platelet-rich plasma-treated Achilles tendon disease,a theoretical bioinformatics-based study. World Journal of Orthopedics. 15 (2), 192-200 (2024).
  14. Restuccia, G., Varchetta, G. E. Platelet rich plasma (PRP) in the surgical treatment of Haglund's syndrome: the use of PRP membranes as an intra-operative local adjuvant. medicinski glasnik. 21 (1), 196-202 (2024).
  15. Wang, K., Cheng, L., He, B. Therapeutic effects of asperosaponin VI in rabbit tendon disease. Regen Ther. 20, 1-8 (2022).
  16. Shen, H., Lane, R. A. Extracellular Vesicles From Primed Adipose-Derived Stem Cells Enhance Achilles Tendon Repair by Reducing Inflammation and Promoting Intrinsic Healing. Stem Cells. 41 (6), 617-627 (2023).
  17. Bisciotti, G. N., et al. Achilles Tendon Repair after Tenorraphy Imaging and the Doughnut Metaphor. Int J Environ Res Public Health. 20 (11), (2023).
  18. Roh, C. Metabolomics in Radiation-Induced Biological Dosimetry: A Mini-Review and a Polyamine Study. Biomolecules. 8 (2), (2018).
  19. Malinowska, J. M., et al. Derivation of metabolic point of departure using high-throughput in vitro metabolomics: investigating the importance of sampling time points on benchmark concentration values in the HepaRG cell line. Arch Toxicol. 97 (3), 721-735 (2023).
  20. He, L., et al. Causal Associations of Obesity With Achilles Tendinopathy: A Two-Sample Mendelian Randomization Study. Front Endocrinol (Lausanne). 13, 902142(2022).
  21. Koike, Y., et al. Genetic insights into ossification of the posterior longitudinal ligament of the spine. Elife. 12, (2023).
  22. Birney, E. Mendelian Randomization. Cold Spring Harb Perspect Med. 12 (4), (2022).
  23. Burgess, S., Thompson, S. G. Interpreting findings from Mendelian randomization using the MR-Egger method. Eur J Epidemiol. 32 (5), 377-389 (2017).
  24. Georgakis, M. K., Gill, D. Mendelian Randomization Studies in Stroke: Exploration of Risk Factors and Drug Targets With Human Genetic Data. Stroke. 52 (9), 2992-3003 (2021).
  25. Ho, J., Mak, C. C. H., Sharma, V., To, K., Khan, W. Mendelian Randomization Studies of Lifestyle-Related Risk Factors for Osteoarthritis: A PRISMA Review and Meta-Analysis. Int J Mol Sci. 23 (19), (2022).
  26. Larsson, S. C., Butterworth, A. S., Burgess, S. Mendelian randomization for cardiovascular diseases: principles and applications. Eur Heart J. 44 (47), 4913-4924 (2023).
  27. Sekula, P., Del Greco, M. F., Pattaro, C., Köttgen, A. Mendelian Randomization as an Approach to Assess Causality Using Observational Data. J Am Soc Nephrol. 27 (11), 3253-3265 (2016).
  28. Zhao, X., Wang, Q., Wang, W., Lu, S. Increased neutrophil extracellular traps caused by diet-induced obesity delay fracture healing. Faseb j. 38 (20), e70126(2024).
  29. Lin, K., et al. Exosomal miR-212-5p promotes tendon repair via targeting FOXO1 to activate PP1A/YAP1 signaling. Commun Biol. 8 (1), 1798(2025).
  30. Migliorini, F., et al. Management of transient bone osteoporosis: a systematic review. Br Med Bull. 147 (1), 79-89 (2023).
  31. Napoli, R., et al. Cross Cultural Adaptation and Multi Centric Validation of The Italian Version of The Tegner Activity Scale. Muscle Ligaments Tendons J. , (2023).
  32. Koo, T. K., Li, M. Y. A Guideline of Selecting and Reporting Intraclass Correlation Coefficients for Reliability Research. J Chiropr Med. 15 (2), 155-163 (2016).
  33. Hafez, A. E., Ismail, F. M., Abdelhakeem, M. A., Ragaee, S., Soliman, S. A. Musculoskeletal Ultrasound Changes in Chronic Plantar Fascia after Treatment with Platelet Rich Plasma Compared to Steroid. Muscle Ligaments Tendons J. 13 (01), 126(2023).
  34. Xiangyang, Y., et al. Sirtuin1 mitigation of calcium oxalate nephropathy via enhancing itaconate abundance through reduction of histone trimethylation. Clin Transl Med. 15 (8), (2025).
  35. Roland, K., et al. Ceramides in cardiovascular disease: emerging role as independent risk predictors and novel therapeutic targets. Cardiovasc Res. 121 (9), (2025).
  36. Kathryn, A. M., Bernard, D. K., Anna, N. Circulating ceramides as biomarkers of cardiovascular disease: Evidence from phenotypic and genomic studies. Atherosclerosis. 327 (0), (2021).
  37. Kuliś, S., Pietraszewski, P., Callegari, B. Characteristics of Post-Exercise Lower Limb Muscle Tremor Among Speed Skaters. Sensors (Basel). 25 (14), (2025).
  38. Tuniyazi, M., et al. Changes of microbial and metabolome of the equine hindgut during oligofructose-induced laminitis. BMC Vet Res. 17 (1), 11(2021).
  39. Dobritzsch, D., et al. β-Ureidopropionase deficiency due to novel and rare UPB1 mutations affecting pre-mRNA splicing and protein structural integrity and catalytic activity. Mol Genet Metab. 136 (3), 177-185 (2022).
  40. Nakajima, Y., et al. Dihydropyrimidinase deficiency in four East Asian patients due to novel and rare DPYS mutations affecting protein structural integrity and catalytic activity. Mol Genet Metab. 122 (4), 216-222 (2017).
  41. Hirano, M., et al. Mitochondrial neurogastrointestinal encephalomyopathy (MNGIE): Position paper on diagnosis, prognosis, and treatment by the MNGIE International Network. J Inherit Metab Dis. 44 (2), 376-387 (2021).
  42. Mukherjee, A., et al. Adipocytes reprogram cancer cell metabolism by diverting glucose towards glycerol-3-phosphate thereby promoting metastasis. Nat Metab. 5 (9), 1563-1577 (2023).
  43. Tighanimine, K., et al. A homoeostatic switch causing glycerol-3-phosphate and phosphoethanolamine accumulation triggers senescence by rewiring lipid metabolism. Nat Metab. 6 (2), 323-342 (2024).
  44. Blackwell, L. F., Cooke, D. G., Brown, S. The Use of Estrone-3-Glucuronide and Pregnanediol-3-Glucuronide Excretion Rates to Navigate the Continuum of Ovarian Activity. Front Public Health. 6, 153(2018).
  45. Chen, J., et al. Quantitation of serum pregnanediol-3-glucuronide level in different endocrine statuses by LC-MS/MS. J Pharm Biomed Anal. 184, 113171(2020).
  46. Usala, S. J., Alliende, M. E., Trindade, A. A. Algorithms with Area under the Curve for Daily Urinary Estrone-3-Glucuronide and Pregnanediol-3-Glucuronide to Signal the Transition to the Luteal Phase. Medicina (Kaunas). 58 (1), (2022).
  47. Feng, J., Huang, Z., Cui, C., Zhao, M., Feng, Y. Synthesis, taste characteristics and taste mechanism of N-lactoyl leucine from soy sauce using sensory analysis and UPLC-MS/MS. Food Chem. 454, 139670(2024).
  48. Fernandes Silva, L., Hokkanen, J., Vangipurapu, J., Oravilahti, A., Laakso, M. Metabolites as Risk Factors for Diabetic Retinopathy in Patients With Type 2 Diabetes: A 12-Year Follow-up Study. J Clin Endocrinol Metab. 109 (1), 100-106 (2023).
  49. Ito, T., Tono, M., Kitaura, Y., Hemmi, H., Yoshimura, T. Urinary l-erythro-β-hydroxyasparagine-a novel serine racemase inhibitor and substrate of the Zn2+-dependent d-serine dehydratase. Biosci Rep. 41 (4), (2021).
  50. Xia, Y., et al. N(γ) -Hydroxyasparagine: A Multifunctional Unnatural Amino Acid That is a Good P1 Substrate of Asparaginyl Peptide Ligases. Angew Chem Int Ed Engl. 60 (41), 22207-22211 (2021).
  51. Schmidt, C., et al. Lactoyl leucine and isoleucine are bioavailable alternatives for canonical amino acids in cell culture media. Biotechnol Bioeng. 118 (9), 3395-3408 (2021).
  52. Castro, B. M., Prieto, M., Silva, L. C. Ceramide: a simple sphingolipid with unique biophysical properties. Prog Lipid Res. 54, 53-67 (2014).
  53. Cogolludo, A., Villamor, E., Perez-Vizcaino, F., Moreno, L. Ceramide and Regulation of Vascular Tone. Int J Mol Sci. 20 (2), (2019).
  54. Zhang, J., Wei, L., Tan, H., Pang, W. Gut microbiota and postpartum depression: a Mendelian randomization study. Front Psychiatry. 15, 1282742(2024).
  55. Liu, Y., et al. The risk of Alzheimer's disease and cognitive impairment characteristics in eight mental disorders: A UK Biobank observational study and Mendelian randomization analysis. Alzheimers Dement. 20 (7), 4841-4853 (2024).
  56. Chi, J., et al. Causal effects for neurodegenerative diseases on the risk of myocardial infarction: a two-sample Mendelian randomization study. Aging (Albany NY). 16 (11), 9944-9958 (2024).
  57. Tan, Z., Hong, J., Sun, A., Ding, M., Shen, J. Causal effects of circulating lipids and lipid-lowering drugs on the risk of urinary stones: a Mendelian randomization study. Front Endocrinol (Lausanne). 14, 1301163(2023).
  58. Kitsios, G. D., Thaler, D. E., Kent, D. M. Potentially large yet uncertain benefits: a meta-analysis of patent foramen ovale closure trials. Stroke. 44 (9), 2640-2643 (2013).
  59. Sung, C. W., et al. Prediction of high-risk emergency department revisits from a machine-learning algorithm: a proof-of-concept study. BMJ Health Care Inform. 31 (1), (2024).
  60. Lidi, L., Jennifer, H., Daniel, J. L., Hui, B. S. Advances of stem cell based-therapeutic approaches for tendon repair. J Orthop Translat. 9 (0), (2018).
  61. Daibang, N., Yiqin, Z., Wang, W., Jianying, Z., James, H. -C. W. Mechanical Overloading Induced-Activation of mTOR Signaling in Tendon Stem/Progenitor Cells Contributes to Tendinopathy Development. Front Cell Dev Biol. 9 (0), (2021).
  62. Mathieu, M., et al. Trigonelline is an NAD(+) precursor that improves muscle function during ageing and is reduced in human sarcopenia. Nat Metab. 6 (3), (2024).
  63. Yoshida, M., Funasaki, H. Optimal Platelet Concentration for The Therapeutic Effect of Autologous Neutrophil-Reduced Platelet Rich Plasma in A Rat Model of Achilles Tendinopathy. Muscles, Ligaments & Tendons Journal (MLTJ). 10 (4), (2020).
  64. Kuan-Ju, C., Li-Cheng, C., Yi-No, K., Chiehfeng, C. Autologous Stem Cell Therapy for Chronic Lower Extremity Wounds: A Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials. Cells. 10 (12), (2021).
  65. Gupta, S., Paliczak, A., Delgado, D. Evidence-based indications of platelet-rich plasma therapy. Expert Rev Hematol. 14 (1), 97-108 (2021).
  66. Impellizzeri, F. M., Bizzini, M. Systematic review and meta-analysis: A primer. International Journal of Sports Physical Therapy. 7 (5), 493-503 (2012).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Doku OnarımıGenetik VerilerAraç DeğişkenlerWestern Blotİnflamasyon BelirteçleriFare Tendon DokusuNedensel İlişkiler
Bize Ulaşın
Kütüphaneye Öner

Gizlilik

Kullanım Koşulları

Politikalar

Telif Hakkı © 2026 MyJoVE Corporation. Tüm hakları saklıdır.