Method Article

Multipl Myeloma Hastalarından Plazmada Karfilzomib Nicelesi için Hızlı LC-MS/MS Yönteminin Geliştirilmesi ve Doğrulanması

DOI:

10.3791/70167

⸱

May 12th, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1College of Traditional Chinese Medicine, Yunnan University of Chinese Medicine, 2Department of Pharmacy, Second Affiliated Hospital of Naval Medical University, 3Department of Rehabilitation, Second Affiliated Hospital of Naval Medical University, 4School of Pharmacy, Shanghai University of Medicine and Health Sciences

* These authors contributed equally

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, insan plazmasında karfilzomibin nicelendirilmesi için hızlı, hassas sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi (LC-MS/MS) yöntemi geliştirmek ve doğrulamayı amaçladı. Tamamen doğrulanmış yöntem, çoklu miyeloma hastalarında terapötik ilaç izlemeyi destekler ve böylece kişiselleştirilmiş doz optimizasyonunu sağlar.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Karfilzomib, ikinci nesil bir proteazom inhibitörü olarak, terapötik ilaç izleme (TDM) gerektirir. Bu çalışma, insan plazmasında karfilzomibin nicelendirilmesi için hassas ve sağlam bir sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi (LC-MS/MS) yöntemi geliştirmek ve doğrulamayı amaçladı. Plazma örnekleri, asetonitril (ACN) ile protein çökeltmesi kullanılarak işlendi. Kromatografik ayrım, 40 °C'de tutulan bir C18 kolonunda (2,1 mm × 100 mm, 3,5 μm) sağlandı; hareketli faz ise ACN ve suda 10 mmol/L amonyum asetat (80:20, v/v) ile 0,35 mL/dakika akış hızında sağlandı. Yöntem, 2.00-1000.00 ng/mL konsantrasyon aralığında mükemmel doğrusal bir performans göstermiştir. Ayrıca, karfilzomib için iyileşme oranları %84,1 ile %93,0 arasında değişen yüksek gün içi ve gün içi hassasiyet ve doğruluk gözlemlendi. Bu doğrulanmış LC-MS/MS yöntemi, multipl miyeloma hastalarından plazmadaki karfilzomib konsantrasyonlarının doğru, verimli ve hassas belirlenmesini sağlar ve böylece karfilzomib bazlı tedavinin optimizasyonunu destekler.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Multipl miyelom (MM), kemik iliği1'de plazma hücrelerinin klonal proliferasyonu ile karakterize edilen hematolojik bir malignitedir. Küresel genelinde en yaygın ikinci hematolojikmaligniteyi temsil eder 2 ve tüm hematolojik kanserlerin yaklaşık %10'unu oluşturur3. Yıllar içinde, proteazom inhibitörlerinin, immünomodülatör ilaçların ve monoklonal antikorların tanıtılması gibi ilaç tedavisindeki gelişmeler, terapötik sonuçların iyileştirilmesine yol açmıştır. Ancak, MM hastalarının önemli bir kısmı (%20-%30), kısa ilerlemesiz sağalma (PFS)4,5 advers reaksiyon (ADR), ilaç direnci ve nüks 6 gibi zorluklarla karşılaşmaya devam etmektedir.

Bortezomib, sınıfının birincisi proteasom inhibitörü7, MM'nin terapötik ortamını dönüştürdü. Etkinliğine rağmen, hastaların çoğunluğu sonunda nüks veya refrakter hastalık geliştirir; genellikle bortezomib direnci 8,9 ve tedavi yanıtı ile sağkalımda azalmaoranları 10,11 ile birlikte olur. Bu zorluklar, MM'de sonuçları iyileştirmek için yenilikçi tedavi yaklaşımlarına acil ihtiyaç olduğunu vurguluyor. FDA tarafından onaylanan ikinci nesil proteasom inhibitörü Karfilzomib, daha stabil bir farmakokinetik profil sunarak şimotripsin benzeri aktivitenin sürekli baskılanmasını ve güçlü antimiyelom etkileri sağlamasını sağlar. Genellikle, bortezomib ve immünomodülatörilaç 1,11 dahil olmak üzere en az iki önceki tedavi hattı almış MM hastaları için endiklenir. Araştırmalar, karfilzomib'in miyelom hücrelerinde bortezomib'e göre daha sağlam proteasom inhibisyonu sağladığını ve bortezomib direnciniaşma yeteneğine sahip olduğunu göstermiştir 12,13.

Biyolojik matrislerde ilaç konsantrasyonlarının nicelendirilmesinde en yaygın kullanılan yöntemler arasında yüksek performanslı sıvı kromatografi-ultraviyole tespit (HPLC-UV), enzimle bağlantılı immünosorbent test (ELISA) ve sıvı kromatografi-tandem kütle spektrometrisi (LC-MS/MS)14 bulunur. HPLC-UV operasyonel sadelik ve düşük maliyet sunsa da, faydası nispeten düşük hassasiyet ve seçicilikle sınırlıdır. Sonuç olarak, hedef analitlerin hassas niceliklemesi, özellikle düşük konsantrasyonlarda veya karmaşık biyolojik matrisler içinde, hâlâ zorlu15. ELISA yüksek hassasiyet gösterir. Ancak, uygulaması uzun bir geliştirme süreci, yüksek kaliteli antikorlara bağımlılık ve örnekteki yapısal olarak benzer bileşiklerle çapraz reaktiviteye karşı duyarlılık gibi çeşitli sınırlamalarla karşı karşıyadır. Bu faktörler topluca testin özgüllüğünütehlikeye atır 16. Buna karşılık, LC-MS/MS olağanüstü seçicilik, üstün hassasiyet ve hızlı analitik verimlilik sunar. Bu avantajlar, onu terapötik ilaç izleme (TDM) ve farmakokinetik araştırmalar için altın standart metodoloji olarakkonumlandırır. Karfilzomib, geniş plazma protein bağlanması, in vivo zayıf stabilitesi ve dar bir terapötik indeks özelliklerine sahiptir. LC-MS/MS teknolojisi, hedef bileşiğin hızlı nicel analizini yapabilir, matris etkisini etkili bir şekilde azaltabilir ve kesin klinik ilaç uygulaması için bilimsel bir temel sağlayabilir.

Karfilzomib'in ilaç maruziyeti seviyesi, terapötik etkisi veADR'leri 18,19 ile yakından ilişkilidir. Karfilzomib'in doza bağlı birözelliği 20 vardır ve vücuttaki dozla birlikte maruziyet seviyesi pozitif olarak artar; bu da terapötik etkisini doğrudan etkileyebilir. Bir çalışma, MM tedavisinde karfilzomibin tam yanıt (CR) oranının %28, çok iyi kısmi yanıt (VGPR) oranının %73 ve genel yanıt oranının (ORR) %93 olduğunu gösterdi. Ayrıca, kontrol grubuna kıyasla karfilzomib ile tedavi edilen hastalarda kardiyotoksisite insidansı anlamlı şekilde artmış, periferik nöropatide ise anlamlı bir değişiklik olmamıştır. Başka bir çalışmada da MM tedavisinde karfilzomibin etkinliği ve güvenliği belirtildi ve karfilzomibin kardiyotoksisite riskini artırırken terapötik etkiyiiyileştirebileceğini doğruladı 22. Bu nedenle, karfilzomibin etkinliği ve ADR'leri maruziyet seviyesiyle ilişkilidir. Bugüne kadar, insan plazmasında karfilzomibin nicelendirilmesi için doğrulanmış çok az LC-MS/MS yöntemi rapor edilmiştir; özellikle titiz biyoanalitik doğrulama kriterlerini karşılayanlar (örneğin FDA yönergeleri). Mevcut çalışmalar ağırlıklı olarak hayvan modellerine veya diğer biyolojik matrislere odaklanmakta olup, MM hastalarında TDM için klinik olarak uygulanabilir testlerde bir boşluk olduğunu vurgulamaktadır.

Bu nedenle, MM hastalarında karfilzomib konsantrasyonlarının optimize edilmesi için hızlı, hassas ve hassas bir test oluşturulması acil bir ihtiyaç vardır; böylece tedavi faydası ve güvenlik profili optimize edilmektedir. Bu çalışmada, insan plazmasında karfilzomibi 3 dakika içinde niceleştirebilen güvenilir bir LC-MS/MS yöntemi geliştirdik ve doğruladık; bu yöntem mükemmel hassasiyet ve tekrarlanabilirlik göstermiştir. MM'de karfilzomib TDM'si için geliştirilen bu yöntem, doz optimizasyonu ve maruziyet-yanıt değerlendirmesini destekler. Kullanıcılar, ilacın plazmadaki istikrarsızlığının farkında olmalıdır; Doğru nicelik belirleme, kan alındıktan sonra 4 saat içinde numune işlenmesini gerektirir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu araştırma protokolü, Deniz Tıp Üniversitesi İkinci Hastanesi (Shanghai Changzheng Hastanesi) Etik Komitesi tarafından onaylandı. Çalışmaya katılan tüm hastalar bilgilendirilmiş onay imzasını imzaladı.

1. LC-MS/MS enstrümantasyonu

  1. Yöntem geliştirme ve örnek analizi yapmak için elektrospray iyonizasyon (ESI) kaynağına sahip üçlü bir quadrupol kütle spektrometresine bağlı ultra-yüksek performanslı sıvı kromatografi (UHPLC) sistemi kullanın.
  2. UHPLC sistemini çevrimiçi bir gazdan çıkarıcı, ikili pompa, otomatik örnekleyici ve sütun fırını içerecek şekilde yapılandırın.
  3. Enstrüman üreticisinin veri toplama yazılımını kullanarak veri toplama ve işleme işlemlerini gerçekleştirin.

2. Sıvı kromatografik koşullar

  1. ZORBAX-SB C18 sütunu (2,1 mm × 100 mm, 3,5 μm) kullanılarak kromatografik ayrım sağlanır.
  2. Kolon sıcaklığını 40 °C'de tutun.
  3. Su içinde %20 10 mmol/L amonyum asetat ve %80 ACN içeren hareketli bir fazla izokratik elülasyon uygulanır.
  4. Akış hızını 0.35 mL/da'ya ayarlayın.
  5. Bu koşullar altında hem analit hem de iç standart (IS) için simetrik zirve şekilleri ve uygun tutma süreleri sağlanmalıdır.
    NOT: Karfilzomib-d8, karfilzomib ile yapısal benzerliği nedeniyle IS olarak seçilmiştir; bu da çıkarma iyileşmesi, kromatografik davranış ve iyonizasyon verimliliğinin karşılaştırılabilir olmasını sağlar.
  6. Toplam çalışma süresini 3.0 dakika olarak ayarlayın.

3. Kütle spektrometrisi koşulları

  1. Kütle spektrometresini negatif ESI modunda çalıştırın.
  2. Kapiler voltajı -6000 V'a ayarlayın.
  3. Azot hem nebulizasyon hem de kurutma gazı olarak kullanın.
  4. Çarpışma gazı olarak yüksek saflıkta azot kullanın, bu basınç 0.2 MPa olur.
  5. Nebulizör basıncını 20 psi olarak tutun.
  6. Kurutma gazını 400 °C'ye ısıtın ve 10 L/dakika akış hızında verin.
  7. Kılıf gazının sıcaklığını 350 °C'ye ayarlayın, deka 12 L/dakika akış hızı olsun.
  8. Çoklu reaksiyon izleme (MRM) modunda veri edinin.
  9. Karfilzomib'in (Şekil 1A) ve IS'nin (Şekil 1B) ürün iyon spektrumlarını edinerek parçalanma desenlerini gösterin.
  10. Ebeveyn iyonu tanımlamak için MS2 Tarama modunu kullanın.
  11. Fragmentor voltajını optimize etmek için MS2 SIM modunu kullanın.
  12. Optimal Çarpışma Enerjisini (CE) belirlemek için Ürün İyonu modunu kullanın.
  13. Karfilzomib ve IS için optimize edilmiş kütle spektrometrisi parametrelerini detaylandırın (Tablo 1).

4. Kalibrasyon ve kalite kontrol örnekleri

  1. 2.0 mg karfilzomibi 2 mL hacimsel şişeye doğru tartarak ve 2 mL metanol (MeOH) içinde çözerek karfilzomib (1.0 mg/mL) stok çözeltisi hazırlayın.
    DIKKAT: MeOH yanıcı ve toksiktir. Ameliyat sırasında, buhar solumasını veya cilt temasını önlemek için bir duman başlıklı ile yapılmalıdır. Eldiven ve göz/yüz koruma gibi uygun kişisel koruyucu ekipman kullanın.
  2. Stok çözeltiyi -80 °C'de sakla.
  3. Stok çözeltinin %10 MeOH ile seri seyreltilmesiyle 100,0 μg/mL, 10,0 μg/mL ve 1,0 μg/mL konsantrasyonları elde edilerek çalışma çözeltileri üretin.
  4. Çalışan çözeltilerle boş plazmayı aşılayarak kalibrasyon standardları oluşturun.
  5. Spikli plazmayı boş plazmayla 1:9 (v/v) oranında seyreltirerek nihai konsantrasyonları 2.0, 5.0, 50.0, 50.0, 200.0, 500.0, 750.0 ve 1000.0 ng/mL elde edin.
  6. Aynı yöntemle kalite kontrol (QC) örneklerini bağımsız olarak 5.0 ng/mL (düşük), 200.0 ng/mL (orta) ve 750.0 ng/mL (yüksek) konsantrasyonlarda hazırla.

5. Numune hazırlama

  1. Plazma örnekleri (100 μL) %4 fosforik asit çözeltisi 20 μL eklenerek önceden tedavi edilir.
    DIKKAT: Fosforik asit aşındırıcıdır. Cilt ve göz teması önlemek için eldiven, güvenlik gözlüğü ve laboratuvar önlüğü takın. Temas durumunda hemen bol miktarda suyla durulayın.
  2. Standart laboratuvar vorteks mikseri kullanılarak örnek maksimum hızda 2 dakika vortex karıştırılır.
  3. 200 μL ACN ekleyin, böylece 200,0 ng/mL konsantrasyonda bir IS çözeltisi içerdiğinden emin olun,karışım 25'e eklenin.
    DİKTİT: ACN yanıcı, uçucu ve toksiktir. Tüm işlemler bir duman davlumbonunda yapılmalı ve ısı kaynaklarından ve alevlerden uzak tutulmalıdır. Eldiven ve göz/yüz koruma gibi uygun kişisel koruyucu ekipman kullanın.
  4. Birleşik karışımı tekrar vortex yaptı.
  5. Karışımı 12.500 ×g sıcaklığında 10 dakika boyunca 4 °C25'te santrifüj yapın.
  6. 100 μL süpernatant toplayın.
  7. 100 μL süpernatantı 100 μL su ile birleştirin.
  8. Ortaya çıkan çözeltiyi cam bir iç ile donatılmış bir HPLC şişesine aktarın.
  9. Analiz için LC-MS/MS sistemine nihai çözeltiden 10 μL enjekte edin.

6. Özgüllük değerlendirmesi

  1. Karfilzomib ve IS'nin yanıtlarını altı farklı boş plazma partisi, IS sivri plazma, alt ölçü limiti (LLOQ) örneği ve gerçek plazma örneklerinde karşılaştırarak özgüllüğü değerlendirin.
  2. Eğer yanıt analitin LLOQ'unun %15'inden ve IS yanıtının %5'inden az ise girişimi kabul edilebilir olarak kabul edilebilir.

7. Doğrusal değerlendirme

  1. Doğrusal olmayı farklı günlerde (en az iki gün) üç kalibrasyon standardı setini analiz ederek değerlendirin.
  2. En az altı kalibrasyon standardına dayalı kalibrasyon eğrileri oluşturmak için ağırlıklı doğrusal en küçük kare regresyon modeli kullanın.
  3. En düşük konsantrasyon standardını LLOQ olarak tanımlayın.
  4. Her standart için geriye dönük hesaplanan konsantrasyonların nominal değerlerinin ± %15'i içinde olmasını ve LLOQ için %20 ± toleransın olmasını zorunlu kılın.

8. Hassasiyet ve doğruluk belirleme

  1. Üç konsantrasyon seviyesinde beş kopya QC örneği ve en az iki farklı günde LLOQ örneğini analiz ederek gün içi ve gün içi hassasiyet ve doğruluk belirleyin.
  2. Hassasiyeti göreli standart sapma (RSD%) olarak ifade etmek için kalite kontrol örnekleri için %15, LLOQ için %20 ≤ ≤ gereklidir.
  3. Doğruluğu göreceli hata olarak (RE%) ifade edin, kalite kontrol örnekleri için %±15, LLOQ için %20 ± içinde olması gerekir.

9. Geri kazanma ve matris etkisinin belirlenmesi

  1. Geri kazanımı belirlemek için ekstraksiyondan önce plazmaya karfilzomibin zirve alanını, aynı konsantrasyonda çıkarılmış matrikse karfilzomibin zirve alanını karşılaştırın.
  2. Matris etkisini, çıkarılan matrise spiklenmiş karfilzomibin zirve alanını, aynı konsantrasyonda temiz bir çözeltide karfilzomibin zirve alanı ile karşılaştırarak değerlendirin.
  3. Matris etki faktörünün RSD% oranı %15'ten küçükse, boş plazma matriksinin analit sinyali üzerindeki tutarlı etkisini gösterin.

10. Devreden aktarma değerlendirmesi

  1. En yüksek kalibrasyon standardını takip ederek hemen boş bir numune enjekte ederek önceki enjeksiyondan kalan herhangi bir analiz sinyalini tespit edin.
  2. Boş örnekteki karfilzomib yanıtı LLOQ'un %20'sinden ve IS yanıtının %5'inden az ise, aktarma kabul edilebilir olarak kabul edilebilir olarak değerlendirin.

11. Sulandırma etkisi değerlendirmesi

  1. Sürünme etkisini, hassas plazma konsantrasyonlarını (ULOQ) üst sınırı aşan sivri plazma örneklerini boş plazma ile seyreltirerek konsantrasyonu kalibrasyon aralığına getirerek değerlendirin.
  2. Ölçülen konsantrasyonu nominal konsantrasyonla karşılaştırın.

12. Stabilite değerlendirmesi

  1. Farklı depolama koşullarında üç konsantrasyon seviyesinde kalite kontrol örneklerini analiz ederek stabiliteyi değerlendirin.
  2. QC örneklerini oda sıcaklığında saklayıp 6 saat sonra analiz edin.
  3. İşlenen örnekleri otomatik numune cihazında depolayın ve 0, 2, 4 ve 6 saat içinde analiz edin.
  4. Kalite kontrol örneklerini −20 °C ve oda sıcaklığında dönüşümlü olarak üç donma-erime döngüsüne tabi tutun, ardından analiz yapın.
  5. Kalite kontrol örneklerini −80 °C'de iki ay boyunca saklayın, ardından analiz edin.
  6. Ölçülen konsantrasyonları nominal değerlerle karşılaştırın ve sapmaların %15 (RE%) ±içinde olduğunu doğrulayın.

13. Hasta kaydı ve örnek toplama

  1. Tüm hastalardan yazılı bilgilendirilmiş onay alın.
  2. MM hastalarını kaydedin ve karfilzomib ile tedavi edin.
  3. İlaç uygulandıktan hemen sonra kan örnekleri alın (30 dakika boyunca IV infüzyon).
  4. EDTA-3K tüplerinde toplanan kan örneklerini 4500 ×g sıcaklıkta 4 °C'de 10 dakika boyunca santrifüj ederek plazma örnekleri alın.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

LC-MS/MS optimizasyonu

Karfilzomibin tespitini optimize etmek için, analitin yanıt değerleri hem pozitif hem de negatif iyonizasyon modlarında karşılaştırıldı. Negatif iyonlaşma modu, karfilzomib için pozitif iyonizasyon modundan daha yüksek yanıt verdi ve bu nedenle sonraki analizler için seçildi. C8, C18 ve T3-C18 sütunlarının performansını karşılaştırarak en uygun olanı seçtik. C18 kolonu, karfilz...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Geleneksel HPLC-UV ve ELISA yöntemlerinin aksine, LC-MS/MS olağanüstü seçicilik, hassasiyet ve hız sunarak seleflerinin sınırlamalarını etkili bir şekilde ele almaktadır. Bu avantajlar, özellikle TDM ve farmakokinetik araştırmalar için karmaşık biyomatrislerde ilaç analizinde altın standart tekniği olarak rolünü pekiştirmektedir17. İnsan plazmasında karfilzomibi nicelendirmek için bir LC-MS/MS yöntemi geliştirdik ve doğruladık. Bu yöntemin temel pratik avantajları...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar, bilinen bir rekabet eden finansal çıkarları veya diğer çıkar çatışmaları olmadığını belirtirler.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Bethune Hayırseverlik Vakfı: Shining China- Pharmaceutical Research Capacity Building Funding (Z04JKM2023E040), Uluslararası İşbirliği ve Değişim Projeleri (No. 2014DFA33010) ve Şanghay Doğu Yetenek Planı Lider Yetenek Programı (SHSLJRC-TX) tarafından desteklenmiştir

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Asetonitril (ACN)Merck Şirketi (Darmstadt, Almanya)34888LC-MS derecesi
Amonyum asetatMerck Şirketi (Darmstadt, Almanya)9689Analiz saflığı: ≥ 99.0%
Analiz dengesiSartorius (Almanya))Hassasiyet: 0.01 mg
Analitik sütunAgilent Technologies (ABD)Agilent ZORBAX SB-C18, 2.1 & times; 100 mm, 3.5 ve mikro; m
CarfilzomibŞanghay yuanye biyoteknolojisi (Şanghay, Çin)868540-17-4Standart örneklemi analiz edin, saflık %99 >
Carfilzomib-d8Şanghay yuanye biyoteknolojisi (Şanghay, Çin)Standart örneklemi analiz edin, saflık %98 >
Veri toplama yazılımıAgilent Technologies (ABD)Agilent Masshunter veri işleme yazılımı (sürüm 6.0)
Veri analiz yazılımıAgilent Technologies (ABD)Agilent MassHunter nicel analiz yazılımı (sürüm 10.1)
Distile suShenzhen Watsons Damıtılmış Su Şirketi, Ltd (Shenzhen, Çin)LC-MS derecesi
HPLC Şişeleri & EklemelerShanghai Titan Technology Co., Ltd. ((Şanghay, Çin))-
Sıvı kromatografi sistemiAgilent Technologies (ABD)Agilent 1200 serisi, ikili pompalar, çevrimiçi gaz kazandırıcı, otomatik numune alıcı ve kolon sıcaklık kutusu içerir.
Metanol (MeOH)Merck Şirketi (Darmstadt, Almanya)1.06035LC-MS derecesi
MikropipetlerEppendorf (Almanya)Birden fazla ölçüm aralığı (örneğin, 10 & mikro; L, 100 & mikro; L, 200 & mikro; L, 1000 & micro; L)
Ofis & İstatistiksel yazılım-Microsoft Office 365; GraphPad Prism 9.5
Fosforik asitMerck Şirketi (Darmstadt, Almanya)49685Analiz saflığı, %85 ağırlık
Soğutmalı santrifüjEppendorf (Almanya)4& derece derecede santrifüjlenmiş örnekler için; C
Üçlü dörtlü kütle spektrometresiAgilent Technologies (ABD)G6475AAAgilent 1200 serisi, elektrosprey iyonizasyon kaynağı (ESI) ile donatılmıştır
Vortex mikserLabnet  (ABD)S0200Ayarlanabilir hız

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Wu, J., Liu, J. Research progress in proteasome inhibitor resistance to multiple myeloma. Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 46 (8), 900-908 (2021).
  2. Rajkumar, S. V., et al. International myeloma working group updated criteria for the diagnosis of multiple myeloma. Lancet Oncol. 15 (12), e538-e548 (2014).
  3. Mateos, M. V., San Miguel, J. F. Management of multiple myeloma in the newly diagnosed patient. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2017 (1), 498-507 (2017).
  4. Joseph, N. S., Gentili, S., Kaufman, J. L., Lonial, S., Nooka, A. K. High-risk multiple myeloma: Definition and management. Clin Lymphoma Myeloma Leuk. 17s, S80-S87 (2017).
  5. San Miguel, J. F. Introduction to a series of reviews on multiple myeloma. Blood. 125 (20), 3039-3040 (2015).
  6. Rafae, A., Van Rhee, F., Al Hadidi, S. Perspectives on the treatment of multiple myeloma. Oncologist. 29 (3), 200-212 (2024).
  7. Yan, H., et al. Identification of key candidate genes and pathways in multiple myeloma by integrated bioinformatics analysis. J Cell Physiol. 234 (12), 23785-23797 (2019).
  8. Shi, L. L., Zhai, Y. P. Research Progress on Molecular Mechanisms of Resistance to Bortezomib in Multiple Myeloma-Review. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 25 (5), 1576-1579 (2017).
  9. Wang, Y. R., Ma, Y. P. Research Progress on Mechanism of Bortezomib Resistance in Multiple Myeloma. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 31 (5), 1584-1587 (2023).
  10. Callander, N. S., et al. Nccn guidelines® insights: Multiple myeloma, version 3.2022. J Natl Compr Canc Netw. 20 (1), 8-19 (2022).
  11. Kumar, S. K., et al. Risk of progression and survival in multiple myeloma relapsing after therapy with imids and bortezomib: A multicenter international myeloma working group study. Leukemia. 26 (1), 149-157 (2012).
  12. Kuhn, D. J., et al. Potent activity of carfilzomib, a novel, irreversible inhibitor of the ubiquitin-proteasome pathway, against preclinical models of multiple myeloma. Blood. 110 (9), 3281-3290 (2007).
  13. Moreau, P., et al. Subcutaneous versus intravenous administration of bortezomib in patients with relapsed multiple myeloma: A randomised, phase 3, non-inferiority study. Lancet Oncol. 12 (5), 431-440 (2011).
  14. Shah, V. P., et al. Bioanalytical method validation--a revisit with a decade of progress. Pharm Res. 17 (12), 1551-1557 (2000).
  15. Mandal, V., Ajabiya, J., Khan, N., Tekade, R. K., Sengupta, P. Advances and challenges in non-targeted analysis: An insight into sample preparation and detection by liquid chromatography-mass spectrometry. J Chromatogr A. 1737, 465459(2024).
  16. Kizuki, K., et al. Enzyme-linked immunosorbent assays for human tissue kallikrein and analysis of immunoreactive kallikrein in the plasma by them. Adv Exp Med Biol. 247b, 211-216 (1989).
  17. Delguidice, C. E., Ismaiel, O. A., Mylott, W. R., Halquist, M. S. Jr Comparison of methods for quantitative analysis of ranibizumab and bevacizumab in human plasma using various bioanalytical techniques, including microfluidic immunoassay, triple quadrupole, and high-resolution liquid chromatography-tandem mass spectrometry approaches. J Pharm Biomed Anal. 217, 114823(2022).
  18. Fotiou, D., et al. Carfilzomib-associated renal toxicity is common and unpredictable: A comprehensive analysis of 114 multiple myeloma patients. Blood Cancer J. 10 (11), 109(2020).
  19. Mingrone, G., et al. Effects of carfilzomib therapy on left ventricular function in multiple myeloma patients. Front Cardiovasc Med. 8, 645678(2021).
  20. Stewart, A. K., et al. Carfilzomib, lenalidomide, and dexamethasone for relapsed multiple myeloma. N Engl J Med. 372 (2), 142-152 (2015).
  21. Luo, T., Xia, H. L. [efficacy and safety of carfilzomib in the treatment of multiple myeloma：a systematic evaluation]. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi. 27 (6), 1887-1893 (2019).
  22. Nakao, S., et al. Evaluation of cardiac adverse events associated with carfilzomib using a japanese real-world database. Oncology. 100 (1), 60-64 (2022).
  23. Min, J. S., et al. Quantitative determination of carfilzomib in mouse plasma by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study. J Pharm Biomed Anal. 146, 341-346 (2017).
  24. Yang, J., et al. Pharmacokinetics, pharmacodynamics, metabolism, distribution, and excretion of carfilzomib in rats. Drug Metab Dispos. 39 (10), 1873-1882 (2011).
  25. Zhu, X., et al. A simple and rapid lc-ms/ms method for the quantification of nirmatrelvir/ritonavir in plasma of patients with covid-19. Int J Anal Chem. 2024, 6139928(2024).
  26. Kang, J. S., Lee, M. H. Overview of therapeutic drug monitoring. Korean J Intern Med. 24 (1), 1-10 (2009).
  27. Seger, C., Salzmann, L. After another decade: Lc-ms/ms became routine in clinical diagnostics. Clin Biochem. 82, 2-11 (2020).
  28. Mushtaq, A., et al. Efficacy and toxicity profile of carfilzomib based regimens for treatment of multiple myeloma: A systematic review. Crit Rev Oncol Hematol. 125, 1-11 (2018).
  29. Smrdel, L., Locatelli, I., Zver, S., Gobec, M. A systematic review and meta-analysis of carfilzomib-associated thrombocytopenia as an adverse event in patients with multiple myeloma. Ther Adv Hematol. 15, 20406207241292517(2024).
  30. Reichel, A., Lienau, P. Pharmacokinetics in drug discovery: An exposure-centred approach to optimising and predicting drug efficacy and safety. Handb Exp Pharmacol. 232, 235-260 (2016).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Carfilzomib QuantificationLC MS MS MethodPlasma SamplesMultiple MyelomaTherapeutic Drug MonitoringProtein PrecipitationChromatographic SeparationC18 ColumnAmmonium AcetateMethod Validation

Related Articles