Yöntem makalesi

Sare Kardiyak Nakilinde Akut Antikor Aracılı Redaksiyonun Oluşturulması ve Analizi

273 görüntüleme

⸱

DOI:

10.3791/70191

⸱

13 Şubat 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Organ Transplantation Research Institution, Division of Kidney Transplantation, Department of Surgery, The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu çalışma, kalp nakli sonrası akut antikor aracılı reddetme için pratik bir fare modeli oluşturmuştur; bu model, güçlü DSA üretimi, tipik patolojik değişiklikler ve orta derecede allogreft sağlıkla karakterize edilmiştir.

Özet

Kalp nakli alıcılarında allogreft başarısızlığının başlıca nedenlerinden biri antikor aracılı reddasyondur (AMR). Bu nedenle, fare AMR modeli, temel mekanizmalarını çözmek ve yenilikçi tedavilerin geliştirilmesini teşvik etmek için hayati bir araç olarak hizmet eder. Bu çalışmada, alıcı fareler üç gruba ayrıldı: duyarsızlar (NS), önceden duyarlılar (PS) ve siklosporin A tedavisiyle önceden duyarlılaştırılmış (PS + CsA). NS grubunda, ortalama allogreft sağ kalma süresi 6,8 ± 0,7 gün oldu; kalp nakli (BT) sonrası dört gün içinde serum DSA seviyelerinde artış görmedi ve negatif allograft C4d boyama görüldü; bu da akut hücresel reddedilmenin hakim olduğu bir patolojiyi gösterdi. Bu çalışma, BT'den bir hafta önce alıcıları cilt nakli (ST) ile önceden duyarlılaştırarak bağışıklık sistemini önceden aktive ederek akut bir AMR modeli oluşturdu. Bu yaklaşım, 2,8 ± 0,4 günlük kısa bir allogreft sağ kalma, ST sonrası ve BT sonrası DSA-IgG seviyelerinde önemli bir artış ve VT sonrası 12 saat içinde vaskülitin erken patolojik özellikleri ile yaygın C4d birikimiyle başarılı bir şekilde indükte bulundu. Buna rağmen, bu modelin aşırı ciddiyeti daha geniş uygulamasını kısıtlamaktadır. ST'nin indüklediği eşzamanlı T hücresi aktivasyonunu en aza indirmek ve daha spesifik akut AMR modeli oluşturmak için bu çalışma siklosporin A uygulandı. Sonuç olarak, PS + CsA grubu allogreft hayatta kalma süresi 5,2 ± 0,4 gün göstermiştir. Serum DSA-IgG seviyeleri, ST'den sonraki 7. güne kadar anlamlı şekilde yükseldi ve BT sonrası beş gün içinde yüksek kaldı. BT sonrası 2. gün patolojik değerlendirme, anlamlı vaskülit ve C4d birikimini doğruladı; bunlar orta-şiddetli akut AMR için tanı kriterlerini tamamlıyor. Sonuç olarak, bu çalışma CT sonrası akut AMR için son derece pratik ve çevrilebilir bir fare modeli oluşturmuştur; bu model, sağlam DSA üretimi, karakteristik patolojik değişiklikler ve orta derecede allogreft sağlıkla tanımlanmıştır.

Giriş

Kalp nakli (BT), son evre kalp hastalığı için altın standart tedaviolmaya devam etmektedir 1. Ortalama nakil sonrası hayatta kalma süresi artık 13 yılı geçse de, uzun vadeli greft başarısızlığı kaçınılmazdır2. Antikor aracılı reddetme (AMR), CT3 sonrası geç greft kaybına büyük katkı sağlar. Çalışmalar, AMR kaynaklı greft kaybı insidansının T hücresi aracılı reddetme nedeniyle neden olanı aştığını ve geç başlangıçlı AMR'de greft eksikliği riskinin erken AMR 4,5'in yaklaşık iki katı olduğunu göstermiştir. Bu nedenle, AMR için erken teşhis ve zamanında müdahale, greftin sağ kalmasını iyileştirmek için kritik öneme sahiptir.

AMR, komplement aktivasyonu, vasküler iltihap ve iskemik yaralanma yoluyla greft yetmezliğine neden olan donör-spesifik antikorlar (DSA) tarafından yönlendirilir 6. DSA'nın vasküler endotelye bağlanması endotel hasarını başlatır, trombozu teşvik eder ve hem akut hem de kronik inflamatuar yanıtları indükler. DSA aracılı yaralanmanın başlıca mekanizmaları, komplemente bağlı sitotoksisite ve antikora bağlı hücresel sitotoksisiteyollarını içerir 7. Anti-C5 antikor ekülizumab ve B-hücre azaltıcı ajan rituksimab gibi hedefli tedaviler geliştirilmiş olsa da, geç evre AMR'de klinik sonuçlar tatmin ediciolmaya devam etmektedir 7,8,9. Bu nedenle, hastalık ilerlemesini daha iyi anlamak ve yeni terapötik hedefleri belirlemek için akut hayvan modelleriyle daha fazla mekanik araştırma yapılması şarttır.

Fare vaskülerize heterotopik BT modeli, özellikle iskemi-reperfüzyon yaralanması ve reddetme 10,11,12 konularında KT çalışmak için iyi kurulmuş bir platformdur. Greft fonksiyonu genellikle günlük karın palpasyonu ile kalp atışı yoğunluğu ile izlenir; bu da fonksiyonel durumu yansıtır ve greftyetmezliğini tanımlar. Ancak, geleneksel modeller genellikle nakil sonrası kısa bir süre AMR başlangıcını tespit edemez ve bu nedenle DSA oluşumunu tetiklemek ve akut AMR'yi tetiklemek için ön duyarlılık gerektirir. Ayrıca, fare suşları bağışıklık reaktivitesinde farklılık gösterir; örneğin, C57BL/6 fareleri daha güçlü komplement aktivasyonu gösterirken, BALB/C fareleri Th2 eğilimliyanıtları tercih eder 14,15. Sonuç olarak, hem önce-duyarlılık stratejisi hem de alıcı gerilme seçimi model performansının kritik belirleyicileridir.

Önceki çalışmalarda, bu çalışma ekibi cilt nakli (ST) sonrası böbrek nakli için farklı fare suşları kullanmış, bir AMR modeli oluşturmuş ve özelliklerini analiz ederek önemli bir deneyimtoplamıştır 16,17,18. 2021'de bu ekip, temel araştırmalar için BT'de ST-indüklenen akut AMR fare modeli oluşturdu ve bu model büyük bir kararlılıkgösterdi 19. Allogenik kantransfüzyonu 20 ile nispeten verimsiz ön sensibilizasyon veya daha karmaşık ve zaman alıcı dalak lenfositinfuzyonu 21 gibi yöntemlerin aksine, ST, sağlam, stabil ve daha basit bir duyarlılık protokolü sunar. Bu model, akut AMR nedeniyle serum DSA seviyelerinin ve gözlemlenebilir allogreft yaralanmalarının erken post-transplant tespitini kolaylaştırır ve özellikle akut AMR üzerinde girişimsel çalışmalar için uygundur. Ancak, ST'nin indükettiği akut AMR genellikle şiddetlidir ve kronik yaralanmanın ilerlemesini sıklıkla gizleyen ciddi doku hasarına yol açar. Bu çalışma, bu modun oluşturulmasında kullanılan metodoloji ve prosedürlerin ayrıntılı bir tanımını sunmayı, modelin immünolojik ve patolojik özelliklerini analiz etmeyi ve pratik deneyimi özetlemeyi amaçlamaktadır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm hayvan deneyleri, Guangdong deneysel hayvan yönetimi yönetmelikleri, Helsinki Bildirgesi ve 3Rs ilkelerine sıkı şekilde uygun olarak gerçekleştirildi. Deneysel protokol, Guangzhou Jennio Biotech Co., Ltd. Komitesi tarafından onaylandı (onay numarası JENNIO-IACUC-2024-A027). Erkek Balb/c ve C57BL/6 fareleri (6-8 haftalık, 20-25 g ağırlığında), hepsi özgün patojensiz (SPF) sınıfta, ticari bir kaynaktan elde edilmiştir. Bu çalışmada kullanılan reaktifler ve ekipmanlar Malzeme Tablosu'nda detaylandırılmıştır.

1. Hayvan hazırlığı

  1. SPF sınıfı fareyi uygun hayvan tesisi sistemine yerleştirin.
  2. Fareleri Şekil 1'de tarif edildiği gibi üç deneysel gruba ayırın
    1. Duyarsız grup (NS): BT için bağışçı olarak Balb/c fareleri, alıcı olarak ise C57BL/6 fareleri kullanılır.
    2. Önceden duyarlı grup (PS): ST için Balb/c farelerini donör olarak ve C57BL/6 farelerini alıcı olarak kullanın, ardından bir hafta sonra BT uygulanır.
    3. Önceden duyarlı + siklosporin A grubu (PS + CsA): ST için alıcı olarak Balb/c fareleri, alıcıları olarak C57BL/6 fareleri kullanılır, ardından bir hafta sonra BT uygulanır. ST gününden itibaren alıcı farelere 2 mg/(kg·d) CsA enjeksiyonu yapılarak greft başarısızlığı veya greft örneği toplanana kadar uygulanır.

2. Ameliyat öncesi hazırlık

  1. Donör farelerin ameliyattan önce yiyecek veya sudan mahrum bırakılmadığından, alıcı farelerin 8 saat oruç tutulduğundan ancak sudan mahrum bırakılmadığından emin olun.
  2. Anestezi
    1. Fareyi indüksiyon için anestezi indüksiyon odasına yerleştirin (İzofluran konsantrasyonu: %3-4; Akış hızı: 300-500 mL/dakika) (kurumsal onaylı protokollere göre). Hayvanın tamamen anestezi edilip edilmediğini kontrol etmek için indüksiyon odasını sallayın.
      NOT: Hayvan yan yatağa çevrilir ve tekrar yatağa dönmeye çalışmazsa, bu tam anestezi anlamına gelir.
    2. Cerrahi platformdaki bakım konsantrasyonu ayarlandıktan sonra, fareyi indüksiyon odasından çıkarır, burnunu anestezi maskesine sabitleyin (İzofluran konsantrasyonu: %1,0-%2,5; Akış hızı: 100-200 mL/dakika) ve farenin tamamen anestezi yapıp olmadığını kontrol edin (parmakla pati veya kuyruğu basın; yanıt gelmezse tam anestezi anlamına gelir).

3. ST ile önduyarlılık (2. ve 3. gruplar için)

  1. Donör kuyruk derisi hasadı
    1. Anestezi altındaki donör farelerin kuyruk derisini %75 alkolle dezenfekte edin.
    2. Kuyruğu (distal 1/3'te) kesmek için bir skarpel kullanın, sol elde forsepsle kütüğü sabitleyin ve sağ elinizle neşterle kuyruk damarları arasındaki deriyi keserek alttaki beyaz tendonu ortaya çıkarın. Sonra, kuyruk kemiğini forsepsle sabitleyin, kesideki cildi kıvrımlı forsepslerle sıkıştınız ve dikkatlice çıkarın.
    3. Soyulan deriyi steril buz gibi tuzlu bir fincana yerleştirin, doku aşağıya bakacak şekilde. Daha sonra kullanmak üzere 1,0 cm × 1,0 cm uzunluğunda bir deri parçası kesin.
  2. Alıcı dorsal ST
    1. Anestezi altındaki alıcı farelerin sırt bölgesindeki tüyleri saç makası makinesiyle tıraş edin, %75 alkolle dezenfekte edin ve steril bir perde yerleştirin.
    2. Deriyi kesmek için bir skalpel kullanın, deri kenarlarını dişli forsepsle tutun ve doku makası ile 1,0 cm × 1,0 cm cisiminde bir deri parçası keserek greft yatağını oluşturun.
    3. Donör fare derisi greftini greft yatağına doku yüzü aşağı konumlandırın. Greft kesildikten sonra, donör deriyi alıcı deriye mikroskop altında 8-0 ile dikin Naylon iplik, donör derinin greft yatağına eşit şekilde yerleştirilmesini sağlar.
    4. Yarayı steril bir yapışkan bandajla kapatın ve fare bilinç kazandıktan sonra bir kafese yerleştirin.

4. BT

  1. Donör kalp hasadı
    1. Anestezi altındaki donör farelerin göğsü ve karın tüylerini saç makası makinesiyle tıraş edin, %75 alkolle dezenfekte edin ve steril bir perde yerleştirin.
    2. Alt vena kava'nın üst segmentini açığa çıkaran bir skalpelle orta karın kesisi yapın ve aşağı vena kavaya 1 mL 50 U/mL heparinize soğuk salin (4 °C) enjekte ederek enjekte edin.
    3. Göğüs boşluğunu açmak ve kalbi açmak için doku makası kullanın. Yükselen aortu izole edin ve ilk dalından önce kesin; akciğer arterini izole eder ve ikiye bölünürken kesir; 6-0 travmatik olmayan dikiş kullanarak alt vena kava ve bağ dokusunu akciğer hilum'da birbirine bağla; Ligasyon bölgesindeki distal dokuyu doku makasla kesip kalbi çıkarın.
    4. Toplanan kalbi hızlıca 2 mL hipertonik sitrat adenin (HCA) çözeltisine yerleştirin ve daha sonra kullanmak üzere buz-su karışımında saklayın. Donör fareyi servikal dislokasyon yöntemiyle ötenazi yapın.
  2. Alıcı CT
    1. Anestezi altındaki alıcı farelerin karın tüylerini saç makası makinesiyle tıraş edin, %75 alkolle dezenfekte edin ve steril bir perde yerleştirin.
    2. Dişli forsepsle cildi kaldırın ve doku makası ile xiphoid sürecinden mesane tabanına kadar karın duvarında orta hat kesi yapın. Kesiyi korumak için kesiyin her iki yanına steril, nemli gazlı bez yerleştirin.
    3. Steril pamuk çubukları kullanarak bağırsak halkalarını kesinin sağ tarafına itin ve nemli gazlı bezle sarın. Peritonu kesik bir şekilde disseksiye ettikten sonra, alt vena kava ve karın aortasını açığa çıkarın, bel damarlarını bağlayın ve aort ile vena kavanın distal ve proksimal uçlarına kan akışını durdurmak için damar kelepçesi kullanın.
    4. Mikroskop altında, mikro makasla venöz duvarı yaklaşık 2 mm keserek donör kardiyak pulmoner arterinin çapına uygun şekilde delin; benzer şekilde, arterial duvarı 1-2 mm kesin, donör kardiyak yükselen aortanın çapına uydurun.
    5. Donör kalbi alın ve donör kardiyak pulmoner arter ile alıcının alt vena kavası arasında 12-0 travmatik olmayan dikişler kullanarak uçtan yana anastomoz yapın. Benzer şekilde, donör kalp yükselen aort ile alıcının karın aortu arasında uçtan yana anastomoz yapılabilir (son düğüm bağlanırken, lümenden havayı boşaltmak için tuzlu sin kullanın; anastomoz sırasında donör kalp yüzeyine aralıklı olarak 4 °C tuzlu su damlatarak serinleyebilirsiniz).
    6. Damar kelepçesini serbest bırakın ve kalbe kan akışını geri getirin (koroner arterlerin normal dolması görünür, kalp pembeye döner ve 1-2 dakika içinde atmaya devam eder). Bağırsak halkaları yeniden yerleştirildikten sonra, karın boşluğunu 4-0 naylon dikişlerle kapatın.
      NOT: Ameliyat dışı kanama 0,5 mL'yi aşarsa, sıvı hacmini korumak için normal salin deri altına verin.
    7. Ameliyat sonrası, fareleri izleme için 37 °C'lik bir ısıtma platformuna yerleştirin. Alıcı fare bilinci kazandığında, onu tekrar konut kafesine yerleştirin. Fare ameliyat sonrası normal yeme ve içmeye devam eder.

5. Ameliyat sonrası bakım ve izleme

  1. Genel durum gözlemi
    1. Ameliyattan sonra farenin ağrı durumunu günlük olarak takip edin; iştahın azalması, aktivite azalması, yaranın aşırı yalama veya tırmalanması ya da artan saldırganlık olup olmadıklarını kontrol edin.
    2. Ameliyattan sonra cerrahi yarayı her gün gözlemleyerek kızarıklık, şişlik, söküntü veya irinli enfeksiyon belirtilerini kontrol edin. Gerekirse yarayı temizleyin ve dezenfekte edin.
  2. Kardiyak greft hayatta kalma gözlemi
    1. Nakil edilen kalp atışının gücünü kontrol etmek ve kaydetmek için günlük gözlem ve palpasyon yapın. Gerekirse, fareyi anestezi yapın ve kalp atışını gözlemlemek için bir kesi yapın.
      NOT: Nakil edilen kalbin kalp atışı tamamen durduğunda, greft başarısızlığı olarak kaydedilir ve hayatta kalma süresi not edilir.

6. Ameliyat sonrası değerlendirmeler

  1. DSA seviyesi tespit
    1. NS grubunda, CT sonrası ameliyat sonrası 0, 4 ve 7. günlerde nakil sonrası DSA seviyelerini izlemek için kan örnekleri alınır. PS grubunda, ST'den sonraki 0, 4 ve 7. günlerde ve BT sonrası 1 ve 3. günlerde örnekler toplayarak ön duyarlılık sonrası DSA dinamiklerini değerlendirir. PS+CsA grubunda, ST'den sonraki 0, 4 ve 7. günlerde ve CT sonrası 1, 3 ve 5. günlerde kan toplayarak CsA'nın DSA seviyelerine etkilerini değerlendirin.
    2. Alıcı fareden alınan tüm kan örneğini santrifüj edin ve serumu (2000 x g, 10 dakika, 4 °C) toplayın; Serumu PBS ile 10 kez seyreldin ve donör fare dalak hücreleriyle 37 °C'de 30 dakika kuluçka yapın.
    3. 350 × g ve 4 °C'de 5 dakika boyunca santrifüjlendikten sonra üst malzemeyi atabilirsiniz. Hücreleri 1 mL PBS ile nazikçe pipetleyerek yıkayın ve sonraki santrifüjlemeden sonra bu yıkama adımını iki kez tekrarlayın.
    4. Hücreleri floressein izotiosiyanat (FITC) fare karşıtı IgG antikoru ve fikoeritrin (PE) anti-fare IgM antikoru ile 4 °C'de 1 saat boyunca kuluçka edin.
    5. Hücreleri PBS ile yıkandıktan sonra, onları 5 × 106 /mL konsantrasyonuna yeniden süzülür.
    6. Akış sitometrisi kullanarak iki antikoru ayrı ayrı tespit edin ve alıcı farede DSA seviyelerini (IgG, IgM) değerlendirmek için ortalama floresans yoğunluğunu (MFI) analiz edin (Parametre Ayarları: Analiz için 10.000 olay edinin). Enkaz dışlamak için FSCA ile SSCA karşılaştırmasını kullanın, ardından FSCA ile FSCH kapılarını kullanarak çift tutuşu çıkarabilirsiniz. Negatif bir kontrol ekleyin ve her kanalın voltajını negatif popülasyonu 10 0-10 1 aralığında konumlandıracak şekilde ayarlayın.
  2. Kardiyak greftin histopatolojik muayenesi
    1. Greftleri CT'den sonra 6 saat, 12 saat, 1 gün, 2 gün, 3 gün, 4 gün ve 5 gün sonra toplayın. Toplandıktan sonra, greftleri %4 paraformaldehit ile sabitleyin, rutin olarak parafine yerleştirin, kesin ve hematoksilin-eosin (H&E) ile boyanın. Greftlerin patolojik değişimlerini 400x ışık mikroskobu altında gözlemleyin.
  3. C4d boyama
    1. Parafinle gömülü örnekleri 4 μm kesitlere kesin, bölümleri 42 °C'de suda düzleştirin ve 60 °C'de fırında 30 dakika kurutun.
    2. Ksilen I, ksilen II, etanol ve deiyonize su kullanılarak dokuyu sıradan çıkarıp nemlendirin.
    3. Bölümleri EDTA antijen alma çözeltisine batırın, yaklaşık 15 dakika boyunca 95-100°C'de ısıtın ve oda sıcaklığına soğutun.
    4. Bölümleri %3 hidrojen peroksit çözeltisiyle oda sıcaklığında 10-15 dakika kuluçka geçirerek endogen peroksidazı inaktive edin.
    5. Anti-C4d antikorlarını (1:200) antikor seyreltici ile seyreldin ve bölümleri gece boyunca 4 °C'de inkübe edin. İnkubasyondan sonra bölümleri PBS ile yıkayın.
    6. İlgili ikincil antikorları ekleyin ve oda sıcaklığında 30 dakika kuluçka yapın, ardından PBS ile yıkayın.
    7. DAB kromojen çözeltisi ekleyin ve renklendirme için oda sıcaklığında 30 saniye kuluçka yapın.
    8. Hematosilinle karşı boyama yapın, etanol ile kurutmayın, ksilen içine batırın ve nötr reçine ile montaj yapın.
    9. Greftlerin boyama sonuçlarını 400x ışık mikroskobu altında gözlemleyin.

7. İstatistiksel analiz

  1. Tüm verileri sunmak için ortalama ± standart sapma kullanın.
  2. Normal dağılımla sürekli verilerin grup karşılaştırmaları için t-testini kullanırken, normal dağılıma uymayan sürekli verilerin grup karşılaştırmaları için Mann-Whitney U testini kullanın.
  3. Kaplan-Meier analizini kullanarak gruplar arasında kardiyak allogreftlerin hayatta kalma süresini karşılaştırın.
  4. Tüm verileri istatistiksel olarak analiz etmek için SPSS sürüm 27.0'ı kullanın ve <0,05 P-değerini istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edin.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Kardiyak allogreft hayatta kalma süresi
Fare modelinin başarılı bir şekilde kurulmasının ardından, gruplar arasında greft hayatta kalma süreleri Kaplan-Meier analiziyle değerlendirildi. Beklendiği gibi, PS grubundaki fareler, NS grubundakilere kıyasla kardiyak allogreft ortalama sağ kalma oranı NS grubuna göre anlamlı şekilde daha kısa (2,8 ± 0,4 gün, vs. 6,8 ± 0,7 gün, P < 0,01) göstermiştir; bu durum akut AMR'ye bağlanabilir. Akut AMR için terapötik stratejilerin ge...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Şu anda geç evre AMR tedavileri etkisiz hale gelmekte ve erken teşhis için güvenilir yöntemlereksiklik göstermektedir 22,23,24,25. Bu boşluğu gidermek için, bu çalışma mekanik araştırmayı kolaylaştırmak için akut bir AMR fare modeli oluşturdu. Alıcılar ST ile önceden duyarlılaştırıldı ve eşzamanlı aTCMR'yi bastırmak için CsA uygulandı. Patolojik analizler, PS+C...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar çıkar çatışması belirtmemektedir.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 82200847), Guangzhou Şehri Bilim ve Teknoloji Projesi (No. 2024A03J0765) ve Guangdong Tıp Bilimleri Araştırma Fonu (No. A2025268) tarafından desteklendi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Anti-C4d Monoklonal AntikorHycult Biotech (Hollanda)HP8034İmmünohistokimya için (komplement birikimini tespit etmek)
Mikrocerrahi aletlerin tam setiGuangzhou Qihua Tıbbi Ekipman A.Ş., Ltd.Fare kalp nakli ameliyatı için kullanılır
Sürekli zoom stereoskopik cerrahi mikroskopPekin Zhongtian Guangzheng Teknoloji Şirketi, Ltd.TS-39NKFare kalp nakli ameliyatı için kullanılır
Siklosporin ANovartis Pharmaceuticals (İsviçre)H20100673Alıcı farelerde TCMR'yi inhibelemek için kullanılır
FITC anti-fare IgG AntikorBio Legend (ABD)406001DSA-IgG seviyelerinin akış sitometrik nicelenmesi için kullanılır
Akış sitometresiBecton Dickinson, ABDBD FACScaliburAlıcı farelerde serum DSA seviyelerinin değerlendirilmesi için kullanılır
PE anti-fare IgM AntikorBio Legend (ABD)406507DSA-IgM seviyelerinin akış sitometrik nicelenmesi için kullanılır
Küçük hayvan gazı anestezi sistemiAnhui Zhenghua Biyo-Enstrüman Ekipmanları A., Ltd.ZH-MZJGenel anestezi için izofluran ile donatılmıştı
Damarlı Bulldog KılepçeleriROBOZ CERRAHI ALET ŞIRKETIRS-5481TKalp nakli sırasında kan akışını engellemek için kullanılır

Kaynaklar

  1. Zhu, Y., et al. The Stanford experience of heart transplantation over five decades. Eur Heart J. 42 (48), 4934-4943 (2021).
  2. Truby, L. K., et al. Donation after circulatory death in heart transplantation: History, outcomes, clinical challenges, and opportunities to expand the donor pool. J Card Fail. 28 (9), 1456-1463 (2022).
  3. Yalcintas, A., et al. Risk factors of antibody-mediated rejection and predictors of outcome in kidney transplant recipients. Exp Clin Transplant. 18 (Suppl 1), 29-31 (2020).
  4. Everitt, M. D., et al. Clinical outcomes after a biopsy diagnosis of antibody-mediated rejection in pediatric heart transplant recipients. J Heart Lung Transplant. 44 (1), 82-91 (2025).
  5. Fernando, S. C., Polkinghorne, K. R., Lim, W. H., Mulley, W. R. Early versus late acute AMR in kidney transplant recipients - A comparison of treatment approaches and outcomes from the ANZDATA Registry. Transplantation. 107 (11), 2424-2432 (2023).
  6. Reed, E. F., et al. Acute antibody-mediated rejection of cardiac transplants. J Heart Lung Transplant. 25 (2), 153-159 (2006).
  7. Halverson, L. P., Hachem, R. R. Antibody-mediated rejection: Diagnosis and treatment. Clin Chest Med. 44 (1), 95-103 (2023).
  8. Coutance, G., et al. Intermediate-term outcomes of complement inhibition for prevention of antibody-mediated rejection in immunologically high-risk heart allograft recipients. J Heart Lung Transplant. 42 (10), 1464-1468 (2023).
  9. Piñeiro, G. J., et al. plasma exchange and immunoglobulins: An ineffective treatment for chronic active antibody-mediated rejection. BMC Nephrol. 19 (1), 261(2018).
  10. Lu, C., et al. Y4 RNA fragment alleviates myocardial injury in heart transplantation via SNRNP200 to enhance IL-10 mRNA splicing. Mol Ther. 33 (4), 1735-1748 (2025).
  11. Zhao, J., et al. Monotherapy with anti-CD70 antibody causes long-term mouse cardiac allograft acceptance with induction of tolerogenic dendritic cells. Front Immunol. 11, 555996(2021).
  12. Lin, C. M., Gill, R. G., Mehrad, B. The natural killer cell activating receptor, NKG2D, is critical to antibody-dependent chronic rejection in heart transplantation. Am J Transplant. 21 (11), 3550-3560 (2021).
  13. See, H. L. E., et al. Heart transplantation from brain dead donors: A systematic review of animal models. Transplantation. 104 (11), 2272-2289 (2020).
  14. Van Averbeke, V., et al. Host immunity influences the composition of mouse gut microbiota. Front Immunol. 13, 828016(2022).
  15. Leão, A. C., et al. Different responses involving Tfh cells delay parasite-specific antibody production in Trypanosoma cruzi acute experimental models. Front Immunol. 16, 1487317(2025).
  16. Liao, T., et al. In vivo attenuation of antibody-mediated acute renal allograft rejection by ex vivo TGF-β-induced CD4⁺Foxp3⁺ regulatory T cells. Front Immunol. 8, (2017).
  17. Zhao, D., et al. Triptolide inhibits donor-specific antibody production and attenuates mixed antibody-mediated renal allograft injury. Am J Transplant. 18 (5), 1083-1095 (2018).
  18. Zhao, D., et al. Mouse model established by early renal transplantation after skin allograft sensitization mimics clinical antibody-mediated rejection. Front Immunol. 8, 1356(2018).
  19. Ma, M., et al. Blockade of IL-6/IL-6R signaling attenuates acute antibody-mediated rejection in a mouse cardiac transplantation model. Front Immunol. 12, 778359(2021).
  20. Qian, Z., et al. Antibody and complement-mediated injury in transplants following sensitization by allogeneic blood transfusion. Transplantation. 82 (7), 857-864 (2006).
  21. Mang, Y., Zhang, S., Zhao, J., et al. Characteristics of pre-sensitization-related acute antibody-mediated rejection in a rat model of orthotopic liver transplantation. Ann Transl Med. 10 (19), 1066(2022).
  22. Böhmig, G. A., et al. Antibody-mediated rejection - treatment standard. Nephrol Dial Transplant. 40 (8), 1615-1627 (2025).
  23. Massat, M., et al. Do anti-IL-6R blockers have a beneficial effect in the treatment of antibody-mediated rejection resistant to standard therapy after kidney transplantation. Am J Transplant. 21 (4), 1641-1649 (2021).
  24. Nickerson, P. W. Rationale for the IMAGINE study for chronic active antibody-mediated rejection (caAMR) in kidney transplantation. Am J Transplant. 22 (Suppl 4), 38-44 (2022).
  25. Lee, B. T., Fiel, M. I., Schiano, T. D. Antibody-mediated rejection of the liver allograft: An update and a clinico-pathological perspective. J Hepatol. 75 (5), 1203-1216 (2021).
  26. Alegre, M. L., Atkinson, C., Issa, F., Valujskikh, A., Zhang, Z. J. Best practices of heart transplantation in mice. Am J Transplant. 25 (9), 1820-1829 (2025).
  27. Liu, Y., et al. Donor MHC-specific thymus vaccination allows for immunocompatible allotransplantation. Cell Res. 35 (2), 132-144 (2025).
  28. Charmetant, X., et al. Inverted direct allorecognition triggers early donor-specific antibody responses after transplantation. Sci Transl Med. 14 (663), eabg1046(2022).
  29. Ma, N., et al. Targeting TFH cells is a novel approach for donor-specific antibody desensitization of allograft candidates: An in vitro and in vivo study. Haematologica. 109 (4), 1233-1246 (2024).
  30. Charreau, B. Cellular and molecular crosstalk of graft endothelial cells during AMR: Effector functions and mechanisms. Transplantation. 105 (11), e156-e167 (2021).
  31. Nankivell, B. J., P'Ng, C. H., Shingde, M. Glomerular C4d immunoperoxidase in chronic antibody-mediated rejection and transplant glomerulopathy. Kidney Int Rep. 7 (7), 1594-1607 (2022).
  32. Manral, P., Caza, T. N., Storey, A. J., Beck, L. H. Jr, Borza, D. B. The alternative pathway is necessary and sufficient for complement activation by anti-THSD7A autoantibodies, which are predominantly IgG4 in membranous nephropathy. Front Immunol. 13, 952235(2022).
  33. Zarantonello, A., Revel, M., Grunenwald, A., Roumenina, L. T. C3-dependent effector functions of complement. Immunol Rev. 313 (1), 120-138 (2023).
  34. Hubler, F., et al. Discovery and characterization of a new class of C5aR1 antagonists showing in vivo activity. J Med Chem. 67 (5), 4100-4119 (2024).
  35. Luan, D., et al. FOXP3 mRNA profile prognostic of acute T cell-mediated rejection and human kidney allograft survival. Transplantation. 105 (8), 1825-1839 (2021).
  36. Carter, N. M., Pomerantz, J. L. Calcineurin inhibitors target Lck activation in graft-versus-host disease. J Clin Invest. 131 (11), e149934(2021).
  37. Notarantonio, A. B., et al. Differential clinical and immunological impacts of anti-T-lymphocyte globulin (ATLG) vs. anti-thymocyte globulin (ATG) in preventing graft-versus-host disease post-allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: A comparative study. Am J Hematol. 100 (4), 626-637 (2025).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Murin ModelAllogreft Sa kal mnceden Duyarla t r lm FarelerSiklosporin ADeri TransplantasyonuDSA IgGC4d BirikimiVask lit

İlgili makaleler