Röportaj: Evolved Recombinase kullanarak HIV-1 Proviral DNA eksizyonu

Özet

Günümüzde HIV-1 stratejileri, viral bir yaşam döngüsü bastırmak için değil, etkili bir şekilde enfeksiyonu ortadan kaldırmak hareket ederler. Burada göstermektedir ki enfekte hücreleri genom bir mühendislik recombinase verimli tüketim entegre HIV-1 proviral DNA.

Özet

HIV-1 enfekte hücreleri ev sahipliği kromozom entegre ve uzun terminal tekrarlar ile çevrili bir provirus olmaya devam etmektedir. Mevcut tedavi stratejileri, öncelikle enfeksiyonu ortadan kaldırılması olmadan, virüs enzimler ya da virüs-hücre füzyonu, viral yaşam döngüsü bastırmak hedef. Entegre provirus bu yaklaşımlar, HIV-1 yeni dirençli suşlar tarafından hedef olmadığı ortaya çıkabilir. Burada, mühendislik recombinase Tre (Moleküler evrim, Tre recombinase, Buchholz, F., Hücre Biyolojisi ve Genetik Max Planck Enstitüsü, Dresden) verimli bir şekilde enfekte olmuş hücreleri genom entegre HIV-1 proviral DNA maktu vergileri raporu. Incelemek için, viral pseudotypes ve enfekte HeLa hücreleri içeren loxLTR üretilen Tre recombinase HIV-1 ile enfekte insan hücreleri genom tüketim provirus belirtir. A virüsünün partikül bırakmadan hücre hattı klonlanmış ve plazmid bir ifade Tre ya da bir ebeveyn kontrol vektör ile transfekte edildi. Recombinase aktivite ve virüs üretimi takip edildi. Tüm testlerin görünür sitotoksik etki olmadan enfekte hücrelerden provirus verimli silme gösterdi. Bu sonuçlar, özellikle HIV-1 LTR hedef recombinase gelişmeye mümkündür ve bu recombinase, HIV-1 ile enfekte insan hücrelerinde genomu HIV-1 provirus eksize yeteneğine sahip olduğunu prensip kanıtı olarak hizmet vermektedir.

Mühendislik recombinase terapötik arenaya önce, ancak, önemli engelleri aşmak gerekir. En önemli konular arasında, insanlığın karşı karşıya olduğu, hedef hücrelere etkin ve güvenli bir şekilde teslim ve yan etkilerin olmaması.

Protokol

Lütfen görüntülemek ilgili videoları başlıklı Site Özel Recombinase (SSR) Teknoloji İlkeleri ve Moleküler Evrim Tre Recombinase siteye özgü rekombinasyon ve mühendislik recombinase enzimlerin site özgüllüğü hakkında daha fazla bilgi için.