Amerikan Horseshoe Yengeç, Limulus Polyphemus'un Kan Toplama

Özet

Amerikan at nalı yengeci, Limulus Polyphemus'un, tartışmalı, büyük miktarda herhangi bir omurgasız kan için en uygun bir kaynağıdır. Kan genel dolaşımı, granül amebocyte ve plazma, hemosiyanin, C-reaktif protein ve α2-makroglobulin sadece üç bol protein sadece tek bir hücre tipi, kompozisyon basit. Kan kalpten toplanır ve kan hücreleri ve plazma santrifüj ile ayrılır.

Özet

At nalı yengeci, herhangi bir uzun ömürlü omurgasız en iyi karakterize bağışıklık sistemine sahiptir. At nalı yengeçleri bağışıklık çalışma, büyük miktarda kan toplama kolaylığı ve kan basitlik kolaylaştırılmıştır. At nalı yengeçleri, genel dolaşımı, granül amebocyte sadece tek bir hücre tipi göstermektedir. Plazma, deniz suyunun tuz içeriğine sahiptir ve sadece üç bol miktarda protein, hemosiyanin, solunum protein, C-reaktif bakteri hücreleri de dahil olmak üzere, yabancı hücrelerin sitolitik imha işlevini proteinleri, ve α2-makroglobulin, proteazlar inhibe patojenlerin işgalci. Kan lipopolisakkarid (aka, endotoksin, LPS), Gram-negatif bakteriler bir ürün kontaminasyonu en aza indirecek koşullar altında doğrudan kalp ponksiyon tarafından toplanır. 400 mL kan büyük bir hayvan 200 verim alınabilir. Plazma, kan hücrelerinin çalışma için santrifüj ile plazmadan hemen kaldırılır ve plazma sonra kendisini oluşturan proteinleri içine fraksiyone olabilir. Rahatlıkla kan hücrelerinin LPS-izotonik tuzlu su (0,5 M NaCl) içine küçük miktarda kan kültürü çanak yüzeyinde daha fazla bir LPS-ücretsiz coverglasses koyarak direkt mikroskobik muayene izin koşullar altında toplayarak, daha sonra bu coverglasses montaj mikroskobik olarak incelenmiştir hücre eklenti aşağıdaki basit gözlem odalarında. Doğrudan gözlem için ikinci bir hazırlık toplamak için 3 - 5 ml kan LPS-embriyo çanak ve sonra bir odaya toplanmış amebocytes parçaları explanting bir slayt ve coverglass arasında sandviç doku. Bu hazırlık, hareketli amebocytes kolayca görülebilir coverglass yüzey üzerine göç ederler. Kanın pıhtılaşma sisteminde amebocytes agregasyonu ve kan hücrelerinin salgı granülleri salınan bir protein, coagulin ekstrasellüler bir pıhtı oluşumunu içerir. % 2 Tween-20, 0.5 M LPS-free NaCl, hücreler santrifüj tarafından takip ve 0.5 ile yıkanarak M 0.1 birimlere kan toplama gerçekleştirilebileceğini agregasyonu ve degranülasyonu oluşmaz, yıkanmış kan hücrelerinin biyokimyasal analiz gerektirir NaCl.

Protokol

Kanama ile ilgili at nalı yengeci anatomik özellikleri (Şekil 1)

Şekil 1

1. Vücudun üç ana bölümden posterior anterior (P), zehir opisthosoma (O), ve telzon (T) ^1.
2. Zehir anterior ve lateral kenar boşlukları flanş.
3. Telzon dile opisthosoma en arka girinti, terminal koy.
4. Zehir ve opisthosoma ifade eklemi menteşe (H).
5. Kalp prostoma ve opisthosoma ² (Şekil 2) karapaksla altında, dorsal orta....

Tartışma

At nalı yengeci, Kuzey Amerika'nın doğu kıyıları ve Bengal Körfezi, Japonya bu aralıkta üç türün Limulus Polyphemus'un dört tür vardır . Anatomik benzeri şekillerde ²⁷ 445 milyon yıl önce fosil olarak tespit edilmiştir, çünkü hayvan bir "yaşayan fosil" olarak tanımlanır. Olgunluğa ulaşması 13 yıl ve en az 20 yıl ²⁸ yaşayan at nalı yengeci, 10 gerektiren, uzun ömürlü bir hayvan temsil eder. Amerikan at nalı yengeci, yılan balığı ve kabuklu ^{balıkçılık} 29 yem olarak kapsamlı hasat tab.......