$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Çekme pipetler
Çektirmesi gibi filament kullanarak bir Sutter P-97 / Kahverengi Mikroelektrod Çektirme Flaming, yaklaşık 10-20 pipetler bir set çekin.
- Cam seçin. Biz borosilikat (BF150-86-10, OD = 1.5 mm, ID = 0.86 mm) kullanın. Temiz ve tozsuz kalır cam dikkatlice saklayın.
- Çekme programı tasarlayın. Birincil amacı, uygulamaya bağlı olacaktır yaklaşık istenen boyut, açılan bir ucu. Sutter P-97-Pipet Yemek Tarifleri 2 mükemmel bir referans.
- Açılış çap ve pürüzsüzlük belirlemek için mikroskop altında pipetler uyun. Kaba, düzensiz ya da düzensiz ipuçları atın. Karşısında 2-4 mikron olan bir ucu açılış standart yama kelepçe kayıt için en iyisidir. Künt ucu tercih edilir aynı açılış çapı, direnci düşük açar. Şekli ve boyutu aşağıda, parlatma sırasında değiştirilebilir.
Basınç parlatma pipetler
- Temiz, sıkıştırılmış hava hattı için bir pipet tutucu takın. Bir regülatör kullanarak, sıkıştırılmış hava hattı basıncı ~ 40 PSI ayarlayın. Pipet tutucu basıncı ve devre dışı bırakılmasına izin verecek bir 4-yönlü kontrol valfi basınçlı hava hattı bağlayın. Tygon ⅛, uzunluğu ® boru ile kontrol vanası bir pipet tutucu bağlayın.
- Yüksek basınçlı bir pipet tutucu, bir ayak pedalı, düşük ve yüksek büyütme, uzun çalışma mesafesi (ideal, 10x ve 100x) hava hedefleri ile donatılmış bir mikroskop tarafından kontrol edilen bir parlatma bobini ile parlatma teçhizat (microforge) kullanın. Pipet açılışı protokol sırasında gözlemlemek edebilmek için kritik öneme sahiptir.
- İsteğe Bağlı: Kat kapasitans azaltmak ve gürültü özelliklerinin iyileştirilmesi ("bölümüne bakın" Çekme pipetler, bu tekniğin) hidrofobik bir yalıtkan pipet .
- Basınç valfi kapalı konumda olduğundan emin olun. Pipet pipet tutucu içine yerleştirin ve parmak sıkı uydurma sıkın.
Güvenlik notu: pipet pipet tutucu içine sıkıca tutulur, hava basıncı, pipet pipet tutucu uzaklaştırılırlar neden olacaktır .
- Microforge pipet ve tutucu yerleştirin. Mikroskop sahneye pozisyon pipet tutucu ucu ve parlatma bobin hem microforge düşük güçte (10x) görülebilir. ~ 75 mikron filament ucu getir. Isıtıldığında filament genişletmek olacağını aklınızda bulundurun.
- Yüksek güç (100x) amacı geçin. Pipet ve parlatma bobin Her iki odak ve görüş alanı içinde olmalıdır. Değilse, parlatma bobin yükseklik ayarı. (Pipet konumu ayarlanabilir olamaz). Pipet ve parlatma bobini zıt görüş alanında yakın olmalıdır. Onu ısıtır olarak genişletmek ve pipet içine darbelerim çünkü çok pipet yakın bobin koymaktan kaçının.
- Pipet içine basınçlı hava doğrudan vana açın ve pipet ucu arkasındaki konik dışa balon başlayana kadar ısıtmak.
- Isıtma ucu çok yoğun balonlar önce durdurun. Deney için uygun mesafe, ısı ve zaman istenilen şekil belirlemek için gereklidir.
- İsteğe Bağlı: basınç yokluğunda ucu parlatma ucu açılış çapı azaltın. 7. ve 8. adımları pipet şekli ve boyutları hem de ince ayar yapmak için tekrar tekrar.
- Basınç kapatın ve pipet güvenli bir yöne işaret ederken, pipet kaldırmak ve tozdan korunacak temiz bir saklama kutusu yerleştirin.
Güvenlik notu: hava basıncı kapalı değilse, kaldırma sırasında pipet pipet tutucu çıkartıldığı olabilir.
Microforge ilgili notlar
Off-the-raf piyasada bulunan parçaları monte microforge kullanın. (Ayrıca birkaç şirket, örneğin, ALA Bilim, GlassWorx bir basınç parlatma kiti satın alabilirsiniz). Microforge ne olursa olsun, genellikle sadece birkaç mikron çapında ucu açılması, görmek için yeterli olan optik olması esastır. Bunun için uzun bir çalışma mesafesi 100x objektif kullanın. Ayrıca, mont için yüksek ergime sıcaklığına sahip cam parlatma bobin pipetler buharlaşmış dolgu en aza indirmek için.
Bölüm 3: Beklenen Sonuçlar
Orta basınç parlatma çapı açılması kayda değer bir değişiklik olmadan bir pipetle direnci azaltabilir. İsterseniz, bu protokolü 5-10M arasında mikron alt açıklıkların ve dirençleri pipetler yapmak için kullanılabilir.