RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
tr_TR
Menu
Menu
Menu
Menu
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Kaynak: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Notre Dame Üniversitesi, IN
Fareler ve sıçanlar, biyomedikal araştırmalar için kullanılan hayvanların% 90'ından fazlasını oluşturur. Bu araştırma hayvanlarının uygun bakımı, deneylerin sonucu için kritik öneme sahiptir. Bu farelerin ve sıçanların çoğunluğu için geçerli olan genel prosedürler vardır, ancak bağışıklığı baskılanmış olanlar gibi bazı hayvanlar, deney için onları sürdürmek için ek adımlar atılmasını gerektirir.
Yaygın olarak kullanılan bağışıklığı baskılanmış fareler, kendi içinde yetiştirilmiş farelerde doğal olarak meydana gelenleri ve genetik mühendisliği yoluyla yaratılanları içerir. Araştırmada kullanılan ilk bağışıklığı baskılanmış fareler "çıplak" farelerdi. BALB/c Nude (nu) fare, 1966 yılında, hem kılları hem de timüsleri olmayan fareler üreten bir BALB/c kolonisi içinde keşfedildi. Bu timik fareler, T hücrelerinden yoksun inhibe edilmiş bir bağışıklık sistemine sahiptir. Bu hayvanın değeri kısa süre sonra mikrobiyal enfeksiyonlar, bağışıklık yetmezlikleri ve otoimmünite çalışmalarında kullanılmak üzere keşfedildi. Çıplak fare kadar yaygın olarak kullanılmasa da, çıplak bir fare de vardır. Çıplak sıçan T hücresi eksiktir ve periferik lenfoid organların timus bağımlı bölgelerinde tükenmiş hücre popülasyonları gösterir. Doğal olarak oluşan bir başka immün yetmezlik faresi, şiddetli kombine immün yetmezlik faresidir (SCID). Bu fareler, fonksiyonel B ve T hücrelerinin üretimini bozan bir kusura sahiptir. Yeterli bir bağışıklık tepkisi oluşturamama durumunda, bu fareler insan hücrelerinin nakli için konakçı alıcılar olarak hizmet edebilir. İmmün yetmezlikleri olan genetik olarak değiştirilmiş birkaç fare türü ticari olarak temin edilebilir. 1 Eksikliğin şiddeti genetik modifikasyona göre değişir; Bununla birlikte, bağışıklığı baskılanmış tüm fareler ve sıçanlar benzer şekilde ele alınır.
Bu el yazması, hem bağışıklığı yeterli hem de bağışıklığı baskılanmış hayvanların bakımını açıklayacaktır. Barınma, diyet, çevresel gereksinimler ve taşıma her iki hayvan grubu için de tartışılacaktır.
1. İmmünkompetan (konvansiyonel) farelerin kullanımı
Farelerin bağışıklık bozukluklarının insanlardakine çok benzer olduğu gösterilmiştir. 2 Bu hayvanların immünolojik yetenekleri sınırlı olduğundan, bu hayvanların ele alınması ve bakımına ilişkin prosedürler, mühendislik kontrolleri, hayvan bakım personeli için kişisel koruyucu ekipman ve standart işletim prosedürleri kullanılarak bulaşıcı hastalık riskini en aza indirecek şekilde tasarlanmıştır; Bunlar, hayvanların temas halinde olduğu kafes ve diğer ekipmanların kirlenmesini azaltır.
2. İmmün sistemi baskılanmış farelerle başa çıkma
Fareler ve sıçanlar, biyomedikal araştırmalar için kullanılan hayvanların yüzde doksanından fazlasını oluşturduğundan, bu organizmalara uygun şekilde bakmak, deneylerin sonucu için kritik öneme sahiptir. Bu bakım prosedürleri, hayvanların nakliye konteynırlarından ambalajından çıkarılması, kafes değişimi, uygun barınma koşullarının sürdürülmesi, uygun beslenmenin sağlanması ve uygun ortamın sağlanması ile başlar. Laboratuvardaki farelerin ve sıçanların çoğunluğu için geçerli olan genel prosedürler olmasına rağmen, bağışıklığı baskılanmış olanlar gibi bazı hayvanlar, deneysel amaçlar için onları sürdürmek için ek dikkat gerektirir.
Bu video, hem bağışıklığı yeterli hem de bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için standartları ve temel bakım prosedürlerini açıklayacaktır. Ve son olarak, bilim adamlarının bu bilgiyi farklı araştırma amaçları için nasıl kullandıklarını gösteren bazı örnek deneyler göstereceğiz.
Hayvanların diğer kurumlardan alınması, taşıma sırasında taşıma kutuları patojenik ajanlarla temas edebileceğinden, tesis içinde halihazırda barındırılan hayvanlar için bir risk oluşturur. Bu nedenle, nakliye konteynırlarını ambalajından çıkarırken uygun bir prosedür uygulanmalıdır.
Herhangi bir hayvana dokunmadan önce, uygun Kişisel Koruyucu Ekipman veya KKD giymek önemlidir. Giyilmesi gereken minimum KKD, laboratuvar önlüğü, eldiven, koruyucu gözlük ve toz ve alerjenlere maruz kalmayı azaltacak cerrahi tip bir maskedir. Bir sonraki adım, gelen hayvanlar için uygun kafesleri seçmektir. Ardından, kafesi uygun yatak takımları ve yuvalama malzemeleri ile donatın. Ve hazırlanan kafesleri, hayvanların gelmesinden önce transfere hazır olmaları için sıcaklık kontrollü kabul odasına götürün.
Sevkiyat varışta, taşıma kutularını teslim alma odasında güvenli bir yere yerleştirin. Kabı herhangi bir hasar açısından inceleyin ve zararlı patojenleri yok etmek için dış yüzeyleri dezenfekte edin. Üreticinin tavsiyelerine göre dezenfektanın kutu ile en az 15-30 dakika temas halinde olduğundan emin olun. Ardından, kabı Hayvan Aktarma İstasyonuna veya ATS'ye yerleştirin. Bu istasyon, davlumbaz içinde Yüksek Verimli Partikül Hava veya HEPA, filtrelenmiş tek yönlü hava akışı sunar. HEPA, kullanıcıyı alerjenlerden korur ve hayvanları çevredeki oda havasından koruyarak kontaminasyon olasılığını en aza indirir. Ardından, nakliye konteynırını açın ve kemirgenlerin genel sağlığını değerlendirin. Yaralı veya hasta gibi görünen herhangi bir hayvanı not edin. Bundan sonra, bunları uygun grup boyutlarında önceden monte edilmiş kafese yerleştirin, kafesi tel çubuk kapağı ile örtün ve iki alan oluşturmak için bölücüyü sabitleyin. Uygun yiyeceği seçin ve bir tarafa koyun ve daha iyi hava sirkülasyonu sağlamak için ikinci tarafı açık bırakın. Son olarak, hayvanlar otomatik sulama ile bir rafa yerleştirilmiyorsa, yeterli su temini sağlamak için bir su şişesi ekleyin. Unutmayın, ATS'nin her seansın sonunda dezenfekte edilmesi ve dezenfeksiyon sırasında üfleyicinin kapalı olması gerekir.
Kafes değişimi için, iki kafesi - uygun yatak malzemesine sahip yeni bir kafes ve hayvanlarla birlikte kullanılmış kafes - ATS'ye yerleştirin. Hayvanlar eski kafesten yeni kafese elle veya yastıklı bir forseps kullanılarak aktarılabilir. Bu yöntemlerin her ikisi de bu koleksiyonun başka bir videosunda tartışılmıştır. Bir seferde yalnızca bir hayvan kafesinin açılabileceğini unutmayın. Erkek fareler veya çöpü olan dişiler için, farelerin yuvalama alanının temiz kafese aktarılmasının hayvanlara geçişte yardımcı olduğu gösterilmiştir. Kafes üstü yeni kafesin üzerine yerleştirildikten sonra, yiyecekleri eski kafes üstünden yeni üste aktarın ve gerekirse daha fazla yiyecek ekleyin. Ardından, bariyerin üstünü yerleştirin ve kafesi rafa geri koyun. Kafesler arasında veya gruplar arasında eldiven değiştirmek iyi bir uygulamadır.
Bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için ambalajın açılma prosedürü biraz farklıdır, çünkü her şeyin steril olması gerekir. Davlumbazın içindeki üfleyicinin kullanımdan en az 24 saat önce açık olması önerilir. İmmün sistemi olan hayvanlarda olduğu gibi, sevkiyat varışta kabı teslim alma odasına dezenfektan bir solüsyonla püskürtün ve 15-30 dakika boyunca açılmadan bırakın. Bağışıklığı baskılanmış fareler için belirlenmiş ATS'de, hayvanları manipüle etmeden 30 dakika önce laminer akış başlığına %70 etanol püskürtün. Bu ambalaj açma faaliyetine iki kişinin katılması idealdir - bir kişi, aseptik teknikler kullanarak hayvanları idare etmek için buharla sterilize edilmiş önlük ve çift steril eldiven giyen steril teknisyen ve diğeri steril olmayan teknisyen olacaktır. temiz bir izolasyon elbisesi ve kontamine olmuş maddeleri işlemek için bir çift eldiven giyiyor. Her ikisi de maske, saç bonesi ve koruyucu gözlük takmalıdır.
Davlumbazın içindeki nakliye konteynırını açmadan önce, tüm malzemeleri ve kafesleri bunların içine yerleştirin ve dışlarına alkol püskürtün. Ve sevkiyat geldikten sonra, alınan hayvan kutusunu davlumbazın içine yerleştirin ve% 70 etanol ile püskürtün. Steril kafesleme için iki seçenek vardır, ya sarılmış ve buharla sterilize edilmiş standart kafes ya da satıcı tarafından ışınlama kullanılarak sterilize edilmiş tek kullanımlık üniteler.
Steril gıdayı açarak ve ardından taşıma kutusunu açarak ambalajdan çıkarma işlemine başlayın. Bu noktada, işleyici ilk steril eldiven çiftini atmalıdır. Daha sonra, steril olmayan kişi steril kafesi açar ve aseptik olarak hayvan bakıcısına geçirir, o da daha sonra kaputu ve tel çubuk kapağını çıkarır ve bunları baş aşağı kaputun içine yerleştirir. Daha sonra, kafes üzerindeki yudum borusu, davlumbazda bulunan istasyonda su ile doldurulur. Son olarak, hayvan bakıcısı hayvanı kafese yerleştirir, tel çubuk kapağıyla sabitler, yiyecek ekler ve kaputu yerine yerleştirir. Steril ortamı korumak için davlumbaz üfleyicinin her zaman açık kalması gerektiğini unutmayın. Sonunda, steril olmayan kişi, doldurulmuş kafesi başlıktan çıkarır ve uygun bir rafa yerleştirir. Gruplar arasında olası çapraz kontaminasyonu önlemek için, hayvan bakıcısı her nakliye konteynerinden sonra eldivenleri değiştirmelidir.
Bağışıklığı baskılanmış hayvanların kafes değişimi için, davlumbaz ve kafeslerin ve KKD'nin hazırlanması, bu hayvanların ambalajlarının açılması ile aynıdır. Ve transfer tekniği, immünokompetan hayvanlarla aynıdır, ancak steril koşullar altındadır.
Şimdi, temel bakım sağlamanın bir diğer önemli yönü olan hayvanlar için uygun barınma koşullarını tartışalım. Fareler ve sıçanlar esas olarak, yatak malzemesi içeren sağlam bir tabana sahip ayakkabı kutusu tipi kafese yerleştirilir. Tipik fare kafesi, maksimum 5 yetişkin fare için yeterli olan 75 inç karelik bir taban alanı sağlar. Öte yandan, bir sıçan kafesi 142 inç karelik bir alana sahiptir ve 2 yetişkin sıçan için yeterlidir. Statik kafesler genellikle bir tel çubuk kapak ile kapatılır ve filtre malzemesi kafes üstünün üzerine bir kaput olarak eklenir. Ayrı ayrı havalandırılan kafesler veya IVC'ler ayrıca bir tel çubuk kapağına ve kaputa sahiptir, ancak bunlar kafese hava akışı sağlayan bir rafa yerleştirilir. Bu, kafesi statik kafesler kadar sık değiştirme ihtiyacını ortadan kaldırır, bu da bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için faydalı olabilir.
Tüm kafes sistemlerinde yiyecek ve su temini için bir hüküm vardır. Hayvan kafesinin içine yerleştirilmiş yemlikler vardır ya da tel çubuk kapağının bir bölümü gıda saklama için kullanılır. Yiyecekler, hayvanlar tarafından kirletilmeyecek şekilde yerleştirilmelidir. Su genellikle kafesin üstüne yerleştirilmiş bir su şişesi veya hayvan kafesinin yerleşik bir bileşeni olan otomatik bir sulama içme vanası aracılığıyla sağlanır. İçme vanası seçeneği için, kafes bir rafa takıldığında, hayvan tesisi boyunca hayvanın ihtiyaçlarını karşılamak üzere tasarlanmış otomatik bir sulama sistemi için su tüpe taşınır.
Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu, tüm kafes aletlerinin en az 2 haftada bir dezenfekte edilmesi gerektiğini belirtir. Bazı kafeslerin ve aksesuarların, muhafazadaki koku ve amonyak seviyesine göre daha sık değiştirilmesi gerekebilir.
Şimdi bağışıklığı yetmez ve bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için uygun yiyecek ve su temini hakkında konuşalım. Değişken protein, karbonhidrat ve yağ bileşimlerine sahip ticari olarak temin edilebilen birçok yem vardır. İdeal olarak, yemler %15-19 protein, %44 karbonhidrat ve %4-9 yağ içermelidir. Bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için, yemin sterilize edildiğinden emin olun.
Musluk suyu veya RO suyu olan ters ozmoz, bağışıklığı yeterli hayvanlar için kullanılabilir, ancak bağışıklığı yetersiz hayvanlar için su bir kontaminasyon kaynağı olabilir ve bu nedenle sterilize edilmesi gerekir. Sudaki sterilite, 8 litre RO suyuna 2 damla 12 molar hidroklorik asit eklenerek korunur, bu da suyu 2.5-3 pH'a asitleştirecek ve bakteri üremesini sınırlayacaktır. Daha sonra suyu ayrı şişelere dökün ve üzerlerini alüminyum folyo ile örtün. Yudum tüplü şişe kapaklarını ayrı ayrı bir otoklav torbasına koyun ve buhar sterilizasyonu için her şeyi bir otoklava koyun.
Şimdi hayvan bakımı için gerekli olan standart çevre koşullarını tartışalım.
Kafes düzeyinde, bilimsel olarak gerekçelendirilmedikçe veya bir hayvan diğerleriyle uyumsuz olmadıkça sosyal konut zorunludur. Çevreyi kağıt kulübeler ve yuvalama malzemeleri ile zenginleştirmek, hayvanların yuva kurma ve yuva açma gibi türe özgü davranışlar sergilemesine olanak tanır, bu da stres seviyesini azaltır ve hayvanların genel refahını artırır. Yuvalama malzemeleri ayrıca, aynı kafeste birden fazla erkek farenin barınmasına yardımcı olan sakinleştirici feromonlara doymuş bir uyku alanı sağlar. Daha önce de belirtildiği gibi, kafes değiştirildikten sonra yuvalama alanını temiz kafese taşımak, hayvanlar yeni bir ortama sokulduğundan, özellikle erkeklerde saldırganlığın önlenmesine yardımcı olur. Atimik çıplak hayvanlar için, termoregülasyona yardımcı olmak için kafeslerinde ek yatak takımları ve parçalanmış kağıt türü yuvalama malzemeleri sağlamayı düşünmelidir.
Oda seviyesinde, fareler ve sıçanlar için sıcaklık 68 ila 79 ° F arasında olmalıdır. Oda nem seviyesi %30-70 olmalıdır, çünkü daha düşük seviyeler halka kuyruk olarak bilinen bir duruma neden olabilir. Üçüncü oda parametresi aydınlatmadır. Buna ışık yoğunluğu ve döngüler dahildir. Normalde, hayvan odası 12 saatlik aydınlık / 12 saatlik karanlık döngüsüne ayarlanmıştır. Aydınlatma yoğunluğu odadaki aktiviteye göre değişmelidir. Teknisyenler çalışırken, daha yüksek aydınlatma seviyeleri kullanılabilir. Ancak, tüm aktivite sona erdikten sonra yaklaşık 325 lux'e düşürülmelidir. Son olarak, oda içindeki hava akışı da dikkatli bir şekilde kontrol edilmelidir. Her saat başı en az %100 taze hava ile minimum 10-15 hava değişimi yapılmalıdır. Bu, hayvan odasındaki mikropları ve kokuları azaltır.
Son olarak, araştırmacıların deneylerinde laboratuvar hayvanlarının barınması, diyet ve çevre tercihleri hakkındaki bu bilgileri nasıl kullandıklarını görelim.
Daha önce tartışıldığı gibi, laboratuvar hayvanları genellikle stresi azaltan yuva kurma davranışı sergiler ve araştırmacılar bunu hayvan refahının bir göstergesi olarak kullanmışlardır. Bu özel deneyde, bilim adamları inşa edilen yuvayı puanlamak için tarafsız bir sistem geliştirdiler ve daha sonra ortam sıcaklığının yuva kurma davranışı üzerindeki etkisini incelemek için kullandılar. Gördüğünüz gibi, sıcaklıktaki bir artış, skorda önemli bir düşüşe neden oldu ve çevre sıcaklığının hayvan refahındaki rolünü vurguladı.
Farelerin ve sıçanların karbonhidratları sevdiği göz önüne alındığında, araştırmacılar hayvanın motor fonksiyonunu test etmek için farklı şekillerde yem kullandılar. Bu, farklı türdeki gıda işleme görevleri sırasında el becerisini analiz etmeyi ve cerrahi veya farmakolojik müdahaleleri takiben ulaşma davranışını incelemeyi içerir.
Son olarak, fare ve sıçanların gece yaşadıkları ve aydınlatılmış alanları tercih etmedikleri bilinmektedir. Bilim adamları bu bilgiyi, bu türlerdeki kaygıyı incelemek için ortam oluşturmak için kullanırlar. Örneğin, burada yapılan araştırmalar, hayvanları basit bir açık alana soktu ve vahşi tip ve nakavt farelerin iç ve dış bölgelerde, gen yıkımının anksiyete benzeri davranışlar üzerindeki etkisini analiz etmek için harcadıkları zamanı inceledi.
JoVE'nin fareler ve sıçanlar için temel bakım prosedürlerine girişini izlediniz. Artık bu hayvanların çevresinin ve muamelesinin hayvan sağlığına herhangi bir zarar vermemesini sağlamak için alınması gereken önlemleri daha iyi anlamalısınız ve ayrıca araştırmacıların farklı bilimsel hedeflere ulaşmak için bu parametreleri nasıl değiştirebileceklerini de bilmelisiniz. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!
Fareler ve sıçanlar, biyomedikal araştırmalar için kullanılan hayvanların yüzde doksanından fazlasını oluşturduğundan, bu organizmalara uygun şekilde bakmak, deneylerin sonucu için kritik öneme sahiptir. Bu bakım prosedürleri, hayvanların nakliye konteynırlarından ambalajından çıkarılması, kafes değişimi, uygun barınma koşullarının sürdürülmesi, uygun beslenmenin sağlanması ve uygun ortamın sağlanması ile başlar. Laboratuvardaki farelerin ve sıçanların çoğunluğu için geçerli olan genel prosedürler olmasına rağmen, bağışıklığı baskılanmış olanlar gibi bazı hayvanlar, deneysel amaçlar için onları sürdürmek için ek dikkat gerektirir.
Bu video, hem bağışıklığı yeterli hem de bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için standartları ve temel bakım prosedürlerini açıklayacaktır. Ve son olarak, bilim adamlarının bu bilgiyi farklı araştırma amaçları için nasıl kullandıklarını gösteren bazı örnek deneyler göstereceğiz.
Hayvanların diğer kurumlardan alınması, taşıma sırasında taşıma kutuları patojenik ajanlarla temas edebileceğinden, tesis içinde halihazırda barındırılan hayvanlar için bir risk oluşturur. Bu nedenle, nakliye konteynırlarını ambalajından çıkarırken uygun bir prosedür uygulanmalıdır.
Herhangi bir hayvana dokunmadan önce, uygun Kişisel Koruyucu Ekipman veya KKD giymek önemlidir. Giyilmesi gereken minimum KKD, laboratuvar önlüğü, eldiven, koruyucu gözlük ve toz ve alerjenlere maruz kalmayı azaltacak cerrahi tip bir maskedir. Bir sonraki adım, gelen hayvanlar için uygun kafesleri seçmektir. Ardından, kafesi uygun yatak takımları ve yuvalama malzemeleri ile donatın. Ve hazırlanan kafesleri, hayvanların gelmesinden önce transfere hazır olmaları için sıcaklık kontrollü kabul odasına götürün.
Sevkiyat varışta, taşıma kutularını teslim alma odasında güvenli bir yere yerleştirin. Kabı herhangi bir hasar açısından inceleyin ve zararlı patojenleri yok etmek için dış yüzeyleri dezenfekte edin. Üreticinin tavsiyelerine göre dezenfektanın kutu ile en az 15-30 dakika temas halinde olduğundan emin olun. Ardından, kabı Hayvan Aktarma İstasyonuna veya ATS'ye yerleştirin. Bu istasyon, davlumbaz içinde Yüksek Verimli Partikül Hava veya HEPA, filtrelenmiş tek yönlü hava akışı sunar. HEPA, kullanıcıyı alerjenlerden korur ve hayvanları çevredeki oda havasından koruyarak kontaminasyon olasılığını en aza indirir. Ardından, nakliye konteynırını açın ve kemirgenlerin genel sağlığını değerlendirin. Yaralı veya hasta gibi görünen herhangi bir hayvanı not edin. Bundan sonra, bunları uygun grup boyutlarında önceden monte edilmiş kafese yerleştirin, kafesi tel çubuk kapağı ile örtün ve iki alan oluşturmak için bölücüyü sabitleyin. Uygun yiyeceği seçin ve bir tarafa koyun ve daha iyi hava sirkülasyonu sağlamak için ikinci tarafı açık bırakın. Son olarak, hayvanlar otomatik sulama ile bir rafa yerleştirilmiyorsa, yeterli su temini sağlamak için bir su şişesi ekleyin. Unutmayın, ATS'nin her seansın sonunda dezenfekte edilmesi ve dezenfeksiyon sırasında üfleyicinin kapalı olması gerekir.
Kafes değişimi için, iki kafesi - uygun yatak malzemesine sahip yeni bir kafes ve hayvanlarla birlikte kullanılmış kafes - ATS'ye yerleştirin. Hayvanlar eski kafesten yeni kafese elle veya yastıklı bir forseps kullanılarak aktarılabilir. Bu yöntemlerin her ikisi de bu koleksiyonun başka bir videosunda tartışılmıştır. Bir seferde yalnızca bir hayvan kafesinin açılabileceğini unutmayın. Erkek fareler veya çöpü olan dişiler için, farelerin yuvalama alanının temiz kafese aktarılmasının hayvanlara geçişte yardımcı olduğu gösterilmiştir. Kafes üstü yeni kafesin üzerine yerleştirildikten sonra, yiyecekleri eski kafes üstünden yeni üste aktarın ve gerekirse daha fazla yiyecek ekleyin. Ardından, bariyerin üstünü yerleştirin ve kafesi rafa geri koyun. Kafesler arasında veya gruplar arasında eldiven değiştirmek iyi bir uygulamadır.
Bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için ambalajın açılma prosedürü biraz farklıdır, çünkü her şeyin steril olması gerekir. Davlumbazın içindeki üfleyicinin kullanımdan en az 24 saat önce açık olması önerilir. İmmün sistemi olan hayvanlarda olduğu gibi, sevkiyat varışta kabı teslim alma odasına dezenfektan bir solüsyonla püskürtün ve 15-30 dakika boyunca açılmadan bırakın. Bağışıklığı baskılanmış fareler için belirlenmiş ATS'de, hayvanları manipüle etmeden 30 dakika önce laminer akış başlığına %70 etanol püskürtün. Bu ambalaj açma faaliyetine iki kişinin katılması idealdir - bir kişi, aseptik teknikler kullanarak hayvanları idare etmek için buharla sterilize edilmiş önlük ve çift steril eldiven giyen steril teknisyen ve diğeri steril olmayan teknisyen olacaktır. temiz bir izolasyon elbisesi ve kontamine olmuş maddeleri işlemek için bir çift eldiven giyiyor. Her ikisi de maske, saç bonesi ve koruyucu gözlük takmalıdır.
Davlumbazın içindeki nakliye konteynırını açmadan önce, tüm malzemeleri ve kafesleri bunların içine yerleştirin ve dışlarına alkol püskürtün. Ve sevkiyat geldikten sonra, alınan hayvan kutusunu davlumbazın içine yerleştirin ve% 70 etanol ile püskürtün. Steril kafesleme için iki seçenek vardır, ya sarılmış ve buharla sterilize edilmiş standart kafes ya da satıcı tarafından ışınlama kullanılarak sterilize edilmiş tek kullanımlık üniteler.
Steril gıdayı açarak ve ardından taşıma kutusunu açarak ambalajdan çıkarma işlemine başlayın. Bu noktada, işleyici ilk steril eldiven çiftini atmalıdır. Daha sonra, steril olmayan kişi steril kafesi açar ve aseptik olarak hayvan bakıcısına geçirir, o da daha sonra kaputu ve tel çubuk kapağını çıkarır ve bunları baş aşağı kaputun içine yerleştirir. Daha sonra, kafes üzerindeki yudum borusu, davlumbazda bulunan istasyonda su ile doldurulur. Son olarak, hayvan bakıcısı hayvanı kafese yerleştirir, tel çubuk kapağıyla sabitler, yiyecek ekler ve kaputu yerine yerleştirir. Steril ortamı korumak için davlumbaz üfleyicinin her zaman açık kalması gerektiğini unutmayın. Sonunda, steril olmayan kişi, doldurulmuş kafesi başlıktan çıkarır ve uygun bir rafa yerleştirir. Gruplar arasında olası çapraz kontaminasyonu önlemek için, hayvan bakıcısı her nakliye konteynerinden sonra eldivenleri değiştirmelidir.
Bağışıklığı baskılanmış hayvanların kafes değişimi için, davlumbaz ve kafeslerin ve KKD'nin hazırlanması, bu hayvanların ambalajlarının açılması ile aynıdır. Ve transfer tekniği, immünokompetan hayvanlarla aynıdır, ancak steril koşullar altındadır.
Şimdi, temel bakım sağlamanın bir diğer önemli yönü olan hayvanlar için uygun barınma koşullarını tartışalım. Fareler ve sıçanlar esas olarak, yatak malzemesi içeren sağlam bir tabana sahip ayakkabı kutusu tipi kafese yerleştirilir. Tipik fare kafesi, maksimum 5 yetişkin fare için yeterli olan 75 inç karelik bir taban alanı sağlar. Öte yandan, bir sıçan kafesi 142 inç karelik bir alana sahiptir ve 2 yetişkin sıçan için yeterlidir. Statik kafesler genellikle bir tel çubuk kapak ile kapatılır ve filtre malzemesi kafes üstünün üzerine bir kaput olarak eklenir. Ayrı ayrı havalandırılan kafesler veya IVC'ler ayrıca bir tel çubuk kapağına ve kaputa sahiptir, ancak bunlar kafese hava akışı sağlayan bir rafa yerleştirilir. Bu, kafesi statik kafesler kadar sık değiştirme ihtiyacını ortadan kaldırır, bu da bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için faydalı olabilir.
Tüm kafes sistemlerinde yiyecek ve su temini için bir hüküm vardır. Hayvan kafesinin içine yerleştirilmiş yemlikler vardır ya da tel çubuk kapağının bir bölümü gıda saklama için kullanılır. Yiyecekler, hayvanlar tarafından kirletilmeyecek şekilde yerleştirilmelidir. Su genellikle kafesin üstüne yerleştirilmiş bir su şişesi veya hayvan kafesinin yerleşik bir bileşeni olan otomatik bir sulama içme vanası aracılığıyla sağlanır. İçme vanası seçeneği için, kafes bir rafa takıldığında, hayvan tesisi boyunca hayvanın ihtiyaçlarını karşılamak üzere tasarlanmış otomatik bir sulama sistemi için su tüpe taşınır.
Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu, tüm kafes aletlerinin en az 2 haftada bir dezenfekte edilmesi gerektiğini belirtir. Bazı kafeslerin ve aksesuarların, muhafazadaki koku ve amonyak seviyesine göre daha sık değiştirilmesi gerekebilir.
Şimdi bağışıklığı yetmez ve bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için uygun yiyecek ve su temini hakkında konuşalım. Değişken protein, karbonhidrat ve yağ bileşimlerine sahip ticari olarak temin edilebilen birçok yem vardır. İdeal olarak, yemler %15-19 protein, %44 karbonhidrat ve %4-9 yağ içermelidir. Bağışıklığı baskılanmış hayvanlar için, yemin sterilize edildiğinden emin olun.
Musluk suyu veya RO suyu olan ters ozmoz, bağışıklığı yeterli hayvanlar için kullanılabilir, ancak bağışıklığı yetersiz hayvanlar için su bir kontaminasyon kaynağı olabilir ve bu nedenle sterilize edilmesi gerekir. Sudaki sterilite, 8 litre RO suyuna 2 damla 12 molar hidroklorik asit eklenerek korunur, bu da suyu 2.5-3 pH'a asitleştirecek ve bakteri üremesini sınırlayacaktır. Daha sonra suyu ayrı şişelere dökün ve üzerlerini alüminyum folyo ile örtün. Yudum tüplü şişe kapaklarını ayrı ayrı bir otoklav torbasına koyun ve buhar sterilizasyonu için her şeyi bir otoklava koyun.
Şimdi hayvan bakımı için gerekli olan standart çevre koşullarını tartışalım.
Kafes düzeyinde, bilimsel olarak gerekçelendirilmedikçe veya bir hayvan diğerleriyle uyumsuz olmadıkça sosyal konut zorunludur. Çevreyi kağıt kulübeler ve yuvalama malzemeleri ile zenginleştirmek, hayvanların yuva kurma ve yuva açma gibi türe özgü davranışlar sergilemesine olanak tanır, bu da stres seviyesini azaltır ve hayvanların genel refahını artırır. Yuvalama malzemeleri ayrıca, aynı kafeste birden fazla erkek farenin barınmasına yardımcı olan sakinleştirici feromonlara doymuş bir uyku alanı sağlar. Daha önce de belirtildiği gibi, kafes değiştirildikten sonra yuvalama alanını temiz kafese taşımak, hayvanlar yeni bir ortama sokulduğundan, özellikle erkeklerde saldırganlığın önlenmesine yardımcı olur. Atimik çıplak hayvanlar için, termoregülasyona yardımcı olmak için kafeslerinde ek yatak takımları ve parçalanmış kağıt türü yuvalama malzemeleri sağlamayı düşünmelidir.
Oda düzeyinde, fareler ve sıçanlar için sıcaklık 68 ile 79 arasında olmalıdır. F. Oda nem seviyesi %30-70 olmalıdır, çünkü daha düşük seviyeler halka kuyruk olarak bilinen bir duruma neden olabilir. Üçüncü oda parametresi aydınlatmadır. Buna ışık yoğunluğu ve döngüler dahildir. Normalde, hayvan odası 12 saatlik aydınlık / 12 saatlik karanlık döngüsüne ayarlanmıştır. Aydınlatma yoğunluğu odadaki aktiviteye göre değişmelidir. Teknisyenler çalışırken, daha yüksek aydınlatma seviyeleri kullanılabilir. Ancak, tüm aktivite sona erdikten sonra yaklaşık 325 lux'e düşürülmelidir. Son olarak, oda içindeki hava akışı da dikkatli bir şekilde kontrol edilmelidir. Her saat başı en az %100 taze hava ile minimum 10-15 hava değişimi yapılmalıdır. Bu, hayvan odasındaki mikropları ve kokuları azaltır.
Son olarak, araştırmacıların deneylerinde laboratuvar hayvanlarının barınması, diyet ve çevre tercihleri hakkındaki bu bilgileri nasıl kullandıklarını görelim.
Daha önce tartışıldığı gibi, laboratuvar hayvanları genellikle stresi azaltan yuva kurma davranışı sergiler ve araştırmacılar bunu hayvan refahının bir göstergesi olarak kullanmışlardır. Bu özel deneyde, bilim adamları inşa edilen yuvayı puanlamak için tarafsız bir sistem geliştirdiler ve daha sonra ortam sıcaklığının yuva kurma davranışı üzerindeki etkisini incelemek için kullandılar. Gördüğünüz gibi, sıcaklıktaki bir artış, skorda önemli bir düşüşe neden oldu ve çevre sıcaklığının hayvan refahındaki rolünü vurguladı.
Farelerin ve sıçanların karbonhidratları sevdiği göz önüne alındığında, araştırmacılar hayvanın motor fonksiyonunu test etmek için farklı şekillerde yem kullandılar. Bu, farklı türdeki gıda işleme görevleri sırasında el becerisini analiz etmeyi ve cerrahi veya farmakolojik müdahaleleri takiben ulaşma davranışını incelemeyi içerir.
Son olarak, fare ve sıçanların gece yaşadıkları ve aydınlatılmış alanları tercih etmedikleri bilinmektedir. Bilim adamları bu bilgiyi, bu türlerdeki kaygıyı incelemek için ortam oluşturmak için kullanırlar. Örneğin, burada yapılan araştırmalar, hayvanları basit bir açık alana soktu ve vahşi tip ve nakavt farelerin iç ve dış bölgelerde, gen yıkımının anksiyete benzeri davranışlar üzerindeki etkisini analiz etmek için harcadıkları zamanı inceledi.
JoVE'nin fareler ve sıçanlar için temel bakım prosedürlerine girişini izlediniz. Artık bu hayvanların çevresinin ve muamelesinin hayvan sağlığına herhangi bir zarar vermemesini sağlamak için alınması gereken önlemleri daha iyi anlamalısınız ve ayrıca araştırmacıların farklı bilimsel hedeflere ulaşmak için bu parametreleri nasıl değiştirebileceklerini de bilmelisiniz. Her zaman olduğu gibi, izlediğiniz için teşekkürler!
Related Videos
13:40
Lab Animal Research
190.8K Görüntüleme
13:54
Lab Animal Research
38.1K Görüntüleme
13:04
Lab Animal Research
59.5K Görüntüleme
13:46
Lab Animal Research
27.9K Görüntüleme
15:06
Lab Animal Research
109.6K Görüntüleme
12:32
Lab Animal Research
40.6K Görüntüleme
12:34
Lab Animal Research
34.5K Görüntüleme
12:21
Lab Animal Research
56.9K Görüntüleme
16:35
Lab Animal Research
187.9K Görüntüleme
12:27
Lab Animal Research
80.9K Görüntüleme
12:35
Lab Animal Research
54.8K Görüntüleme
10:12
Lab Animal Research
24.0K Görüntüleme
18:52
Lab Animal Research
62.9K Görüntüleme
12:24
Lab Animal Research
36.4K Görüntüleme