Name: Hamster Oosit ve Fare Embriyolar Toplama ve Kriyoprezervasyon (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-03-27T00:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 36 s
Description: Öğrenin hamster oosit ve fare embriyoları için kriyoprezervasyon yöntemini. Bu güvenilir teknik, yüksek çözülme sonrası hayatta kalma oranları sağlar ve üreme biyolojisi araştırmalarında genetik materyalin korunmasına yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma, İspanyol Ministerio de educacion y Ciencia (BIO 2.006-11.792) ve Generalitat de Catalunya (2005-SGR00437) tarafından desteklenmiştir . Yazarlar medya hazırlanmasında Marc Puigcerver ve Jonatan Lucas kendi teknik yardım için teşekkür etmek istiyorum. Servei d&#39;Estabulari tüm personeli, hayvan barınağı için kabul ve özellikle bu video kayıt ek katkı Juan Jose Martin ve Javier Benito. NCB Ciencia e Tecnologia ve SG, Portekizce Fundação para İspanyolca Ministerio de educacion y Ciencia bir adam bir adam .

Hayvan bakım ve prosedürleri, Barselona, ​​İspanya Universitat Autonoma Hayvan ve İnsan Araştırma Etik Komitesi tarafından onaylanmış kurallar ve düzenlemelere göre yapılmıştır. I. Oosit toplama <ol><li> Altın Suriye suşu kalın bir vajinal akıntı (postovulatory akıntı) varlığı için; dişi hamster (8-12 hafta eski Mesocricetus auratus) kontrol edin ve seçin. </li><li> 60 saat sonra intraperitoneal (Gebe Kısrak Serum gonadotropin) hCG (insan koryonik gonadotropin) 40 IU 40 IU PMSG superovulate için seçilen kadın neden. </li><li> Karbon dioksit odası hCG uygulanmasından 16 saat sonra dişi hamster Euthanize. </li><li> Siyon hatası videoda gösterildiği gibi kadın izole etmek ve KSOM-H orta bir damla aktarabilirsiniz. </li><li> 37 hiyalüronidaz (156 U / ml), bir damla stereoskopik mikroskop altında yumurtalık ampulla yırtarak oosit-kümülüs kompleksleri toplayın ° C. Oosit kümülüs hücreleri yaklaşık 5 dakika içinde serbest olacak. </li><li> Hiyalüronidaz gelen oosit pick up ve KSOM-H orta ve iki kez yıkayın. </li></ol> Fare embriyo toplanması için, dişi farelerde (Mus musculus; 6-8 hafta eski) daha sonra 5 IU hCG 48 saat takip ve erkek fareler ile evlendirilen PMSG 5 IU intraperitoneal superovulate indüklenen. Dişiler 24-26 servikal dislokasyon ile sakrifiye pronükleer, 2-hücre veya 4-hücreli aşamada embriyoların sırasıyla obtention hCG uygulandıktan sonra 44-46 veya 54-56 saat. Pronükleer embriyoların toplanması tam bir hamster oosit açıklandığı gibi yapılır. 2-hücre ve 4-hücreli aşamada Embriyolar KSOM-H orta [6] siyon hatası kızarma toplanır. Not: Bu protokol sonrasında yaklaşık olarak 20 ila 30 oosit / embriyoların her kadın alınacak . II. Dondurma ve çözme çözümler hazırlanması <ol><li> Propilenglycol KSOM-H (propilenglycol 1.5 M) 5 ml, 0.57 ml seyreltilmesiyle çözüm hazırlayın. </li><li> 0,2052 g sakkaroz (sakkaroz 0.3 M) ile bir tüp KSOM-H 2 ml ekleyerek çözülme çözüm hazırlayın. </li><li> 0,0684 g sakaroz (1.5 propilenglycol M ve 0.1 M sakkaroz) ile bir tüp çözümü ben 2 ml ekleyerek donma çözüm hazırlayın. </li></ol> Not: Çözüm I ve çözümler dondurma ve çözme sadece kendi kullanmadan önce hazır olmalıdır. Ancak, donma ve çözülme çözümler hazırlanması için kullanılacak sakaroz belirtilen miktarlarda avans ağırlıklı ve birkaç ay için 3 ml tüpler oda sıcaklığında muhafaza edilebilir. III. Donma protokol <ol><li> Transfer oosit / KSOM-H orta çözümü ben bir damla ve 7-15 dakika oda sıcaklığında inkübe embriyolar. </li><li> Bu arada, 90 video (1 damla her çözüm / saman) görüldüğü gibi, dondurma ve çözme çözümler ul damla koyarak payet yüklemek için 90 mm petri hazırlar. </li><li> İstenilen sayıda oosit / embriyo dondurma çözüm damla aktarın. Not: Biz genellikle 5 ila 30 oosit veya embriyo / bırak arasında transfer. </li><li> Ağız kontrollü aspirasyon sistemi bir saman takın ve bu sırada aşağıdaki yükü: çözümü, hava, oosit, hava, çözülme damla, hava ile dondurma bırak. </li><li> Saman yüklendikten sonra, saman ve mühürler Bu amaçla en sonunda polimer ulaşan ilk damla (çözüm) tanıtıldı kadar aspire tutun. Termo-plastik bir fiş ile saman veya mühür mühür diğer ucunu. </li><li> Programlanabilir dondurucu açın ve donma programı seçin. Bu protokolde kullanılan dondurma programı, Lassalle ve arkadaşları tarafından yayınlanan soğutma hızları dayanır. [7]: <ul><li> -7 Oda sıcaklığında 2 ° C / dak ° C 0 ° C / dk 10 dk tohum sıcaklık dengeleme ve indüksiyon için izin (aşağıya bakın) </li><li> -7 &#39;Den 0,3 ° C / dak ° C ila -30 ° C 0 ° C / dk 2 dk sıcaklık dengelenmesi için izin </li><li> 35 ° C / dak -30 ° C -130 ° C </li></ul></li><li> Çözülme çözüm damla ile saman parçası dışa karşı karşıya olduğunu emin olun, programlanabilir dondurucu sahibinin yuvaları payet yükleyin. Donma programını başlatın. </li><li> Örnek sıcaklığı -7 ° C ve soğutma beklemeye ulaştığında, elle tohumlama gerçekleştirin: sıvı azot içine atılmak forseps, hemen çözüm çözülme damla içeren payet bölümünü ortaya çıkarmak için, hafifçe dışarı dondurucu sahiplerine doğru çekin ve forseps ile payet bu dokunun. Sahibinin her tutucu ve her saman için tekrarlayın ve sonra donma program sonuna kadar işletilen sağlar. </li><li> Program tamamlandığında, sıvı nitrojen içinde sahiplerine dalıyoruz. </li><li> Payet Kaldıretiketli gobelet sahipleri ve aktarabilirsiniz. </li><li> Son olarak, bir sıvı nitrojen tankı içinde gobelet saklayın. </li></ol> IV. Protokol Çözülme <ol><li> Sıvı nitrojen tankı saman çıkarın. </li><li> 40 saniye boyunca oda sıcaklığında saman koruyun. </li><li> 40 saniye boyunca 30 ° C&#39;de su banyosunda saman bekletin. </li><li> Saman fişi çıkarın veya termo-mühürlü ucu kesmek. </li><li> 35 mm petri saman boşaltın ve hafifçe donma ve çözülme çözümler içeren iki damla karıştırın. </li><li> Oda sıcaklığında 15 dakika boyunca karışımı oosit / embriyoların bırakın. </li><li> 37 KSOM-H taze bir damla ilave bir 15 dakika için oosit / embriyo transferine ° C </li><li> Oosit / embriyoların şimdi manipülasyon için hazır. </li></ol> Not: 6. ve 7. adımları sırasında çözülmüş oosit / embriyoların yavaş rehidrasyon için nedeniyle şişer göreceksiniz. V. Temsilcisi Sonuçlar Kriyoprezervasyon protokol burada bir hamster oosit için yaklaşık% 95 ve&gt;% 90,% 85 ve fare B6CBAF1 embriyolar pronükleer, 2-hücre ve 4-hücreli aşamaları sırasıyla% 80, sağ kalım oranı sonuçlar bildirdi. Fare embriyoları çözme sonrası KSOM in vitro kültür, en az 70 ila% 80, en iyi kültür koşullarında blastosist aşamasına ulaşması gerekir. (Saman) ve oosit / embriyo dondurma her deneyde bir kontrol grubu yer almasını tavsiye ederiz oosit / embriyo geri kalanında daha fazla manipülasyonları için kullanılan önce bu grup Çözülme. Kontrol grubunda sağkalım oranları beklenenden daha düşük ise, aynı partinin diğerine saman Çözülme. Bu ikinci grup için sağkalım oranları da düşük ise, bu dondurma çok kalan payet atın.

<ol><li>Whittingham, D. G., Leibo, S. P., Mazur, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+mouse+embryos+frozen+to+-196+and+-269+%C2%B0C%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Survival of mouse embryos frozen to -196 and -269 °C.</a> Science. 178, 411-414 (1972).</li>
<li>Wilmut, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+cooling+rate%2C+warming+rate%2C+cryoprotective+agent+and+stage+of+development+on+survival+of+mouse+embryos+during+freezing+and+thawing%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">The effect of cooling rate, warming rate, cryoprotective agent and stage of development on survival of mouse embryos during freezing and thawing.</a> Life Sci. 11, 1071-1079 (1972).</li>
<li>Parkening, T. A., Tsunoda, Y., Chang, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+various+low+temperatures%2C+cryoprotective+agents+and+cooling+rates+on+the+survival%2C+fertilizability+and+development+of+frozen-thawed+mouse+eggs%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Zool%22%5BJournal%5D)">Effects of various low temperatures, cryoprotective agents and cooling rates on the survival, fertilizability and development of frozen-thawed mouse eggs.</a> J. Exp. Zool. 197, 369-374 (1976).</li>
<li>Schneider, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryobiological+principles+of+embryo+freezing%5BTitle%5D)+AND+%22J.+In+Vitro+Fert.+Embryo+Transf%22%5BJournal%5D)">Cryobiological principles of embryo freezing.</a> J. In Vitro Fert. Embryo Transf. 3, 3-9 (1986).</li>
<li>Vajta, G., Kuwayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+cryopreservation+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Improving cryopreservation systems.</a> Theriogenology. 65, 236-244 (2006).</li>
<li>Duselis, A. R., Vrana, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrieval+of+mouse+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Retrieval of mouse oocytes.</a> JoVE. 3, (2007).</li>
<li>Lassalle, B., Testart, J., Renard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+embryo+features+that+influence+the+success+of+cryopreservation+with+the+use+of+1%2C2+propanediol%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil.+Steril%22%5BJournal%5D)">Human embryo features that influence the success of cryopreservation with the use of 1,2 propanediol.</a> Fertil. Steril. 44, 645-651 (1985).</li>
<li>Ibáñez, E., Grossmann, M., Vidal, F., Egozcue, J., Santaló, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryopreservation+of+caprine+beta-lactoglobulin+transgenic+mouse+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Cryobiology%22%5BJournal%5D)">Cryopreservation of caprine beta-lactoglobulin transgenic mouse embryos.</a> Cryobiology. 35, 290-298 (1997).</li>
<li>Dinnyes, A., Wallace, G. A., Rall, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+genotype+on+the+efficiency+of+mouse+embryo+cryopreservation+by+vitrification+or+slow+freezing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Reprod.+Dev%22%5BJournal%5D)">Effect of genotype on the efficiency of mouse embryo cryopreservation by vitrification or slow freezing.</a> Mol. Reprod. Dev. 40, 429-435 (1995).</li>
<li>Tateno, H., Kamiguchi, Y., Mikamo, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+freezing+and+thawing+method+of+hamster+oocytes+designed+for+both+the+penetration+test+and+chromosome+assay+of+human+spermatozoa%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Reprod.+Dev%22%5BJournal%5D)">A freezing and thawing method of hamster oocytes designed for both the penetration test and chromosome assay of human spermatozoa.</a> Mol. Reprod. Dev. 33, 202-209 (1992).</li>
<li>Biggers, J., McGuinnis, L. K., Raffin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino+acids+and+preimplantation+development+of+the+mouse+in+the+protein-free+KSOM%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Reprod%22%5BJournal%5D)">Amino acids and preimplantation development of the mouse in the protein-free KSOM.</a> Biol. Reprod. 63, 281-293 (2000).</li>
</ol>

Bu protokol, bir hamster oosit ve fare embriyoları ile başarıyla Kriyoprezerve olabilir. Bir kez dondurulmuş, oosit / embriyoların sıvı nitrojen tanklarında süresiz saklanır ve istenilen herhangi bir yerde veya zamanda telafi edilebilir. Bu ihtiyaç duyulduğunda kullanmak örneklerin neredeyse hazır sahip olmanın avantajını sunar. Öte yandan, bu protokol de, canlı hayvan kolonileri bakımı, ekonomik ve güvenli bir alternatif olarak değerli fare suşları (transgenik hatları gibi), embriyo cryobanks oluşturmak için kullanılır. Bu protokol bir ham...

<table><tbody><tr><td>Materyal Adı</td><td>Tür</td><td>Şirket</td><td>Katalog Numarası</td><td>Yorum</td></tr><tr><td>Fransız tipi mini-pipet 0.25 ml</td><td></td><td>Mini-tub</td><td>13407/0010</td><td></td></tr><tr><td>hCG</td><td></td><td>Farma-Lepori, İspanya</td><td>749036.4</td><td></td></tr><tr><td>Hiyaluronidaz</td><td></td><td>Sigma</td><td>H-3884</td><td></td></tr><tr><td>KSOM-H medyumu</td><td></td><td></td><td></td><td>Ref. [11]</td></tr><tr><td>Sıvı Azot</td><td></td><td>Air Liquide</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Plastik tıkaçlar</td><td></td><td>Mini-tub</td><td>19046</td><td></td></tr><tr><td>PMSG</td><td></td><td>Intervet, İspanya</td><td>1.614/8447</td><td></td></tr><tr><td>Propilenglikol</td><td></td><td>Fluka</td><td>82280</td><td></td></tr><tr><td>Sükroz</td><td></td><td>Merck</td><td>107687</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td></td><td>Aesculap</td><td>BC-060R; BG-061R</td><td></td></tr><tr><td>Termo-mühürleyici</td><td></td><td>SIZ</td><td>220</td><td></td></tr><tr><td>35 ve 90 mm kültür kapları</td><td></td><td>Nunc</td><td>153066; 150350</td><td></td></tr><tr><td>10 ml tüpler</td><td></td><td>Greiner Bio-one</td><td>163160</td><td></td></tr><tr><td>Azot tankı</td><td></td><td>MVE, Cryogenics</td><td>XC 43/28</td><td></td></tr><tr><td>Programlanabilir Dondurucu</td><td></td><td>Planner Products Ltd.</td><td>Kryo-10 Series III</td><td></td></tr><tr><td>Pens</td><td></td><td>Aesculap</td><td>BD-331R; BD-053R; OC-020R</td><td></td></tr></tbody></table>

hamster oosit ve fare embriyolar toplama ve kriyoprezervasyon

Collection and Cryopreservation of Hamster Oocytes and Mouse Embryos

Zaman Whittingham Embriyolar ve oositlerin ilk başarıyla, 30 yıldan daha uzun önce Kriyoprezerve edildi<i&gt; Ve ark.</i&gt;<sup&gt; 1</sup&gt; Ve Wilmut<sup&gt; 2</sup&gt; Ayrı Parkening fare embriyoları ° C ve birkaç yıl sonra -196 dondurulur ve saklanır olabilir tanımlanmıştır<i&gt; Ve ark.</i&gt;.<sup&gt; 3</sup&gt; Kriyoprezerve oositlerin in vitro fertilizasyon (IVF) kaynaklanan canlı yavrular doğum bildirdi. O zamandan beri, kriyoprezervasyon teknikleri kullanımı, insan ve hayvan üremeye yardımcı uygulama ve hayvan genetik kaynaklarının korunması konusunda önemli bir bileşeni haline hızla yayıldı. Yavaş dondurma ve vitrifikasyon: Şu anda, oosit ve embriyoların cryopreserve için kullanılan iki ana yöntem vardır. Kriyoprezerve embriyolar, hayvan ve binlerce çocuk her iki tekniğin ve milyonlarca artırmak için çok çeşitli yaklaşımlar denemek için kullanılmıştır doğmuştur. Ancak, dondurulması ile ilişkili önemli eksikliklerin hala buz kristali oluşumu, çözüm etkileri ve ozmotik şok sonrası çözülmüş oosit ve embriyolarda çeşitli cryoinjuries neden olacak gibi görünüyor bu yana, aşılabilir. Programlanabilir dondurucular Yavaş dondurma genellikle kimyasal toksisite ve ozmotik şok ile ilişkilidir cryoprotectants, düşük konsantrasyonlarda kullanılarak avantajı vardır, ama düşük konsantrasyonlarda buz kristali oluşumunu önlemek için yeteneği sınırlıdır. Yavaş dondurma, ayrıca manuel veya otomatik tohumlama kullanarak kaçınılmalıdır soğuma etkileri indükler<sup&gt; 4</sup&gt;. Vitrifikasyon süreçte, yüksek konsantrasyonlarda cryoprotectants buz kristallerinin oluşumunu engeller ve su katılaşmış olduğu bir glasslike vitrifiye devlet oluşumuna yol, ancak genişletilmiş değil. Ancak, kullanılan konsantrasyonlarda cyroprotectants toksisite nedeniyle oosit / embriyoları sıvı nitrojen içinde doğrudan örnekleri daldırarak önce, zaman çok kısa sürede ve en az bir ses çözümü dölveriminin çözüm maruz bırakılmamalıdır.<sup&gt; 5</sup&gt;. Pahalı ekipman (programlanabilir dondurucu) gerekli olduğu çok hızlı bir yöntem olması nedeniyle son on yıl içinde, vitrifikasyon daha popüler hale gelmiştir. Ancak, yavaş dondurma oosit / embriyo dondurulması için en yaygın kullanılan yöntem olmaya devam etmektedir. Bu video-makale-çözülme sonrası sağkalım oranları yüksek bir hamster oosit toplamak ve yavaş yavaş dondurma nasıl adım adım göstermektedir. Aynı işlem, başarılı bir şekilde dondurma ve preimplantasyon gelişimi farklı aşamalarında fare embriyoları Çözülme uygulanabilir.

Bu video-makale-çözülme sonrası sağkalım oranları yüksek bir hamster oosit toplamak ve cryopreserve nasıl bir adım-adım gösteri sunuyoruz. Aynı işlem, başarılı bir şekilde dondurma ve preimplantasyon gelişimi farklı aşamalarında fare embriyoları Çözülme uygulanabilir.

Hamster Oosit ve Fare Embriyolar Toplama ve Kriyoprezervasyon

Embriyolar ve oositler, Whittingham ve arkadaşları 1 ile Wilmut'un 2 fare ... olduğunu ayrı ayrı tanımladıkları 30 yılı aşkın bir süre önce ilk kez başarıyla kriyoprezerve edilmiştir.

collection-and-cryopreservation-of-hamster-oocytes-and-mouse-embryos

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu protokol, farelerde yumurtalık açılan oosit ve erken evre döllenmiş embriyolar tekniği göstermektedir. Infindibulum belirlemek ve künt bir sonu iğne içine girmek için doğru işlemi gerçekleştirmeden yeteneği esastır.

Fare Oosit alımı

Oosit mayotik olgunlaşması sırasında kromozom segregasyon hataları nedeniyle anöploidi yatkındır. Anöploid yumurta, kısırlık, düşüklere veya gelişimsel bozukluklar, Down sendromu gibi neden olabilir. Burada, yumurta ve mayotik olgunlaşma incelemek ve Ploidi değerlendirmek için yöntemler seçim malzemeleri tanıtmak için yöntemler açıklanmaktadır.

Fare Oosit Mikroenjeksiyon, olgunlaşması ve ploidi Değerlendirmesi

Fare embriyoları için etilen glikol tabanlı Vitrifikasyon yöntemi açıklanmıştır. , Sadeliği ve düşük embriyonik toksisite diğer yöntemler için avantajlı olduğunu ve bu nedenle farelerin kendilenmiş ve gen modifiye fareler de dahil olmak üzere birçok suşları, genel olarak uygulanabilir.

Etilen Glikol Tabanlı Vitrifikasyon Fare Embriyolar Kriyoprezervasyon

Karşılaştırmalı tür yaklaşım davranışsal sinirbilimciler, belirli bir hayvan modelinin karakteristik olarak görülmelidir özel davranışları ile ilgili çeşitli nörobiyolojik faktörler keşfetmek için izin verir. Yakından ilgili türler arasındaki davranış farklılıkları doğal olarak meydana gelen yararlanarak, bu tekniği invaziv tekniklerin davranış ifade işlemek için gerekli değildir.

Baba Yanıtları Nörobiyoloji incelenmesi Karşılaştırmalı Türlerin Yaklaşım

Burada fare sperm dondurulması için yeni geliştirilen I • Cryo kiti göstermektedir. Sperm ile dondurulmuş çözülmüş İki hücreli evre embriyo gelişimi bu kit kullanımı ile 5 fare suşlarının sürekli geliştirildi. 1.5 yıllık bir dönemde, 49 genetiği değiştirilmiş fare hatları I • Cryo kiti ile sperm dondurulması tarafından arşivlendiği ve daha sonra başarılı IVF tarafından kurtarıldı.

I · Cryo Kit kullanarak Fare Sperm Kriyoprezervasyon ve Kurtarma

Burada, fare oosit mayoz mili montaj ve organizasyon değerlendirmek için immünoflüoresans analizi ile takip özgü siRNA aracılı mRNA tükenmesi için bir protokol mevcut. Bu protokol, transkript in vitro tükenmesi ve farklı mili ve / veya oositlerde MTOC ilişkili faktörler fonksiyonel değerlendirmesi için uygundur.

SiRNA aracılı susturma Mouse Oositlerinin içinde mayoz Mili Değerlendirmesi

Bu makalede, verimli bir şekilde elde ve pluripotent kök hücre satırlarından fare embriyoların blastosist aşamasında kültür için bir protokol.

Fare Preimplantasyon embriyo kök hücre satırlarından türetme

Burada, tek hücreli embriyoların kriyopreservation için değiştirilmiş bir yöntem yanı sıra genetik olarak değiştirilmiş farelerin verimli nesil için dondurulmuş çözülmüş embriyolar ve elektroporasyon kullanarak çiftler bir protokol sıyoruz.

Genetiği Değiştirilmiş Farelerin Yüksek Verimli Üretimi için Dondurulmuş Çözülmüş Embriyoların Kullanımı

Bu el yazması, olgunlaşmamış kedi yumurtalarının ticari destekler de laboratuvar yapımı ortamla minimum hacimli vitrifikasyonuna ilişkin bir protokolü açıklamaktadır. Oosit izolasyonundan ex vivo gonadlardan vitrifikasyon ve ısınmaya kadar her adımı kapsar.

Olgunlaşmamış Kedi Yumurtalarının Minimum HacimVitrifikasyonu

Bu protokol, fare oositlerinin in vitro olgunlaşması, in vitro döllenme ve ardından blastosist evresine kadar embriyo kültürü prosedürlerini açıklar.

Fare Oositleri In Vitro Olgunlaşma, Döllenme ve Preimplantasyon Embriyolarının Kültürü

Öğrenin hamster oosit ve fare embriyoları için kriyoprezervasyon yöntemini. Bu güvenilir teknik, yüksek çözülme sonrası hayatta kalma oranları sağlar ve üreme biyolojisi araştırmalarında genetik materyalin korunmasına yardımcı olur.

Hamster Oosit ve Fare Embriyolar Toplama ve Kriyoprezervasyon

Daha fazla video keşfet