Deniz suyu Örnekleme ve Tahsilat

Merhaba, ben British Columbia Üniversitesi Mikrobiyoloji ve İmmünoloji Bölümü'ndeki Stephen Hallam Laboratuvarı'ndan Elena Kova. Bugün size fiziksel, kimyasal ve biyolojik analizler için deniz suyu toplama prosedürünü göstereceğiz. Laboratuvarımızda bu prosedürü deniz sularının okyanus grafik parametrelerini incelemek için kullanıyoruz.

Öyleyse başlayalım. İlk olarak, her bir dökümdeki döküm sayısı ve derinlik atanır, daha sonra örneklenecek derinlikler ve mevcut döküm için toplanacak toplam hacim belirlenir. Go flow ve akraba suyu numune alma cihazlarının açık konumda olduğundan ve tüm vanaların ve tıkaçların kapalı olduğundan emin olun.

CTD'yi hattın tabanına takın ve profildeki en derin derinlik için suya indirin. CTD'yi hemen takip eden hatta bir numune alma cihazı getirin. Misinanın cihaz braketine düzgün şekilde takıldığından ve vidaların sıkıldığından emin olun.

Suya indirmeden önce en derin örnekleme derinliği dışında her cihaza ağırlıklı bir haberci takın. Çizgiyi ve belirtilen ilk derinlik ile bir sonraki derinlik arasındaki mesafeyi indirin, ardından başka bir örnekleme cihazı donatın. Büyük hacimli su numunelerinin toplandığı derinlik aralıkları için, yaklaşık 0,75 metre aralıklarla art arda toplam iki x 12 litrelik şişenin yüklendiğini unutmayın.

Tüm cihazlar hatta girdikten sonra, hattı en derin derinliğe indirin ve iki dakika geçmesine izin verin. Her cihazı yakın konuma getirerek bir haberci gönderin. Hattı kurtarmadan önce birkaç dakika geçmesine izin verin.

Tüm cihazların kapalı olduğundan emin olmak için, hattı sarın ve her cihazı sudan çıkarken güverteye boşaltın. Protein DNA veya RNA saflaştırması için büyük numune hacimleri gerektiren derinlikler için, birlikte iki numune alma cihazı kullanın. RNA'yı hemen bir şişeden toplayın ve gemide süzün.

Diğer şişedeki kimyasalları ve besinleri örnekledikten sonra, 20 litrelik bir nihai hacim elde etmek için kalan suyu arabaya boşaltın. Düşük hacimli numuneler için, steril Nalgene şişelerinde filtrasyon için bir litre su ayırın. Tipik olarak 16 derinlik aralığından düşük hacimli numuneler 16 x bir litrelik numuneler ve altı x 20 litrelik numuneler yüksek hacimli numuneler olarak toplanır.

Gaz numuneleri toplarken daima oksijen ve eser gaz numuneleri alın. İlk olarak, su örnekleme cihazının musluğuna ince bir boru parçası takın. Borunun diğer ucunu glos serum şişelerine yerleştirin.

Serum şişesini üç kez durulayın, ancak numune suyu alın ve hava kabarcığı olmayacak şekilde taşana kadar doldurun. Serum şişesine 50 mikrolitre cıva klorür ekleyin. Numunenin içine hava kabarcıkları girmemesine dikkat edin.

Serum şişesini alüminyum kapaklı kauçuk bir tıpa C kıvrımı ile kapatın ve ardından nitrat, fosfat ve silikat dahil olmak üzere besin ölçümleri için numune toplamak üzere buz üzerinde saklayın. Önce 60 cc'lik bir şırıngayı numune suyu ile durulayın. Ardından sıraya 0,2 mikrometrelik bir acro disk filtresi takın.

Şırıngadan yaklaşık iki ml su itin. Filtreyi temizlemek için. Bir polietilen şişeyi yaklaşık 10 ml filtrelenmiş su ile üç kez durulayın.

Durulama sırasında şişeyi çalkalayın, ardından yaklaşık dörtte üçü dolu şişelere filtrelenmiş numune suyu ekleyin. Numuneyi buz üzerinde saklayın. Amonyak ölçümleri için numune toplamak için distal su toplama tüplerini boşaltın.

Önce toplama tüplerini durulayın, ancak suyu tamamen örnekleyin. 10 ml'lik dereceli bir silindiri, dereceli silindirden beş ml numune suyunda numune su borusu ile doldurun ve kalanını silindirden boşaltın. Ardından beş ml'yi tekrar boş silindire ekleyin.

Tüm derinliklerden numuneler toplandıktan sonra, her tüpe 7.5 ml amonyum işleme reaktifi yerleştirildi. Hücre sayımları için numune toplamak için, %4'lük bir nihai konsantrasyon için 5.4 ml, %37 formalite yüksekliği içeren önceden etiketlenmiş 50 ML Falcon tüpünü 50 ml işaretine kadar doldurun Tüpün taşmamasına dikkat edin. Numuneleri toplamak için numuneyi buz üzerinde saklayın.

Hidrojen sülfür ölçümleri için. Üstüne üç ml,% 20 çinko asetat içeren önceden etiketlenmiş 50 ML Falcon tüpünü doldurun. Tüpün taşmamasına dikkat edin.

Küçük hacimleri toplamak için numuneyi buz üzerinde saklayın. Biyokütle konsantrasyonu için. Biyokütle konsantrasyonu için büyük hacimler toplamak için bir litrelik Nalgene şişelerini en üste kadar doldurun.

Üstüne 20 litrelik damacanaları doldurun. Deniz suyu örneklemesinin nihai sonucu yaklaşık 32 ila 48 arasındadır. Gaz numuneleri, 32 amonyum numunesi.

16 hidrojen sülfür örneği. Hücre sayımı için 16 örnek. Altı adet 20 litrelik araba, 16 adet bir litrelik şişe ve dört adet sterex.

İkinci nokta, mikrobiyal biyokütle içeren iki mikrometre filtresi daha sonra kullanılmak üzere korunur. RNA izolasyonu. Biyokimyasal analiz için farklı türde su örneklerinin nasıl toplanacağını gösterdik.

Bu, çok fazla hazırlık ve planlama gerektirir. Bu nedenle, işleri düzene sokmak için yolculuktan iki gün önce ve temizlik için bir gün sonra bütçe ayırın, tuzlu suyun bir peralt pompasıyla veya saha ekipmanını taşımak için kullanılan alüminyum zago kutusuna temas etmesine izin vermeyin. Ekipmana saygılı davranın ve uzun süre iyi hizmet edecektir.

İşte bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler ve deneylerinizde iyi şanslar.