Zebra balığı Tüm Dağı Yüksek Çözünürlüklü Çift Floresan Yerinde Hibridizasyon

Bu prosedür, zebra balığı embriyolarında gen ekspresyon modellerini yüksek çözünürlükte belirlememize izin verir, bir antisens ribo probu, tamamlayıcı hedef mRNA'ya hibritlenir. Etiketli Ribo probu, bir peroksidaz enzimine konjuge edilen bir antikor tarafından tanınır: embriyolara aramid konjuge floro dört eklenir ve peroksidaz, IDE'yi oldukça reaktif bir bileşiğe dönüştürür. Floro dörtlü bağlanmamış IDE'nin kararlı bir şekilde birikmesine yol açarak, mRNA dağılımının ayrıntılı hücre altı modelini ortaya çıkararak yıkanır.

İkinci bir genin ekspresyonu, belirgin bir şekilde etiketlenmiş bir prob ve farklı bir tyrom fluoro four kullanılarak gözlemlenebilir ve bu da ekspresyonun ayrıntılı olarak karşılaştırılmasına olanak tanır. Merhaba, ben Yale Üniversitesi Moleküler, Hücresel ve Gelişimsel Biyoloji Bölümü'ndeki Scott Holly'nin laboratuvarından Tim Brent. Bugün size tüm laboratuvarlarda zebra zebra balığı embriyolarının tam montajlı yüksek çözünürlüklü çift floresan in situ iki hibridizasyonuna yönelik bir prosedür göstereceğiz.