27 Mayıs 2010
Telemetrik EKG, kardiyak aritmiler ve ani kardiyak ölüm için hayvan modellerinde değerlendirilmesinde önemli bir araç olarak ortaya çıkmıştır. Burada, fareler üzerinde yapılan uzun vadeli ambulatuvar EKG monitorizasyonu uygulama için telemetrik EKG kayıtları kademeli bir kılavuz mevcut.
Fareyi tıraş ederek, anestezi altına alarak ve planlanan operasyon bölgesindeki karın ve göğüs bölgesini sterilize ederek Beacon cerrahisini gerçekleştirin; peritonu açığa çıkaracak şekilde skapelle karın bölgesine dikey bir orta hat insizyonu yapın. Telemetrenin yerleştirilmesi için peritonda başka bir dikey orta hat insizyonu yapın. TER'i, sadece iletkenler açıkta kalacak şekilde sağ karın bölgesinde peritonun altına yerleştirin.
Ardından, negatif veya beyaz elektrot sağ üst göğüs bölgesine, pozitif veya kırmızı elektrot ise sol üst karın bölgesine yerleştirilecek şekilde TER elektrotlarını deri altına implante ederek peritonu kapatın. Son olarak cildi sütürlerle kapatın. Merhaba, ben Baylor College of Medicine Tıp Bölümü'nde Xandr Wearan laboratuvarından Mark McCauley.
Bugün sizlere farelere EKG TER implantasyonu tekniğini göstereceğim. Bu tekniği, farelerde kalp hızı ve kalp ritmindeki değişiklikleri incelemek için kullanıyoruz. Haydi başlayalım.
Bir ECG TER'i fareye yerleştirmeden önce, TER'in steril olduğundan ve düzgün çalıştığından emin olmak önemlidir. Bu, kırmızı pozitif uca ve beyaz negatif uca sahip, Data Sciences International marka küçük hayvan telemetresine bir örnektir. Her uçta, yalıtkan bir kılıf, iki milimetre açıkta kalan tel ve ucun cilt üzerinden aşınmasını önleyen plastik kaplı bir uç bulunur.
Yeni telemetri cihazları üretici tarafından genellikle steril durumda sağlanır, ancak TER'ler zyme %1'lik çözelti ile dört saatten fazla süreyle hava temizlemesi yapıldığı takdirde yeniden kullanılabilir. Ek olarak, ECG Telemetre'yi sterilize etmek için gece boyunca WA OFI O bir dezenfektan kullanın. Farelere implantasyon yapmadan önce dezenfektanın steril su ile yıkandığından emin olun.
Telemetre kablolarının hem iletken tellerinin hem de yalıtkan kılıfının bütünlüğünü kontrol edin. Bir mıknatıs kullanarak telemetri vericisini açın ve sinyali AM radyo frekansı üzerinden test edin. Sinyal güçlü ve net olmalı; tellerin hareket ettirilmesine bağlı olarak yoğunluk ve perde açısından değişiklik göstermelidir.
Model numarasını, TER seri numarasını ve ECG kalibrasyon değerini kaydedin. Uygulanabilirse, üreticiler genellikle TER'in implantasyondan 24 saat önce açık tutulmasını önerirler. Kendi özel TER cihazınız için kullanım kılavuzuna başvurun.
TER elektrodunu hazırlamak için, negatif veya beyaz ucu yaklaşık 3,5 santimetre ve pozitif veya kırmızı ucu 2,5 santimetre olacak şekilde kesin. Bu uzunluklar, negatif ucun sağ göğüse ve pozitif ucun sol abdomene implantasyonu için optimal uzunluklardır. Ardından, yedi milimetrelik teli açığa çıkarmak için yalıtım kılıfını çıkarın.
Metal iletkenin uçlarını hızlı yapıştırıcı ile boyayın ve ardından metal uçlara iletken kapaklarını takın. Bu kapaklar, iletken yerleşimi nedeniyle oluşabilecek cilt erozyonunu önleyecektir. Doğal kalp ritminin elektriksel algılanması için metal telin yaklaşık iki ila üç milimetresi açıkta bırakılmalıdır.
Cerrahi işlemde steril tekniklerin kullanımı kritik öneme sahiptir. Telemetrenin implantasyonu için steril eldivenlere, steril bir örtüye ve altı adet O prolin sütüre ihtiyacınız olacaktır. Tüm cerrahi aletler, 250 °C'ye ısıtılmış bir cam boncuk sterilizatörde sterilize edilmelidir.
Bunlar; iki çift pens, bir çift küt uçlu makas, bir skalpel ve bir iğne tutucuyu içerir. TER'i daha önce açıklandığı şekilde sterilize ettiğinizden ve yıkadığınızdan emin olun. Fareyi cerrahi işlem için hazırlamak amacıyla kullanın.
Öncelikle hayvanı bir indüksiyon kutusunda anesteziye alın. Farede yeterli sedasyon sağlandığını ayak parmağı sıkıştırma testi ile doğruladıktan sonra, farenin karnını ve göğsünü elektrikli tıraş makinesi ile tamamen tıraş edin. Fareyi izoflorin ile yeniden anesteziye alın ve ardından fareyi sabit akışlı bir anestezi tüpüne aktarın.
Hayvanı, başı karşıya ve kuyruğu size bakacak şekilde sırtüstü pozisyona getirin. Farelerin pençelerini ısıtmalı cerrahi masaya bantlayın. Anestezi altındaki hayvanın vücut sıcaklığını 37 ± 1 °C değerindeki dar bir aralıkta tutmak için bir ısıtma pedi kullanın.
Sıcaklığı izlemek için rektal bir prob kullanılabilir; tıraş edilmiş kılları temizlemek ve operasyon alanını arındırmak için karnını alkollü bir pamukla silin. Karnı ve göğsü dezenfekte etmek için pamuklarla üç kez Betadine uygulayın. İntraperitoneal teter implantasyonu için farenin karnına steril örtü yerleştirin.
Önce bir bistüri kullanarak, karın üzerindeki ciltte yaklaşık 2,5 santimetre uzunluğunda dikey bir orta hat insizyonu oluşturun ve küt uçlu makaslar kullanın. Cildi altındaki bağ dokulardan dikkatlice ayırın. Ardından, periton üzerindeki linea alba'da yaklaşık 1,5 santimetre uzunluğunda dikey bir orta hat insizyonu oluşturun.
Ek olarak, deri altı iletkenler için çıkış noktası olarak hizmet edecek şekilde, periton insizyonunun hemen kranialine peritonda küçük bir delik açın. Cerrahi işlem sırasında, operasyon bölgesine ara ara steril salin damlatarak cerrahi alanı nemli tutun. TER'yi sağ periton boşluğuna yerleştirin.
Forsepsleri TER'in üst kısmındaki deliğe yerleştirin ve her iki lead'i, peritondan dışarı çıkacak şekilde lead deliğinden yukarıya doğru çekin. 1,5 santimetrelik peritoneal vertikal orta hat insizyonunu kapatmak için sürekli altı sıfır prolin sütürler kullanın. ECG lead'lerini lead II konfigürasyonuna yerleştirmek için.
Beyaz şeffaf kılıflı negatif elektrot sağ göğüs bölgesine yerleştirilecektir. İlk olarak, farenin sağ üst göğüs bölgesinde 0,5 santimetre boyutunda bir cilt insizyonu yapın. Ardından, abdominal insizyona geri dönecek şekilde küt uçlu makasla bir tünel oluşturun.
Negatif ucu tünelden çekin ve ucu pektoral kasa sabitlemek için 6-0 prolene sütür kullanın. Sütürün, ucun açıkta kalan kısmının üzerinde olduğundan ve açıkta kalan metal tel ile alttaki kas arasında iyi bir temas oluşturduğundan emin olun. Ucu kasa immobilize etmek için önceki sütürün proksimaline ikinci bir sütür atın.
Cilt insizyonunu iki adet 3-0 prolin sütürle kapatın. Pozitif elektrot, sol abdomenin sol diyaframın altında ve kalbin altında kalan kısmına yerleştirilir. Elektrot implantasyon bölgesi dikey orta hat insizyonuna yakın olduğu için burada ek bir insizyona gerek yoktur.
Lead'in alttaki karın kasına sabitlenmesi için 6-0 prolin sütür kullanın ve dokuyla iyi temas ettiğinden emin olun. Son olarak, karın kasını ve cildi sırasıyla 6-0 prolin sütürlerle katmanlar halinde kapatın. Fareye, protokol metnimizde açıklanan uygun postoperatif bakımı sağlayın.
Şimdi, normal bir EKG dalga formunun bazı temsili sonuçlarını göstereceğiz. Yaban tip bir fareden alınan normal EKG, atriyal depolarizasyonu temsil eden bir P dalgasını ve ardından ventriküler depolarizasyonu temsil eden bir QRS dalgasını net bir şekilde göstermektedir. P ve QRS dalgalarının küçük arka plan gürültüsünden farklı olduğu ve her P dalgasının, her QRS'den önce bire bir oranla geldiği dikkat çekicidir.
Ayrıca, her R dalgası arasındaki mesafe olan R-R aralığının ve her P dalgası arasındaki mesafe olan sinüs döngü uzunluğunun düzenli olduğunu, bunun da farenin normal sinüs ritminde olduğunu gösterdiğini not edin. Böylece, ambulatuvar ECG kaydı için bir fareye ECG TER'in nasıl implante edileceğini göstermiş olduk. Bu prosedürü gerçekleştirirken, yerleştirmeden önce TER'in yeterince temizlenmesi, elektrotların uygun konumlara yerleştirilmesi, abdomenin tamamen kapatılması ve son olarak işlemden sonra fareye uygun analjezi uygulanması önemlidir.
İşte bundan ibaret. İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, farelerde uzun süreli ambulatuvar ECG izlemi için telemetrik ECG kayıtlarına yönelik aşamalı bir kılavuz sunmaktadır. Telemetrik ECG, kardiyak aritmiler ve ani kardiyak ölüm hayvan modellerinin değerlendirilmesi için kritik öneme sahiptir.
Farelerde ambulator EKG telemetrisi, preklinik modellerde aritmi mekanizmalarının ve ani kalp ölümü fenotiplerinin risklerini azaltmak için temel teşkil eden kardiyak elektrofizyolojinin sürekli ve uzun süreli izlenmesine olanak tanır. Bu yaklaşım, keşif aşamasından translasyonal kardiyoloji programlarına geçişi sağlayan kantitatif ve tekrarlanabilir kalp hızı ile ritim verileri sunarak hedef doğrulamayı destekler. Ölçeklenebilir çoklu hayvan kayıt sistemi, kardiyovasküler ilaç keşif süreçlerinde öncü bileşik tanımlama ve öngörücü güvenlik taramaları için işlem hacmini artırır.
Bu yöntem, hedef hipotez testinden öncü bileşik optimizasyonuna ve preklinik güvenlik değerlendirmesine kadar uzanan kardiyovasküler keşif sürekliliğine entegre olarak, "devam/dur" kararlarına veri sağlayan ambulatuvar fenotipleme sunar.