Name: Hemaglütinasyon Testi kullanarak Reaktivite ve Serum Titre Belirlenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-29T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 59 s
Description: Öğrenin hemaglütinasyon testi ile serum reaktivitesi ve titre belirlemeyi. Bu immünoloji yöntemi, antikor konsantrasyonunu görsel olarak değerlendirir ve hızlı sonuç sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazar Miss Lora Matthews sinematografi teknikleri ve Bay Paul Shepherd gerçekleştirmek için teşekkür etmek istiyorum. Bu proje, Güney Avustralya Üniversitesi, Tıp Laboratuarı programı tarafından finanse edildi.

5x veronal Tamponlu Salin (VBS) hazırlanması <ol><li> Veronal Tamponlu Salin (VBS) hazırlamak için, üç ayrı çözüm hazırlıklı olması gerekiyor. </li><li> Distile su 350ml Sodyum barbital NaCl ve 0.94gm 21.25gm çözme çözüm 1 hazırlayın. NaCl ve Sodyum barbital son konsantrasyonları sırasıyla 1.02m ve 13mm. </li><li> Sıcak distile su 125ml barbital, 1.44gm eriterek çözüm 2 hazırlayın. Barbital son konsantrasyon 62.5mm. </li><li> Distile su 100 ml CaCl 2 MgCl 2 ve 4.41gm 20.33gm eriterek çözüm 3 hazırlayın. MgCl 2 ve CaCl 2 final konsantrasyon sırasıyla 2,18 m ve 440mm. </li><li> Mix çözüm 1 ve 2 ve oda sıcaklığına kadar soğumasını. </li><li> Kombine çözüm soğuduktan sonra, 1.25 ml çözüm 3 ve pH 7,3-7,5 1M HCl kullanarak ayarlayabilirsiniz. </li><li> 5x bir stok solüsyonu hazırlamak için 500ml için son hacim distile su ile ayarlayın. </li><li> 1x çalışma çözeltisi hazırlamak için, saf su ile seyreltilmiş hisse 01:05. </li></ol> Revercells, seyreltilmesi <ol><li> Yavaşça tersine çevirerek Revercells stok solüsyonu tekrar süspansiyon haline getirin ve sonra 4 600g az 5 dakika boyunca santrifüj hücre ve 1ml kaldırmak ° C </li><li> Santrifüj sonra dikkatle süpernatant kaldırmak ve veronal Tuzlu Tamponlu 1x 3ml hücrelerin tekrar süspansiyon haline getirin. </li><li> Hücreler 4 ° C kullanana kadar saklanabilir. </li></ol> Prosedür <ol><li> 50ml 1x VBS 96 U alt plakası satır A1-A12 içine aktarın. </li><li> Eh, A1, anti-serum, 50μl ekleyin ve bir pipet kullanarak iyice karıştırın. </li><li> Taze bir pipet kullanarak, A1 kuyusunda sıvı 50μl kaldırmak ve iyi A2 transfer. İyice karıştırın ve iyi A11 ulaşmak ve daha sonra bu kuyudan son 50μl atmak kadar bu işlemi tekrarlayın. </li><li> Şimdi serum örneği seri 01:02 dan 1:2048 2 kat sulandırılmış oldu. Bu VBS negatif kontrol olarak serum Peki A12 eklenir. </li><li> Eğer birden fazla serum örneği değerlendirilecek, tekrar satır B vb 4,1-4,4 adımları </li><li> Bir kez tüm dilüsyonları yapılmış, tüm kuyulara 1% Revercells 50μl ekleyin. Not: Revercells zaman içinde çözecek ve kuyuların içine yavaşça reçete edilmeden önce ara verilmelidir. </li><li> Mikrotitre tepsinin yan hafifçe dokunarak örnekleri karıştırın, kapak ve 37 1s için devam etmek hemaglutinasyon reaksiyonu ° C bırakın Bir inkübatör veya uygun ısıtılmış bir oda kullanılabilir. </li><li> Inkübasyon sonrasında, dikkatli bir şekilde inkübatör tepsiyi kaldırın ve hemaglutinasyon plaka inceleyin. VBS kontrolü de iyi incelendiğinde ilk olmalıdır. Reaksiyonun negatif ise, daha sonra sonuçları geçerlidir. VBS örnek olumlu bir hemaglutinasyonun sonuç gösteriyorsa, o zaman sonuç ve süreç tekrar edilmelidir. Olumsuz bir tepki kuyunun merkezinde küçük bir hücre konsantre pelet olarak görünecektir olumlu bir hemaglutinasyon reaksiyonu, iyi tabanı geniş bir sayfa olarak görünecektir. Bir ara sonuç pelet hücrelerinin merkezi bir çekirdek ile pozitif hücrelerin bir hale olacaktır. Bu sonuç, serum tepki verebilir bazı Ab olarak oluşur, ancak tam bir reaksiyona neden yetersiz miktarda Ab. </li><li> Temsilcisi sonuç bölümünde iki şematik gösterimleri beklenen sonuçlar vardır. Sonuçların geçerli ve geçersiz bir set bir örnek verilir. Aynı zamanda anti-serum titresi tespit edilecektir. </li></ol> Temsilcisi Sonuçlar: Video temsilcisi sonuçlar bir örnek içerir. Aşağıda şematik bir biçimde gösterildiği gibi iki örnek k (fiekil 1 ve Şekil 2). İlk örnek, VBS kontrolü pozitif olarak yorumlanır olamaz bir reaksiyon ikinci belirlenecek titresi sağlar geçerli bir testtir. <img src="/files/ftp_upload/1752/1752fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 hemaglutinasyonun bir örnek pozitif sonuç başarısız oldu. Yukarıdaki şematik temsili, heamagglutination tepki kabul edilemez. VBS serum negatif kontrol kuyunun dibinde tabaka oluşumu ile kanıtlandığı gibi olumlu bir hemaglutinasyon reaksiyonu gösterir. Bu bir hata oluştu ve sonuç kabul edilemez olduğunu gösterir. Bu durumda, işlem tekrarlanmalıdır. <img src="/files/ftp_upload/1752/1752fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 pozitif sonuç doğru çalıştı hemaglutinasyonun bir örnek. Şematik temsili, heamagglutination reaksiyon geçerlidir. VBS negatif kontrol olumsuz hemaglutinasyon reaksiyonu gösterir.kuyunun dibinde oluşan pelet ile kanıtlanır. Son olumlu yanı, bu serum örneği için titresi 128 (yani karşılıklı 1 / 128) olduğunu gösterir satır 7,. Bu, orta miktarda serum bulunan bir antikor bir örnek olacaktır.

Hemaglutinasyon testi zaman kısa bir süre içinde değerlendirilmesi gereken çok sayıda serum örneklerinin sağlayan çok basit bir teknik. Uygun olması göz, özel ekipman ihtiyacı olmadan okumak olmanın avantajı da vardır. Bu teknik de bir hemaglutinasyon-inhibisyon testi parçası olarak, idrarda insan koryonik gonadotropin hormonu tespiti için değiştirilmiş olabilir. Standart bir hemaglutinasyon testi ile ilgili olarak, bakım doğru yapılacak tahlil için alınması gereken birkaç alanları vardır. Birincisi, bu teknik, içbükey ...

<table><tbody><tr><td>Revercells</td><td>CSL</td><td>02490201</td><td>%1 nihai konsantrasyonda kullanın</td></tr><tr><td>Anti-A serumu</td><td>CSL</td><td>02611305</td><td></td></tr><tr><td>96 kuyucuklu U tabanlı plaka</td><td>TRP</td><td>92097</td><td>U tabanlı olmalıdır</td></tr><tr><td>Veronal tamponlu salin</td><td></td><td></td><td>1x nihai konsantrasyonda kullanın</td></tr><tr><td>37&amp;#x00B0;C oda/inkübatör</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tek kullanımlık eldivenler</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

hemaglütinasyon testi kullanarak reaktivite ve serum titre belirlenmesi

Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay

Hemaglütinasyon aglütinasyon belirli bir biçimi ve antikorlar, bir parçacık antijen olarak hareket kırmızı kan hücreleri, bağladığınızda kullanılır. Kırmızı kan hücreleri, bunlar da hazır olarak özellikle yararlı hedefler ve aglütinasyon çıplak gözle kullanarak gözlemlenebilir. Bu teknik genellikle kan gruplama ve viral kantifikasyon bir antikor titresi (Ab) belirlemek için kullanılır. Bu video, hemaglutinasyon tahlil hazırlanması ve sahne alan adımları spesifik antikorlar kan grubu A-antijenleri, kırmızı kan hücreleri (Revercells) gösterilmiştir. Antiserum, seri Revercells bir süspansiyon eklendi hangi, iyi bir 96 U-alt mikrotitre tepsi seyreltilir. Örnekleri 60 dakika karıştırılır ve daha sonra 37 ° C&#39;de inkübe. Bu süreden sonra, örnekleri daha sonra kolayca Ve + ve orta (-/+) hemaglutinasyon reaksiyonlar için gol olabilir. Bu yaklaşım, basit ve hızlı bir tekniği kullanılarak değerlendirilmiştir bir serum örnek reaktivite ve titresi sağlar. Video testin nasıl değiştirilebilir titre nasıl belirlenir sonuçlar okunur ve nasıl yorumlanır Testin ardındaki teori, ve bu tekniğin kullanımı ile ilişkili herhangi bir sorun kapsayacaktır.

Hemaglütinasyon antikorlar kırmızı kan hücrelerinin bağlamak aglütinasyon şeklidir. Kırmızı kan hücreleri de hazır ve sonuçları çıplak gözle kolayca gözlemlenebilir. Bu video sonuçları yorumlama ve titre belirlenmesi, hemaglutinasyon tayininde yer alan adımları göstermektedir.

Hemaglütinasyon Testi kullanarak Reaktivite ve Serum Titre Belirlenmesi

Hemaglütinasyon, aglütinasyonun spesifik bir formudur ve antikorlar, partiküler bir antijen görevi gören kırmızı kan hücrelerine bağlandığında kullanılır. Kırmızı kan...

Hemaglütinasyon analizi kullanılarak serum için reaktivite ve titrenin belirlenmesi. Glütinasyon, çözünür antikorlar ile partiküler antijenler arasında gerçekleşen bir reaksiyondur. Bunlar hücreleri veya taşıyıcı molekülleri içerebilir.Taşıyıcının yüzeyindeki epitoplar, bir antikorun bağlanmasına ve taşıyıcıyı birbirine çapraz bağlamasına olanak tanıyarak antijen antikor kompleksi adı verilen kompleks bir örgünün oluşumuna yol açar. Hemaglütinasyon, antikorların partikül antijen görevi gören kırmızı kan hücrelerine bağlandığı spesifik bir aglütinasyon formudur. Kırmızı kan hücreleri, hem kolayca temin edilebildikleri hem de sonuçlar çıplak gözle kolayca görülebildiği için kullanışlı hedeflerdir.Serum örnekleri seri olarak seyreltilir ve ardından 96 kuyucuklu U-taban plakaya yerleştirilir. Daha sonra kırmızı kan hücreleri süspansiyonu eklenir. Yüksek konsantrasyonda bulunan antikorlar kırmızı kan hücrelerine bağlandığında geniş bir ağ yapısı oluşur.Bu kafes yapı yerçekimiyle çöktükçe, ubo plakasının şeklini alır. Yukarıdan bakıldığında, geniş bir kırmızı kan hücresi tabakası görülür. Bu, pozitif bir hemaglütinin reaksiyonudur.Antikor seviyeleri düşük olduğunda, ağ yapısı oluşamaz ve

determining-reactivity-titre-serum-using-haemagglutination

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

En korunmuş dizileri biyoinformatik analizleri ile tespit hedefleyen evrensel bir antikor kullanarak influenza virüs hemaglutinin ve nöraminidaz miktarının tayini için basit bir yuva blot yöntemi geliştirilmiştir. Bu yenilikçi yaklaşım, tüm viral hemaglutinin ve nöraminidaz kantitatif tayini için kullanışlı bir alternatif sunabilir.

Tüm Influenza Kantitatif Analiz Basit Slot Blot Tahliller Evrensel Antikorlar kullanarak Viral Hemagglutinins ve nöraminidaz yazın

Video, spesifik antijenlere karşı serum antikorlarını tespit etmek için bir hemaglutinasyon inhibisyon testini göstermektedir. Test kuyusunda hemaglutinasyon inhibisyonunun ve kontrol kuyusunda hemaglutinasyonun doğrulanması, farklı görsel desenlerle elde edilir. Bu test, viroloji ve immünolojide bağışıklık tepkisini, aşı etkinliğini değerlendirmede ve viral enfeksiyonları incelemede çok önemli bir rol oynar.

Bir Hedef Antijene Karşı Serum Antikorlarını Tespit Etmek için Hemaglutinasyon İnhibisyonu Testi

Bu video, insan serumunda α2,6'ya bağlı sialik asidi aşırı eksprese eden Madin-Darby Köpek Böbrek hücrelerini kullanarak nötralize edici antikorları ölçmek için Mikronötralizasyon testlerini göstermektedir. Bu test genellikle influenza insan serolojisi için...

İnsan Serumunda Nötralize Edici Antikor Titrelerini Ölçmek için Bir Mikronötralizasyon Testi

Bu video, bir serum örneğinde influenza nöraminidaz (NA) inhibe eden antikor titrelerini ölçen bir testi göstermektedir. NA'ya karşı antikorlar içeren bir serum örneği, fetuin kaplı bir mikrokuyu plakasına eklenir. Virüs eklendikten sonra, antikorlar viral NA'nın fetuini parçalamasını ve galaktoz kısmını açığa çıkarmasını önler. Daha sonra, açıkta kalan galaktoza bağlanan peroksidaz konjuge bir lektin eklenir. NA-inhibe edici antikor titresi, bir peroksidaz substratının, renk üretmek için...

İnfluenza Nöraminidaz İnhibisyonu Antikor Titrelerini Ölçmek İçin Bir Test

Serumlarda influenza nöraminidaz (NA)-inhibisyon antikor titrelerini ölçmek için enzime bağlı lektin testini (ELLA) tarif ediyoruz. Tahlil, NA'nın fetuin kaplı, 96 oyuklu plakalardan sialik asidi çıkardığında erişilebilir hale gelen galaktoz kalıntılarını ölçmek için fıstık aglütinini kullanır.

Enzim-linked Lektin Testi tarafından Grip Nöraminidaz İnhibisyon antikor titreleri Ölçme

Sunulan iletişim kuralları nasıl grip özgü antikor titreleri serum numuneleri grip aşısı alıcıların üzerinden ölçmek için bir hemaglütinasyon inhibisyon tahlil gerçekleştirileceğini açıklar. İlk tahlil hemaglütinasyon tarafından en iyi viral antijen konsantrasyonları belirler. İkinci tahlil hemaglütinasyon inhibisyon tarafından grip özgü antikor titreleri quantifies.

Grip özgü antikor titreleri ölçmek için bir en iyi duruma getirilmiş hemaglütinasyon inhibisyon (hı) tahlil

Fc-aracılı efektör fonksiyonları aktivasyonu antikorlar tarafından hedefleyen grip virüsü hemagglutinin ölçmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu tahlil de Fc-aracılı bağışıklık ikna etmek için monoklonal antikorlar veya poliklonal sera diğer viral yüzey glikoproteinlerin hedefleme yeteneklerini değerlendirmek için adapte edilebilir.

Grip Hemagglutinin özel antikorlar tarafından indüklenen Fc-aracılı efektör fonksiyonları değerlendirmek için bir yöntem

Grip nötralize antikorlar grip enfeksiyonlar korunması ile aralarındaki ilişkileri belirlemektir. Microneutralization deneyleri insan sera nötralize antikor ölçmek ve sık sık grip insan seroloji için kullanılır. Biz bir microneutralization tahlil nötralize antikor titreleri çağdaş 3C.2a ve 3C.3a A(H3N2) virüs grip aşısı ya da enfeksiyon takip için ölçmek için MDCK-SIAT1 hücreleri kullanarak açıklar.

MDCK-SIAT1 hücreleri kullanarak antikor yanıt için Microneutralization tarafından insan Sera A(H3N2) virüsleri nötralize grip ölçme deneyi

Bu makale, Newcastle hastalığı virüsü serolojik testi için 4 hemaglutinasyon ünitesi antijen hazırlamak için basitleştirilmiş bir yöntem sunmaktadır. Antijenin hemaglutinasyon titresini doğru bir şekilde belirleyerek, daha titiz bir geri titrasyon yöntemi ve iyi tanımlanmış bir ayarlama süreci ile birleştiğinde, test verimliliğini artırır, yanlış pozitifleri azaltır ve kümes hayvanlarında hastalık sürveyansını iyileştirir.

Hemaglutinasyon İnhibisyonu için Antijen Preparatının Optimizasyonu: Newcastle Hastalığı Virüsü Serolojisinin Testi

Klasik yolu antikor tarafından aktif ve hedef hücre parçalama içinde sona eriyor.

Ölçüm% 50 Hemolitik Kompleman (CH 50</subSerum) Faaliyet

Öğrenin hemaglütinasyon testi ile serum reaktivitesi ve titre belirlemeyi. Bu immünoloji yöntemi, antikor konsantrasyonunu görsel olarak değerlendirir ve hızlı sonuç sağlar.

Hemaglütinasyon Testi kullanarak Reaktivite ve Serum Titre Belirlenmesi

Daha fazla video keşfet