Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Bu prosedürün genel amacı, transplant vaskülopatisi gelişimini incelemek için doğru bir model ve kolayca uygulanabilir bir yöntem oluşturmaktır. Bu, PVG'den CI su kombinasyonuna doğru bir uygulama kullanılarak gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, donör aortanın hasat edilmesidir.

Prosedürün üçüncü adımı, alıcının hazırlanmasıdır. Prosedürün son adımı ise donör aortun alıcının aortu ile anastomoz edilmesidir. Nihayetinde, patohistoloji kullanılarak neointima oluşumunu gösteren sonuçlar elde edilebilir.

Merhaba, ben Almanya'daki Hamburg Üniversite Kalp Merkezi'nde bulunan TS Eye Lab'de transplant immünolojisi profesörü Sonya Schwefel. Ben de Manish Duboff. Ben de TS Eye Lab'denim.

Laboratuvarım transplant immünolojisi ile ilgilenmektedir. Bu videoda, farelerde transplant vaskülopatisi gelişimini incelemek için kolay ve geçerli bir model olan Ortotopik aort transplantasyonu modelini tanıtacağız. Laboratuvarımızda bu prosedürü, kardiyovasküler greftlerde kronik reddi araştırmak için kullanıyoruz.

Ortotopik aort transplantasyonu modelinde, aorta histolojik olarak kolayca değerlendirilebilir. Ayrıca, CI modeline yapılan PVG, transplant vaskülopatisi çalışmaları için özellikle faydalıdır; çünkü akut vasküler reddetme önemli bir karıştırıcı faktör değildir ve vaskülopati gelişimi klinik bulgularla benzerlik gösterir.

Hadi başlayalım. Bu ORTOTOPİK aort transplantasyonunda kullanılan donör, yaklaşık 250 ila 300 gram ağırlığında bir PVG sıçandır. Hayvan anestezi altındayken karın ve göğüs bölgesindeki tüyleri tıraş edin.

Sıçağı sırt üstü yatırın ve burun ile ağzının üzerine bir yüz maskesi yerleştirin. Anesteziyi sürdürmek için, önce Provo iyot kullanarak ardından %80 etanol ile abdominal ve torasik bölgeyi genişçe dezenfekte edin. Daha sonra, hayvanın arka ayaklarını sıkarak reflekslerini kontrol edin.

Yeterince anestezi edildiğinden emin olun. Karın boşluğunu açıp abdominal aortada bir delik oluşturarak sıçanı kanatın. Descending torasik aortayı bulmak için toraksı dikkatlice açın.

Torasik aortu; yağ, sinirler ve özofagus gibi çevre dokulardan disseke edin. Aort dokusuna zarar vermeden acuta kullanarak aorttan 1,5 santimetre uzunluğunda bir parça çıkarın. Aort greftini soğuk salin ile iyice perfüze edin ve grefti dört santigrat derecede saklayın.

Bu ortotopik aort transplantasyonu için alıcı, yaklaşık 250 ila 300 gram ağırlığında bir A CI sıçanıdır. Bu prosedüre başlamak için, anestezi altındaki sıçanın karın bölgesini tıraş edin ve anestezi sırasında gözlerin kurumasını önlemek için göz merhemi uygulayın. Sıçanı sırtüstü yatırın ve anesteziyi sürdürmek için burnunun ve ağzının üzerine bir yüz maskesi yerleştirin.

Ardından, abdominal bölgeyi önce provo iyot, sonra %80 etanol kullanarak dezenfekte edin. Sıçanın yeterince anestezi aldığını doğrulamak için arka ayaklarını çimdikledikten sonra, orta hat abdominal insizyon yaparak ve deri ile kası ayırarak abdomeni açın. İki adım.

Karın açıldıktan sonra bağırsakları salinli eldivenin içine yerleştirin. Nem kaybını önlemek için eldiveni bağırsakların etrafına katlayın. Abdominal aortayı örten yağ dokusunu temizleyin.

Damar dallarına zarar vermemeye dikkat ederek, aortayı infrarenal bölgeden bifurkasyona kadar disseke edin. Gerekiyorsa, aortayı disseke ettikten sonra aorta dallarını ligatize edin. İlk olarak, kan akışını durdurmak için aortanın infrarenal kısmına mikrocerrahi klempi uygulayın.

Ardından, aortanın bifurkasyonuna yakın bir noktaya ikinci bir klempi yerleştirin. Kan akışı durdurulduğuna göre, aortadan kısa bir segment çıkarın. Daha sonra, buz üzerinde %0.9 saline içinde bekletilen donör aortik grefti alın.

Uygun uzunluğa getirin ve aorttaki boşluğa yerleştirin. Kraniyal uç uca anastomoz ile başlayarak, sürekli 8-0 prolene dikişler atarak donör aortu resipiyent aortuna bağlayın. Distal uç uca anastomoz tamamlandığında, distal klempi dikkatlice açın.

Ardından, kranial klempi dikkatlice açın. Aortun distal ucunda görünür bir nabız olmalıdır. Şimdi bağırsakları tekrar abdomen içine yerleştirin ve abdomeni önceden ısıtılmış steril salin ile yıkayın.

Karın duvarının kas tabakasını, sürekli 6-0 proline sütürler kullanarak kapatın. Ardından, sıçan henüz anestezi altındayken cildi kapatmak için sürekli 5-0 proline sütürler kullanın. Kilogram başına 4-5 mg karprofeni deri altına enjekte edin.

Hayvanı kafesine geri koyun. Ağrı tedavisi için içme suyuna üç gün boyunca methimazole ekleyin. Transplantasyon sonrası.

120 gün sonraki histopatoloji sonuçları, histoloji mikroskobumuzda gösterilecektir. Görüntüler, transplant vaskülopatisi gelişimini net bir şekilde ortaya koyacaktır. Gelişen lüminal daralma, bilgisayar animasyonu ile vurgulanacaktır.

Sıçanlarda ototopik aort transplantasyonunun nasıl gerçekleştirileceğini göstermiş olduk. Ayrıca, histopatoloji kullanarak 120 gün sonra transplant vaskülopatisinin başarılı bir şekilde geliştiğini kanıtladık. Bu yöntem, ilaçların kronik allogreft vaskülopatisi üzerindeki başlangıç etkilerinin araştırılmasına olanak tanır.