Kemirgen Modeller Merkezi Sinir Sistemi Hastalıkları Tedavisinde Sistemik ve Yerel İlaç Taşıyıcı

Bu video makalesinde dört Merkezi sinir sistemine ilaç verme yöntemleri gösterilmiştir. İlk üç yöntem intravenöz enjeksiyon, intraperitoneal enjeksiyon ve oral gavajdır. Bu yöntemlerin üçü de ilacın sistemik olarak verilmesine neden olur.

Son yöntem, farenin beynine lokal bir ilaç infüzyonudur. Bu yöntem için, in vivo, uygun infüzyonu doğrulamak için optik görüntüleme kullanılır. Üç sistemik uygulama tekniği, klinik öncesi ortamlarda yaygın olarak kullanılan standart prosedürlerdir.

Yerel uygulama tekniği biraz daha zordur, ancak ajanın kan beyin bariyerini atlayarak beyne doğrudan uygulanmasına izin verir. Bu yöntemler anahtar soruyu cevaplamaya yardımcı olabilir. Nobel terapötiklerinin etkinliği ve dağılımı gibi yeni onkolojide, bu yöntemler beyin tümörlerinin yeni tedavisi hakkında fikir verebilir.

Bu yöntemler, nörodejeneratif ve psikiyatrik bozukluklar gibi merkezi sinir sisteminin diğer hastalıklarına da uygulanabilir. Kuyruk damar ısıtıcı fareyi beş ila 10 dakika genişletmek için bir ısı lambası kullanarak, fareyi ısıtırken hipotermiyi önlemek için fareyi her zaman dikkatlice izleyin. İlacı 28 gauge insülin şırıngasına yükleyin.

Farenin vücut ağırlığının hacim olarak% 1'inden fazlası bir kerede enjekte edilmemelidir. Beş ila 10 dakika geçtikten sonra. Fareyi fare kuyruğundaki bir tutma cihazına aktarmak için dört görünür damar vardır.

Sırt ve yan damarlar damarlardır. Ventral damar, lateral kuyruk damarına erişmek, farenin kuyruğunu en uzak noktada tutmak ve damar yukarı bakacak şekilde 90 derece döndürmek için kullanılan bir arterdir. Enjeksiyon bölgelerini alkollü bir bezle temizleyin.

Ardından, hazırlanan şırınga eğim bölgesini damarın içine yerleştirin. İğne damar içine düzgün bir şekilde yerleştirilirse, serbestçe ve basınçsız hareket etmelidir. İlacı yavaşça beş ila 10 saniye boyunca eşit basınçla enjekte edin.

Kuyruk şişerse, iğnenin artık damarda olmadığını gösterdiğinden enjekte etmeyi bırakın. Enjeksiyondan sonra, kanama durana kadar enjeksiyon bölgesine hafif bir baskı uygulayın. Bu normalde 30 ila 60 saniye sürer.

Daha fazla kanama olmadığından emin olmak için fareyi beş ila 10 dakika izleyin. İlaca 28 gauge iğne ile bir şırınga yükleyerek bu prosedür için hazırlanın. Fareyi kuyruğundan kafesinden çıkarın ve kafes kapağı gibi dokulu bir yüzeye yerleştirin, böylece farenin kavrayacak bir şeyi olur.

Farenin vücudunu germesine izin verin. Ardından, başparmak ile işaret ve orta parmaklar arasında mümkün olduğunca fazla cildi hafifçe sıkıştırmaya özen göstererek farenin arkasındaki cildi kavrayın. Fareyi, farenin karnı yukarı bakacak şekilde ters çevirin.

Fare başını serbestçe hareket ettirebiliyorsa, tutamağı bırakın ve tekrar deneyin. Enjeksiyon sırasında ısırılmayı önlemek için, organları enjeksiyon bölgesinden uzaklaştırmaya yardımcı olmak için fareyi hafifçe ters çevirin. İğnenin intraperitoneal boşlukta olduğundan emin olmak için hazırlanan şırınga iğnesini farenin sol alt çeyreğine 30 derecelik bir açıyla yerleştirin.

Şırınga pistonunu geri çekin. Şırıngaya sıvı aspire edilmezse, şırınga içeriğini bir ila beş saniye boyunca eşit bir basınçla enjekte edin. Fareyi serbest bırakın.

Normal aktivite seviyelerine döndüğünden emin olmak için enjeksiyondan sonra fareyi beş ila 10 dakika izleyin. İğnenin farenin ağzına ne kadar sokulabileceğini belirleyerek oral gavaja başlayın. Son kaburgada 18 G bilye ucu kavisli bir gavaj iğnesi tutun.

Kalıcı bir işaretleyici kullanarak uzunluğu işaretleyin. Enjeksiyon hacmini belirlemek için fareyi tartın. Oral gavaj ile verilebilecek maksimum hacim, vücut ağırlığının kilogramı başına 10 mililitredir.

Ardından iğneyi yükleyin. Ardından, intraperitoneal enjeksiyon için gösterilenle aynı tutuşu kullanarak fareyi kısıtlayın. Gavaj iğnesini dilin üzerinden ağza sokun ve yemek borusunun delinmesini önlemek için iğneyi farenksten ilerletin.

İğneyi durma işaretini geçecek şekilde sokmayın. İğne herhangi bir baskı olmadan sorunsuz bir şekilde ilerlemelidir. İğne yerindeyken, pistona yavaşça bastırın.

İğneyi yerleştirildiği açıyla çıkarın. Önerilenden daha büyük hacimler enjekte etmeye çalışmayın. Çünkü bu, reflü ve eksik ilaç dağıtımına neden olabilir.

Fareyi kafesine geri yerleştirin ve beş ila 10 dakika boyunca izleyin. Sıvının akciğerlere girdiğini gösterebilecek herhangi bir zor nefes alma belirtisine çok dikkat etmek. Bu işlemi gerektiği kadar tekrarlayın.

Kemirgenler için reflüye dirençli bir CED kanülü henüz ticari olarak mevcut olmadığından 24 saatlik bir süre içinde üç doza kadar verilebilir. Üç parçadan oluşan bir kanül oluşturun. 100 mikron çapında bir silika boru parçası, içinden sekiz tane akar.

Yapısal destek için sert bir metal iğne ve demliği yüklemek için esnek Teflon boru. Sekiz. Cerrahi alanı hazırlamak için tüm yüzeylere %2 klorheksidin dezenfektan püskürtün. Ardından yüzeyleri emici perdelerle örtün.

Ameliyat bölgesine aşağıdaki malzemeler yerleştirilmelidir. Biri %3 hidrojen peroksit ve diğeri %2 Klorheksidin steril GRE'ler ve pamuklu çubuklar içeren daha fazla petro yemeği seçin. Steril tek kullanımlık 21 numara neşterler otoklav, fare derisi zımba, zımba ve zımba sökücü.

Steril 20 gauge iğneler, fare vücut ısısını korumak için ısıtma yastığı, bir fare stereotaksik çerçevesi ve kontrollü bir hız şırınga pompası. Kanülü kurmak için Teflon boruya bir mililitrelik bir şırınga takın. Bir dizi plastik şırınga adaptörü kullanarak, kanülü cerrahi yüzeye dik olacak şekilde stereotaksik çerçeveye sabitleyin.

Bir mililitrelik bir şırınga kullanarak, içinden %70 etanol geçirerek kanülü dezenfekte edin. Steril tuzlu su kullanarak bu işlemi tekrarlayın. Ardından kanül bağlantılarının çevresinde herhangi bir sızıntı olup olmadığını kontrol edin.

Şırıngayı geri çekin, böylece kanülün içine küçük bir hava kabarcığı çekilir. Bu hava kabarcığı, infüzyon sekizini tuzlu sudan ayıracaktır. Ardından, demleme sekizini geri yükleyin.

Kanülü kısa bir süre çalıştırarak pompayı doldurun. Anestezi uygulanmış bir farenin derisini %2 Klorheksidin içine batırılmış steril kan ile değiştirin, işlem sırasında yeterli göz nemini korumak için oftalmik merhem uygulayın. Steril bir neşter kullanarak, kafatasının merkezi boyunca yaklaşık 1,5 santimetre uzunluğunda sagital bir kesi oluşturun.

Kafatasının yüzeyini %3 hidrojen peroksit çözeltisine batırılmış bir pamuklu çubuk kullanarak temizleyin. Kafatasının dikiş hatları bu noktada belirgin olmalıdır. Değilse, kafatasını% 3 hidrojen peroksit çözeltisine batırılmış taze bir pamuklu çubukla nazikçe temizleyin.

BGMA'yı tanımlayın, ardından infüzyon bölgesini bulmak için iki milimetre sağa ve bir milimetre arkaya doğru ölçün. Steril 20 gauge bir iğne kullanarak, iğneyi kafatasına doğru bükerek bu noktada kafatasında nazikçe bir delik oluşturun. İğneyi kafatasına doğru aşağı doğru zorlamaktan kaçının.

Bu noktada, fareyi stereotaksik çerçeveye aktarın ve inhale anestezik uygulamaya başlayın. Düşük bir seviyede. Solunum hızındaki değişiklikler için fareyi dikkatlice izleyin ve anesteziyi buna göre ayarlayın.

Dolayısıyla bu sonraki adım, muhtemelen tüm yöntemin en zor yönüdür. Kanülü yerleştirirken, deliğin üzerine ortaladığınızdan emin olun. Bunu yapmak için kanül yerleşimini tüm açılardan kontrol edin.

Ardından, kanülü kafatası deliğinin üzerine yerleştirin ve ardından kafatası yüzeyinin üç milimetre altına indirin. İnfüzyonun sonunda burada gösterilen oranları ve süreleri kullanarak şırınga pompasını açarak infüzyona başlayın. Kanülü yavaşça çıkarın ve kafatasını %3 hidrojen peroksit ile değiştirin.

Forseps kullanarak deliğe steril kemik mumu uygulayın. Cildi bir araya getirin ve kapatmak için zımbalayın. Ameliyat sonrası ağrıyı gidermek için buprenorfini deri altına uygulayın.

Hipotermiyi önlemek için fareyi bir ısıtma yastığı üzerindeki bir kafese yerleştirin. İyileşen fareyi diğer aktif farelerle birlikte barındırmayın. Fareyi ameliyat sonrası bilincini ve hareket kabiliyetini geri kazanana kadar izleyin.

İşlemin uzunluğu nedeniyle, farenin tam aktivitesini yeniden kazanması bir saat kadar sürebilir. Görüntüleme yapılacaksa, floresan etiketli infüzyonun görüntülenmesini gerçekleştirmek için iki ila üç saat beklemek en iyisidir. Sekiz. CED uygulamasını takiben, anestezi uygulanmış fare sırt bölgesini, görüntülenen floresan için uygun bir filtre ayarı kullanarak bir görüntüleme istasyonuna yerleştirin.

CED için bir görüntü edinin. Başarılı bir infüzyon, kafatasındaki materyalin çoğunu infüzyon bölgesinin yakınında göstermelidir. Tedavinin uygulanmasına karşı advers reaksiyon eksikliği, başarılı enjeksiyonun önemli bir göstergesidir.

Aşağıdakiler, kuyruk enjeksiyonları için uygun olmayan enjeksiyonların, kuyruğun boyutunun veya renginin görünümündeki değişikliğin, kuyrukta bir kabarcık veya kabarcıkın, intravenöz doğumdan ziyade deri altı göstergesinin göstergeleridir. İntraperitoneal enjeksiyonlar için. Deride bir şişlik veya karnın renginin değişmesi, deri altı enjeksiyonu veya iç yapılarda hasarı gösterebilir.

Oral gavajda, nefes almada veya öksürükte zorlanan bir fare, sıvının mideye değil akciğerlere enjekte edildiğini gösterebilir. CED için nörolojik fonksiyon, tedavinin başarılı bir şekilde uygulanmasını değerlendirmek için önemlidir. Nöbet veya hemiparezi sergileyen bir fare yanlış infüzyon almış olabilir.

Burada in vivo görüntüleme, solda başarılı bir CED infüzyonu ve sağda başarısız bir infüzyon gösterilen bir fare üzerinde gerçekleştirildi. Başarılı infüzyonda, görüntüleme sinyalinin beyne lokalize olduğunu unutmayın. Başarısız infüzyon sırasında, sinyal nöro eksene yayılmıştır.

Gördüğünüz gibi, bu prosedürün en zorlu yönü, uygulama yolunun uygun şekilde seçilmesini içerir. İlaçları merkezi sinir sistemine verirken, en iyi uygulama yükünü seçmek için ilaçların farmakolojik özelliklerini göz önünde bulundurmak önemlidir. İşte bu kadar.

Umarım bu sunumu faydalı bulmuşsunuzdur ve deneylerinizde iyi şanslar.