Zebra balığı elektrokardiyografisi (EKG): Kardiyak Fonksiyonu Değerlendirmek İçin Minimal İnvaziv Bir Test

- Başlamak için, uyuşturulmuş bir balığın ventral tarafı yukarı bakacak şekilde ıslak bir süngerdeki bir yarığa yerleştirin. Pozitif elektrodu, soğanlı arteryoz seviyesinde balığın orta hattına yerleştirin. Daha sonra, negatif elektrodu ventrikülün altına ve orta hattın 0,5 ila 1 milimetre soluna yerleştirin ve elektrik potansiyelindeki farklılıkların ölçülebileceği iki kutuplu bir uç oluşturun. Son olarak, elektrik sinyalini topraklamak için referans elektrodunu anal bölgenin yakınına yerleştirin.

Kayda başlayın ve kısa bir süre sonra, dört ölçütün karşılandığından emin olmak için izlemeyi gözden geçirin. Tüm dalga formları görünür ve birbirinden farklı olmalıdır. Atriyal depolarizasyonu temsil eden P dalgası pozitif olmalıdır. Ventriküler depolarizasyonu temsil eden Q, R ve S dalgalarının net toplamı pozitif olmalıdır. Ve son olarak, atriyal repolarizasyonu temsil eden T dalgası pozitif olmalıdır. Kriterler karşılanmazsa, uygun bir iz kaydedilene kadar elektrotları ayarlayın.

Kayıttan sonra, balığı oksijenli suya batırarak ve solungaçlar veya balıklar düzenli olarak hareket etmeye başlayana kadar solungaçların üzerine su fışkırtarak uyandırın. Örnekte, yetişkin bir zebra balığı üzerinde yüzey elektrokardiyografisi yapacağız.

- Deney gününde, zebra balığını akvaryumdan laboratuvara taşıyın. In vivo EKG kayıt sistemini kurmak için, temel ekipman parçalarını bağlayın ve EKG kablosunun üç renk kodlu paslanmaz çelik elektrotunu amplifikatörün renk uyumlu üç erişim portalına yerleştirin. Seviye 4 anestezinin indüksiyonu için, yetişkin bir zebra balığını, Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanan önceden belirlenmiş en düşük konsantrasyonlarda bir anestezik çözeltisi içeren bir tabağa daldırın.

Zebra balığı üç saniye boyunca anestezi seviyesini koruduktan sonra, balığı üç EKG elektrodunun yerleştirilmesi için yarık bir ventral yüzeye sahip nemli bir süngere hemen aktarmak için bir çift künt forseps kullanın. Pozitif elektrodu, operkulumların iki alt kenarını birbirine bağlayan hayali bir çizginin 1 ila 2 milimetre üzerinde, soğanlı arteryoz seviyesinde ventral orta hatta nazikçe yerleştirin.

Negatif elektrodu kaudal olarak ve 0,5 ila 1 milimetre sola lateral olarak pozitif elektrota yetişkin zebra balığı ventrikülünün maksimum apikal-bazal uzunluğundan daha büyük bir mesafede yerleştirin. Ardından, referans elektrodu anal bölgenin yakınında kaudal olarak konumlandırın. EKG kaydı için sistemi başlatın ve EKG veri toplama programını açın. Aralık, alçak geçiş ve yüksek geçiş için açılır menülerden istediğiniz ayarı seçin.

1 kilohertz örnekleme hızında sürekli boşluksuz EKG kaydını başlatmak için Başlat'a basın. Maksimum sinyal-gürültü oranı için kurşun konumlandırmasını optimize etmek için, kaydı durdurmak için durdur'a basın ve her kalp için ilk kayıt denemesinden kısa bir süre sonra izi gözden geçirin. EKG'nin normal olması bekleniyorsa, tüm EKG dalga formlarının farklı ve kolayca görülebildiğini ve P dalgasının, net QRS kompleksinin ve T dalgasının hepsinin pozitif olduğunu onaylayın.

- En kritik adım, sinyal-gürültü oranını en üst düzeye çıkarmak için kurşun konumlandırmadır. Doğru geri bildirim almak için her balık için ilk EKG kayıt denemesinden sonra dört doğrulama kriterinin tümünü uygulayın.

- Normal bir EKG bekleniyorsa, bu dört doğrulama kriterinin tümü karşılanana kadar elektrotları gerektiği gibi yeniden konumlandırın. Normal bir T dalgası bekleniyorsa ancak T dalgası çok küçükse, T dalgası genliğini en üst düzeye çıkarmak için elektrotları yeniden konumlandırın. Kurşun konumlandırmasını optimize ettikten sonra EKG kaydına devam edin ve EKG taramalarını sonraki analizler için kaydedin.

EKG kayıt seansının sonunda, balığa zarar vermeden elektrotları dikkatlice çıkarın. Hayatta kalma çalışmalarında, balıkları tricaine içermeyen taze, oksijenli balık suyuna aktarın. Bu videoda, okuyucuların anesteziden kurtarılan balıkları izlemelerini kolaylaştırmak için oksijenasyonun durdurulduğunu lütfen unutmayın.

Hayatta kalma çalışmalarında anesteziden iyileşmeyi kolaylaştırmak için, balık normal solungaç hareketine veya yüzmeye devam edene kadar solungaçların üzerine kuvvetlice su fışkırtmak için bir Pasteur pipeti kullanın. Ardından, balıkları akvaryuma geri göndermeden önce anesteziden tam iyileşme için izleyin. Balık, en az 5 saniye dik olarak yüzebildiğinde anesteziden tamamen kurtulmuş kabul edilir.