JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 2:20 dk. • April 30th, 2023
- Başlamak için, 10 zebra balığı embriyosunu bir transfer pipeti yardımıyla 20 mililitre su ile dolu bir behere aktarın. Şimdi, embriyoları bir deney için gerekli olan uygun açık karanlık döngü altında 28 santigrat derecede büyütün. Daha sonra, larvaları kuyu plakalarına aktarın. Yüzmek için yeterli alan sağlamak için her kuyucuğun bir larva içerdiğinden emin olun.
Şimdi her kuyuyu tamamen suyla doldurun. Kuyu plakasını davranışsal kayıt odasına yerleştirin ve video izleme yazılımını kullanarak larva hareketini izleyin. Larvalar, artan stres seviyeleri nedeniyle anormal bir aydınlık ve karanlık döngüsüne maruz kaldıklarında karanlıkta artan hareket ve ışıkta azalan hareket sergilerler. Bir başlangıç periyodunun son dakikasında kat edilen ortalama mesafe ile bir sonraki periyodun ilk dakikası arasındaki farkın hesaplanması bize balığın fotomotor tepkisini söyler.
Bu protokolde kafeine maruz kalan zebra balığı ve şişman minnow larvalarında fotomotor yanıtı inceleyeceğiz. İlk olarak, deney balığını içeren kuyu plakasını davranışsal kayıt odasına yerleştirin. Ardından, daha önce geliştirilmiş izleme protokolünü açın. Video izleme görüntüleyicisinde, tüm larvaların görünür olduğundan, her kuyucukta yalnızca bir larva bulunduğundan ve kuyucukların tanımlanan gözlem alanlarıyla hizalandığından emin olun.
Ardından, Deney ve Yürüt'e tıklayın. Verilerin adını ve kaydetme konumunu belirtin ve önceden tanımlanmış tüm görüntüleme alanlarını vurgulamak için Birkaç Canlı Görüntü simgesine tıklayın. Son olarak, kayıt odasının panelini kapatın ve Arka Plan ardından Başlama bilgisayar monitöründe.