$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
- Anestezi uygulanmış bir balığı, gözleri ve solungaçları platformun kenarının ötesine uzanacak şekilde bir platforma sabitleyin. Balıkları, serbestçe dönebilen iyi aydınlatılmış bir tambur içinde su dolu bir silindire dik olarak yerleştirin. Balık, solungaç ve göz hareketiyle gösterilen canlandığında, tamburun içine alternatif beyaz ve siyah dikey çizgilerden oluşan bir ızgara veya desen yerleştirin. Şimdi sol gözün görünümünde çizgilerin üzerine düz siyah bir tıkayıcı yerleştirin.
Döndürmeye başlayın ve sağ göz için optokinetik yanıtı (OKR) kaydedin. OKR, görsel bir uyarana yanıt olarak refleksif göz hareketlerinden oluşur. Göz hareketi artık gözlenmeyene kadar deseni daha küçük ve daha küçük siyah beyaz çizgilerle değiştirin. Aynı işlemi sol göz için de uygulayın.
Monoküler görme keskinliğini hesaplamak için, ince detayları ayırt etme yeteneği, göz merceğinin merkezinden desene olan mesafeyi ve göz hareketinin gözlendiği bir çift beyaz ve siyah şeridin en küçük deseninin uzunluğunu ölçme yeteneği. Örnek protokolde, yetişkin zebra balıklarında monoküler ve binoküler görme keskinliğini ölçmek için optokinetik yanıtı kullanacağız.
- Optokinetik çalışmalar, 14,5 santimetre çapında döner tambur, ışık şiddeti ayarı ayarlanabilen stereo mikroskop, bilgisayar ve görüntü yakalamak ve kayıt yapmak için kamera kullanılarak özel yapım bir kayıt cihazı ile gerçekleştirilir. Tamburun dönme hızını ve dönüş yönlerini ayarlamak için bilgisayarla çalıştırılan bir mikrodenetleyici kullanılır. Standart koşullar altında muhafaza edilen balıkları kullanarak, bir balığı% 0.016 tricaine içinde iki ila üç dakika boyunca anestezi uygulayarak ve ardından gözleri ve solungaçları kenarda asılı olacak şekilde küçük bir platforma yerleştirerek bir analize başlayın.
Yaralanmayı önlerken balığı hareketsiz tutmak için, balığın vücudunun üzerine ince bir sünger veya havlu yerleştirin ve kuyruğun hareketinin sınırlı olduğundan emin olarak balığın üzerine iki ila üç parça köpük sabitleyin. Balıkları, OKR kayıt cihazının dönen tamburunun içine sığan silindirik su dolu bir tankın içine yerleştirin. Balıkları, tamburun kenarından yaklaşık 7,3 santimetre uzakta gözlerle dik olarak konumlandırmak için platformda mıknatıslar kullanın.
Balık anesteziden canlandığında ve normal solunum ve rastgele göz hareketleri gözlendiğinde, dönen tambura derece başına 0.07 döngü veya CPD'lik bir taban ızgarası yerleştirin ve döndürmeye ve video yakalamaya başlamak için bilgisayar kontrollerini devreye sokun. Taban ızgarası tarafından ilk OKR ortaya çıktıktan sonra, dönüşü kısa bir süre duraklatın ve ızgarayı daha yüksek uzamsal frekansa sahip daha küçük bir ızgara ile değiştirin. Bu işlemi, bir OKR artık ortaya çıkamayacak duruma gelene kadar sıralı olarak daha küçük ızgaralarla tekrarlayın. OKR kaybını doğrulamak için, değiştirilmiş bir merdiven yaklaşımını izleyerek, OKR'ye neden olan en küçük ızgara ile ve ardından OKR kaybını doğrulamak için bir yanıt ortaya çıkaramayan ızgara ile yeniden test edin.
Monoküler keskinlik ölçümleri elde etmek için, karşı göze bitişik şeritlerin üzerine siyah plastik bir tıkayıcı yerleştirin ve veri toplama işlemini tekrarlayın. Daha sonra oklüderi yeniden konumlandırarak ve ölçüm yaparak diğer göze geçin. Doğru keskinlik ölçümleri yapmak için her bir gözün şeritten olan mesafesini not etmek için akvaryumun altındaki referans ölçüm şeridini kullanın.
Görme keskinliğini belirlemek için, aşağıdaki formülü kullanarak CPD'yi hesaplayın, burada a, lensin merkezinden ızgaraya olan mesafe ve h, OKR'nin gözlemlendiği en küçük ızgaranın bir döngüsünün uzunluğudur. Kombine görme keskinliği ölçümleri için, hem sol hem de sağ gözden hesaplanan ortalama bir değer kullanın.