JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 4:22 dk. • April 30th, 2023
- 96 oyuklu bir plakanın her bir oyuğuna E3 ortamında 5 embriyo ekleyerek başlayın ve fazla ortamı bir pipetle çıkarın. Kontaminasyonu önlemek için her bir oyuğa kanamisin içeren E3 ortamı ekleyin. Embriyoların 28 santigrat derecede büyümesine izin verin.
Birkaç konsantrasyon veya doz hazırlamak için ilgilenilen bileşiği DMSO gibi uygun bir çözücü ile seyreltin ve her dozun gelişmekte olan embriyolar üzerindeki etkisini test edin. Embriyolar istenen aşamaya ulaştığında, her bir stok çözeltisini ayrı ayrı oyuklara pipetleyin. Plakayı bir kapakla örtün ve içindekileri karıştırmak için hafifçe döndürün. Kuyu plakasındaki embriyoların 28 santigrat derecede büyümesine izin verin.
Embriyonik gelişimde istenen zamanda, embriyoların fenotipini incelemek için kuyu plakasını uygun bir mikroskop altına yerleştirin. Gelişmekte olan embriyolarda göz kaybı, gecikmiş büyüme veya melanosit kaybı gibi fenotipleri gözlemleyebilirsiniz. Aşağıdaki protokolde, ön beyin gelişiminin küçük moleküllü inhibitörleri için bir bileşik kütüphanesini test edeceğiz.
- Küçük molekül kütüphaneleri tipik olarak 96 oyuklu bir kaynak plakasında sağlanır ve her bileşik DMSO'da 10 milimolar bir stok olarak depolanır. Em
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin